应用ABC-ELISA和SPA-ELISA诊断华枝睾吸虫病的初步比较

本文应用生物素-亲和素过氧化物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)检测华枝睾吸虫病患者血清IgG抗体,并与常规SPA-ELISA比较。前法与粪检的阳性和阴性符合率分别为100％和87％,后法分为100％和95.7％。用SPA-ELISA检测12份日本血吸虫病兔血清未见交叉反应。由于SPA-ELISA操作简便,试剂价廉,因此更适宜于基层单位推广使用。     

华支睾吸虫病快速诊断试剂盒质量控制10年分析

目的：建立华支睾吸虫病快速诊断试剂盒的质量控制体系，并以此对试剂盒进行质量监控。方法：建立了由200份确诊病人血清混合而成的阳性质控品和由200份非流行区健康人血清混合而成的阴性质控品，确定了包括对阳性质控品和阴性质控品的检测标准。结果：对10年104批次共101万人份的诊断试剂盒进行了监测，阳性质控品和阴性质控品的平均吸光度值分别为0．444和0.066，总阳性质控品和总阴性质控品变异系数分别为7．60％和10．72％。结论:华支睾吸虫病快速诊断试剂盒具有高度的敏感性、特异性和稳定性，质量监测体系也是一种性能可靠、行之有效的质量控制方案。     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原,以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence,immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体,分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原,ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份,华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30),健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30),肺吸虫病为26．7％(4／15),日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出,此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于华支睾吸虫病的血清学诊断,组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。     

IEST和快速ELISA诊断华支睾吸虫病的效果比较

应用成虫石蜡切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和快速酶联免疫吸附试验(Q—ELISA)对比检测了52份华支睾吸虫病患者和50份健康人血清,两法的阳性率分别为96％和94％,假阳性率分别为4％和6％。应用IEST和Q—ELISA检测50份血吸虫病患者和20份卫氏并殖吸虫病患者血清,其交叉反应率分别为6％、8％和5％、5％。结果表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性。Q—ELISA更适台于现场应用。     

南宁市城区人群华支睾吸虫感染调查

目的 了解南宁市城区居民华支睾吸虫病感染情况。方法 以ELISA法和改良醛醚法检查来自门诊和现场采集的血清和粪便样本的华支睾吸虫抗体和虫卵。结果 调查共1388例，其中门诊就诊者772人，感染率61．66％，现场调查人群616人，感染率25．65％，前者明显高于后者；有吃鱼生史、鱼生史不详和无鱼生史者的感染率分别为58．83％、32．77％及1．88％，三者差异高度显著。以ELISA法与改良醛醚法检测门诊就诊者华支睾吸虫病感染率的差异不显著。结论 南宁市华支睾吸虫病流行严重，对市民健康已造成严重威胁。     

华支睾吸虫病137例临床分析

目的 探讨华支睾吸虫病在临床上有效的诊断与治疗方法。方法对137例经临床诊断为华支睾吸虫病患者进行流行病学个案调查及回顾性分析。结果137例华支睾吸虫病患者中有食鱼生史占96．35％;无鱼生史占3．65％。其中49例为胆囊炎、胆结石、胆息肉等肝胆管疾病,需要手术治疗,在手术中均发现华支睾吸虫成虫;88例实验诊断及B超辅助检查诊断为华支睾吸虫病,经及时治疗后痊愈。结论应提高华支睾吸虫病的认识,减少误诊漏诊,在并发症出现前尽早治疗效果最为理想。     

间接血凝试验诊断旋毛虫病

本文采用经Sephadex G-200层析后的旋毛虫幼虫抗原对实验感染旋毛虫大鼠和旋毛虫病人血清作间接血凝试验(IHA)。结果表明,20只大鼠感染后第16天全部出现阳性反应。9例旋毛虫病患者为阳性。本试验用于囊虫病、华枝睾吸虫病和健康人及正常大鼠均为阴性。检查本地区31只狗,阳性符合率为66.7％。     

快速ELISA检测华支睾吸虫与粪检查虫卵结果分析

目的 探讨快速ELISA在华支睾吸虫病临床诊断中的价值。方法 应用快速ELISA诊断试剂盒检测华支睾吸虫抗体呈阳性的118份标本与粪便清水沉淀查虫卵比较。结果 快速ELISA检测华支睾吸虫抗体阳性118例中，粪便找到虫卵63例(53．3％)。结论 快速ELISA诊断试剂盒在华支睾吸虫病临床诊断中有一定应用价值，其方法操作简单、快速、无需特殊仪器设备，适合基层应用。     

两个华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶的基因克隆、表达与定性

目的寻找对华支睾吸虫病诊断有效的抗原基因,以便生物合成并研究其应用价值.方法选取两个Genbank已报告的基因序列AF271091(CysA)及AF093242(CysB)分别克隆与表达融合蛋白,亲和层析纯化后进行免疫定性.结果CysA与CysB均获得成功克隆与表达,Western blot分析显示CysA与华支睾吸虫病阳性血清有强反应,与日本血吸虫病阳性血清只有很弱的交叉反应,而CysA与华支睾吸虫感染血清无反应.免疫组化显示,被表达的两个半胱氨酸蛋白酶在华支睾吸虫体内的免疫定位无显著不同,主要在成虫肠道及虫卵.结论成功表达的两个半胱氨酸蛋白酶中,CysB针对华支睾吸虫病血清有良好的抗原活性,值得视为诊断抗原候选做进一步的研究.     

斑点免疫结合试验与间接血凝试验和对流免疫电泳试验在包虫病诊断中的比较

目的：为了进一步了解斑点免疫结合试验（ＤＩＢＡ）诊断包虫病的敏感性和特异性，进行血清特异抗体的检测，并与间接血凝试验（ＩＨＡ）和对流免疫电泳试验（ＣＩＥＰ）作比较。方法：用羊肝细粒棘球蚴液抗原对９４例包虫病患者、２２例非包虫病患者和４５例健康人血清进行了ＤＩＢＡ、ＩＨＡ和ＣＩＥＰ。结果：ＤＩＢＡ、ＩＨＡ、ＣＩＥＰ的阳性率分别为９２．６％、８６．２％和６３．８％，ＤＩＢＡ的阳性率明显高于ＣＩＥＰ（Ｐ＜０．０１），而与ＩＨＡ无统计学差别；假阳性率分别为５．８％、９．０％和０。结论：ＤＩＢＡ的敏感性高于ＩＨＡ和ＣＩＥＰ，且与ＣＩＥＰ有显著差异；ＤＩＢＡ的特异性高于ＩＨＡ，但低于ＣＩＥＰ。在诊断包虫病时，应同时使用两种以上免疫试验，提高其确诊率     

钩端螺旋体病人血清抗体的SPA-ELISA检测法

用酶标葡萄球菌A 蛋白作ELISA 检测临床确诊、显凝试验为阳性的钩端螺旋体病人血清59份,同时用40份健康人血清与酶标抗体作ELISA进行比较。两种方法都有较高的敏感性和特异性,而酶标葡萄球菌A 蛋白具有制备简单,标记步骤简便,比较稳定和易被推广等优点,可替代酶标抗体在ELISA中应用。     

CGIA和ELISA诊断肝吸虫病的比较分析

目的 比较胶体金免疫层析法（CGIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）诊断肝吸虫病的特异性和准确性，探讨其在肝吸虫病诊断中的应用。方法 采用CGIA和ELISA检测36例大便检出虫卵的肝吸虫病患者血清中的肝吸虫抗体。并设立健康人对照组和其它疾病患者作为阴性对照。结果 CGIA和ELISA对阳性标本检测的准确性分别为94．44％和97．22％；对阴性病例检测的特异性分别为98．06％和96．12％；对正常标本检测的特异性分别为97．78％和93．33％。结论 CGIA和ELISA对肝吸虫病患者血清抗体检测的准确性和特异性无显著性差异，两种方法的准确性和特异性均高，且操作简便，均可作为肝吸虫病的初诊及普查筛选方法。     

胶体金免疫层析法在鼠疫监测应用

目的了解胶体金免疫层析法（GICA）快速诊断鼠疫试剂的应用效果。方法在鼠疫监测中用间接血凝（IHA）微量法和胶体金免疫层析法检测鼠型动物血清中鼠疫F1抗体;选IHA微量法初筛时发生凝集的鼠型动物血清,用GICA检测鼠疫F1抗体,设立IHA微量法抑制试验对照;在溶血血清中加入鼠疫阳性参考血清,用GICA检测鼠疫F1抗体,设立IHA对照;用鼠疫菌EV76株免疫鼠类建立动物模型,用GICA检测鼠疫F1抗体和F1抗原,分别设立IHA和反向间接血凝（RIHA）对照。结果 IHA微量法和GICA检测鼠型动物血清237份,两种方法检测结果一致,全部阴性;GICA及IHA微量法抑制试验检测IHA微量法初筛时发生凝集的鼠型动物血清57份,两种方法结果一致,均为阴性,证实初筛结果为非特异性凝聚;GICA检测含鼠疫鼠疫阳性参考血清的鼠型动物溶血血清45份,结果全部阳性,而IHA对照结果无法判断;用GICA检测动物模型中鼠类血清25份和鼠类脏器18份,结果分别与IHA和RIHA对照一致。结论鼠疫胶体金试剂使用简便、快速、特异、敏感、便于鼠疫监测现场和鼠疫应急应用。     

河南邓县人、猪旋毛虫病血清流行病学调查

本文报告用酶联免疫吸附试验(ELISA)对河南邓县人群、用酶联葡萄球菌A蛋白试验(SPA-ELISA)对当地猪旋毛虫病血清流行病学调查结果。 邓县健康人297例,ELISA阳性59例,抗体阳性率为19.87%。男女性别抗体阳性率无显著差异,但屠宰场屠宰工、农村居民、炊事员的抗体阳性率显著高于工人和学生;且青壮年和老年人抗体阳性率高于儿童及青少年。提示在流行区内,旋毛虫病感染率可能和职业、年龄有关。 邓县旋108头,SPA-ELISA阳性32头,抗体阳性率为29.63%,活检阳性猪的SPA-ELISA阳性率为93.55%,肌肉中包囊计数(个/g)与SPA-ELISA的OD_(492)值之间存在正相关。 对汉族地区旋毛虫病流行特点进行了讨论。     

斑点免疫金银染色试验与斑点ELISA诊断血吸虫病的比较

以日本血吸虫成虫抗原，应用斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断日本血吸虫病，５５例粪检阳性病人血清抗体检出率均为１００．０％，５０例正常人血清阴性符合率均为９８．０％，与５０例肝吸虫病人的交叉反应分别为２．０％和４．０％，两法未见显著性差异（Ｘ１１＝０．３４４Ｐ＞０．０５）。但进一步研究显示金标法的混合阳性血清最终滴度较酶法高４～５倍；使用抗原节省；２０份阳性血清抗体检出阳性终点也较酶法高２～４个滴度。