东亚钳蝎蝎毒的指纹图谱

目的 :探索东亚钳蝎蝎毒 (scorpionofButhusmartensiivenom)的分析及鉴定方法 ,建立相关质量标准。方法 :采用高效液相色谱法 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)分析检测 8个蝎毒样品。结果 :蝎毒可分离出40多个组分 ,实验所使用的 8个省内所产蝎毒具有非常相似的图谱。蝎淋巴液和 3种蛇毒与蝎毒图谱有显著不同。同一样品 (二次冻干粉 )连续测定 5次进样量的精密度、重现性均达到有关规定。结论 :采用HPLC法获得了蝎毒的指纹图谱 ,并测定了可影响蝎毒质量的蝎淋巴液和可能用于掺伪的 3种蛇毒的图谱。本研究为蝎毒及其制剂的进一步开发应用提供了有价值的实验依据。     

不同产地白芍HPLC指纹图谱及芍药苷和芍药内酯苷含量的比较研究

目的 建立湘白芍、毫白芍与抗白芍HPLC指纹图谱分析方法,并对3种不同产地药材进行主要化学成分的比较.方法 采用HPLC对11批白芍样品进行指纹图谱分析,并测定了主要化学成分芍药苷和芍药内酯苷的含量.结果 所建立的方法精密度、稳定性和重现性良好;11批白芍样品的指纹图谱有8个共有峰.结论 通过建立白芍指纹图谱的定性、芍药苷及芍药内酯苷的定量,为白芍的质量控制提供了更为全面的方法.     

佛手和属间药用植物的主成分聚类分析及HPLC指纹图谱研究

目的 研究佛手及属间药用植物化橘红、广陈皮的亲缘关系,同时建立了HPLC指纹图谱。 方法 运用HPLC法对佛手同属的3种药用植物进行测定,对其进行主成分分析及聚类分析,实现了预分类,制定了原料药材的选择方法。 结果 测定了样本的HPLC的色谱峰,从获得的17个不同产地的佛手药材的HPLC指纹图谱比较,结果从检测出17个分离度良好的共有指纹峰可以看出它们之间的相似性良好,说明佛手这一植物所含的化学成分分布及比例较稳定;使用SPSS分析软件,采用欧氏距离进行聚类分析,样品的聚类结果理想,19个样本可聚为8类,即样本1、7～10和15处于一类,样本2和3处于一类,样本4、14、16和17处于一类,样本5、6和11处于一类,样本12和样本13分别单独处于一类,而同属药用植物化橘红(样本18)和广陈皮(样本19)分别单独处于一类,可较明显地与佛手样品区分。 结论将佛手及其属间3种药用植物的中药指纹图谱及主成分聚类分析相结合,丰富了中药鉴定的理论内容。     

HPLC-UV法测定草决明中五种蒽醌类化合物含量及其指纹图谱的建立

目的：建立一种同时测定草决明中五种蒽醌类化合物含量的HPLC方法及草决明HPLC指纹图谱。方法：采用Hypersil C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,以乙腈-0．05％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速1．0mL/min,柱温：30℃,检测波长254nm。采用评价软件（2004A）进行数据分析,对来自加纳和中国13个地区,共22种生、炒草决明建立了HPLC 指纹图谱,并进行相似度计算。结果：方法的灵敏度、线性、精密度以及准确度均符合方法学验证的要求。分别在生品中检出16个共有峰,在炮制品检出8个共有峰;与对照样品（加纳的生品）相比,中国的两个样本相似系数分别为0．577（南京）和0．565（武汉）。结论：所建立的草决明指纹图谱的方法稳定可靠,适用于草决明质量评价,两个国家的草决明质量有明显差异。     

指纹图谱技术结合PLS-DA在黄连上清丸质量控制中的应用

目的建立黄连上清丸的指纹图谱,结合偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),为黄连上清丸的质量控制提供一种新方法。方法选择8个制药厂家生产的共22个批次的黄连上清丸样品。采用高效液相色谱法(HPLC)建立黄连上清丸的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(A版)建立指纹图谱共有模式和相似度计算,并用SIMCA 13.0软件建立PLS-DA模型做统计分析。结果建立了黄连上清丸的HPLC指纹图谱,确定了34个共有峰,相似度计算结果在0.745~0.946之间,通过对照品指认出小檗碱、黄芩苷等8种成分。PLA-DA分析显示8个制药厂家22个批次黄连上清丸样品的成分较为一致,但34个共有成分的含量存在差异,且与生产厂家呈较好相关性。结论指纹图谱技术结合PLA-DA能很好地区分不同厂家样品,并找到造成差异的成分。提示该方法可用于黄连上清丸的质量控制。 更多还原     

五种石斛的指纹图谱研究

目的：建立密花、马鞭、短棒、鼓槌和金钗等五种石斛的色谱指纹图谱。方法：采用HPLC/UV/MS技术对五种石斛的色谱指纹图谱进行了研究。结果：建立了五种石斛的HPLC/UV指纹图谱,并对其中三种石斛HPLC/MS指纹图谱中的色谱峰进行了解析,共对15个谱峰进行了化学成分的初步归属。结论：所建立的方法可用于石斛指纹图谱的测定,并为其全面质量控制及化学成分研究提供参考。     

不同来源白木香茎、叶化学成分分析

目的：比较不同来源白木香 AquiIaria sinensis（ Lour.）GiIg 新鲜茎、叶化学成分的异同。方法：利用高效液相色谱法（HPLC）进行检测,利用国家药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版对各个样品的HPLC图谱进行相似性比较和分析。结果：建立了白木香的HPLC分析方法,各色谱峰分离度良好,6个白木香样品茎的HPLC图谱相似度为0.885~0.973;叶的HPLC图谱相似度为0.709~0.985;茎的HPLC图谱和叶的HPLC图谱相比,主要的色谱峰相同,只是含量有所不同。结论：不同来源的白木香的化学成分基本相同,白木香叶和茎具有相似的化学成分。     

免疫抑制蝎毒活性肽Im169的重组表达和功能鉴定

目的:筛选鉴定新型蝎毒免疫活性肽。方法:从海南斑等蝎(Isometrus maculates)毒腺组织c DNA文库中筛选和分离蝎毒肽基因,通过GST融合蛋白表达纯化、肠激酶酶切和高压液相色谱(HPLC)分离的方法,获得色谱纯重组蝎毒活性肽,酶联免疫吸附(ELISA)实验检测细胞因子,鉴定免疫调节活性。结果:筛选得到一个新的蝎毒活性肽基因Im169,其编码的成熟肽由29个氨基酸组成,其中含有6个半胱氨酸。Im169多肽对T淋巴细胞IL-2、TNF-α和IFN-γ等细胞因子的分泌具有明显的抑制作用,且作用呈浓度依赖性(P<0.05)。序列分析显示:Im169多肽和蝎钾通道毒素的相似性最高,提示其是一个潜在的钾通道毒素多肽。功能机制分析显示:Im169多肽通过抑制T细胞表面的钾通道,从而发挥免疫抑制功能。结论:发现了一个新的蝎毒免疫调节肽,丰富了对蝎毒活性肽的功能认识,为自身免疫疾病的药物开发提供了新的多肽模板。     

高效液相色谱法指纹图谱结合化学模式识别对除湿丸质量控制研究

目的 建立除湿丸指纹图谱,为完善其质量控制提供参考。 方法 采用高效液相色谱法（HPLC）,色谱柱为Luna Omega Polar C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液,流速为1.0 ml/min,波长为254 nm,柱温30 ℃,进样量10 μl。以黄芩素为参照,测定29批除湿丸的HPLC图谱,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行相似度评价。 结果 29批除湿丸HPLC指纹图谱有35个共有峰,相似度均＞0.95,并指认了8个色谱峰;聚类分析将29批除湿丸聚为3类;主成分分析中7个主要成分分别反映32个共有峰信息。 结论 不同批次除湿丸存在一定的质量差异。所建立的除湿丸指纹图谱可全面评价除湿丸的质量。     

蝎毒素ITX氨基酸含量及蛋白质组分分析

目的:测定蝎毒素ITX样品中17种氨基酸的含量,分析并鉴定其中某些蛋白质组成成分.方法:将常压柱分离得到的蝎毒素蛋白ITX利用L-8800氨基酸分析仪进行氨基酸含量分析;以17 cm pH 3～10固相pH梯度胶条(IPG)为第一向IEF,18%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳;PDQuest 7.1.1分析软件分析电泳图谱,筛选目的蛋白,然后对重现性和稳定性良好的蛋白点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-Ms)和串联质谱(MS/MS)分析,得到肽质量指纹图谱(PMF)数据,登录网站http://www.matrixscience.com.用Mas-cot程序检索NCBInr数据库,鉴定蛋白质.结果:ITX 17种氨基酸的含量从0.14%-11.35%不等;从蝎毒素ITX蛋白样品中共筛选出9个等电点不同,相对分子质量约为5800的蛋白点,其中蛋白点1、2、3、4位于酸性区,蛋白点5、6、7、8、9位于碱性区.获得了4、6号蛋白点多肽的PMF数据.结论:测定了蝎毒素ITX蛋白的氨基酸含量;建立蝎毒素ITX蛋白质组学研究方法,为后续工作奠定了基础.     

蝎毒的研究及临床应用

蝎(scorpion)属原始肉食性蛛形纲蝎目、甘蝎科的节支动物。据统计,目前全世界蝎目分6科、70属,约600种,中国仅占其中15种。东亚甘蝎在我国因分布广、种群大、药效好而成为蝎类药材的主要来源。蝎的疗效在于蝎毒,蝎毒具有广泛的药理学性质,近年来的研究主要集中在其抗肿瘤、抗风湿、抗癫痫以及对心血管的作用等方面,现将其近年来的研究情况作一简要回顾和展望。1　抗肿瘤研究　　国内外学者对蝎毒的抗肿瘤效应进行了广泛的研究,取得了很多有价值的结果。如用不同浓度的蝎毒(svc)培养基培养人食管癌细胞株后发现:蝎毒可使癌细胞DNA指数下降,…     

东亚钳蝎毒素的研究及应用

东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch，（简称BmK）即问荆蝎，广泛分布于我国和东亚地区。用电刺激法将其含毒腺的尾末节剪下研磨萃取即可采得蝎毒。蝎毒包括一系列短链多肽（少于40个氨基酸残基）和长链多肽（60～70个氨基酸残基）。其中长链毒素按作用对象可分为三类：抗哺乳动物神经毒素、抗昆虫神经毒素和抗甲壳纲类动物神经毒素。国内对BmK毒素的研究始于80年代初，目前已取得一些进展。不同BmK毒素的功能有着显著差异，因而是研究结构与功能的理想药物；并且抗昆虫毒素有望成为新型生物杀虫剂。另外，蝎还是一种名贵中药，对一系列神经…     

水黄花药材高效液相色谱指纹图谱及模式识别

目的：研究水黄花药材高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）指纹图谱及模式识别方法。方法：采用HPLC,以贵州不同产地、不同采收期的水黄花药材为对象,对15批药材进行指纹图谱研究,运用聚类分析对指纹图谱进行模式识别研究。结果：15批样品中有13个共有峰,15批药材相似度较高,色谱峰强度不同是药材的主要差别。通过聚类分析将15批样品按采收期不同分为2类。结论：该方法能很好分离水黄花的各类成分,HPLC指纹图谱具有良好的稳定性、重复性,可用于水黄花药材的质量控制。     

石柱和抚松产人参叶指纹图谱分析

[目的]建立石柱和抚松人参叶药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,以探讨两产地人参叶皂苷含量的差异。[方法]采用HPLC法分别测定采于辽宁宽甸石柱、吉林抚松的人参叶HPLC指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对各样品进行分析。[结果]10批人参叶样品的HPLC指纹图谱相似度均大于0.9,标定了22个共有峰,不同产地人参叶共有峰相对含量存在一定的差异。[结论]建立的人参叶HPLC指纹图谱分析方法科学可靠,可为人参叶药材质量研究提供参考。     

三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的：建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法：采用HPLC方法，测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其2种混淆品的指纹图谱。结果：三七与人参、西洋参、姜状三七及其2种混淆品的指纹图谱有明显区别，三七不同部位也有差异。结论：HPLC皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点，可作为三七药材的鉴别方法。     

竹柏叶的高效液相色谱特征图谱研究

【目的】通过高效液相色谱(HPLC)技术,对采集的8批竹柏叶样品进行醇提物的分析研究,建立竹柏叶的HPLC特征指纹图谱,为其基源鉴定提供方法学依据。【方法】采用高效液相色谱法,以乙腈—体积分数0.05%磷酸水溶液为流动相,以穗花杉双黄酮为对照品,对竹柏叶的醇提物进行检测分析,并采用国家药典委员会推荐的相似度评价软件对8批次样品进行相似度分析。【结果】共标定竹柏叶的HPLC共有特征峰21个,相似度分析结果显示2、3和6号样品其相关系数(中位数)小于0.95,尤其6号样品,小于0.90,提示各样品具有差异性。【结论】HPLC特征指纹可以显示竹柏叶样品的差异性,可用于竹柏叶的基源鉴定。     

不同栽培品种高良姜HPLC指纹图谱研究及指标成分含量测定

【目的】比较不同栽培品种高良姜(竹头姜与蜂窝姜)HPLC特征图谱,并测定3个指标成分的含量,为高良姜的品种鉴定、质量控制及优良品种的选育提供参考。【方法】采用高效液相色谱法(HPLC)测定样品指纹图谱,并对其结果进行相似度分析、聚类分析及主成分分析。同时测定二苯基庚烷A、高良姜素、山柰素的含量。【结果】不同栽培品种高良姜指纹图谱共有峰12个,但各组分比例差异显著。竹头姜与蜂窝姜之间的相似度为0.760～0.860,明显低于同品种高良姜之间的相似度。聚类分析和主成分分析均可将竹头姜与蜂窝姜样品分开。竹头姜与蜂窝姜中二苯基庚烷A、山柰素的平均含量较接近,而高良姜素的平均含量差异显著,分别为0.30%、0.98%。【结论】HPLC指纹图谱可用于区分不同栽培品种高良姜;指标成分含量测定方法可靠,重复性好,对高良姜栽培品种的鉴定、质量控制及品种选育具有指导意义和参考价值。     

决明子的HPLC指纹图谱及模式识别研究

目的 研究决明子药材的质量控制方法。方法 采用高效液相色谱法建立了决明子药材的HPLC的指纹图谱,收集了32批样品进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。结果 建立了决明子药材的指纹图谱。结论 方法可用于决明子质量控制及综合评价。     

新血府逐瘀软胶囊质量标准HPLC指纹图谱定性研究

目的建立中药复方制剂新血府逐瘀软胶囊HPLC共性指纹图谱,为其质量标准评价提供依据。方法采用Thermo C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.2%甲酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,以254 nm为检测波长,对14批次新血府逐瘀软胶囊内容物样品HPLC图谱进行采集和相似度分析比较。同时,采用图谱对照法,以保留时间为参数,比对样品共有HPLC图谱、对照品HPLC图谱和单味对照药材HPLC图谱,对可辨析的18个共有峰成分进行指认和药材来源进行追溯。结果以峰形可辨析的18个共有成分峰的相对保留时间为匹配点,14批次样品色谱图相似度在0.938~0.985之间,RSD值为1.25%,各批次样品之间HPLC图谱有良好的相似性,并建立新血府逐瘀软胶囊样品内容物HPLC共有指纹图谱。比对指认出9个共有峰成分分别为熊果酸、绿原酸、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、金丝桃苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷;追溯出HPLC共有指纹图谱中红花、赤芍、山楂、枳实等四味药材的存在。结论新建立的中药复方制剂新血府逐瘀软胶囊HPLC共性指纹图谱方法准确可靠,为全面控制制剂质量提供了依据。     

蝎毒研究及综合应用简介

蝎毒研究及综合应用简介本校蝎毒研究及综合开发项目在孔天翰教授（国家突出贡献专家）、董伟华教授主持下，１９８８年以来在蝎养殖、蝎毒提取、蝎毒分析、检测、蝎毒分离、纯化，蝎毒质量标准等方面开展了卓有成效的系列研究。他们紧紧把握了国内外天然药物研究的新动向...