高效液相色谱法测定人脑脊液中万古霉素浓度及临床应用

目的：采用HPLC-DAD快速有效地测定人脑脊液中万古霉素浓度,为颅内感染患者鞘内注射调整剂量提供依据。方法：前处理采用乙腈: 6%高氯酸（1∶1,v/v）沉淀萃取,采用Eclipse XDB C18柱（250 mm × 4.6 mm,5 μm）;流动相：A-pH3.2磷酸二氢钾缓冲液,B-乙腈,梯度洗脱;流速：1 mL·min-1;检测波长：236 nm;柱温：30 ℃;进样量：20 μL;二极管阵列检测。内标法定量,去甲万古霉素为内标。结果：万古霉素低、中、高3个浓度（3.125、25、50 mg·L-1）方法的绝对回收率分别为95.4%、97.5%、100.7%,日内精密度RSD小于2.76%,日间精密度RSD小于5.24%,基质效应小于1.08%。结论：本方法准确简便,符合万古霉素药物浓度监测的要求。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素浓度的快速高效液相色谱法测定方法。方法:以替硝唑为内标,血浆样品通过硫酸锌(0.005g)沉淀,采用ODS C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-磷酸二氢钾缓冲液(20∶80,v/v)为流动相;流速为1.2mL.mim-1;检测波长为281nm;柱温为25℃;进样量为20μL。结果:万古霉素最低检测浓度为80μg.L-1,血浆样品浓度在5.0~80.0mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 3,(n=5);相对回收率在96.86~102.2%;日内RSD为3.8%、2.1%、0.81%,日间RSD为3.4%、2.7%、1.6%。结论:本方法简便、快速、可靠。     

RP-HPLC法同时测定人体血清及脑脊液中万古霉素的含量

目的:建立人体血清及脑脊液样品中万古霉素浓度的高效液相色谱测定法。方法:以外标法定量,采用AglientZORBAXSB-C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),流动相为30 mM磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈(91:9,pH3.2),流速1.1ml/min,检测波长236nm,柱温20℃。结果:万古霉素在5～200μg/mL血清浓度范围内线性关系良好(r=0.9981),最低定量限为5μg/mL,提取回收率在23.40～47.36%;日内RSD为3.57%、0.97%、0.46%(n=5),日间RSD为4.49%、0.90%、4.10%(n=5);在10～2000μg/mL脑脊液浓度范围内线性关系良好(r=0.9997),最低定量限为10μg/mL,提取回收率在48.61～53.20%;日内RSD为3.10%、6.34%、4.06%(n=5),日间RSD为19.47%、0.87%、2.53%(n=5)。结论:本方法快速,准确,具有创新性。     

高效液相色谱法检测脑脊液中万古霉素药物浓度方法学建立

目的：建立一种有效、灵敏、准确的可用于检测人脑脊液内万古霉素浓度的方法学。方法：色谱柱：Diamonsil C₁₈（200 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（pH 3.6）（9：91）,流速：0.8 mL·min^-1,紫外检测波长：236 nm,内标：去甲万古霉素,柱温：40℃,进样量：20 μL。结果：万古霉素峰与其他药物峰分离良好,不受脑脊液内源性物质干扰。在0.40~101.00 μg·mL^-1范围内万古霉素浓度和两者峰面积比值呈线性关系（r=0.999 6）,最低定量限0.40 μg·mL^-1。万古霉素和内标的保留时间分别为13 min和10 min,日内和日间RSD均小于10%,低、中、高3个浓度提取回收率分别为60%、30.6%、28.8%。结论：此方法具有较高可行性,准确度高,适用于脑脊液中万古霉素浓度检测。     

高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度

目的：建立人血浆中万古霉素ＨＰＬＣ测定法,为临床测血药浓度以调整万古霉素剂量提供方法学基础。方法：采用液－液萃取作提取法,并选用去甲万古霉素为内标,色谱条件：ＹＷＧ－ＲＰ１８分析柱,流动相为乙腈－０．０５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（８：９２）,紫外２３６ｎｍ检测。结果：本法在１．０５～８４μｇ／ｍｌ间线必耵关系数Ｒ＝０．０９９８（Ｎ＝５）,日内、日间精密度ＲＳＤ均〈１％。绝对回收率均〉７０％,结论：本     

反相高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的　建立测定人血浆中万古霉素浓度的高效液相色谱方法。方法　采用HypersilC18柱( 4 0mm× 2 5 0mm ,5 μm)流动相为甲醇∶水 ( 2 0∶80 )含 0 1%三乙胺和 1%四氢呋喃 ,检测波长 2 30nm。结果　本方法线性范围 0 4～ 10 0 μg/ml,最低检测限 80ng/ml ,血浆平均回收率 10 0 2 % ,日内、日间RSD均小于10 %。结论　本方法简单快捷、灵敏度高、色谱效果好、结果准确 ,可用于万古霉素血浓度监测及体内药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度。方法:以替硝唑为内标,色谱柱为WondaSil C18柱(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸二氢钾-乙腈(90∶10),柱温30℃,流速1 mL.min-1,检测波长236 nm,进样量20μL,采用甲醇沉淀蛋白后直接进样。结果:万古霉素血药浓度在10～100 mg.L-1之间呈良好线性关系,r=0.999 1(n=5),线形方程Y=0.008 4C+0.038 7,日内、日间RSD均小于5%,平均回收率大于90%,稳定性考察RSD<5%。结论:该法快速简便且准确度高,适用于万古霉素血药浓度检测。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的 建立人血浆中万古霉素浓度的高效液相色谱测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以去甲万古霉素为内标进行检测,分析柱采用Kinetex C₁₈(100 mm×4.6 mm,2.6μm),并以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(pH=3.2)为流动相进行梯度洗脱,流速为1 ml/min,柱温为40℃,检测波长为220 nm,血浆样品以硫酸锌沉淀后进样,进样量为10μl。结果 血药浓度在2.22～111.11μg/ml内线性关系良好(R²=0.9995,n=6),日内相对标准偏差<4.86%,日间相对标准偏差<3.72%,回收率>94.6%。结论 高效液相色谱法灵敏、准确,可在临床上运用于血浆万古霉素药物浓度的检测,指导临床进行个体化给药,提高疗效,降低不良反应的发生率。     

高效液相色谱法测定血浆中去甲万古霉素和万古霉素浓度

目的：建立HPLC方法测定血浆去甲万古霉素和万古霉素浓度，并应用于治疗药物监测。方法：采用Zorbax SB C18色谱柱，采用梯度流动相．流动相组成甲醇：pH7．3磷酸缓冲盐水溶液，检测波长230nm，流速1．0ml&#183;min-1柱温32℃。采用高氯酸和二氯甲炕去蛋白的方法处理样品。结果：去甲万古霉素和万古霉素与血浆中其他成分分离良好，在2．5～100μg&#183;ml-1范围内线性关系良好，低、中、高3个浓度的绝对回收率去甲万古霉素分别为79．57％，76．46％，84．88％，万古霉素分别为86．52％，87．05％，83．47％，两者的日内、日间RSD均〈7％，血浆样品室温放置4h，冷冻解融2次，处理好的样品室温放置24h均稳定．结论：该方法灵敏、准确、快速，可用于去甲万古霉素和万古霉素人体血药浓度监测和药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度

目的建立测定血清万古霉素质量浓度的高效液相色谱法．．方法以HypersilC,s柱（250mm×4．6mill,10μm）为色谱柱,流动相为乙腈一磷酸二氢钾缓冲液（10：90）,流速为0．8mL／min,检测波长为236nm,以10％硫酸锌（ZnSO4）为沉淀血清蛋白,离心后取上清液直接进样测定。结果万古霉素的低、中、高（1．50,30．82,150．45mg／L）3种质量浓度的平均相对回收率分别为99．33％,98．94％和99．70％,日内及日间精密度的RSD均小于5％（n=5）;分析方法的最低检测质量浓度为0．5mg／L;线性范围为2．o～150mg／L,回归方程为C=0．06108A＋0．0003845,r=0．9999。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,适用于血清万古霉素血药浓度的监测和药物代谢动力学研究。     

高效液相色谱法测定去甲万古霉素血药浓度

目的：建立人血浆中去甲万古霉素反相高效液相色谱测定法,为临床监测血药浓度提供方法学基础。方法：采用液－液萃取法并选用２万古霉素为内标,以ＹＷＧ－ＲＰ１８色谱柱,流动相为乙腈－０．０５ｍｏｌ．Ｌ＾－１磷酸二氯（８：９２）,紫外２３６ｎｍ检测。结果：本法在０．８１～８１ｕｇ．ｍｌ＾－１间线性良好,相关系数ｒ＝０．９９９８（ｎ＝６）。日内日间精密度ＲＳＤ均小于３％,提取回收率均大于７５％。结论：本方法在     

反相高效液相色谱法测定临床联合用药时血浆中万古霉素浓度

目的:建立人血浆中万古霉素 HPLC 测定方法,为临床万古霉素的血药浓度监测提供实验手段。方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经10%硫酸锌溶液沉淀,采用 Discovery~RP Amide C_(16)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析。色谱条件:流动相为乙睛-0,05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲溶液(10:90,pH=2.8),流速为1mL·min~(-1),检测波长为230 nm,柱温为35℃。结果:本法在2.0～80.0μg·mL~(-1)浓度范围内线性良好,r=0.9999(n=5,RSD=2.88%)。日内、日间精密度 RSD 均小于6%,低、中、高浓度的提取回收率均大于99.0%(n=5)。结论:该方法采血量少,简便快速,灵敏度高,重复性好,适用于临床治疗尤其合并用药时的药物浓度监测运用。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱法测定方法.方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经硫酸锌沉淀,采用Thermo-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-pH 3.2磷酸二氢钾缓冲液(20:80)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为230nm;柱温为25℃;进样量为10μL.结果:万古霉素最低检测浓度为80ng·mL-1;血浆样品浓度在5.0～80.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.994 7,n=5;相对回收率为在98.67%～100.4%;日内RSD与日间RSD均在1.6%～3.4%(n=5).结论:该方法采血量少,简便快速、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规血药浓度监测及药动学研究.     

高效液相色谱法测定儿童万古霉素血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定儿童万古霉素血药浓度,并为临床评估疗效、调整给药剂量提供方法学基础.方法:建立万古霉素标准曲线,血浆样品通过10%硫酸锌沉淀,采用Insertil ODS-3色谱分析柱,以甲醇、磷酸二氢钾缓冲液、乙腈(pH=3.2010:86:4)(v/v/v)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长为196nm,柱温为28℃,进样量为20μL.结果:万古霉素血浆样品质量浓度在1.5625mg·L-1至100mg·L-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9996,n=7).低、中、高3个质量浓度溶液的方法回收率分别为98.52%±3.88、97.52%±1.74和100.00%±4.86,RSD分别为3.94%、1.79%和4.86%.结论:本方法灵敏、快速、简便、可靠,可用于儿童万古霉素的血药浓度监测及临床药学研究.     

简单灵敏的高效液相色谱法测定人血浆中去甲万古霉素的浓度

目的建立血浆中去甲万古霉素含量的HPLC测定方法。方法采用高效液相色谱检测法,分析柱为Tskgel ODS-80TS（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为10mmol·L^-1甲酸铵（0．1％甲酸）-甲醇（0．1％甲酸）=（82：18,v／v）,流速：1．0mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：236nm,进样量：20μL.血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,进样分析。结果去甲万古霉素在1～1000μg·mL^-1与峰面积线性关系良好（r=0．999）,最低检测浓度为1μg·mL^-1。平均回收率为96％;日间、日内RSD均〈15％。结论研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中去甲万古霉素浓度的检测。     

高效液相色谱法测定血清去甲万古霉素与万古霉素浓度

目的 建立测定人血清去甲万古霉素与万古霉素浓度的高效液相色谱法。方法全血经过20%硫酸锌沉淀，以Agilent ZORBAX SB C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（pH值=3.2）－甲醇－乙腈（87：10：3）为流动相，检测波长236 nm，流速为1.0 mL·min^-1。去甲万古霉素和万古霉素互为内标。结果去甲万古霉素和万古霉素在1～100 μg·mL^-1内线性关系良好（r＝0.999 9，r＝0.999 7）；平均回收率分别为99.90%和100.90%；日内、日间RSD均＜5%。结论所建立的方法简便、快速、准确可靠，灵敏度高，适合两药临床血清浓度的监测。     

高效液相色谱法测定人血清中盐酸去甲万古霉素含量

目的建立反相高效液相色谱方法测定人血清中盐酸去甲万古霉素含量,并用于临床患者血药浓度监测,为个体化给药提供依据,减少不良反应发生。方法采用Synergi4μ Fusion-RP80A（250×4.6mm,4μm）色谱柱;磷酸二氢钾缓冲盐（0.02%三乙胺,用磷酸调pH=3.10）-乙腈（93：7,V/V）为流动相;流速为1.0mL.min-1;紫外检测波长：210nm;柱温：30℃;进样量：30μL。结果盐酸去甲万古霉素血清浓度与峰面积在2.0～20.0μg.mL-1范围内线性关系良好,其回归方程为：Y=30187X-3485.3,r=0.9993;低、中、高浓度的平均相对回收率分别为96.61%,95.79%,101.09%;日内精密度分别为6.21%,6.35%,10.74%,日间精密度分别为10.19%,5.89%,6.09%。结论该方法简便、快速,灵敏度高,重复性好,回收率稳定,可用于临床盐酸去甲万古霉素人体血药浓度监测及相关研究应用。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素的浓度

目的建立以去甲万古霉素为内标的人血清中万古霉素HPLC测定法。方法血样处理采用10%三氯醋酸沉淀法,色谱分析采用Agi-lent C18（250mm×4.6mm,5μm）分析柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（15：2：83,pH3.2）,紫外检测波长236nm,流速1.0mL.min-1,柱温35℃。结果万古霉素的线性范围为1.3mg.L-1～83.2mg.L-1（r〉0.999）;平均回收率为100.6%;日内、日间RSD均〈4%。结论此法具有采血量少,检测快速、稳定、灵敏度高而成本低特点,适合临床常规血药浓度的监测。     

高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度

目的：建立测定人血浆中万古霉素浓度的高效液相色谱法。方法：采用外标法定量,万古霉素血浆样品经5%高氯酸处理,采用Inertsil ODS-SP C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.025 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）（11.5∶88.5）,流速为0.5 ml/min,检测波长为230 nm,柱温30℃,进样量20μl。结果：血浆中万古霉素在1.56~100.00 mg/L内线性良好（r=1）,检测限0.33 mg/L（S/N=3）,平均回收率为95.26%,RSD为1.16%。结论：该方法灵敏、准确、快速、操作简便、取样量少,适合临床万古霉素血药浓度的监测。