新生大鼠心肌Ito下降与心肌肥大的相关性研究

本研究旨在探讨Ito下降对心肌肥大的影响及内在机制.     

新生大鼠心肌细胞短暂外向钾电流下降与心肌肥大的相关性研究

在某些心力衰竭患者中常观察到心肌细胞短暂外向钾电流 (Ito)下降和动作电位时程 (APD)延长 ,笔者主要探讨Ito下降与心肌肥大的关系及内在机制。用Ito阻断剂 ,4 氨基吡啶 (4 AP) ,处理新生大鼠心室肌细胞 ,观察作为心肌肥大指标的细胞膜电容和3 H 亮氨酸 (3 H Leu)掺入量 ,同时测Ito振幅和APD。结果 :Ito振幅下降近 5 0 %(1 5 0 .3± 1 8.6pA ,n =7vs 74 .0± 1 1 .5pA ,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。APD50 (5 0 %复极 )显著的延长 (75 .8± 1 4 .1ms,n =7vs2 0 1 .7± 2 3.5ms,n =1 1 ,P <0 .0 5 )。膜电容和3 H Leu掺入量分别增加 4 7%和 31 % (P均 <0 .0 5 )。L 型钙通道阻断剂维拉帕米 ,能抑制 4 AP诱导的APD延长以及膜电容和3 H 亮氨酸掺入量的增加。环孢素A(CsA)也可抑制 4 AP诱导的膜电容和3 H Leu掺入量的增加 ,但对APD影响不明显。结论 :Ito下降通过延长APD ,致细胞内钙增加 ,激活钙调神经磷酸酶反应途径 ,可能引起心肌肥大     

阿托伐他汀抑制大鼠心肌肥大的实验研究

目的 通过体外心肌细胞培养和在体动物实验方法,观察阿托伐他汀对大鼠心肌肥大的抑制作用,以及对心肌中炎性细胞因子的影响,探讨该类药物影响心肌肥大可能涉及的作用机制。方法 体外原代培养新生大鼠的心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌肥大模型,给予不同浓度的阿托伐他汀处理。采用RT-PCR法检测脑钠素（BNP）、基质金属蛋白酶9（MMP9）和白细胞介素1β（IL-1β）mRNA的表达,并以^3H-亮氨酸掺入测定心肌细胞蛋白合成速率。在体实验中通过不完全结扎大鼠的腹主动脉,使压力过度负荷增加造成左心室肥厚,以阿托伐他汀治疗4周,RT-PCR检测IL-1β,心调理素-1（CT-1）的表达,并观察心脏的病理学改变。结果心肌细胞肥大模型出现后,心肌细胞的BNP、MMP9和IL-1βmRNA的表达以及蛋白合成速率增加。经不同浓度的阿托伐他汀处理后,这些变化得以减轻。阿托伐他汀抑制压力负荷升高引起的左心室心肌BNP,IL-1β,CT-1的mRNA表达的增加,并减轻大鼠心脏重／体重比值、左心室壁厚度和心肌细胞平均直径的增加。结论 阿托伐他汀可能通过抗炎作用抑制大鼠心肌肥大,对防治以心肌肥厚为特征的心血管疾病可能有一定的应用前景。     

内皮素在大鼠高血压心肌肥大中的作用

目的研究内皮素（ＥＴ）在一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）诱导的高血压心肌肥大中的作用及ＥＴＡ受体阻断剂ＪＫＣ－３０１的保护效应。方法复制大鼠Ｌ－ＮＡＭＥ高血压模型，动物分对照组、高血压组和ＪＫＣ－３０１治疗组，测定心重、血浆及心肌ＥＴ水平和心肌丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果高血压动物的心重、ＥＴ水平和心肌ＭＡＰＫ活性较对照组都显著升高（Ｐ＜０．０１或０．０５），加用ＪＫＣ－３０１治疗则较高血压组ＥＴ水平不变，但血压、心重和ＭＡＰＫ活性均降低（Ｐ＜０．０１或０．０５），心肌ＭＡＰＫ活性与左心室肥大程度呈正相关（ｒ＝０．８２，Ｐ＜０．０１）。结论一氧化氮缺乏的心肌肥大可能是由ＥＴ所介导的，ＥＴＡ受体阻断剂对此种肥大有防治作用     

C-JNK信号通路对糖尿病大鼠心肌Ito钾通道重构的影响

目的研究c-JNK信号通路在糖尿病(DM)大鼠左室心肌细胞电压门控钾通道(Kv)重构中的作用和内在调控机制。方法将50只健康SD大鼠随机分为DM组[n=25,采用链尿佐菌素(STZ)诱导成模]和对照组(sham)(n=25)。应用全细胞膜片钳方法记录DM组与sham组大鼠心室肌瞬时外向钾电流(Ito);使用非放射性JNK激酶分析kit进行c-Jun活性测定。应用JNK抑制剂SP600125(10M)对DM大鼠心肌细胞进行体外孵育,观察孵育前后心肌细胞Ito的变化。用硫氧还蛋白还原酶(TrxR)抑制剂金诺芬(AF)对经JNK抑制剂SP600125孵育的大鼠心肌细胞进行处理,观察处理前后心肌细胞Ito的变化。应用抗Kv4.2抗体对Kv4.2的含量进行检测,检测结果使用UVP生物成像系统进行分析。结果DM组心肌JNK活性显著升高超过1倍,而Ito显著降低[Sham组:(31.2±3.4)pA/pF,n=16;DM组:(15.4±3.1)pA/pF,n=17;P<0.05]。DM大鼠心室肌细胞经JNK抑制剂SP600125(10 M)处理4 h后,Ito电流密度可恢复至Sham组水平[DM+SP600125组:(31.9±3.8)pA/pF,n=18;Sham组:(31.2±3.4)pA/pF,n=16;P<0.05];且sham组经SP600125处理后的最大Ito电流强度[(29.8±3.4)pA/pF,n=9]和未经处理的sham组无统计学差异。DM心肌经膜渗透性蛋白抑制剂JNKI-1(10 M)处理后,Ito密度也有显著增加,而sham组经相同处理后无改变。TrxR抑制剂AF显著抑制了SP600125对DM大鼠心肌Ito电流的增大作用[DM+AF+SP600125:(15.5±3.2)pA/pF,n=17],而AF对sham组Ito无明显影响。JNK抑制剂SP600125治疗后DM大鼠心肌的Kv4.2蛋白表达量显著增大,尽管未完全恢复到sham组心肌水平,但与先前在DM大鼠心肌所观察到的Ito电流改变一致。而JNK抑制并没有明显改变sham组心肌的Kv4.2蛋白表达量。结论DM大鼠心肌钾通道重构是氧化还原敏感的,可能通过持续性激活c-JNK信号通路促进Ito重构。在DM心肌中,JNK活性显著增高,Kv通道的电流密度降低;抑制JNK信号通路后可显著改善Kv通道重构,这一过程可能被硫氧还原蛋白系统所调控。     

硫氧还蛋白系统对糖尿病大鼠心肌Ito钾电流的影响

目的：研究硫氧还蛋白（Trx）系统对糖尿病（DM）大鼠左室心肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）的影响。方法采用链脲菌素（STZ）诱导的DM大鼠模型作为DM组（n=25）,未经STZ诱导的大鼠作为对照组（n=20）,应用全细胞膜片钳方法记录DM组与对照组大鼠心室肌Ito电流;用分光光度计测量氧化还原活性分子含量;采用5,5-二巯基双-2-硝基苯甲酸（DTNB）法评估蛋白质巯基的氧化程度;应用胰岛素对DM大鼠心肌细胞进行体外孵育,观察孵育前后心肌细胞Ito的变化。用TrxR抑制剂金诺芬或13-顺式视黄酸对经胰岛素孵育的大鼠心肌细胞进行处理,观察处理前后心肌细胞Ito的变化。结果 DM组存活22只,对照组存活20只。与对照组相比,DM组大鼠心肌硫氧还蛋白还原酶（TrxR）、谷胱甘肽还原酶（GR）明显降低[TrxR：（70.3±4.9）mU/mgvs.（147.9±18.2）mU/mg;GR：（34.4±2.4）mU/mg vs.（53.1±1.9）mU/mg,P＜0.05],而硫氧还蛋白（Trx）、谷氧还蛋白（Grx）明显升高[Trx：（15.6±1.8）mU/mgvs.（9.2±1.9）mU/mg;Grx：（36.5±6.1）mU/mgvs.（14.7±1.0）mU/mg,P＜0.05];同时,DM组大鼠左心室心肌自由巯基（P-SH）水平较对照组明显减少[（6.1±0.3）nmol/mgvs.（10.2±0.8）nmol/mg,P＜0.05];DM组大鼠心肌细胞Ito密度较对照组显著降低[（16.8±2.4）pApFvs.（30.6±2.8）pApF,P＜0.05];但胰岛素处理（4～5）h后Ito密度显著增加（31.2±2.1pApF,P＜0.05）;TrxR抑制剂金诺芬或13-顺式视黄酸均可以显著降低用胰岛素处理的DM大鼠心肌细胞Ito密度（P＜0.05）。结论DM大鼠心肌Trx系统功能下降,可造成心肌细胞Ito密度显著下降。     

腹主动脉缩窄诱发大鼠心肌肥大的细胞色素氧化酶研究

本文报道对大鼠行腹主动脉缩窄10天,发现实验组单位体积心肌细胞的细胞色素氧化酶“反应产物”面密度和单位体积线粒体“反应产物”体密度及线粒体数密度均增加。结果提示:肥大早期因心脏的代偿作用而出现细胞色素氧化酶活性增强和线粒体数密度增加。     

肥大细胞膜稳定剂对大鼠糖尿病心肌病变的影响

目的研究肥大细胞膜稳定剂酮替芬对大鼠糖尿病心肌病(DCM)的影响及可能机制。方法将45只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DCM组和肥大细胞膜稳定剂组(Ket组)。NC组给予普通饮食,DCM组予以高脂高糖饮食加一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DCM大鼠模型,Ket组为DCM大鼠模型建模成功后给予0.025%的酮替芬溶液1 mg/kg腹膜腔内注射,2次/d,连续注射8 w。同时,NC组和DCM组给予等体积的生理盐水空白对照注射。实验完成后处死全部大鼠,剪下左心室,称取左心室重量计算全心指数和左心室重量指数,在电镜下对各组心肌组织进行观察分析,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、活性氧簇(ROS)表达,甲苯胺蓝改良染色法比较肥大细胞数量分布。结果 DCM组全心指数显著高于NC组和Ket组(均P<0.05);DCM组左心室重量指数显著高于NC组和Ket组(均P<0.05)。电镜下NC组大鼠心肌细胞核椭圆形清晰可见,闰盘连续,肌丝致密,胞内可见大量形态结构正常的线粒体;DCM组大鼠心肌细胞核固缩,线粒体肿胀,显示不清晰,闰盘扭曲断裂,肌丝溶解;Ket组大鼠心肌细胞核无明显肿胀,核膜尚光滑、完整,无核固缩表现,线粒体完整清晰。DCM组大鼠血清TNF-α、ROS显著高于NC组和Ket组(均P<0.05)。DCM组大鼠心肌组织中肥大细胞分布密度显著高于NC组和Ket组。结论糖尿病大鼠心肌组织存在肥大细胞的表达增强,肥大细胞膜稳定剂酮替芬可减轻DCM。肥大细胞表达的增强可促进TNF-α和ROS的表达,部分参与DCM的发生发展。     

负荷与心肌代偿性肥大

心脏对不同负荷的变化,依靠自身调节,不仅仅调节收缩力,肌原纤维数量增加,室壁肥厚,缓解室壁应力状态,同时心肌细胞蛋白质的构型也发生了质的变化,这种构型变化具有收缩能量利用率高的生理学特点.     

心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡与心肌纤维化的相关性

目的探讨心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡与心肌纤维化的相关性。方法雄性SD大鼠18只,随机分为两组,每组9只。模型组腹腔注射阿霉素建立心力衰竭模型,空白对照组腹腔注射等体积生理盐水。模型建立后检测两组大鼠血清炎性因子表达水平及心肌细胞凋亡、心肌纤维化情况,并进行相关性分析。结果所有大鼠在实验中都存活,模型组大鼠建模均成功。与空白对照组比较,模型组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量明显增加(P0.05)。模型组左心室重量指数(LVMI)、心肌胶原体积比例(CVF)、心肌血管周围胶原与管腔面积比例(PVCA)均高于空白对照组(P0.05)。模型组心肌组织Caspase-8、Bcl-2蛋白相对表达量高于空白对照组(P0.05)。相关分析显示,心肌组织Caspase-8、Bcl-2蛋白相对表达量与LVMI、CVF、PVCA呈正相关(P0.05)。结论心力衰竭大鼠伴有心肌细胞凋亡增加与心肌纤维化,并表现为炎性因子的过量表达,两者可相互影响。     

心肌肥大与心力衰竭的新认识

<正> 目前,心力衰竭的发病率、死亡率日益增加,因而从不同方面探讨本病的病理生理机制实属必要。在发生心力衰竭的过程中,心肌最初的适应性肥大到随后的不适应性心力衰竭,即从代偿性心肌肥大到失代偿性心力衰竭,这方面的研究越来越受到人们的重视。本文旨在综述与临床有关方面的进展,以提高对发生心力衰竭中心肌肥大的认识。一、心肌肥大的病理生理学分类 (一)压力超负荷型此种类型常常是病理性心肌肥大的最常见原因,然而其对不同心室的影响又迥然不同。在右室泵功能障碍和心力衰竭之前,已观察到肥大心肌每单位肌群的收缩功能降低。另外一个研究发现突然的压力超负荷造成收缩功能降低系暂时的急性损伤,一旦此早期损伤过后,收缩功能可恢复正常。但是,这种突然的压力超负荷实验研究不能适用于人类的临床情况,因为心力衰竭患者心室压力     

心房钠尿肽与心肌肥大的关系

心房钠尿肽是主要由心房肌细胞分泌和合成.参与体液和血压调节的多肽类激素.它具有排尿利钠、舒张血管、减弱心肌收缩和降低血压等生物学作用.心房钠尿肽通过调节神经、体液因素和细胞因子拮抗心肌肥大的发生和发展.它还通过自分泌或旁分泌的途径在心肌组织发挥直接的抑制心肌细胞过度生长和胶原增生的作用.因此,探讨心房钠尿肽与心肌肥大的关系具有重要的理论意义和实践价值.     

瘦素与心肌肥大关系的研究进展

瘦素是肥胖基因编码,主要由脂肪细胞合成和分泌的多肽激素,通过与其受体结合发挥抑制饮食、减少能量摄入、增加能量消耗等生物学作用。心肌细胞肥大是指心肌细胞体积增大直径增宽或长度增加和肌节数量增多。心肌肥大的机制未完全阐明,目前认为各种机械刺激、化学因素作用是导致心肌肥大的主要原因。近年来瘦素与心血管疾病的关系引起广泛关注,瘦素除了有抗肥胖、维持能量平衡作用外,与心肌肥大方面有密切的关系,瘦素可能作为一个内源性物质在心肌肥大中起到重要的作用。该文就瘦素与心肌肥大的关系进行综述。     

心房钠尿肽与心肌肥大的关系

心房钠尿肽是主要由心房肌细胞分泌和合成,参与体液和血压调节的多肽类激素。它具有排尿利钠、舒张血管、减弱心肌收缩和降低血压等生物学作用。心房钠尿肽通过调节神经、体液因素和细胞因子拮抗心肌肥大的发生和发展。它还通过自分泌或旁分泌的途径在心肌组织发挥直接的抑制心肌细胞过度生长和胶原增生的作用。因此,探讨心房钠尿肽与心肌肥大的关系具有重要的理论意义和实践价值。     

环孢素A对儿茶酚胺诱导的大鼠心肌肥大的作用

目的 观察环孢素A（CaA)对儿茶酚胺诱导的大鼠心肌肥大的作用。方法 雌性Wistar大鼠21只,实验分三组,每组7只：（1）单纯肥大组：给大鼠皮下注射异丙肾上腺素（5mg.kg^-1,d^-1),连续10d:(2)CsA治疗组：除注射异丙肾上腺素外,同时腹腔注射CsA(20mg.kg^-1,d^-1),连续10d;（3）对照组：不作特殊处理。三组大鼠计大小,组织形态,心系数以及心肌组织抑制钙调神经磷酸酶CaN,丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及蛋白激酶C（PKC）活性的变化。在培养的大鼠心肌细胞上,观察CsA对去甲肾上腺素（NE）刺激的^3H－亮氨酸掺入的影响。结果 单纯注射异丙肾上腺素组的大鼠心脏明显增大,心肌细胞肥大,排列紊乱,并出现广泛间质纤维化,CaA治疗组大鼠心脏未明显增大,但仍可见部分心肌纤维化,大鼠心重及心系数明显低于单纯肥大组（P＜0．05）。肥大组大鼠心肌组织CaN活性明显高于对照组（P＜0．05）,CaA治疗组大鼠心肌组织CaN活性低于肥大组（P＜005）,三组大鼠心肌组织MAPK活性差异无显著性,但肥大组大鼠心肌组织PKC活性较对照组增高4倍（P＜0．001）,CsA治疗组的大鼠心肌组织PKC活性较肥大组下降50％（P＜0．001）,CsA可明显抑制NE刺激的大鼠心肌细胞^3H-亮氨酸掺入,结论 CaN信号通中可能以儿茶酚胺诱导的心肌肥大中起一定作用,CsA可阻滞儿茶酚胺诱导的心肌肥大,这种作用可能主要通过抑制CaN及PKC活性,阻断CaN和PKC介导的信号传导通路所致。     

心肌肥大的形态学诊断

近年来,对心肌肥大的形态学诊断有了新进展。本文复习心肌活检、超声心动图、心血管造影和心电图的形态诊断资料,以提高对心肌肥大的诊断水平。一、心肌肥大的活组织检查 Schaper对主动脉瓣缺损的左室肥厚进行活检,发现轻度肥大的心肌细胞除了肌节排列不规则和线粒体异常外,其它结构正常。重度肥大的左心室肌的重量增加三倍,线粒体和肌原纤维增加二倍,细胞浆增加五倍,非肌细胞与肌细胞的比例为1:4(正常为1:9)。     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌肥大的防治作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对糖尿病大鼠心肌肥大的防治作用及机制.方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、正常对照治疗(NC+NAC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治疗(DM+NAC)组.NC+NAC和DM+NAC组给予NAC 1.4～1.5g·kg~(-1)·d~(-1),持续8周后检测各组心脏收缩压、心率、左室内压舒张速率(-dp/dt)及到达最大舒张速率的时间(T值)、PG、血清Ins、15-F_(2t)-异前列烷(15-F_(2t)-Isop)和超氧化物歧化酶(SOD)水平.处死动物后测量心肌细胞面积并计算左室质量指数(LVW/BW).结果 (1) DM+NAC组LVW/BW和心肌细胞面积显著低于DM组(P＜0.05),而-dp/dt显著增加,T值显著减少;(2)与DM组比较,DM+NAC组15-F_(2t)-Isop 水平显著下降,SOD水平显著升高,PG明显下降(P均＜0.05).结论 NAC可有效抑制糖尿病大鼠心肌肥大,改善心脏舒张功能,这与其增强心肌抗氧化能力有关.     

肿瘤抑制因子PTEN与心肌肥大关系的研究

目的 观察肿瘤抑制因子PTEN在心肌肥厚大鼠心肌组织以及在血管紧张素Ⅱ诱导的肥大心肌细胞中的表达,探讨PTEN在心肌肥大发生发展中的作用以及相关机制。方法采用腹主动脉狭窄术制备压力超负荷心肌肥厚动物模型,及血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌细胞肥大模型,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法、Western blot及免疫组化等方法,分别检测各组PTEN mRNA和蛋白表达的变化,以及PTEN蛋白在心肌细胞中的定位。结果(1)与对照组相比,心肌肥厚组大鼠左室肌PTEN mRNA和蛋白表达均明显减少;血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大组PTEN蛋白表达明显减少。(2)与心肌肥厚组相比,卡托普利组大鼠左室心肌PTEN mRNA和蛋白表达增加,接近对照组。(3)免疫组化实验结果显示心肌细胞胞核内有阳性免疫产物生成,提示PTEN蛋白定位于心肌细胞核内。结论PTEN在心肌肥大发生发展中可能起负调控作用,该作用与肾素-血管紧张素系统密切相关。