大鼠动脉损伤后MMP-2表达变化的实验研究

目的观察球囊导管损伤大鼠主动脉内膜以后基质金属蛋白酶一2在内膜表达的变化过程。方法70只SD大鼠按照不同的时间段分为七个实验组及对照组,实验组从颈总动脉切开应用2F Fogarty导管损伤主动脉内膜至肾动脉水平,球囊充放气3次,然后结扎颈总动脉,对照组只切开然后结扎颈总动脉而不损伤内膜,然后于不同的时间段处死大鼠取主动脉以及内膜,处死前30min从尾静脉注入Evansblue以便证实为主动脉内膜,分别进行HE染色,Gelatin Zymography来分析动脉内膜损伤以后MMP-2表达的变化。结果MMP-2于损伤后开始升高,至5天时达到顶点,而后逐渐下降,内膜增生则是28天最为显著。结论动脉内膜损伤以后MMP-2表达有着规律的变化且与内膜增生并不成比例,MMP-2的升高先于内膜增生,为治疗动脉损伤后血管再狭窄提供一种新方法。     

大鼠脊髓损伤后MMP-9表达和细胞凋亡的研究

目的 探讨MMP-9在SCI后继发性细胞凋亡中的作用,为继发性脊髓损伤的治疗提供新的思路.方法 成年雄性SD大鼠84只,随机分为假手术组与损伤组(spinal cord injury group,SCI group),两组大鼠均于SCI后1 h、6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d(每个时间点n=6)处死大鼠取材.免疫组织化学染色观察损伤脊髓组织MMP-9表达并测平均光密度值(optical density,OD),原位缺口末端标记法(TUNEL法)观察损伤脊髓组织细胞凋亡并计算凋亡指数(apoptotic Index,AI).分别对各时间点损伤脊髓组织MMP-9平均光密度和细胞凋亡指数进行组间、组内比较,并对损伤组各时间点MMP-9平均光密度和细胞凋亡指数进行相关性分析.结果 大鼠SCI后损伤节段脊髓组织中MMP-9表达和细胞凋亡指数明显增多,24 h达高峰,持续至3 d后逐渐下降,7 d仍有表达.结论 大鼠SCI后损伤节段脊髓组织的MMP-9表达与细胞凋亡呈正相关关系(相关系数r=0.936,P<0.05).     

大鼠脑缺血再灌注后MMP-9、MMP-2表达与脑水肿的关系

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的动态变化规律及其与脑水肿的关系。方法:将80只SD大鼠分为假手术组(n=10)和实验组(再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d组,n=10)。线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d测定大鼠神经功能缺损评分;断头取脑,按Elliot公式计算脑组织含水量,免疫组织化学法测定相应时间点MMP-2、MMP-9免疫阳性细胞数。结果:实验组再灌注后6 h出现神经功能障碍,48 h最严重,10 d仍未完全恢复,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h出现脑水肿,48 h最严重,7 d时脑水肿仍存在,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h有少量的MMP-9免疫阳性细胞,12 h开始增多,48 h达到高峰,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注24 h见少量MMP-2免疫阳性细胞,48 h逐渐增多,72 h最多,7 d和10 d仍有较多表达,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9均升高,两者表达方式的不同,提示MMP-9主要参与脑缺血再灌注后脑水肿形成,MMP-2可能与组织修复和神经再生有关。     

氨氯地平对大鼠动脉粥样斑块稳定性和MMP-9及其抑制物表达的影响

目的：探讨氨氯地平对大鼠动脉粥样斑块稳定性和基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制物表达的影响。方法以18只雄性Wistar大鼠构建动脉粥样硬化模型,采用随机数字表法将18只雄性Wistar大鼠分为氨氯地平组和模型组,每组9只。模型组采取单纯高脂饲料喂养,氨氯地平组每日在高脂饮食基础上给予苯磺酸氯氨地平6 mg/(kg·d)灌胃。连续饲养3个月后采血检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG);免疫组织化学SABC法进行MMP-9及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)表达检测,同时计数血管平滑肌细胞(VSMC)和巨噬细胞占总细胞的百分比。结果氨氯地平组大鼠TC和TG水平分别为(1.63±0.74) mmol/L和(0.81±0.21) mmol/L,明显低于模型组的(3.08±0.67) mmol/L和(1.35±0.34) mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);氨氯地平组MMP-9表达水平为(266.53±32.15)μm2,明显低于模型组的(351.02±45.69)μm2,TIMP-1表达水平为(305.64±36.22)μm2,明显高于模型组的(230.36±25.11)μm2,差异均有统计学意义(P<0.05);氨氯地平组血管平滑肌细胞[(88.12±3.58)%vs (100.00±0.00)%]和巨噬细胞[(90.35±5.33)%vs (100.00±0.00)%]占总细胞的百分比均显著低于模型组(P<0.05)。结论氨氯地平可抑制MMP-9的表达,进而起到稳定动脉粥样硬化板块、降低血脂的作用。     

MMP-2、MMP-9与脑动脉畸形的相关性研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与脑血管畸形的关系。方法 选取经头颅CT、MRI和造影检查证实为脑动脉畸形患者30例为观察组,收集其血清和手术切除的标本;选取脑外伤非血管性疾病患者18例为对照组,收集其血清和脑动脉标本。血清标本采用ELISA法检测MMP-2和MMP-9含量;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9 mRNA在脑动脉标本中的表达;采用Western blot方法和免疫组化技术检测MMP-2和MMP-9蛋白在脑动脉标本中的表达。结果 观察组患者血清MMP-2和MMP-9水平均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,观察组患者MMP-2和MMP-9在mRNA及蛋白表达高,在动脉组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达高,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 MMP-2和MMP-9在脑动脉畸形患者中异常表达,并且在脑动脉畸形的形成和发展中起重要作用。     

大鼠皮肤MMP-2，MMP-9表达与损伤时间相关性的实验研究

目的:探讨创伤皮肤组织基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase-s,MMPs)-2、9的表达与损伤时间的相关性,为损伤时间推断提供实验依据.方法:建立大鼠皮肤切创模型,应用免疫组织化学技术、图像分析技术检测不同损伤时间大鼠皮肤组织生前及死后MMP-2与MMP-9表达.结果:生前伤组大鼠损伤后皮肤组织内MMP-2与MMP-9在损伤区及损伤区周围皮肤组织中表达明显高于正常埘照组(P<0.05).死后伤组皮肤组织中MMP-2与MMP-9表达与正常对照组比较无明显差异(P>0.05).生前伤组中MMP-2在损伤后0.5 h可见在中性粒细胞中阳性表达,随时间进展表达逐渐增强,并可见在少量血管内皮细胞中阳性表达.12 h后明显增多,3 d达到高峰,维持到第5 d后在炎细胞中表达显著减少,而在成纤维细胞,血管内皮细胞中表达增加,维持在一个相对稳定的水平,12～14 d恢复正常.MMP-9在损伤后1 h可见在中性粒细胞中阳性表达,随时间进展表达逐渐增强,12 h后明显增多,3 d达到高峰,维持到第5 d,5 d后在炎细胞中表达显著减少,而在成纤维细胞,血管内皮细胞中表达增加,维持在一个相对稳定的水平,12～14 d恢复正常.结论:皮肤损伤组织MMP-2与MMP-9表达具有规律性且有良好的时间相关性,可望成为法医学损伤时间推断的指标.     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的：观察卡维地洛（CAR）对大鼠颈动脉损伤血管组织MMP-9、TIMP-1表达的影响,探讨卡维地洛防治再狭窄的机制。方法：雄性Wistar大鼠90只,随机分为假手术组、损伤组和CAR组,后两组行颈动脉球囊损伤术。三组均于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d处死大鼠。光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化和RT-PCR法检测MMP-9、TIMP-1在各组术后不同时间点的表达情况。结果：与损伤组比较,术后14 d CAR组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大（P〈0.05）;与损伤组比较,CAR组术后3-14d MMP-9表达显著减少（P〈0.05）,而TIMP-1表达无显著变化。结论：卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后MMP-9表达,抑制了VSMCs迁移、增殖,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,从而减轻再狭窄。     

牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

急性百草枯中毒大鼠肺间质成纤维细胞中MMP-9表达的研究

目的观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨其在PQ中毒致肺纤维化中的意义。方法SD大鼠50只,随机分为染毒组和对照组,染毒组用PQ 50 mg/kg灌胃染毒,对照组代以等剂量生理盐水灌胃,灌胃后1、3、7、14和28 d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)观察MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化。结果PQ灌胃后1 d,肺间质成纤维细胞MMP-9蛋白及其mRNA表达即增高,7 d达到峰值,以后逐渐下降。MMP-9蛋白及其mRNA在PQ灌胃后1、3、7 d与对照组比较升高(P<0.05),MMP-9蛋白在28 d、MMP-9 mRNA在14 d恢复到对照组水平。结论PQ灌胃后,肺间质成纤维细胞MMP-9的表达上调,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维的发生。     

基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在新生兔高氧机械通气肺损伤中的表达

目的观察基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在新生兔机械通气肺损伤中的表达和变化规律,研究肺损伤的分子机制。方法将60只日龄1～5d的新生兔随机分为高吸气峰压组(高压组)、中吸气峰压组(中压组)、低吸气峰压组(低压组)进行高氧机械通气并与未通气组对照,分别于通气后1h、3h、6h3个时间点活杀取肺,病理切片MMP-2、MMP-9免疫组织化学染色,ELISA法检测肺组织匀浆中MMP-2、MMP-9的水平,RT-PCR检测肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA的表达。结果3种方法均发现:(1)高压、中压、低压通气均能使MMP-2的含量增加,mRNA表达增强。(2)高氧机械通气MMP-9的表达先下调,含量降低,随着通气的继续,渐上调到正常水平,不同的吸气峰压对MMP-9的影响变化不大(F=0.083,P>0.05)。(3)MMP-2水平:高压组通气后3h与低压组通气后1h、低压组通气后3h、正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05),中压组通气后6h与低压组通气后1h、正常组比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。MMP-9水平:高压组通气后3h与高压组通气后1h、中压组通气后1h、低压组通气后1h比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)MMP-2与MMP-9之间呈正相关,与肺组织湿干比、灌洗液细胞总数呈正相关。结论新生兔机械通气6h内,高水平的氧通气能使MMP-2上调,使MMP-9下调,通气时机械拉伸上调MMP-2。机械通气影响MMPs的合成,MMPs在新生兔机械通气肺损伤中发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶及抑制剂与急性肺损伤/呼吸窘迫综合征

基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂在急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的比例平衡决定细胞外基质是否处于平衡,起着调节血管内皮通透性、吸引炎性细胞迁移、维持炎症持续等重要作用。但目前对于MMPs及其抑制物如何相互精细协调,它们在发病过程中是否牵涉其他作用目前还不是很清楚。对MMPs及其抑制剂与ALI/ARDS关系的进一步深入研究,可以为早期诊断和防治ALI/ARDS开辟新的途径。     

MMP1、MMP2、TIMP2在子宫腺肌症异位内膜和在位内膜中的表达

目的 :探讨 MMP1、MMP2、TIMP2在子宫腺肌症异位内膜和在位内膜中的表达情况 ,研究子宫腺肌症的发病机制。方法 :采有免疫组织化学方法检测 MMP1、MMP2、TIMP2在子宫腺肌症异位内膜 40例和在位内膜 40例中的表达。结果 :MMP1在子宫异位内膜腺体中阳性表达率较高 ( 85 % ) ,异位和在位内膜之间有显著性差异 ;MMP2在子宫腺肌症异位和在位内膜间质细胞、腺体中表达一致 ;TIMP2在子宫异位内膜间质中阳性表达率 ( 1 5 % )低于在位内膜间质细胞中阳性表达率 ( 4 0 % ) ,二者有显著性差异。结论 :MMP1可能参与子宫腺肌症的发生、发展 ;MMP2在子宫腺肌症异位和在位内膜间质细胞中均有较强的表达 ,说明子宫腺肌症异位和在位内膜间质细胞具有同源性 ;TIMP2不仅对 MMP2有抑制 ,且对 MMP1也有抑制作用 ,MMPs- TIMPs平衡失调可能有利于子宫腺肌症的发生、发展     

基质金属蛋白酶9与创伤性脑损伤

基质金属蛋白酶系(MMPs)是脑损害特异性血清标志物,其中MMP-9的作用尤为重要。MMP-9可破坏血脑屏障,促进脑水肿形成,诱导脑创伤后神经细胞的死亡。基质金属蛋白酶抑制剂能抑制受激后脑内MMP-9的活性,减轻脑水肿的程度,有利于维持神经元生存微环境的稳定。MMP-9的表达水平有可能作为判断脑创伤发展和预后的指标。     

基质金属蛋白酶和组织型纤溶酶原激活剂在脑卒中后脑损伤中的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)有降解脑血管基膜,促进中性粒细胞和炎性因子迁移的作用,这与脑卒中后急性期脑损伤有关。而在脑卒中恢复期,MMPs在细胞外基质的修复和神经血管重构中起重要作用。组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)对脑损伤有一定保护作用,但在脑缺血和炎性因子作用下可以上调MMPs表达,不仅加重脑损伤,同时也是采用t-PA溶栓治疗后发生出血转化的主要机制。现就MMPs和t-PA在脑卒中后脑损伤中的作用及与此相关的药物研究予以综述。     

缺血-再灌注损伤对视网膜明胶酶活性的影响

目的 :探讨大鼠视网膜缺血 再灌注 (RIR)损伤时明胶酶A(MMP 2 )和明胶酶B(MMP 9)蛋白的动态变化及意义。方法 :采用前房高压灌注法造成大鼠视网膜缺血 1h ,RIR 0 ,3,2 4 ,4 8和 72h后取材 ,用免疫组化SP法和计算机图像分析系统检测MMP 2 ,9的表达 ,以视网膜电图 (ERG)评估视网膜损伤情况。结果 :对照组和RIR0h视网膜MMP 2 ,9表达极弱 ,阳性染色于RIR 3h增加 ,2 4h达高峰 ,以后逐渐下降。ERGb波波幅于RIR 2 4h达最低 ,之后逐渐恢复。结论 :明胶酶是参与RIR损伤的重要因素。     

兔颈动脉球囊成形术后MMP9和TIMP1的原位表达

目的 :观察球囊损伤后基质金属蛋白酶 9( MMP9)及其组织特异性抑制因子1 ( TIMP1 )在血管原位表达的动态变化 ,探讨其在球囊成形术后再狭窄 ( RS)形成中的作用机制。方法 :5 0只兔子随机分成正常组、术后 3、7、2 1、90天组 ,正常组不做处理 ,原位杂交方法观察 MMP9及 TIMP1的 m RNA改变。结果 :正常对照组 MMP9m RNA未见阳性表达 ;3d时 ,可见整个中层广泛阳性表达 ;7d时 ,新生内膜阳性表达 ,中层未见阳性表达 ;球囊损伤后随时间延长表达强度及范围逐渐减小 ;90 d时 ,未见阳性表达。正常对照组血管内皮细胞可见 TIMP1基础表达 ;3d时 ,中层广泛阳性表达 ;7d时 ,新生内膜阳性表达 ,中层未见阳性表达 ;2 1 d时 ,新生内膜阳性表达 ,中层未见阳性表达 ;90 d时 ,仍有新生内膜阳性表达。结论 :血管球囊成形术后 MMP9及 TIMP1 m RNA异常表达可能与血管平滑肌细胞迁移、新生内膜形成及血管重塑密切相关     

基质金属蛋白酶在子宫内膜癌中的表达及意义

基质金属蛋白酶(MMPs)是一族锌离子依赖的蛋白水解酶,MMPs及其组织抑制因子(TIMPs)共同参与多种生理、病理过程。不同的MMPs及TIMPs分别与子宫内膜癌患者的发病年龄、临床分期、浸润深度、腹膜细胞是否受累、组织学分级等具有相关性,MMPs-TIMPs平衡的打破也有利于肿瘤的扩散。近年的研究显示,MMPs有望作为子宫内膜癌的诊断工具及判断预后的标志物,人工合成的基质金属蛋白酶抑制剂可能成为治疗子宫内膜癌的新手段。