解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估. 方法 322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平行检测,采用UU-荧光定量PCR试剂盒,以PE 5700全自动分析仪进行检测和分析. 结果 UU-荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825,χ2=3.843,p<0.05.液体培养法敏感性为0.874,特异性为0.815,准确性为0.841. 结论以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法.采用培养法应考虑恰当标本处理,选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会.     

实时荧光定量PCR检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体

目的应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术（SAT）检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体（UU）,并评价其敏感性和特异性。方法对140例疑似泌尿生殖道感染患者的拭子和尿液样本,分别采用培养法、SAT进行解脲脲原体检测,检测结果有差异的标本用实时荧光定量PCR法对拭子进行复测,根据实验结果评估SAT检测尿液UU的敏感性和特异性。结果 140例疑似患者试子培养和尿液SAT检测阳性率均为60%,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）,其中16例培养结果与SAT检测结果不一致,8例培养法阳性、SAT阴性的拭子PCR结果复测阳性;8例培养法阴性、SAT阳性的拭子标本PCR结果 4例阴性、4例阳性,结合培养法结果和PCR结果作为＂扩大金标准＂,得出SAT对尿液检测的敏感性为95.5%、特异性为100%。结论 SAT检测泌尿生殖道患者尿液UU具有取样方便,检测快速、准确等优点,适用于临床实验室泌尿生殖道UU的检测。     

解脲支原体检测方法比较与探讨

比较荧光定量PCR（FQ—PCR）法．培养法以及ELISA法在检测解脲支原体中诊断与方法学。对534例疑似病例取尿道或宫颈分泌物同时进行FQ—PCR法。培养法以及ELISA法对比检测。以两种方法阳性为真阳性,两种方法皆阴性为真阴性。ELISA法敏感性为81．2％．特异性为87．8％。培养法敏感性为93．4％,特异性为100％。FQ-PCR敏感性与特异性皆为100％。ELISA法特异性和敏感性都稍差。荧光PCR法检测支原体有较好的特异性和准确性,快速,但需要特殊设备和环境,操作要求极为严格．不能进行药敏试验。培养法也有较高的特异性．而敏感性稍差,但方法简单再加上可快速做出药敏,配合临床用药,特别适合基层医院检测解脲支原体的好方法。     

免疫组化法检测解脲脲原体的研究

目的　建立检测解脲脲原体 (UU)的实验方法。方法　应用亲和素 生物素 酶复合物技术 (ABC法 )观察UU感染者 ,并与培养法和PCR法相比较。结果　ABC法对 75例临床标本的检出率为 5 2 % ,与培养法和PCR法比较 ,在统计学上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　ABC法可作为诊断UU感染的快速检测方法 ,在临床应用中有一定实用价值。     

液体培养法与套式PCR法检测解脲脲原体比较研究

目的：评价解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ,Ｕｕ）液体培养技术的准确性。方法：应用被认为是目前检测临床标本中支原体最为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术,并辅以ＤＮＡ全自动测序技术,对１５４例男性ＳＴＤ者的尿道拭子和８３例女性ＳＴＤ者的阴道拭子配对进行Ｕｕ液体培养法和套式ＰＣＲ法检测。并以套式ＰＣＲ检测为参照系进行统计分析。结果：一、男性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率为６３．０％,假阴性和假阳性率分别为２８．５７％和８．４４％;二、女性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率仅为３８．５５％,假阴性和假阳性率分别４９．４０％和１２．０５％。三、男、女性ＳＴＤ者合并观察Ｕｕ液体培养准确率为５４．４３％,假阴性和假阳性率分别为３５．８６％和９．７％。四、Ｕｕ套式ＰＣＲ产物经ＤＮＡ全自动测序与Ｕｕ标准株（９６０＾Ｔ）完     

解脲脲原体免疫血清的制备和应用

目的　探讨快速检测解脲脲原体 (UU)的免疫学方法。方法　用处理的临床分离株作为免疫原 ,免疫家兔制备UU免疫血清 ,以自制UU免疫血清作为第一抗体 ,用亲和素 生物素 酶复合物法 (ABC法 )检测了 63例临床标本。结果　UU免疫血清的代谢抑制效价为 1∶640 ,ABC法检测临床标本的阳性率为 54 % ,其结果与培养法比较 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5)。结论　ABC法可作为快速检测UU的方法。     

荧光定量PCR以及培养法检测男性不育症患者液解脲支原体结果的比较分析

目的 研究解脲支原体(UU)感染在男性不育症患者中的意义以及对其培养法和荧光定量PCR两种方法检测结果进行比较分析.方法对342例男性不育症患者和198例对照组同时进行UU培养和荧光定量PCR检测,培养法同步伴有药物敏感试验的结果.结果在不育症患者中培养法和荧光定量PCR检测UU的阳性率分别为43.0%和55.8%,在对照组中则分别为25.3%和29.8%,经x<'2>检验在男性不育症患者中两种方法检测UU的阳性率均显著高于对照组,P<0.005;荧光定量PCR的阳性率显著高于培养法,P<0.005;药物敏感试验结果显示UU培养法阳性者对克拉霉素敏感性最高,敏感率为97.4%,对环丙沙星耐药性最高,耐药率为62.1%.结论UU检测可对男性不育症患者的病因诊断和临库治疗提供实验依据.荧光定量PCR检测UU的敏感性要高于培养法,但是培养法的药敏试验可及时准确的指导临床选择用药.     

解脲脲原体的实验室检测方法的研究现状

解脲脲原体是一种条件致病菌，多与宿主共存，仅在某些条件下引起机会性感染，感染部位常为男女泌尿道，其中更易致病的为U．urealyticum型。近年来检测解脲脲原体的方法主要有液体培养法、固体培养法、免疫学方法和分子生物学方法等等，这些检测方法各有优劣。本文就临床使用较多的液体培养法、固体培养法和分子生物学方法进行重点分析，希望能给临床提供更多的帮助。     

荧光定量PCR对不育症患者解脲支原体和沙眼衣原体感染情况的研究

目的用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)定量检测不孕不育患者解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)基因,观察UU、CT感染情况与不孕不育的关系,探讨实时荧光定量PCR在不孕不育患者诊断和治疗中作用。方法采用FQ-PCR技术检测标本402份。结果 UU阳性率是32.8%,其中男性UU阳性率是21.4%,女性UU阳性率是44.3%。CT阳性率是16.2%,其中男性CT率是11.4%,女性CT率是20.9%。UU感染率在男性、女性患者有极显著性差异(P<0.01),而CT感染率在性别之间有显著性差异(P>0.05)。结论解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)是引起男女不育的主要原因之一,实时荧光定量PCR检测UU、CT基因具有操作简单、反应时间短、重复性好、结果客观准确、敏感性和特异性好等优点,其结果对临床诊断、治疗有一定指导意义。     

女性生殖道感染治疗前后解脲支原体荧光定量PCR检测的假阳性分析

目的探讨荧光定量PCR（FQ—PCR）检测解脲支原体的假阳性率，为客观分析其结果提供依据。方法采用FQ—PCR及培养法同时检查了70例无症状妇女及163例生殖道感染患者治疗前后宫颈分泌物中解脲支原体。结果无症人群FQ—PCR检测阳性率（42．9％），明显高于培养阳性率（11．4％）（P＜0．01）；生殖道感染患者FQ—PCR检测阳性率（66．9％），高于培养阳性率（45．4％）（P＜0．05）；治疗10天后FQ—PCR检测阳性率（40％），高于培养阳性率（10．8％）（P＜0．01）。结论FQ—PCR检测女性生殖道解脲支原体有一定的假阳性，应用时应客观分析其结果。     

妇科疾病中的解脲脲原体、沙眼衣原体Nesed-PCR检测

目的探讨UU、CT在本地区妇科疾病中的发病率及其致病作用,方法收集535例妇科阴道炎、不孕症、宫颈炎、附件炎等疾病患者的阴道分泌物,应用nested PCR(nPCR)技术检测解脲脲原体(UU)及沙眼衣原体(CT)核酸.结果393人检测解脲脲原体(UU),UU-DNA阳性192例(48.8%);142人检测沙眼衣原体(CT),CT-DNA阳性32例(22.5%).结论解脲脲原体(UU-DNA)、沙眼衣原体(CT-DNA)与妇科疾病的发生关系密切,特别是阴道炎的妇科患者.     

解脲脲原体感染与妇女不孕的研究

本文对我院不孕不育症门诊1997年7月-1999年6月收治的不孕妇女进行输卵管通液或造影，并用聚合酶链反应技术（PCR）进行解脲脲原体（UU）之DNA检测。结果：97例患者有58例输卵管有不同程度阻塞；输卵管阻塞者PCR检测UU均为阳必顿时性中原发不孕37例。继发不孕21例。结论：UU是引起输卵管阻塞造成不孕的重要原因之一。预防关键是加强性健康教育，早期查治。     

溶脲型脲原体感染与自然流产关系研究

本文应用聚合酶链反应（PCR）检测自然流产患者组织中溶脲型脲原体（Ureaplasmaurealytlicum，UU），所用引物是按UU尿素酶基因序列设计的，扩增片段为283bp。66例自然流产患者和30例正常人工流产患者作了UU－DNA检测，其阳性率分别为45．5％和13．3％，两者比较P＜0．005。关于流产次数与UU感染的关系，自然流产1、2、3、4次患者UU阳性率分别为30．2％、66．7％、83．3％和100％，与对照组比较，自然流产2次以上，P＜0．005。结果表明UU感染是引起自然流产的重要因素，并且与流产次数密切相关。     

解脲脲原体感染的检测与体外耐药性分析

目的探讨本地区解脲脲原体(Uu)感染及耐药情况,指导临床合理用药。方法对临床送检的531份标本进行Uu培养、计数、鉴定和药敏试验;对775份标本进行荧光定量PCR(FQ-PCR)法和培养法检测Uu。结果FQ-PCR法检出Uu阳性339例,阳性率43.74%。培养法检出Uu206例,阳性率38.79%。Uu对9种抗菌药物的耐药率最高为环丙沙星(CIP)80.10%,最低为交沙霉素(JOS)0.00%,敏感率最高为原始霉素(PRI)98.54%。结论Uu用两种方法检测均可有效检出。培养法能提供药敏结果,更有利于临床治疗。药敏结果提示本地区Uu感染经验用药可选择交沙霉素和强力霉素。     

荧光定量PCR技术对诊治阴道解脲脲原体感染价值的研究

目的　通过荧光定量PCR技术检测阴道内解脲脲原体感染状况 ,用以指导临床正确治疗。方法　对门诊的阴道炎患者 ,采用特制密封棉拭子宫颈管内取样 ,然后采用重量差减法 ,求出分泌物的重量 ,采用荧光定量PCR测定解脲脲原体。FQ -PCRUu的拷贝数 /g分泌物 ,与临床患者不同的症状体征作对照研究。结果　解脲脲原体拷贝数 /g≥ 1× 10 6的患者 ,82 9%具有典型阴道炎症状 ,71 9%具有阴道炎体征。拷贝数 /g <1× 10 6的患者 ,症状体征均不明显 ,二者之间差异显著     

间接免疫荧光法检测解脲支原体

目的;探讨间接免疫荧光法(IIF)检测临床标本中解脲支原体的敏感性及特异性.方法用IIF检测了临床培养分离的50例样本,并分别用IIF及培养法对71例临床标本进行检测并比较了两种方法.结果IIF对50例临床分离标本的检出率为100%,而对临床标本的特异性是92.3%,敏感性为75%,但IIF与培养法检测比较没有统计学差异(P>0.10).结论可以用间接免疫荧光法代替培养法检测解脲支原体.     

泌尿生殖道支原体液体显色培养法与固体培养法的比较

目的以固体培养法为标准，探讨液体显色培养法培养支原体的敏感性、特异性和一致性。方法采用培养鉴定药敏一体化液体显色培养基和固体A7琼脂培养基平行检测155例泌尿生殖道标本的支原体。结果液体显色培养法培养的敏感性为96．5％，特异性为79．7％，一致性Kappa=0．7737，U=11．4767，P〈0．001，两种方法具有好的一致性。男性标本与女性标本比较，敏感性差异无统计学意义（Х^2=0．1298，P〉0．05），特异性差异有统计学意义（Х^2=5．4197，P〈0．025）。结论液体显色培养法可用于支原体培养初筛，结合固体培养法可以提高支原体培养的准确性。     

荧光定量聚合酶链反应检测解脲支原体感染的临床意义

目的　采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术 ,准确定量检测待检标本中解脲支原体 (UU)的感染状况。方法　采用FQ -PCR技术 ,检测男女生殖道标本 76 5份 ,并同时用常规PCR技术 ,对比检测了 85例。结果　FQ -PCR检测76 5份标本 ,UU -DNA阳性 2 79份 ,阳性率 36 .5 % ,其DNA平均拷贝数为 2 .4× 10 4。 38例阳性患者治疗两周内复查 ,转阴率仅为 4 4 .7% ,治疗 3w后复查 ,转阴率达 76 % (P <0 .0 0 5 )。常规PCR结果重复检测时 ,2 5例阳性中 2例变为阴性 ,而 6 0例阴性中 4例变为阳性。FQ -PCR结果重复时完全吻合。结论　FQ -PCR检测UU ,具有快速、特异性高、定量准确等优点 ,并可为临床评价疗效提供依据。     

解脲脲原体／HPV共感染与宫颈癌变的相关性探讨

目的 了解宫颈上皮内瘤变（CIN）宫颈癌患者下生殖道解脲脲原体感染情况,初步探讨解脲脲原体（UU）、HPV与CIN/宫颈癌的相关性.方法 选取2005年9月至2009年2月中山大学附属第六医院及第二医院因宫颈上皮内瘤变或宫颈鳞癌住院的患者124例为病例组.随即抽取同期医院体检中心健康体检女性300例为对照组.采用荧光定量PCR方法进行宫颈分泌物解脲脲原体DNA检测.用杂交捕获Ⅱ代和导流杂交基因芯片技术检测HPV感染情况.结果 病例组解脲脲原体阳性率68.5%,对照组解脲脲原体阳性率38.7%.病例组和对照组之间UU阳性率比较,差异有统计学意义.124例行HPV检测病例中,UU和HPV均阳性者占58.9%.结论 女性下生殖道解脲脲原体感染与宫颈上皮内瘤变/宫颈癌有一定的相关性.解脲脲原体感染与宫颈病变程度相关,尤其与高度宫颈上皮内病变和宫颈癌相关.UU对HPV感染导致的CIN/宫颈癌可能存在协同作用.     

QF-PCR和液体培养法两种方法联合检测解脲支原体的临床意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)和液体培养法检测解脲支原体(Uu)感染的临床意义。方法对泌尿生殖道感染患者治疗前后标本用QF-PCR法和液体培养法平行检测,比较两种检测方法阳性检出率。结果治疗前、后QF-PCR阳性检出率高于液体培养(P0.01),但治疗后拷贝数明显下降。Uu对常用抗生素均有不同程度的耐药性。结论临床应根据QF-PCR及液体培养结果,结合临床综合判断,避免培养的低灵敏度造成漏诊、延误治疗或荧光定量聚合酶链反应的高灵敏度造成误诊。