硝喹对间日疟原虫晚期孢子增殖期超微结构的影响

<正> 用硝喹1、5及10mg/L喂感染疟原虫的阳性大劣按蚊,另以5、20mg硝喹给疟疾患者服用,取血离体喂蚊,感染后8α,分别解剖。用透射电镜观察蚊体内卵囊内成孢子细胞及子孢子的超微结构变化。显示硝喹作用后成孢子细胞与子孢子的细胞质出现空泡,甚至溶解,线粒体肿胀,虫体形态异常。随着药量的增加,超微结构的变化更加明显,蚊胃壁上的卵囊随用     

硝喹(Nitroquine)对小鼠疟原虫叶酸代谢的影响

为确定硝喹作用于叶酸代谢哪一环节,分别给感染伯氏疟或约氏疟原虫的小鼠灌服不同剂量的硝喹,另一部分感染同种疟原虫的动物在服用同样剂量硝喹的基础上,分别加服对氨苯甲酸、肌注甲酰四氢叶酸钙和肌注叶酸,结果对氨苯甲酸使硝喹的量效曲线右移,CD_(50)明显加大,表明对氨苯甲酸对硝喹的抗疟作用有明显的拮抗作用,甲酰四氢叶酸钙和叶酸对硝喹基本上无拮抗作用。 鉴于对氨苯甲酸能拮抗硝喹的抗疟作用,认为其作用环节可能是与对氨苯甲酸竞争二氢碟酸合成酶。对叶酸代谢过程中的其它环节,本文也进行了讨论。     

复方硝喹在某一恶性疟疾流行地区防治效果的观察

抗疟药硝喹对间日疟及恶性疟均有治疗及防治效果,对鸡疟原虫、食蟹猴疟原虫、间日疟原虫、恶性疟原虫的孢子增殖期均有阻断作用。1979年对硝喹进行了鉴定,并商定1980年在疟区扩大使用。我们于1980年在疟区进行大面积防治的工作中,对流行比较严重的几个村寨进行了重点观察,并于1981年继续进行观察,现将两年的结果总结如下。     

三种抗疟药复方对食蟹猴疟原虫的疗效

本文报道喹哌+硝喹、羟基喹哌+硝喹和咯萘啶+硝喹三种抗疟药复方对食蟹猴疟原虫的疗效作用。实验证明,喹哌每天3.5mg/kg×7天+硝喹每天0.1mg/kg×7天复方,羟基喹哌每天3.5mg/kg×7天+硝喹每天0.1mg/kg×7天复方和咯萘啶每天5mg/kg×7天+硝喹每天0.1mg/kg×7天复方均能治愈感染食蟹猴疟原虫的恒河猴,而单服喹哌每天3.5mg/kg×7天、羟基喹哌每天3.5mg/kg×7天或咯萘啶每天5mg/kg×7     

硝喹、喹哌及磷酸喹哌对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

硝喹Nitroquine(CI 679,简称679)对疟原虫的孢子增殖期有明显的阻断作用。临床试用证明硝喹可治愈现症患者,并对恶性疟的抗氯喹株有效。 喹哌Piperaquine和磷酸喹哌为长效抗疟制剂,经对恶性疟和间日疟的现场应用验证,证明均有良好疗效,且副作用小。 本实验通过观察药物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,为进一步探讨三种抗疟药的抗疟作用与机体免疫功能的相互关系。     

硝喹对约氏疟原虫卵囊和子孢子作用的观察

本文对硝喹在鼠疟孢子增殖期作用的超微结构进行了观察。扫描电镜观察表明,卵囊数量减少,个体较小,晚期卵囊退化,外形不规则;透射电镜观察显示,核膜肿胀,核基质浓缩,自噬泡明显可见,线粒体空泡变,残余体增多。子孢子核膜增厚,空泡变。     

发育不同日龄鸡疟原虫卵囊的DNA含量变化初步研究

<正> 疟原虫卵囊阶段是疟原虫在蚊体内发育、分化、繁殖的旺盛阶段,是各种组织化学成分最丰富的时期。对鸡疟原虫卵囊组织化学的研究,50年代以来,国外一些学者作过观察,如糖及多种酶类。国内有人在研究药物对疟原虫卵囊发育阶段作用机制     

斯氏按蚊血淋巴在约氏疟原虫卵囊黑化时差异表达蛋白的SDS-PAGE分析

目的　初步了解约氏疟原虫感染后的雌斯氏按蚊成蚊吸饲硝喹蔗糖水和蔗糖水后不同时间的血淋巴蛋白差异表达。方法　挤压法分别收集两组雌斯氏按蚊成蚊 1～ 5d的血淋巴 ,经SDS PAGE ,考马斯亮蓝和银染显色 ,Bio Rad10 0 0凝胶图像分析系统进行扫描和差异蛋白条带的自动化分析。结果　用药第 2天少数蚊卵囊开始部分黑化 ,第 5～9天黑化蚊及其黑化卵囊逐渐增多。用药后第 3天处理组蚊血淋巴蛋白条带数明显多于对照组 ,两组间存在较多差异蛋白带 ,主要集中在 ( 2 0～ 40 )× 10 3、( 60～ 80 )× 10 3和 13 0× 10 3处。银染比考马斯亮蓝染色出现的蛋白条带数多。结论　约氏疟原虫感染的雌斯氏按蚊成蚊吸饲硝喹糖水后其血淋巴蛋白表达有差异 ,其差异蛋白很可能就是黑化相关蛋白     

伯喹对疟原虫的配子体、配子生殖和孢子增殖的影响

给感染约氏疟原虫尼日利亚亚种的小鼠灌服怕喹1.25mg/kg和1.95mg/kg8h后,小鼠血内配子体数可减少一半,有些配子体胞质出现空泡,甚至虫体变小,随着伯喹剂量的增加与延长药后感染蚊虫的时间,形成动合子的数量,卵囊的感染率、感染度以及子孢子进腺率均降低;同时显示伯喹可致动合子和卵囊的形态结构发生变异,胞质出现空泡,虫体收缩等。在给药1.25mg/kg后8h,1.95mg/kg后4h,2.5mg/kg和5mg/kg后2h感染蚊媒,均未见子孢子进腺。证实伯喹既可作用于疟原虫配子体,又可影响其配子生殖和孢子增殖。     

疟原虫卵囊——子孢子体外培养初步研究

本文通过对约氏疟原虫约氏亚种及鸡疟原虫卵囊体外培养的研究,初步探讨了有关卵囊体外培养的条件。在修改的 M-Mc_3培养基中加入了某些氨基酸亚适当提高了培养基的渗透压,结果有一定促进作用。约氏疟原虫8天卵囊经体外培养3天后,鸡疟原虫7天卵囊体外培养4天后均形成形态成熟的子孢子。本实验还探索了污染的控制问题。结果表明在相同消毒方法处理下,斯氏按蚊与白纹伊蚊蚊胃的污染率不同,前者明显高于后者,其原因尚待进一步探讨。     

斯氏按蚊黑化包被约氏疟原虫卵囊时血淋巴蛋白的二维电泳分析

目的以斯氏按蚊-约氏疟原虫为模型,用二维电泳技术分析比较约氏疟原虫感染后雌性斯氏按蚊吸饲硝喹蔗糖水和蔗糖水蚊血淋巴蛋白差异.方法用挤压法分别收集吸硝喹糖水3 d、吸感染血和吸蔗糖水雌斯氏按蚊成蚊血淋巴,Bradford法检测血淋巴蛋白浓度,继而对血淋巴进行双向电泳,凝胶考马斯亮蓝染色,ImageMaster VDS-CL对二维电泳凝胶蛋白斑点扫描和用ImageMaster 2D Elite软件进行蛋白质斑点自动分析.结果用药组血淋巴蛋白浓度总是低于吸感染血组和吸糖水组,用药组蚊血淋巴蛋白点有101个,对照组有115个,有51个蛋白点相同.50个仅在用药组中检测到,64个仅在对照组中检测到;蛋白点的分子量和等电点主要位于(40～60)×103和碱性端.结论二维电泳技术可直接反映蛋白质的差异,其蛋白浓度和白点的差异与硝喹诱导疟原虫卵囊黑化有关.     

萘酚喹与阿奇霉素伍用延缓恶性疟原虫对萘酚喹的抗性

目的 观察实验组恶性疟原虫经萘酚喹与阿奇霉素伍用与对照组恶性疟原虫经萘酚喹单独用药在药物作用下体外敏感性的变化,评价萘酚喹与阿奇霉素伍用对延缓恶性疟原虫抗性的作用。方法 通过体外药物剂量递增间隔作用法对实验室驯化的恶性疟原虫FccSM/YN株进行长期抗性培育,采用Rieckmann微量测定法,在不同时段（d）测定疟原虫的体外敏感性,用ICEstimator软件计算半数抑制浓度（IC₅₀）,药物作用后实验组、对照组的IC₅₀与亲代相比,计算抗性指数,抗性指数<2,判定为敏感,抗性指数≥2为抗性。结果 药物作用前,萘酚喹对恶性疟原虫IC₅₀值为 2.11 nmol/L,阿奇霉素为3.21 nmol/L。对照组经萘酚喹作用120 d后,萘酚喹IC₅₀值升至65.47 nmol/L,阿奇霉素上升至68.58 nmol/L,萘酚喹/阿奇霉素分别是10.34 nmol/L,抗性指数均>2。实验组经萘酚喹/阿奇霉素作用120 d后,萘酚喹对恶性疟原虫的IC₅₀值升至35.47 nmol/L,阿奇霉素上升至50.04 nmol/L,抗性指数均>2。萘酚喹/阿奇霉素IC₅₀ 值分别为2.89 nmol/L,抗性指数<2。实验组与对照组相比,实验组在同一药物浓度的疟原虫裂殖体抑制率明显高于对照组（P<0.01）;实验组IC₅₀值明显低于对照组;萘酚喹/阿奇霉素的抗性指数<2。结论 本研究方法可以培育出恶性疟原虫萘酚喹抗性株;萘酚喹与阿奇霉素伍用可延缓恶性疟原虫对萘酚喹和萘酚喹/阿奇霉素抗性的产生与发展。     

应用Feulgen染色及显微分光光度计探讨乙胺嘧啶对约氏疟原虫卵囊的作用机理

本实验应用 Feulgen 组化染色研究乙胺嘧啶作用后约氏疟原虫卵囊内核酸含量的变化,并在显微分光光度计下进行 DNA 含量测定。结果显示,对照组早、中期卵囊内含有丰富的 DNA 颗粒,晚期卵囊内形成大量成熟的子孢子。而用药组卵囊发育迟缓,胞浆内来见清晰的 DNA 团块,仅见色素堆积,部分卵囊形成黑孢子。用药组卵囊的 DNA 平约含量亦明显低于对照组。初步说明,乙胺嘧啶可抑制疟原虫卵囊的 DNA 合成,从而阻止了蚊体内疟原虫的继续发育成熟.     

复方硝喹对食蟹猴疟根治作用的初步观察

1972年以来我组对硝喹(2、4二氨基-6-[(3、4二氯苄基)亚硝基胺基]喹唑啉醋酸盐,简称679)作用于疟原虫红细胞内期和组织期进行了一系列的研究,发现服药后6小时即使鸡疟原虫组织期发生明显的形态变化(脑组织涂片),此后又在恒河猴实验发现该药能抑制食蟹猴疟原虫组织期的发育,肝脏的原虫数较对照组明显减少,形态亦有显著改变。本     

约氏疟原虫感染对大劣按蚊PPO4基因转录与卵囊内Ca2+的影响

目的观察约氏疟原虫感染对大劣按蚊前酚氧化酶(prophenoloxidase, PPO)基因转录的影响与卵囊黑化期间囊内Ca2 的变化,探讨疟原虫感染不易感蚊种时卵囊黑化的相关机制.方法分别在大劣按蚊吸血感染约氏疟原虫前与感染后1、2、3和5 d抽提蚊总RNA进行RT-PCR,PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳后扫描进行凝胶图像分析,并对所得数据进行统计学处理.在吸血感染后5、7、11和15 d解剖分离按蚊中肠,以荧光染料Fluo-3/Am作为卵囊内Ca2 指示剂,利用共聚焦扫描显微镜观察不同时期约氏疟原虫卵囊内Ca2 的分布及变化.结果吸血感染约氏疟原虫前大劣按蚊PPO4基因的RT-PCR扩增产物较少,但感染后明显增加(P<0.01),尤其在感染后1 d与2 d最为明显;约氏疟原虫未黑化卵囊内Ca2 为(137.15±7.02) nmol/L,完全黑化卵囊内Ca2 为(18.44±1.75) nmol/L、并在囊壁出现明显的钙沉着.结论吸血感染约氏疟原虫后大劣按蚊PPO4基因转录比感染前明显增强,黑化卵囊内Ca2 较未黑化卵囊明显减少,并有外排现象.     

蚊血细胞对正常和退变之约氏疟原虫卵囊的反应及其在卵囊黑化中之作用

感染约氏疟原虫之斯氏按蚊，饲以1％二氟甲基鸟氨酸，使卵囊发生退变，第11天电镜下分别观察退变卵囊及对照组正常发育之卵囊外周血细胞之反应。结果表明，对照组中正常发育卵囊之周围无明显血细胞反应，但个别退变卵囊有血细胞趋附；用药组中卵囊均呈不同程度之退变，有的已开始黑化，其周围均有一个或多个血细胞，均属颗粒类细胞。血细胞胞浆内及血细胞与卵囊之间均有许多具微管结构之颗粒，提示卵囊退变后可诱使血细胞趋附，后者并可释放颗粒物质或许还有他种物质，促使包被卵囊和黑化卵囊。     

硝喹的临床与现场应用

本文综合报道了我们十几年来在硝喹与复方哨喹临床及现场与扩大使用方面的结果。治疗恶性疟198例,用50～75mg×3天(复方硝喹,下同),对恶性疟或抗氯喹恶性疟患者有良好的效果。治疗间日疟510例,当剂量为50mg×3天时,效果略逊于氯喹。在抗氯喹恶性疟地区的4540人群中进行防治验证,通过重点村寨详细观察认为:用50mg/天/半月或75mg×2天/月,均可达到防治效果。实验室研究表明本药对疟原虫的组织期、红内期、孢子增殖期均有作用,据此提出了复方硝喹的合理使用建议。     

大劣按蚊血淋巴酚氧化酶与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

目的：探讨大劣按蚊血淋巴酚氧化酶（PO）与约氏疟原虫卵囊黑化的关系。方法：以大劣按蚊/约氏疟原虫模型，利用聚丙酰凝胶电泳后的酶底物显色法，比较、分析血餐后5、7、11、15d时不吸血组、吸正常血组和感染组3组的雌大劣按蚊血淋巴酚氧化酶的单酚氧化酶（MPO）和双酚氧化酶（o-DPO)活性；同时观察感染组约氏疟原虫的感染度及其卵囊黑化比率。结果：感染组的血淋巴MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组和吸正常血组（P＜0.05)；但是随着约氏疟原虫卵囊黑化比率的增高，感染组血淋巴MPO和o-DPO活性逐渐下降。另外，吸正常血组的MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组（P＜0.05)。结论：吸血和约氏疟原虫的感染均能激活大劣按蚊前酚氧化酶级联反应，而大劣按蚊血淋巴酚氧化酶可能在大劣按蚊对黑化约氏疟原虫卵囊中发挥重要作用。     

猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内的发育

1、本文报告用巴拉巴按蚊感染猪尾猴疟原虫广西株获得十分满意的结果,胃感染率为100％,感染度极重,64.90％的阳性蚊胃卵囊数达500个以上。腺感染率为100％,且均为3～4度,尤以4度为多,占79.55％,故巴拉巴按蚊是广西株的良好媒介。 2、猪尾猴疟原虫广西株在巴拉巴按蚊体内完成孢子增殖的时间25℃时为12天,27℃时为11天,显较猪尾猴疟原虫的孢子增殖时间为短。 3、讨论了卵囊分化的时间、发育速度、卵囊最大体积和色素的排列型式,广西株虽与猪尾猴疟原虫其他虫株有所差别,这些差别仅为株的差异。     

约氏疟原虫约氏亚种的卵囊、成孢子细胞和子孢子扫描电镜观察(摘要)

<正> 本研究应用扫描电镜初次对约氏疟原虫约氏亚种(Plasmodium yoelii yoelii)的卵囊、成孢子细胞及子孢子的表面形态构造进行了详细观察,为对疟原虫蚊期生物学及抗疟药作用机理的研究提供了参考资料。