帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护作用机制研究

【摘要】〓目的〓探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用机制。方法〓采用链尿佐菌素(STZ)腹腔注射的方法构建DN大鼠动物模型,将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周灌胃帕立骨化醇3次,每次04μg/kg;D组与N组给予等量丙二醇灌胃。给药12周后检测各组24 h尿蛋白定量及血生化指标,通过ELISA法检测肾组织中肾素浓度变化,尿中前列腺素E2（PGE2）水平,免疫组化法检测肾组织中环氧化酶 2（COX 2）和nephrin蛋白的表达。结果〓与N组相比,D组和P组24 h尿蛋白定量、血清肌酐、肾素、尿PGE2水平及COX 2表达较高,P组又显著低于D组,差异均有统计学意义（P<005）。与N组相比,D组和P组nephrin蛋白表达较低,P组又显著高于D组,差异均有统计学意义（P<005）。结论〓帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,此作用可能通过抑制COX 2、PGE2,减少肾素分泌,上调足细胞nephrin蛋白的表达实现。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病肾小管 上皮间充质转化的干预作用研究

目的 探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DKD）肾小管上皮间充质转化（EMT）的作用及内在机制。方法 将24 只SD 大鼠按随机数字表法分为帕立骨化醇干预组（P 组）、糖尿病肾病组（D 组）和正常对照组（C 组）,每组各8 只。P 组和D 组大鼠腹腔注射链脲佐菌素65mg/kg建立糖尿病肾病模型,造模成功后第2天P 组腹腔注射帕立骨化醇（溶于丙二醇中）0.4滋g/kg,3 次/ 周,D 组予等体积丙二醇;C组仅予等体积丙二醇。4 周后测血、尿生化指标;进行肾脏病理学检查;免疫组化及Western blot 技术检测肾组织E- 钙粘蛋白（E-cadherin）、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及Klotho 的表达,并进行指标间的相关性分析。结果 D组大鼠血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）及24 h尿蛋白水平均高于C 组,P 组均低于D 组（均P＜ 0.05）。C 组大鼠肾小管结构完整清晰,无明显病理改变;D 组可见肾小管间质局部炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞脱落,小管扩张,基底膜断裂;P 组肾小管间质病理改变较D 组减轻。D 组大鼠肾组织E-cadherin 与Klotho表达低于C组,而P组高于D组（均P＜0.05）;与C 组比较,D 组大鼠肾组织α-SMA、FN 及TGF-β1 表达增加,而P 组表达均较D 组减少（均P＜0.05）。Klotho 表达与E-cadherin呈正相关（r=0.924,P＜0.05）,而与α-SMA、FN 及TGF-β1 均呈负相关（r=-0.806、-0.623、-0.856,均P＜0.05）。结论 帕立骨化醇可抑制糖尿病肾病大鼠肾小管上皮EMT,其作用可能与增加肾组织Klotho表达,同时减少TGF-β1合成相关。     

帕立骨化醇上调糖尿病大鼠肾脏中胰岛素受体的表达

目的观察维生素D受体（VDR）激动剂-帕立骨化醇对糖尿病大鼠肾脏胰岛素受体表达的影响。方法 SD大鼠腹腔注射链脲菌素75 mg/kg建立糖尿病（DM）模型,将诱导成功的20只DM大鼠随机分为糖尿病组（DM组）、DM＋帕立骨化醇治疗组（DA组）。另设相配的10只SD大鼠为对照组（NC组）。第10周测体质量（BW）、收缩压（SBP）,空腹血糖（BG）、血肌酐（Cr）,24 h尿蛋白定量（24 h UP）及尿液足细胞（UPC）的排泄;RT-PCR检测肾组织nephrin、desmin、胰岛素受体α（IRα）的mRNA表达水平;Western boltting检测肾组织IRα蛋白和磷酸化蛋白激酶B（P-Akt）的表达水平。结果 DM组BG、Cr、24 h UP较NC组显著升高,BW显著降低,SBP、UPC无统计学差异。DM组nephrin mRNA、IRαmRNA及蛋白质,P-Akt蛋白质的表达较NC组显著降低;desmin mRNA的表达较NC组显著增加。帕立骨化醇降低DM大鼠的Cr、24 h UP,恢复肾组织nephrin、IRα、P-Akt的表达,抑制desmin的表达。结论帕立骨化醇上调nephrin并抑制desmin的表达,对足细胞起保护作用;改善胰岛素受体α的表达及磷酸化Akt水平,增强胰岛素信号通路,抑制高糖诱导的胰岛素对抗。     

维生素D受体激活剂治疗早期糖尿病肾病及对尿orosomucoid水平的影响

目的探究维生素D受体激活剂帕立骨化醇治疗早期糖尿病肾病的效果及对尿类黏蛋白（orosomucoid）水平的影响。方法将收治的120例早期糖尿病肾病患者随机分为帕立骨化醇组、药物对照组各60例,帕立骨化醇组患者使用帕立骨化醇进行治疗,药物对照组患者使用前列地尔进行治疗。使用全自动生化分析仪检测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平;免疫透彻比浊法检测血清血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、胱抑素C（Cys-C）水平;对血清白细胞介素（IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平进行检测;Western blot法检测RhoA、ROCK1表达;并对两组患者24 h尿蛋白、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿orosomucoid水平进行检测。结果治疗后帕立骨化醇组患者FBG、FINS、HOMA-IR水平均低于药物对照组（P<0.05）。治疗后帕立骨化醇组患者血清Scr、BUN、Cys-C、IL-6、IL-10、TNF-α水平均低于药物对照组（P<0.05）。治疗后帕立骨化醇组患者24 h尿蛋白、UAER、尿orosomucoid水平均低于药物对照组（P<0.05）。治疗后帕立骨化醇组患者RhoA、ROCK1蛋白相对表达量均低于药物对照组（P<0.05）。帕立骨化醇组患者治疗总有效率高于药物对照组,不良反应发生率低于药物对照组（P<0.05）。结论使用维生素D受体激活剂帕立骨化醇对早期糖尿病肾病进行治疗,患者血糖水平、肾功能改善,炎症反应减轻,调控患者24 h尿蛋白、UAER、尿orosomucoid水平,治疗效果显著。     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

[目的]探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况.[方法]多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM).ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-qPCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的mRNA表达水平;Westemblot法检测相应蛋白表达水平.[结果]随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P＜0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P＜0.05)、而mPGES-1、EP1、EP2、EP3 mRNA表达无显著变化(P＞0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P＜0.05).[结论]1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展.     

miR-214靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路对糖尿病肾病大鼠的保护机制

目的 探讨微小RNA（miR-214）靶向磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠的氧化应激和肾间质纤维化的作用和机制。方法 将40只SD雄性大鼠分为对照组（control组）、模型组（DN组）、miR-214阴性对照组（DN+miR-NC组）和miR-214模拟物组（DN+miR-214 mimics组）,每组10只;qRT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-214的表达;电子天平称量各组大鼠体质量和肾质量,计算肾指数;血糖仪测定各组大鼠的空腹血糖（FPG）;双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白（UP）水平;全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐（Scr）和血清尿素氮（BUN）的水平;HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化;Masson染色观察各组大鼠肾组织间质纤维化;ELISA检测各组大鼠血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的表达;免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达;生物信息学工具预测靶基因;双荧光素酶报告基因检测基因或蛋白之间的相互作用;Western blot检测各组大鼠肾组织中PTEN、p-PI3K、p-AKT和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的表达。结果 miR-214在DN大鼠肾组织中呈低表达,在DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中表达显著上调（均P＜0.001）;miR-214 mimics使大鼠的体质量升高,肾指数、FPG、UP、Scr及BUN水平下调（均P＜0.05）;DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中肾间质中的炎性细胞浸润减少,胶原纤维沉积减少（P＜0.01）;miR-214 mimics使大鼠血清中MDA的水平降低,SOD、GSH、GSH-PX的水平升高（均P＜0.05）,大鼠肾组织中TGF-β1的表达水平下降（P＜0.05）;miR-214与PTEN存在靶向关系;miR 214 mimics使大鼠肾组织中PTEN蛋白表达下调,p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达上调（均P＜0.05）。结论 miR-214在DN大鼠肾组织中低表达,过表达miR-214对DN大鼠的肾组织有保护作用,可能与降低肾组织的氧化应激水平、TGF-β1蛋白表达和抑制PI3K/AKT通路激活有关。     

子宫平滑肌前列腺素E2受体分布与复发性自然流产发病机制的相关性研究

目的研究复发性自然流产（RSA）中子宫蜕膜组织前列腺素E2（PGE2）的水平变化及子宫平滑肌细胞前列腺素E受体（EP）的表达分布,探讨PGE2/EP系统在RSA发病中的作用及机制。方法选择37例RSA患者作为RSA组和48例人工流产孕妇作为对照组。采用RT-PCR法检测蜕膜组织中环氧化酶-2（COX-2）、膜相关前列腺素E合成酶（mPGES）和子宫平滑肌细胞中EP表达水平,ELISA法检测蜕膜组织中PGE2和子宫平滑肌细胞中环磷酸腺苷（cAMP）表达水平,利用Fluo-3AM绿色荧光染料检测子宫平滑肌细胞中钙离子浓度。结果RSA组蜕膜组织中COX-2、mPGES和PGE2表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RSA组子宫平滑肌细胞中EP1和EP3表达水平均高于对照组,而EP2、cAMP表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RSA组子宫平滑肌细胞中钙离子浓度显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论子宫蜕膜组织PGE2的合成增加和平滑肌细胞EP受体分布异常可促使子宫的异常收缩而导致RSA。     

肺癌患者肺组织中COX-2和PGE2表达的变化及其意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺组织中环氧合酶-2（COX-2）和前列腺素E2（PGE2）表达的变化及其与临床病理参数之间的关系。方法采用逆转录聚合酶联反应（RT-PCR）和放射免疫法,分别检测38例NSCLC患者正常肺组织和肺癌组织中COX-2 mRNA和PGE2表达的变化。结果38例肺癌患者正常肺组织和肺癌组织中分别有34例和3例检测到COX-2 mRNA表达,阳性表达率分别为89.47%和7.89%;半定量分析肺癌组织中的COX-2 mRNA平均吸光度显著高于正常肺组织（P〈0.01）。肺癌组织和正常肺组织匀浆中PGE2浓度分别为（42.33±6.13）μg/L和（5.87±1.40）μg/L,两者比较差异亦具有显著性（P〈0.01）。直线相关分析发现肺癌组织中COX-2 mRNA的表达和PGE2浓度的变化呈正相关（r=0.552,P〈0.05）。COX-2mRNA表达在不同性别、年龄、组织分型、TNM分期和分化程度之间差异均无显著性（P均〉0.05）。结论NSCLC患者肺癌组织中COX-2 mRNA和PGE2表达增强,可能在NSCLC的发生和发展中具有重要作用。     

肾衰2号方对慢性肾衰大鼠肾皮质环氧化酶2及环氧化酶1 mRNA表达的影响

目的：观察肾衰2号方对慢性肾衰（chronic renal failure,CRF）大鼠肾皮质环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）及环氧化酶1（cyclooxygenase-1,COX-1）mRNA表达的影响。 方法：采用左肾动脉的2/3分支结扎,右肾摘除（ablation/infarction, A/I）法制作大鼠CRF模型。造模成功后,将造模大鼠随机分为模型组、西乐葆（塞来昔布）组、肾衰2号方组。选用10只正常大鼠作为正常对照组。治疗2个月后,苏木精和伊红染色观察大鼠肾组织形态学改变,检测治疗前后大鼠血清肌酐（serum creatinine,SCr）、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）水平,并用逆转录实时聚合酶链反应检测肾组织中COX-2和COX-1 mRNA的表达。 结果：肾衰2号方能明显降低CRF大鼠SCr和BUN水平,改善肾功能及肾组织形态,并能明显降低CRF大鼠肾皮质COX-2 mRNA表达量,但对COX-1 mRNA表达无明显影响。 结论：肾衰2号方可通过抑制COX-2 mRNA的过度表达改善肾功能,减轻肾小球硬化和纤维化。     

miR-199a-3p调控c-kit/ERK通路在电针关元穴治疗神经源性尿潴留大鼠的作用机制

目的：探讨miR-199a-3p调控c-kit/细胞外信号调节激酶（ERK）通路在电针关元穴治疗神经源性尿潴留中的作用机制。方法: 采用改良脊髓横断法建立神经源性尿潴留大鼠模型60只，通过随机数表法平均分为5组：模型组、电针组、miR-199a-3p antagomir（抑制剂）组、miR-199a-3p antagomir阴性对照组、电针+miR-199a-3p antagomir组，另选取SD大鼠12只，设为假手术组，使用药物分组干预处理后，检测大鼠尿动力学，比较各组膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力；肌条实验检测大鼠逼尿肌兴奋性，比较各组肌条自发性收缩频率；HE染色检测各组大鼠膀胱组织病理形态改变；试剂盒测定各组大鼠血清炎性细胞因子环氧化酶（COX-2）、白细胞介素（IL-18）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平；实时荧光定量（qRT-PCR）实验检测各组大鼠膀胱组织miR-199a-3p与c-kit mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法检测各组大鼠膀胱组织c-kit/ERK通路蛋白表达水平。结果：与假手术组相比，模型组大鼠膀胱组织呈现严重病理损伤改变，膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、血清COX-2、IL-18及iNOS水平显著升高（P＜0.05），肌条自发性收缩频率、膀胱组织miR-199a-3p与c-kit mRNA表达水平、膀胱组织c-kit/ERK通路蛋白p-ERK/ERK、c-kit表达水平显著降低（P＜0.05）。与模型组、电针+miR-199a-3p antagomir组分别相比，电针组大鼠膀胱组织病理损伤均减轻，膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、血清COX-2、IL-18及iNOS水平均降低（P＜0.05），肌条自发性收缩频率、膀胱组织miR-199a-3p与c-kit mRNA表达水平、膀胱组织c-kit/ERK通路蛋白p-ERK/ERK、c-kit表达水平均升高（P＜0.05）；miR-199a-3p antagomir组大鼠膀胱组织病理损伤均加重，膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、血清COX-2、IL-18及iNOS水平均升高（P＜0.05），肌条自发性收缩频率、膀胱组织miR-199a-3p与c-kit mRNA表达水平、膀胱组织c-kit/ERK通路蛋白p-ERK/ERK、c-kit表达水平均降低（P＜0.05）。与模型组相比，miR-199a-3p antagomir阴性对照组大鼠各指标水平无显著差异（P＞0.05）。结论：电针关元穴可通过上调miR-199a-3p表达而抑制c-kit/ERK通路激活，减轻神经源性尿潴留大鼠膀胱组织炎症损伤，增强逼尿肌兴奋性，修复其膀胱功能，改善大鼠尿潴留症状。     

青藤碱对糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1表达的影响

目的研究青藤碱对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,以探讨青藤碱对DN大鼠的治疗作用及其机制。方法将健康雄性SD大鼠45只随机分为3组：正常对照组（N组）、DN组（D组）及青藤碱治疗组（S组）,每组15只。S组在成模后皮下注射青藤碱20mg/（kg.d）;D组给予等量生理盐水皮下注射,共给药6周。每2周观察大鼠体质量、血糖及24h尿蛋白排泄量的变化;每组每2周随机处死3只大鼠,取血标本测肌酐（Scr）;取肾组织光镜观察病理改变,RT-PCR法检测肾组织中TGF-β1mRNA的表达。结果随着病程的延长,D组大鼠体质量增长慢、24h尿蛋白排泄量大、Scr水平高、TGF-β1mRNA表达水平高,与N组比较差异有显著性（P〈0.05）;S组大鼠体质量、24h尿蛋白排泄量及TGF-β1mRNA表达水平与D组比较明显改善,差异有显著性（P〈0.05）,Scr水平及光镜下病理改变有所好转,但差异无显著性意义（P〉0.05）。大鼠肾组织TGF-β1mRNA表达水平与24h尿蛋白排泄量及Scr水平呈正相关（r=0.892,P〈0.01;r=0.845,P〈0.01）。结论青藤碱可通过下调肾组织TGF-β1的表达水平,对DN大鼠的肾脏起保护作用。     

1，25—（OH）2D3对糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨1，25～（OH）。D3对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织VEGFmRNA及蛋白质表达的影响。方法SD大鼠分为3组，对照组，糖尿病肾病（DN）组，1，25—（OH）2D3组。链脲菌素腹腔注射诱导DM大鼠模型，尿蛋白定量≥30mg／24h为DN大鼠，诱导成功后1，25—（OH）2D3组给予3ng／（100g·d）皮下注射。实验12周末检测大鼠体重、血糖、血肌酐、24h尿白蛋白。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测VEGFmRNA及蛋白质的表达。结果DN组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，细胞外基质（ECM）均高于对照组（P〈0．01）。与DN组相比，1，25—（OH）2D3组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，ECM聚积显著降低（P〈0．01或P〈0．05）。尿VEGF与尿白蛋白呈正相关（rs=0．41，P=0．037），与体重、血糖、血肌酐无相关性（rs分别为0．18，0．13，0．21，P〉0．05）。结论1，25-（OH）2D3可减轻DN大鼠尿白蛋白的排泄，抑制肾小球系膜增殖，降低VEGFmRNA及蛋白质的表达。     

前列腺素E1对糖尿病肾病模型大鼠肾上腺髓质素的影响

目的观察前列腺素E1对链腺佐茼素（STZ）诱导的糖尿病肾病（DN）模型大鼠肾上腺髓质素（ADM）的影响,初步探讨前列腺素E1治疗糖尿病肾病的作用机制。方法30只Wistar大鼠分为正常组、糖尿病肾病模型组、前列腺素E1组。前列腺素E1组予前列腺素E1200μg／（kg·d）进行干预。治疗4周、8周后检测24h尿蛋白定量、血清尿素氮、血清肌酐水平;用定量双抗夹心免疫吸附实验（ELISA）法检测ADM的表达。结果糖尿病肾病模型组24h尿蛋白排泄明显增加（P〈0．01）,Scr水平上升（P〈0．05）,ADM量增加;前列腺素E1干预与糖尿病肾病模型组比较,尿蛋白排泄明显减少,Scr水平降低,ADM表达减少。结论前列腺素E1对DN具有一定肾脏保护作用,其作用机制可能是通过降低ADM水平、减少尿蛋白而实现的。     

安体舒通对糖尿病肾病大鼠肝细胞生长因子的影响

目的:探讨安体舒通(Antisterone)对实验性糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响及其可能机制。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病组(DN组)和安体舒通治疗组(AT组),同时设正常对照组(NC组)。记录FBG、Scr及24 h尿微量白蛋白(24 h Upro)等指标。ELISA和Western blot法分别检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、HGF的表达情况。结果:⑴DN组和AT组大鼠FBG、SCr、24 h Upro和RHI水平较NC组显著升高(P均<0.01),其中AT组Scr、24 h Upro和RHI均低于DN组(P<0.05,P<0.01);⑵DN组、AT组肾皮质TGF-β1蛋白表达较NC组显著升高(P<0.05),且AT组低于DN组(P<0.05);⑶DN组、AT组HGF表达量显著低于NC组(P<0.01),但AT组高于DN组(P<0.05)。结论:安体舒通可上调HGF的表达,减轻肾小球系膜区增生,延缓糖尿病大鼠肾脏病进展。     

早期糖尿病肾病患者1,25-(OH)_2D_3及炎性因子的变化及骨化三醇胶丸的干预作用

目的观察维生素D代谢物1,25-二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]对早期糖尿病肾病(DN)患者炎性因子TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平的影响。方法2型糖尿病患者150例,其中单纯糖尿病患者60例为DM组,早期DN 90例为DN组。DN组再随机分为治疗亚组和对照亚组各45例。对照亚组常规治疗,治疗亚组常规治疗+骨化三醇胶丸,疗程均3个月,比较各组1,25-(OH)_2D_3、24 h尿蛋白定量及相关炎性因子的变化。结果治疗前,DN组1,25-(OH)_2D_3水平低于DM组(P<0.05);TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP,24 h尿蛋白定量、SCr水平均高于DM组(P<0.05);治疗亚组治疗后TGF-β、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平及24 h尿蛋白定量均较治疗前降低(P<0.05),1,25-(OH)_2D_3水平较前升高(P<0.05)。对照亚组与治疗亚组不良反应发生率比较差异无统计学意义(11.1】%vs.11.11%,P>0.05)。结论早期DN患者1,25-(OH)_2D_3缺乏,炎性因子水平增高,补充骨化三醇胶丸可以改善炎性反应状态。     

灯盏花素对糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达的影响

目的观察灯盏花素对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,雌性SD大鼠随机分为正常对照组(N)、DN模型组(DN)、DN模型+灯盏花素治疗组(DS)三组。模型建立后,在第12周,测量血糖、24 h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);取大鼠肾组织行HE染色,进行病理组织学观察;用免疫组化法检测肾组织MMP-9。结果实验12周末,与DN模型组比较,DS组大鼠24 h尿蛋白定量、BUN、Scr显著降低(P0.05);肾组织病理改变减轻,免疫组化结果显示,肾组织MMP-9明显增加(P0.05)。结论灯盏花素可增加MMP-9表达,降低蛋白尿,保护肾脏功能。提示灯盏花素可能通过调节MMP-9的表达,从而减缓糖尿病肾病的发生和发展。     

黄芪对糖尿病肾病大鼠尾加压素Ⅱ表达的影响

目的探讨黄芪对糖尿病肾病大鼠表达的影响。方法采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法建立大鼠糖尿病肾病模型。将大鼠分为正常对照组（NC,n=10）、糖尿病肾病组（DN,n=10）、黄芪治疗组（HZ,n=10）（予黄芪注射液5 ml/kg灌胃）。于14周末处死动物,进行以下实验：测定血糖（BG）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）和尿蛋白定量（24 h UTP）;免疫组织化学技术检测UⅡ蛋白表达,RT-PCR技术检测UⅡmRNA表达。结果与NC组相比,各模型组肾脏肥大指数（KI）、BG、TC、TG、Scr、BUN和24 h UTP明显升高,HDL明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;HZ组的上述指标与DN组比较,则有明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。与NC组比较,DN组肾组织UⅡ表达增加,UⅡmRNA表达增加（P〈0.01）;与DN组比较,HZ组肾组织UⅡ表达明显降低,UⅡmRNA表达显著减少（P〈0.05）。结论黄芪可治疗糖尿病肾病,其机制可能与降低肾组织UⅡ蛋白及其mRNA的过度表达有关。     

清热益气通络方对DN大鼠肾小球P—cadherin、FSP1表达的影响

[目的]通过观察清热益气通络方对糖尿病肾病大鼠肾小球P钙黏蛋白（P-cadherin）、成纤维细胞特异蛋白1（fibroblast-fpecific protein 1,FSP1）表达影响,探索该方治疗DN蛋白尿的机制。[方法]将SD大鼠随机分为正常组和糖尿病肾病造模组（采用单侧肾切除腹腔注射链脲佐菌素的方法建立大鼠糖尿病肾病模型。将造模成功的大鼠再分为模型对照组、中药组和厄贝沙坦组。干预治疗12w后处死大鼠,分别检测各组大鼠24h尿蛋白量（urine protein, UPro）、血肌酐（serum creatinine ,Scr）、内生肌酐清除率（creatinine clearance rate, Ccr）、尿素氮（blood urea nitrogen ,BUN）,血糖、血脂,免疫组织化学染色的方法观察肾小球P-cadherin、FSP1蛋白的表达。光镜及电镜观察肾小球结构。[结果]①与模型组比,中药组大鼠24h UPro、Ccr、BUN显著降低（P〈0.01,P〈0.05）。②与模型组比,中药组大鼠肾小球P-cadherin表达显著增高（P〈0.01）,FSP1阳性表达明显降低（P〈0.01）;与厄贝沙坦组比,中药组FSP1阳性表达明显降低（P〈0.05）。[结论]通过上调P-cadherin蛋白表达及降低FSP1蛋白的表达,部分拮抗足细胞上皮间充质转分化可能是清热益气通络中药减轻糖尿病肾病蛋白尿排泄重要作用点之一。     

坎地沙坦酯片联合金水宝治疗2型糖尿病早期肾病疗效观察

目的 观察坎地沙坦酯片联合金水宝对2型糖尿病早期肾病患者的尿白蛋白排泄率（UAER）、尿β2-微球蛋白（β2-MG）、血清胱抑素（CysC）、血脂的影响,探讨其对早期糖尿病肾病患者的保护作用.方法 将120例患者随机分为对照组（A组）、坎地沙坦组（B组）、金水宝组（C组）、坎地沙坦合并金水宝治疗组（D组）各30例,均采用控制饮食和运动疗法.A组予一般常规治疗,B组加用低剂量坎地沙坦酯片4 mg/次每日1次口服,C组加用金水宝胶囊3粒/次,每日3次口服,D组同时加用坎地沙坦酯片和金水宝胶囊,8周为1个疗程.测定4组治疗前后UAER、尿β2-MG、血清CysC、血脂值.结果 治疗后B组、C组、D组UAER、尿2-MG、血清CysC均明显降低,与治疗前比较差异有统计学意义（P＜0.05）.C、D组患者治疗后的血脂有明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义（P＜0.05）,与B组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 坎地沙坦酯片联合金水宝治疗2型糖尿病早期肾病患者能有效减少尿微量白蛋白,改善肾功能.且金水宝胶囊有调节血脂作用,可改善患者血脂情况,更易为患者接受.     

糖尿病肾病尿OD62P的表达与内皮素-1的变化

目的：观察不同程度蛋白尿的糖尿病肾病（diabeticnephropathy,DN）患者尿CD62P表达和内皮素-1（Endothelin,ET-1）的变化,研究肾脏局部血小板活化及内皮细胞损伤在DN发生和发展中的作用。方法：随机选取90例2型DN患者为实验组,根据尿白蛋白排泄率（urinaryalbuminexcretionrate,UAER）分为正常蛋白尿组、微量蛋白尿组、大量蛋白尿组;另选择20例未合并DN的糖尿病患者作为DM组,20例健康人作为健康对照组,检测并比较各组血及尿中CD62P阳性表达及尿ET-1水平。结果：（1）血CD62P阳性表达率：DN组高于健康对照组、DM组,DM组高于健康对照组（P〈0．05）;DM组与正常蛋白尿组间无明显差异（P〉0．05）;正常蛋白尿组、微量蛋白尿组、大量蛋白尿组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）尿CD62P阳性表达率：DN组高于健康对照组、DM组（P〈0．05）,健康对照组与DM组无明显差异（P〉0．05）;DM组与正常蛋白尿组间差异显著（P〈0．05）。DN患者尿ET-1水平高于健康对照组;正常蛋白尿组、微白蛋白尿组、大量蛋白尿组尿CD62P阳性表达率及尿ET-1比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）尿CD62P阳性表达率与尿ET-1水平、尿白蛋白排泄率（UAER）及血CD62P阳性细胞率呈明显正相关;尿ET-1与UAER呈明显正相关。结论：（1）肾脏局部的血小板活化及内皮细胞损伤参与了DN的发生和发展;（2）尿CD62P阳性表达率及尿ET-1水平可能较UAER更早提示DN的发生,尿CD62P阳性表达及尿ET-1水平升高可能成为DN的早期预测指标。