半夏泻心汤及不同配伍组对黄连生物碱大鼠体外肝代谢的影响

目的研究大鼠肝微粒体温孵育体系中黄连生物碱成分的代谢动力学,比较半夏泻心汤全方及不同配伍组对其肝微粒体代谢的影响。方法超高效液相色谱法(UPLC)测定大鼠肝微粒体温孵体系中黄连生物碱成分(小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱)质量浓度。采用在体诱导-体外肝微粒体温孵方法,考察半夏泻心汤全方,辛温开痞组、苦寒降逆组及甘滋补益组对黄连生物碱成分在大鼠肝微粒体系中的代谢变化影响。结果温孵时间小檗碱在0～40 min内,黄连碱在0～20 min内,巴马汀和药根碱均在0～60 min内呈线性消除;各生物碱成分在空白肝微粒体中代谢速率顺序为黄连碱>小檗碱>药根碱>巴马汀;与空白组相比,除辛温开痞组对巴马汀的代谢无抑制作用外,其余配伍组对黄连生物碱成分均呈抑制作用,全方的抑制作用最为显著。结论半夏泻心汤全方对生物碱的代谢主要起抑制作用(P<0.01),且苦寒降逆组的抑制作用较其他配伍组显著。     

吴茱萸对黄连中小檗碱组织分布及肝脏摄取的影响

目的：探讨吴茱萸对黄连中盐酸小檗碱组织分布及肝脏摄取的影响。方法：将大鼠随机分为黄连组、黄连吴茱萸合用组,分别灌胃给予黄连粉末、黄连与吴茱萸混合粉末。于末次给药后1h、2h、4h分批麻醉大鼠取心、肝、肾、脾、肺等组织,HPLC检测各组织中小檗碱的量;将SD大鼠离体肝灌流给予黄连、黄连与吴茱萸混合粉末,取出不同时间点肝灌流液,HPLC法测定肝灌流液中小檗碱的浓度,计算肝脏摄取率。结果：黄连配伍吴茱萸后,小檗碱在肝脏中的分布最高,较配伍前增加,差别有统计学意义（P〈0．05）;小檗碱的肝脏摄取率较配伍前提高,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论：吴茱萸可增加黄连中小檗碱在肝脏中的分布,促进小檗碱的肝脏摄取。     

吴茱萸成分在大鼠肝微粒体对盐酸小檗碱代谢的影响

 目的 研究大鼠肝微粒体温孵系统中盐酸小檗碱代谢动力学以及吴茱萸中多种化学成分对其代谢的影响。方法 采用体外肝微粒体温孵法研究盐酸小檗碱代谢的酶动力学,分别考察了温孵时间、微粒体质量浓度以及底物浓度对盐酸小檗碱代谢速率的影响,并探讨吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯对其代谢的影响。结果 盐酸小檗碱在大鼠肝微粒体温孵系统中发生较强的代谢, 其在大鼠肝微粒体中37 ℃温孵0～60 min呈时间依赖的线性消除;当肝微粒体蛋白浓度在0.5～2.0 mg·mL-1,温孵时间为60 min时,盐酸小檗碱代谢速率表现出微粒体蛋白浓度依赖性增快;当底物盐酸小檗碱浓度大于10.0 μg·mL-1时,盐酸小檗碱的代谢速率不再随底物浓度的增加而增加,表现出明显的饱和特性。其表观酶促动力学参数,米氏常数Km为（2.41 ± 0.617) mg·mL-1,最大反应速度V_max为 (6.88±1.89) μg·g-1·min-1。吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯均能显著抑制盐酸小檗碱的代谢,3个组分对盐酸小檗碱的代谢抑制常数K_i分别为 (140.85±16.48), (15.34±3.04)和(25.98±6.47) μmol·L -1,其中吴茱萸次碱和吴茱萸内酯的代谢抑制作用明显强于吴茱萸碱（P＜0.001）。结论 盐酸小檗碱在大鼠肝微粒体内被迅速代谢;吴茱萸中化学成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯对盐酸小檗碱的代谢有抑制作用,此结果有可能对小檗碱体内药动学产生影响。     

吴茱萸次碱对5种黄连生物碱大鼠体外肝代谢的抑制作用

目的 考察吴茱萸主要成分吴茱萸次碱对黄连中5种生物碱肝代谢的抑制作用,为深入研究黄连吴茱萸药对配伍机制提供依据。方法 采用大鼠体外肝微粒体温孵法,考察吴茱萸次碱对黄连中5种生物碱（黄连碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀和药根碱）肝代谢的抑制作用。结果 吴茱萸次碱对黄连碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀、药根碱均存在体外肝代谢抑制作用,半数抑制浓度（IC₅₀）均大于50 μmol/L,表现为体外弱抑制作用;抑制常数（K_i）的差异性具有统计学意义（P<0.05）,抑制作用强弱程度顺序为小檗碱>药根碱>巴马汀>表小檗碱>黄连碱。结论 为了解吴茱萸对黄连生物碱主要作用环节和揭示黄连吴茱萸药对配伍机制提供依据。     

基于动物行为学考察萸黄连“反制”前后的药性差异研究

目的:研究萸黄连"反制"前后的寒热药性的差异性。方法:选用KM小鼠,依据动物行为趋向性,分别给予黄连、吴茱萸、萸黄连,考察不同药物对小鼠温度趋向性的影响,并结合测定小鼠肝脏ATP酶的活力,探讨不同药性药物对小鼠机体能力代谢的影响。结果:吴茱萸组小鼠体现出"趋寒性",能使小鼠ATP酶活性增强;黄连和萸黄连组小鼠体现出"趋热性",并抑制小鼠ATP酶活性;黄连组和萸黄连组相比,黄连组小鼠的"趋热性"较萸黄连组强(P<0.05),萸黄连组小鼠的钠钾ATPase活力较黄连组有显著提高(P<0.05);结论:吴茱萸体现出"热性",黄连和萸黄连均体现出"寒性",但萸黄连与黄连相比,"寒性"降低。此结论与萸黄连"以热制寒"的"反制"传统炮制理论相符。     

吴茱萸汁炮制对黄连抗炎药效和苦寒药性的影响

目的观察吴茱萸汁炮制对黄连抗炎药效及黄连苦寒药性的影响。方法抗炎实验动物模型采用巴豆油致小鼠耳肿胀法。小鼠随机分为对照组、地塞米松组、生黄连组、疏毛萸连组、萸黄连组和石虎萸连组。黄连各组均口服给药1次,给药剂量为6 g/kg,对照组给与同体积蒸馏水,地塞米松组予地塞米松30 mg/kg腹腔注射,观察各组小鼠耳片肿胀程度。药性实验以大鼠为实验动物,分为对照组、生黄连组和3个黄连炮制品组。给药剂量均为3 g/kg,对照组给与同体积蒸馏水。连续口服给药14 d后测定各组大鼠体质量、食量、饮水量、体温、心率、血黏度,并采用放免法检测血清和血浆中促甲状腺素(TSH)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)含量。结果黄连原药材和不同炮制品均能减轻小鼠耳肿胀程度。黄连各组给药14 d后,大鼠体质量、饮食量、饮水量与对照组比较均有不同程度下降。与对照组比较,疏毛萸连组血黏度升高,IL-2降低(P＜0.05);生黄连组TSH降低(P＜0.05)。结论不同吴茱萸汁炮制对黄连抗炎药效无明显影响,可在一定程度上减轻黄连的寒性。     

黄连-吴茱萸组分配伍对高脂模型大鼠脂代谢相关基因的影响研究

目的:观察黄连-吴茱萸组分配伍(小檗碱、吴茱萸碱配伍)对高脂血症模型大鼠肝脏Ob-Rb、JAK2、STAT3 mRNA表达的影响。方法:给予高脂饲料喂养建立高脂血症大鼠模型,筛选造模成功大鼠随机分为空白组,模型组,辛伐他汀组,黄连吴茱萸组分配伍高、中剂量组,分别给予相应药物灌胃治疗,干预8周后,检测各组动物血清TC、TG、HDL-C及LDL-C含量;检测各组动物肝指数及肝脏TC、TG水平;RT-PCR法检测肝脏Ob-Rb、JAK2、STAT3 mRNA表达。结果:黄连吴茱萸组分配伍中、高剂量组能显著降低高脂模型大鼠血清TC,LDL-C含量(P0.05或P0.01)、改善高脂模型大鼠肝脏脂肪病变,以及降低肝脏TG水平(P0.05)。与模型组相比,黄连吴茱萸组分配伍中剂量组肝脏Ob-Rb,JAK2,STAT3 mRNA表达明显下降(P0.05)。结论:黄连-吴茱萸组分配伍可能通过下调高脂模型大鼠肝脏Ob-Rb,JAK2和STAT3 mRNA的表达参与血脂调控。     

小檗碱吴茱萸碱配伍对高脂血症模型大鼠肝脏HMG-CoA还原酶和L-FABP mRNA表达的影响

目的:观察小檗碱和吴茱萸碱配伍对高脂血症模型大鼠肝脏HMG-CoA还原酶和L-FABP基因表达的影响,探讨黄连吴茱萸配伍发挥降脂作用的机制。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,辛伐他汀组,小檗碱与吴茱萸碱配伍高、低剂量组,每组8只;使用高脂乳剂建立大鼠高脂血症模型,以18sRNA作为内参基因,RT-PCR技术检测各组大鼠肝组织中HMG-CoA还原酶和L-FABP mRNA相对表达水平。结果:小檗碱和吴茱萸碱配伍能显著降低高脂血症模型大鼠肝脏HMG-CoA还原酶和L-FABP mRNA表达,且高剂量组效果更优。结论:黄连吴茱萸降血脂有效成分小檗碱、吴茱萸碱配伍可降低高脂血症模型大鼠的血脂水平,其作用机制可能与抑制肝脏HMG-CoA还原酶和L-FABP基因表达有关。     

盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对小鼠肝P450同工酶的影响

目的　阐明盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对P4 5 0同工酶的影响。方法　采用分光光度法测定盐酸小檗碱、环孢素A及两者合用时小鼠肝微粒体红霉素N 脱甲基酶 (ERD)、氨基比林N 脱甲基酶 (ADM )的活性 ,采用RT PCR法测定CYP3A1和CYP2E1基因在给药前后的变化。结果　灌胃给药 3d和 6d ,盐酸小檗碱 (2 0 0mg·kg-1)对ERD活性没有明显的抑制作用 ,但对ADM有抑制作用 ;环孢素A(45mg·kg-1)对ERD和ADM均有抑制作用 ;盐酸小檗碱与环孢素A合用对ERD和ADM均有明显抑制作用。盐酸小檗碱与环孢素A合用对CYP3A1和CYP2E1基因均有明显抑制作用。结论　盐酸小檗碱与环孢素A合用可明显抑制药物代谢酶ERD(CYP3A1)、ADM以及CYP2E1。     

盐酸小檗碱与环孢素A合用对小鼠肝药物代谢酶的影响

目的：阐明盐酸小檗碱与环孢素A合用对药物代谢酶的影响，方法：采用分光光度法测定盐酸小檗碱，环孢素A及二者合用时小鼠肝微粒体CYP450，ERD，ADM和GST的含量或活性。结果：ig给药3和6d，盐酸小檗碱（200mg/kg)对CYP450，ERD没有明显的抑制作用，但对ADM和GSP有抑制作用，环孢素A（45mg/kg)对ERD，AMD和GST均有抑制作用；盐酸小檗碱与环孢素A合用对CYP450，ERD，ADM和GST均有明显抑制作用。结论：盐酸小檗碱与环孢素A的组合是药物代谢酶CYP450，ERD（CYP3A），ADM（CYP1A1，2B1，2C11）和GST的强抑制剂，其总体抑制水平至少与已知的抑制剂酮康唑和肖苯地平相当甚至更强。     

半夏泻心汤及不同配伍对大鼠肝微粒体中黄芩苷和黄芩素代谢的影响

目的:研究大鼠肝微粒体温孵育体系中黄芩苷和黄芩素的代谢动力学,比较半夏泻心汤全方及不同配伍组对其肝微粒体代谢的影响。方法:超高效液相色谱法(UPLC)测定大鼠肝微粒体温孵体系中黄芩苷和黄芩素含量。采用在体诱导-体外肝微粒体温孵方法,考察半夏泻心汤全方、辛温开痞配伍、苦寒降逆配伍及甘滋补益配伍对黄芩苷和黄芩素在大鼠肝微粒体系中的代谢变化影响。结果:黄芩苷温孵时间在60 min内,黄芩素在10 min内呈线性消除;黄芩苷和黄芩素质量浓度为0.5～25μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系;肝微粒体蛋白质量浓度在0.2～1.0 g/L内,黄芩苷和黄芩素随着肝微粒体蛋白质量浓度的增大,呈线性消除。空白肝微粒体中黄芩素的代谢速率大于黄芩苷;与空白对照组比较,全方组对黄芩苷和黄芩素的代谢较其他配伍组抑制作用强,苦寒降逆配伍组次之,辛温开痞配伍组无显著性差异,甘滋补益配伍组对黄芩苷无抑制作用,对黄芩素抑制作用不显著。结论:半夏泻心汤抑制黄芩苷和黄芩素的代谢,且抑制作用较其他配伍组强,为半夏泻心汤组方合理性及临床配伍发挥相须相使的疗效提供了重要的药理学依据。     

戊己丸活性代表成分在大鼠肝脏中分布的研究

采用L9(34)正交设计将戊己丸中黄连,吴茱萸,白芍提取物组成9组配伍方,以及相应剂量的单味药方,共计18个方。建立并采用UPLC-MS/MS方法测定并比较不同配伍方代表成分小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、芍药苷在大鼠口服给药2 h后在肝脏中的浓度比较戊己丸不同配伍方中有效成分在大鼠肝脏中的浓度。结果显示戊己丸配伍方中有效成分在肝中的浓度与相同剂量的单味药组方存在明显差异,相同剂量配伍方之间也存在差异。黄连与低、高剂量吴茱萸中吴茱萸碱浓度成正相关,吴茱萸与低剂量黄连中小檗碱的浓度成负相关,与中剂量黄连中小檗碱的浓度成正相关,与中剂量白芍中芍药苷浓度成正相关。白芍与中剂量黄连中巴马汀浓度成负相关、与中剂量吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱浓度成负相关。提示了黄连、吴茱萸、白芍之间相互作用导致了各活性成分在肝中分布的差异,分析显示各代表成分2 h在肝中浓度最大的配伍比为12∶6∶6。     

5种黄连生物碱大鼠体外肝代谢特征比较

目的 探讨黄连中5种结构相似异喹啉生物碱大鼠体外肝代谢的选择性。方法 采用大鼠体外肝微粒体温孵方法,通过考察温孵时间、微粒体蛋白浓度以及底物浓度对小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱代谢的影响,求得代谢反应动力学参数K_m、V_max和CL_int。结果 5种黄连生物碱成分的体外肝代谢动力学参数K_m和CL_int间差异明显（P＜0.05）。结论 黄连中5种异喹啉生物碱大鼠体外肝代谢存在显著选择性。     

傣医解药雅解沙把对大鼠肝药酶活性的影响

目的:研究傣药"雅解沙把"对正常大鼠和CCL4致肝损伤大鼠肝药酶活性的影响。方法:傣药"雅解沙把"(2.43g/kg和0.27g/kg)对SD大鼠灌胃(ig)给药,每天1次,连续给药14d,分别测定细胞色素P450(CYP450)、细胞色素b5(Cytb5)的含量以及红霉素N-脱甲基酶(ERD)、氨基比林N-脱甲基酶(ADM)活性。结果:对正常大鼠,"雅解沙把"(2.43g/kg)能提高CYP450和Cyt b5的含量,诱导ERD和ADM活性;对CCL4致肝损伤大鼠,"雅解沙把"(2.43g/kg)能提高CYP450和Cyt b5的含量,对ERD和ADM活性无影响。结论:高剂量"雅解沙把"能提高正常大鼠和CCL4致肝损伤大鼠的CYP450、Cyt b5的含量,可以诱导正常大鼠的ERD和ADM活性,提高CYP3A和CYP2E1蛋白表达。     

小檗碱吴茱萸碱配伍的降脂作用与上调LXRα和PPARγ蛋白表达的研究

目的:探讨小檗碱吴茱萸碱配伍对高脂血症大鼠肝脏LXRα和脂肪PPARγ蛋白表达的影响。方法:将60只大鼠随机分为空白组6只与模型组54只。建立高脂饮食诱导高脂血症大鼠模型,选取造模成功的48只大鼠随机分为8组(每组6只)后药物干预8周,检测各组大鼠的血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平以评价药物作用效果;以Western blot方法检测肝脏LXRα和脂肪PPARγ蛋白的表达。结果:与模型组相比,小檗碱吴茱萸碱配伍能够明显降低高脂血症模型大鼠血清TC、LDL-C水平(P0.01),且降脂效果优于小檗碱或吴茱萸碱单用,能够升高血清HDL-C水平(P0.05),但其作用弱于吴茱萸碱单用;小檗碱吴茱萸碱配伍能够明显上调模型大鼠肝脏LXRα和脂肪PPARγ的表达,且其作用强于小檗碱或吴茱萸碱单用(P0.05)。结论:小檗碱吴茱萸碱配伍能够降低高脂饮食诱导的高脂血症大鼠血脂水平,其作用机制与其上调LXRα和PPARγ蛋白的表达有关。     

黄连配伍吴茱萸对大鼠红细胞内谷胱甘肽含量的影响

目的:研究小剂量和大剂量黄连及黄连配伍吴茱萸对大鼠红细胞内谷胱甘肽含量的影响。方法:将小剂量和大剂量黄连组和黄连配全吴茱萸组的水煎液通过灌胃途径,应用于SD大鼠。取抗凝血观察红细胞内谷胱甘肽含量的改变。结果:给药后,红细胞内谷胱甘肽含量有降低的趋势。黄连大剂量组与空白对照组比较有统计学意义(P<0.01);黄连小剂量组和黄连配伍吴茱萸组对红细胞内谷胱甘肽含量的影响较小,无统计学意义(P>0.05);与黄连配伍吴茱萸组比较,黄连大剂量组有统计学意义(P<0.05)。结论:以红细胞内谷胱甘肽含量为指标,大剂量黄连对红细胞内谷胱甘肽含量有影响,而黄连小剂量和黄连配伍吴茱萸对正常红细胞内谷胱甘肽含量无明显影响。     

戊己丸不同配伍对代表成分吸收及肝脏摄取的影响

目的:从肠道吸收、肝脏摄取的角度解释戊己丸的配伍机制。方法:采用正交设计得到9个戊己丸复方,加上9个单味药,共18个复方为对象。建立单次肠肝灌流模型,于十二指肠给药后0、1、5、10、15、30、60、90、120min在门静脉、肝静脉插管处同时取样,LC-MS检测代表成分浓度,计算药-时曲线下面积(AUC)、肝脏摄取率,并对结果进行方差分析、极差分析。结果:吴茱萸与黄连代表成分小檗碱、巴马汀、白芍代表成分芍药苷吸收呈负相关,白芍与黄连代表成分小檗碱、巴马汀吸收呈正相关,而与吴茱萸代表成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱吸收呈负相关;吴茱萸吴茱萸碱、吴茱萸次碱与黄连代表成分小檗碱、巴马汀肝脏摄取呈正相关,黄连与白芍代表成分芍药苷肝脏摄取呈负相关,白芍与黄连代表成分小檗碱、巴马汀肝脏摄取呈负相关。并且得到了针对代表成分吸收、肝脏摄取的最优配伍比例。结论:吴茱萸抑制黄连、白芍代表成分的吸收;白芍促进黄连代表成分、抑制吴茱萸代表成分的吸收。吴茱萸促进黄连代表成分的肝脏摄取;黄连、白芍相互抑制其代表成分的肝脏摄取。     

戊己丸不同配伍对小檗碱、巴马汀吸收的影响

目的:应用大鼠原位循环肠肝灌流模型,考察戊己丸不同配伍对戊己丸中黄连代表成分小檗碱、巴马汀的吸收的影响。方法:采用L9(34)正交设计得到戊己丸12个配伍方(3个单味药和9个配伍方),经十二指肠给药,于不同时间(0,1,5,10,15,30,60,90,120 min)采集灌流液,LC-MS检测小檗碱、巴马汀的含量,计算其吸收分数,吸收速率常数(Ka)。结果:吴茱萸与小檗碱、巴马汀的吸收分数,吸收速率常数(Ka)之间呈负相关,并得到了促进小檗碱、巴马汀吸收的最优配伍比例黄连-吴茱萸-白芍3∶1∶3。结论:吴茱萸抑制黄连代表成分的吸收,而且黄连、吴茱萸、白芍配伍比例不同,小檗碱、巴马汀的吸收量、吸收速度也有较大差异。     

吴茱萸对黄连生物碱在大鼠肠道吸收中的影响研究

目的:研究吴茱萸对黄连中小檗碱和巴马汀在大鼠肠道吸收中的影响及其机制.方法:采用大鼠单向肠灌流模型,考察维拉帕米和吴茱萸提取物对小檗碱和巴马汀在各肠段吸收的影响,利用HPLC分别测定小檗碱和巴马汀的量,计算两种生物碱的肠吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp).结果:黄连提取物和吴茱萸提取物配比为6∶12时小檗碱和巴马汀的Ka和Papp显著增加.黄连生物碱单体化合物小檗碱、巴马汀与吴茱黄提取物6∶12配伍时,能明显促进小檗碱和巴马汀的吸收;6∶1配伍时,减弱小檗碱的吸收,促进巴马汀的吸收.P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米的存在均能促进小檗碱和巴马汀的吸收.结论:黄连配伍吴茱萸可促进黄连中小檗碱和巴马汀的肠吸收,其机制可能与抑制P-gp的活性有关.     

黄连吴茱萸组分配伍对高脂血症大鼠JAK2/STAT3通路的影响

目的通过考察黄连吴茱萸组分配伍对高脂血症模型大鼠血清瘦素(Leptin)、肝脏组织中瘦素受体(Ob-Rb)、酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响,探讨其对高脂血症大鼠JAK2/STAT3信号转导通路的影响。方法建立SD大鼠高脂血症模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、辛伐他汀组(7mg/kg)、黄连吴茱萸组分配伍中剂量组(44.6mg/kg)、黄连吴茱萸组分配伍高剂量组(89.1mg/kg),除空白组外,其余各组继续采用高脂饲料喂养,连续灌胃给药8周,检测各组动物血清甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),及血清瘦素(Leptin)含量;HE染色检测各组肝脏病变程度;采用Western blot方法检测各组大鼠肝脏Ob-Rb、JAK2、及STAT3蛋白表达。结果黄连吴茱萸组分配伍能显著降低高脂血症模型大鼠血清TC、TG、LDL-C含量(P0.05或P0.01),升高HDL-C含量(P0.05),改善模型对照组大鼠肝脏的纤维化病变,降低血清Leptin含量(P0.01)。与模型对照组比较,黄连吴茱萸组分配伍干预后,高脂血症模型大鼠肝脏中Ob-Rb、JAK2和STAT3表达升高(P0.05或P0.01)。结论黄连吴茱萸配伍能有效改善高脂模型大鼠血脂水平,其可能通过调节JAK2/STAT3信号转导通路实现。