新一代心肌肌球蛋白抑制剂——aficamten

aficamten是新一代心肌肌球蛋白抑制剂,通过减少每个心动周期中活性肌球蛋白产力横桥的数量,抑制与肥厚型心肌病相关的心肌过度收缩。FDA和国家药品监督管理局已经分别授予aficamten用于治疗症状性梗阻性肥厚型心肌病的突破性治疗药物认定。本文将对aficamten的基本信息、作用机制、临床前研究及临床研究等作一概述。     

精神分裂症患者血清心肌酶活性的改变及其临床意义

目的研究精神分裂症患者心肌酶活性改变的机制,并深入探讨心肌酶与精神分裂症的发病机制及病情的关系。方法对65例首发精神分裂症患者入院及治疗4周后的心肌酶(CK、LDH、AST)进行检测并与对照组进行比较分析。结果研究组血清心肌酶活性明显高于对照组,治疗4周后,研究组心肌酶活性均比较治疗前明显下降,与对照组比较差异显著。结论精神分裂症患者血清心肌酶活性出现异常,并与精神分裂症的发病机制和病情有关。     

缬沙坦对实验性心肌损伤大鼠心肌肌球蛋白重链基因表达的影响

目的 研究缬沙坦对阿霉素（ADR）致心肌损伤大鼠心肌肌球蛋白重链（MHC）基因表达的影响。方法 30只SD大鼠腹腔注射ADR（20mg／kg,分8次）造成心脏损伤模型;缬沙坦330mg／kg分11次灌胃,观察其对ADR致心肌损伤的保护作用。停药24h后,测定大鼠体重、心脏／体重比,肌球蛋白重链分析（半定量）。结果 ADR组大鼠体重严重降低,呼吸增快,部分出现不同程度的腹水,2只大鼠死亡;α-MHCmRNA基因表达减弱,pMHCmRNA基因表达增强。缬沙坦干预组大鼠体重增加,呼吸较ADR组慢,无胸腹水;心肌α-MHCmRNA基因表达增强,pMHCmRNA基因表达减弱。结论 缬沙坦通过部分逆转心肌损伤时α-MHC向pMHC的表型转变、减轻自由基对心脏的损伤,而对心脏产生保护作用。     

心肌肌球蛋白抑制剂治疗肥厚型心肌病的研究进展

随着学界对肥厚型心肌病遗传机制的不断了解,最新上市的针对肥厚型心肌病基因突变的新型分子靶向药物Mavacamten和Aficamten均被美国FDA批准用于治疗肥厚型梗阻性心肌病。Mavacamten和Aficamten的作用机制相似,均可选择性地与心肌肌球蛋白的不同变构位点结合来抑制心肌肌球蛋白,从而减轻心肌的高收缩性。相关临床研究表明,2种药物均可降低患者左心室流出道压力梯度、降低心脏标志物N末端B型利钠肽原和心肌肌钙蛋白I水平,并在一定程度上改善纽约心脏协会心功能分级,且安全性良好、不良反应轻、患者均可耐受。相比于Mavacamten,Aficamten作为结构优化后的产物,具有较短的半衰期及更少的药物相互作用,更利于药物目标剂量滴定。     

选择性心肌肌球蛋白激动剂Omecamtiv mecarbil治疗心力衰竭有效性和安全性的meta分析

目的 系统评价选择性心肌肌球蛋白激动剂Omecamtiv mecarbil(OM)治疗心力衰竭(heart failure，HF)的有效性与安全性。方法 计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science、CNKI、Science Direct、Wanfang Data和CBM等数据库，搜集选择性心肌肌球蛋白激动剂治疗HF有效性和安全性相关的随机对照研究(randomized controlled trial，RCT)，检索时限为建库至2021年7月，由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后，采用RevMan 5.3软件进行meta分析。结果 共纳入了6个RCT，包括9429例患者，试验组4763例，对照组4666例；meta分析结果显示，与对照组相比，选择性心肌肌球蛋白激动剂未降低HF患者主要终点事件：心血管(cardiovascular，CV)死亡/因HF住院(HF hospitalization，HHF)复合事件[RR=1.19，95%CI(0.67，2.12)，P=0.54]、HHF率[RR=0.96，95%CI(0.90，1.03)，P=0.29]、CV死亡率[RR=1.01，95％CI(0.92，1.10)，P=0.88]和全因死亡率[RR=1.00，95%CI(0.93，1.07)，P=0.90]。但选择性心肌肌球蛋白激动剂OM显著改善了HF患者的堪萨斯城HF调查表(the Kansas City Cardiomyopathy Questionnaire，KCCQ)临床评分[MD=2.50，95％CI(2.47，2.53)，P<0.00001]、左室射血分数(left ventricular ejection fraction，LVEF%)[MD=7.20，95%CI(2.51，11.89)，P=0.003]、左室舒张末期容积(left ventricular end diastolic volume，LVEDV)[MD=-0.35，95%CI(-0.61，-0.08)，P=0.009]、左室收缩末期容积(left ventricular end systolic volume，LVESV)[MD=-2.78，95%CI(-3.70，-1.87)，P<0.00001]、每搏输出量(stroke volume,SV)[MD=8.80，95%CI(1.37，16.23)，P=0.02]等心功能参数；除此之外，2组严重不良事件(serious adverse events，SAE)发生率相似[RR=0.97，95%CI(0.94，1.01)，P=0.16]，2组急性肾损伤、症状性低血压、呼吸困难等不良事件的发生率也无差异。结论 现有证据表明，选择性心肌肌球蛋白激动剂OM可以明显改善KCCQ临床评分、LVEF%、LVEDV、LVESV及每搏输出量等心功能参数，而且不增加不良事件风险，但对HF患者CV死亡和HHF复合事件、HHF率，CV死亡率和全因死亡率方面无明显益处。     

新生儿巨细胞病毒感染时血清心肌酶活性的变化

目的：探讨血清心肌酶活性在判断新生儿巨细胞病毒感染中有无心肌损伤及其他并发症的参考价值。方法：设对照组（20例）和新生儿巨细胞病毒（CMV）感染组（68例）,并将巨细胞病毒感染新生儿分设两组（I组血CMV—IgM阳性、尿CMV—DNA阴性;II组血CMV—IgM阳性、尿CMV—DNA阳性）,并作对比分析。结果：对照组和新生儿巨细胞病毒感染的两组血清心肌酶活性比较,血清CK—MB差异有统计学意义（P〈0．05）,而新生儿巨细胞病毒感染的两组血清心肌酶活性比较,CK—MB差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：血清CK—MB作为新生儿巨细胞病毒感染所致心肌损害的生化指标特异性强,血清中CK—MB等心肌酶活性升高程度对判断新生儿巨细胞病毒感染病情程度有一定的参考价值。     

替米沙坦对肾性高血压大鼠心肌β-肌球蛋白重链表达的影响

目的观察替米沙坦对肾性高血压大鼠心肌β-肌球蛋白重链(β-MHC)的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和替米沙坦组,每组10只。模型组及替米沙坦组采用两肾一夹法,制备肾血管性高血压模型,替米沙坦组用替米沙坦(10 mg.kg-1.d-1)灌胃干预。术后8周,经动脉插管测血压,经超声心动图评估心脏结构及功能,HE染色观察心肌病理改变;RT-PCR法检测心肌β-MHC mRNA水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠血压显著升高,心肌肥厚(均P<0.01),细胞直径增大,排列不整齐。与模型组相比,替米沙坦组大鼠血压明显下降,心肌无明显肥厚(均P<0.01),其心肌β-MHC mRNA表达水平较模型组明显降低(P<0.05)。结论替米沙坦可下调肥厚心肌β-MHC基因表达水平,可能与其逆转心肌肥厚相关。     

肝硬化对大鼠心肌肌球蛋白重链表达的影响

目的：研究肝硬化对大鼠心肌肌球蛋白重链a、β亚型表达的影响。方法：取清洁级SD大鼠30只,随机分为两组：对照组和肝硬化组。记录各组大鼠的心脏系数,测定各组心脏血流动力学指标,RT—PCR法检测各组心肌肌球蛋白重链a、β亚型表达的变化。结果：与对照组相比,肝硬化组心脏系数增大,心脏LVSP,＋dp／dt,-dp／dt降低,RT—PCR法检测心肌a—MHC基因表达降低、β-MHC基因表达升高。结论：肝硬化影响心肌的收缩功能,同时刺激心肌肌球蛋白重链基因表达发生变化,提示其可能参与了肝硬化心肌病的发生和发展。     

新生儿窒息118例血清心肌酶活性的测定及临床分析

目的：通过检测新生儿心肌酶活性,探讨新生儿心肌酶活性的变化对其窒息的影响。方法：将2008年11月～2009年7月入住本院接受治疗的118例新生儿窒息患者分为轻度窒息组和重度窒息组,另选60例健康新生儿作为对照组。二三组患者均测定其血清中LDH,CK,CK—MB,AST活性,并对结果进行对比分析。结果：窒息新生儿心肌酶活性比对照组明显升高（P〈0．05）;重度窒息组心肌酶活性比轻度窒息组也有明显升高（P〈0．05）。结论：新生儿窒息时血清心肌酶活性变化显著,可作为新生儿窒息后心肌损害的重要观察指标之一。     

猪心肌肌凝蛋白的提取纯化及鉴定

采用超速离心、分级饱和硫酸铵沉淀法等从猪心肌中成功的分离出了肌凝蛋白,并应用DEAE-Sephadex A-50离子交换层析对心肌肌凝蛋白进行了进一步的纯化,Fiske-SubbaRow法测定蛋白质的活性,Bradford法测定蛋白质的浓度。用变性、非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳及质谱分析对蛋白质进行了精确的鉴定。研究表明,蛋白质粗提产量约为15m g/g,经过纯化后的蛋白质中基本不含杂质蛋白,活性为0.22 Piμmol/(mg.min),变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白质为3条带,分子质量约是200 ku,27 ku和20 ku。与标准肌凝蛋白同时进行电泳显示条带相同。非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白质为一条带,此条带经过质谱分析准确的证明为心肌肌凝蛋白。结果表明以上方法成功的从猪心中提取了高纯度高产量心肌肌凝蛋白,为肌凝蛋白在临床和科研中的应用打下了基础。     

甘蓝细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

通过对甘蓝细胞溶质ＳＯＤ的纯化及性质研究,开拓制备ＳＯＤ的廉价原料来源。经硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ＤＥ５２层析３个步骤,将昨细胞溶质ＳＯＤ纯化到均一程度。从１０００ｇ叶片中得到３．２ｍｇ酶,酶的比活力达９７００Ｕ／ｍｇ蛋白。经鉴定该酶是Ｃｕ．ｚｎ－ＳＯＤ。测得其Ｍｒ约为３２２００,亚基Ｍｒ约为１６０００。该酶的Ｎ－末端为丙酸,其可见光区与紫外光区的最大吸收峰分别在     

N-乙酰氨基-D-葡萄糖的合成及其某些性质研究

以Ｄ－氨基葡萄糖盐酸盐及乙酸酐为原料合成Ｎ－乙酰氨基－Ｄ葡萄糖,精品收率为７６．４％,纯度为９９．６％。溶解度试验表明产品易溶于水而难溶于高浓度乙醇。     

卡介苗素抗哮喘有效成分的分离及其药理作用研究

卡介苗素具有平喘作用,主要含多糖和核酸两种组分,为明确其有效成分,将卡介苗素经核酸酶酶解,去除其中的核酸组成后,经Sephadex G-100柱层析分离纯化,得到一种白色粉末状多糖--卡介菌多糖(BCG-PSA).该多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳,Sephadex G-200柱层析证实为均一成分.对BCG-PSA的化学组成分析表明,该多糖的分子量为1.705×105,不含硫酸基和糖醛酸.经纸层析、薄层层析及气相层析确证,其单糖组成仅为D-葡萄糖,属均一多糖类.对BCG-PSA的药理研究表明,该多糖具有明显的免疫调节功能和平喘作用,且毒性很小,是卡介苗素抗哮喘的有效成分.     

吡美莫司的合成和纯化工艺的研究

目的 优化免疫抑制类药物吡美莫司的合成和纯化工艺.方法 以子囊霉素为原料通过选择性的羟基酯化-氯化反应一锅法合成路线,再经过反相填料柱纯化后得到目标产物.结果 目标产物经过红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确认化学结构,总收率为50％,纯度为99％.结论 经过该合成和纯化工艺,产品纯度高,且易于实现工业化.     

C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响

利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌，获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸，ArgGly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD)，以改进L-门冬酰胺酶的作用。以pUA18为模板，利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序列设计的引物来扩增目标基因。将目标基因连于pMD18-T载体，转化宿主菌JM109，筛选出的阳性克隆通过HindⅢ、NcoⅠ双酶切下目标基因连到含T7启动子的高效表达载体pET28a上，再转化BL21宿主菌。高效表达的工程菌摇瓶发酵，渗透休克法提取AnsB-RGD融合蛋白，12％的SDS-PAGE检测酶蛋白并考察酶的活力、特异性及其对血液系统的影响。2％琼脂糖凝胶电泳、DNA测序鉴定构建的pET28a．ansB．RGD工程菌，奈氏法、SDS-PAGE及免疫学方法检测AnsB-RGD融合蛋白。DNA序列分析证明RGD三肽已经连接在L-门冬酰胺酶的C末端，带有RGD三肽的融合蛋白仍然能与抗L-门冬酰胺酶的抗体结合，初步发现AnsB-RGD融合蛋白有促进血液凝固作用，但酶活力下降。     

环孢素A混合胶束的制备与理化性质考察

目的制备环孢素A混合胶束并对其理化性质进行研究。方法通过正交设计筛选环孢素A混合胶束的最佳处方,并考察其形态、粒径、Zeta电位、载药量、包封率和体外释放情况。结果最佳处方为环孢素A与磷脂的质量比为1∶7、胆固醇硫酸酯钠与磷脂的质量比为1∶4、水合介质为双蒸水,由此制备出的胶束呈球形,平均粒径为(139.2±2.3)nm,Zeta电位为(-25.3±0.56)mV,胶束的载药量达(6.04±0.04)g/L,包封率为(94.5±0.46)%,24 h内体外累积释放(33.1±2.7)%。结论用优化处方制备的环孢素A混合胶束,其稳定性和分散性良好,具有一定缓释作用。     

牛肝二硫键异构酶的纯化及其对重组人粒/单系集落刺激因子体外折叠作用的研究

自牛肝中纯化二硫键异构酶（PDI）。经匀浆、热沉淀、硫酸铵分级分离、阳离子和阴离子交换层析等步骤，得到了比活950U／g电泳纯的PDI。在此基础上研究了PDI对重组人粒／单系集落刺激因子（rhGM－CSF）体外复性作用。结果表明，在PDI与rhGM－CSF摩尔比为2：1时，可使0．5mg／ml的rhGM－CSF正确折叠率提高到60％，比活性由5．0×106U／mg提高到1．0×107U／mg。     

三七总皂苷分离纯化工艺研究

目的研究D-101型大孔吸附树脂分离纯化三七总皂苷的工艺条件及参数。方法以三七总皂苷的含量为考察指标,研究三七总皂苷纯化过程中,D-101型大孔吸附树脂吸附容量、洗脱溶媒及其用量,并用正交实验法优选最佳洗脱条件。结果通过D-101型大孔吸附树脂纯化后,70%乙醇洗脱液干燥后总固物中三七总皂苷纯度可达90%。结论本纯化工艺设计科学合理、成本低、污染少,可作为纯化三七总皂苷成分生产工艺的依据。     

三七总皂苷分离纯化工艺研究

目的研究D-101型大孔吸附树脂分离纯化三七总皂苷的工艺条件及参数。方法以三七总皂苷的含量为考察指标,研究三七总皂苷纯化过程中,D-101型大孔吸附树脂吸附容量、洗脱溶媒及其用量,并用正交试验法优选最佳洗脱条件。结果通过D-101型大孔吸附树脂纯化后,70%乙醇洗脱液干燥后总固物中三七总皂苷纯度可达90%。结论本纯化工艺设计科学合理、成本低、污染少,可作为纯化三七总皂苷成分生产工艺的依据。