用羊血代替兔血制作血平板在“链球菌菌落在血平板上的溶血特性”实验中的应用

目的本实验用脱纤维羊血代替脱纤维兔血制作血平板,并观察其对链球菌溶血现象产生的影响。方法向高压灭菌过的哥伦比亚琼脂培养基中加入6 mL脱纤维羊血或兔血,混匀后,倾注平板。经无菌试验合格后,将链球菌分区划线涂布于平板上,37℃培养24 h,培养后于室温放置1和2 d后(day 2和day 3),观察菌落在血平板上的生长情况和产生溶血情况。结果甲型溶血性链球菌培养24 h后(day 1),在羊血平板上有明显的草绿色溶血环,而兔血平板上并未产生明显的草绿色溶血环;平板置于室温1和2 d后(day 2和day 3),在羊血平板上仍然能观察到草绿色溶血环,而培养在兔血平板上的菌落在day 3时才观察到微弱的α溶血现象。乙型溶血性链球菌培养24 h后(day 1),在羊血平板上已经出现明显的无色透明溶血环,此时兔血平板上也有溶血环,但并不透明;平板置于室温1 d后(day 2),羊血平板上的无色透明溶血环更加明显和透明,此时兔血平板开始出现无色透明溶血环。丙型链球菌培养24 h后(day 1),羊血和兔血平板上,均未产生溶血现象,在室温静置几天后,也没有产生溶血现象。结论羊血平板更适合观察甲、乙、丙型链球菌的溶血现象,更适用于教学示教用。     

三种动物血巧克力平板分离流感嗜血杆菌效果评价

目的：为了比较三种巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率和生长情况。方法：将送检的痰标本及流感嗜血杆菌标准菌株ATCC10211分别接种于羊血、马血和兔血巧克力平板上,置烛缸中,36℃培养24h,比较流感嗜血杆菌检出率及其生长情况。结果：（1）三种巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率分别为8%、34%及36%。（2）标准菌株ATCC10211在马血和兔血巧克力平板上生长良好,菌落直径0.5-1mm,而在羊血巧克力平板上生长差,菌落大小如“沙粒”,肉眼难见。结论：痰培养流感嗜血杆菌应使用马血或兔血巧克力平板,而不用羊血巧克力平板。     

中药改良营养琼脂培养苛养菌的研究

目的研究中药改良营养琼脂培养苛养菌的效果。方法分别用单味和配伍的党参、杞子、红枣、赤小豆等中药加入营养琼脂培养苛养菌,并与血平板进行比较。结果多种苛养菌在中药改良的各种培养基上都有不同程度生长,以红枣和赤小豆配伍改良的营养琼脂上菌落生长和可观察性效果最佳。与血平板比较,经配对t检验,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在缺乏血液培养基的乡镇卫生院,可用红枣赤小豆平板代替血平板用于常见苛养菌的培养。     

肺结核病人合并真菌感染浅析

材料与方法标本:为经临床诊断的肺结核病人晨第1口深部痰。材料:血平板、沙保弱氏平板、MIC试剂盒,生化微量鉴定管。方法:把患者痰标本同时接种于血平板及沙保弱氏增养基上,35±1℃,培养24~48小时,观察结果,取可疑菌落进行生化鉴定。我们在长期痰增培养中,发现肺结核病人常出现未见效病菌结果的问题,考虑是否长期大量应用抗生素引起菌群失调的可能,遂在痰培养接种血平板的同时接种沙保弱氏平板,自2002年起共计检测500例痰标本,观察结果,血平板上生长白色假丝酵母菌为178例,其余尚有克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌,假单孢菌和G 球菌则未统计。沙…     

粪培养24h无菌生长实验观察

临床实验室对在SS或麦康凯平板上培养24h无菌生长之粪便标本,报告“无致病菌生长”很容易引起漏检,应延长培养时间,同时接种血平板及霉菌培养基,以提高培养率,指导临床合理用药。     

BD全自动血培养仪假阳性的几种情况分析及处理

目的 BD血培养仪的使用体会,掌握遇到报阳培养瓶,转种血平板,巧克力平板及其它相应平板,进行普通培养而不能长出细菌即认为假阳性的几种情况及处理过程。方法仪器在使用过程中遇到的报假阳性问题及处理方法。设计两个相关实验研究,(1)血培养仪阳性对比实验:(2)血培养仪回收试验。结果 BD血培养仪在临床上应用较广泛,除掌握各种病原菌各种培养特性,以便有的放矢,还需明了所用仪器性能,对仪器需要专责维护保养,使其处于最佳状态,避免出现报所谓假阳性的问题。结论实验结果说明,BACTEC9120型血培养仪的自动化连续监测系统,有允许延迟上机的功能,一般血液标本量越大,仪器报阳时间越短,如不能及时放置血培养瓶,仪器仍能报阳性,而报阳性的总时延长。     

细菌L型变异的检出有关问题初探

细菌L型变异是细菌细胞壁缺损的表现,常规培养不易检出,故易造成漏诊。如何提高细菌L型的检出率,是细菌检验面临的一个重要问题。笔者根据几年来的工作实践,提出有关问题与同道商榷。 1 普通血平板培养有返祖作用将确诊为金葡菌的7份标本,分别接种于高渗和等渗增菌液中,经37℃,24h后,再移种于L型平板和血平板上,培养后观察菌落生长情况,作革兰氏和缺壁染色,镜检。结果均见程度不同的缺壁现象。生长在L型平板上的细     

大鼠化脓性病灶的病原微生物分离与鉴定

两年多来,我们的大鼠一直有皮下化脓性病灶,经微生物分离鉴定证明主要由金黄色葡萄球菌所致。从一例中分离出金葡菌和未知的杆菌。一、病料采集将有化脓灶的大鼠用乙醚麻醉直接取脓针。二、病原微生物的分离与鉴定将采集的病料在无菌条件下用铂金耳取脓汁直接接种在血平板上(兔血+普通琼脂),经37℃24小时培养,挑取平板上可疑菌落后斜面培养基上作纯培养,再做涂片、染色、镜检及生化反应。 1.培养结果:采样5例均系革氏阳性球菌。血平板上金黄色菌落全部溶血、灰白色菌落不溶血。     

空调送风中细菌总数和真菌总数的检测方法

目的比较空调送风中细菌和真菌在不同培养基上的生长情况及培养时间的影响,探讨空调送风中的细菌总数和真菌总数检测方法。方法随机采集珠三角某市26套公共场所空调系统送风中的空气样品126份,分别检测细菌总数和真菌总数,细菌总数检测分别采集样品在营养琼脂平板和血琼脂平板,35~37℃培养48 h,计数细菌菌落数;真菌总数采集样品在沙氏琼脂平板经28℃培养1~7 d,每天观察并记录结果。采用SPSS13.0统计软件对结果进行统计分析。结果营养琼脂平板和血琼脂平板细菌菌落数差异无统计学意义(t=1.35,P0.05);真菌总数检测培养3、4、5 d均数之间的差异无统计学意义(P0.05);真菌菌量最多的培养时间为3 d(占30.95%);真菌菌落蔓延满平板最多的培养时间为4 d(占蔓延满平板数的37%)。结论空调送风中细菌总数检测在营养琼脂平板和血琼脂平板均适用,真菌菌落总数检测的最佳计数时间为培养3 d。     

腹泻患者做便培养时应注意的几个问题

关于便培养目前好多单位还都是采用接种强选择培养基 S.S平板和弱选择培养基伊红美兰平板 (或中国兰平板 ) ,我们发现许多腹泻病人、反复做便培养 ,都未能分离出致病菌 (所谓肠道致病菌的大多数都是指 :沙门氏菌属和痢疾菌属 )。为了不使由霉菌和其它细菌所引起的腹泻漏掉 ,我们在做培养时除了种 S.S平板或伊红美兰平板外 ,又加了血平板和沙保弱平板。1　培养方法及结果用新鲜便同时划线接种 S.S平板、伊红美兰平板、血平板及沙保弱平板各一枚 ,我们随机抽样按常规培养观察 10 0例。其结果如下表 1表 1　大便培养一览表名称例数 溶血性大…     

血培养中猪霍乱沙门氏菌的鉴定与药敏

目的快速对血培养中猪霍乱沙门氏菌进行鉴定以指导临床医师正确使用抗生素,提高治愈率。方法用全自动血培养分析仪进行血培养,对血培养阳性、革兰染色阴性标本同时转种血琼脂、HE琼脂、麦康凯琼脂和SS平板上,采用K-B法检测菌株的药敏情况。结果猪霍乱沙门氏菌在SS平板上形成无色、半透明的菌落,硫化氢和氧化酶试验阴性,沙门氏菌抗血清O7、Hc和H1,5凝集阳性。对氨苄西林,复方新诺明、氯霉素、萘啶酸等耐药;对左氧氟沙星、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等敏感。结论血培养中猪霍乱沙门氏菌快速、准确的鉴定与药敏结果对提高救治率至关重要。     

易变微球菌致婴儿腹泻1例

近期 ,我们从一例腹泻患儿粪便中检出易变微球菌 ,现报告如下。1　病例摘要患儿 ,男 ,3个月 ,2 0 0 1年 8月 1 2日因腹泻伴发热入院。住院间采绿色稀水样便镜检未见脓球 ,白细胞少许。送粪便培养 ,培养出易变微球菌 ,重复培养时结果相同 ,可排除污染。按药敏试验结果 ,临床选用红霉素治疗后 ,粪便培养复查为阴性 ,患儿病愈出院。2　细菌分离培养与鉴定2 .1　分离培养　采集绿色稀水样便接种于碱性蛋白胨水、ＳＳ平板、麦康凯平板 ,3 5℃培养2 4ｈ ,均未长菌。故重采样接种于血平板及麦康凯平板 ,3 5℃培养 2 4ｈ ,麦康凯仍未长菌 ,血平板上…     

质谱快速鉴定血培养阳性标本的方法研究

目的 建立快速、精准的细菌质谱鉴定方法,以缩短血培养阳性的实验周转时间。方法 共收 集血培养阳性瓶91 个（活性炭吸附瓶）,采集培养液分别转种肉汤和血平板增菌培养4 h 后,用基质辅助激光 解吸/ 电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定。以血平板培养24 h 的质谱鉴定结果为对照, 比较2 种方法细菌质谱鉴定符合率。结果 91 株细菌包括51 株革兰阴性菌和40 株革兰阳性菌。4 h 肉汤增 菌法和4 h 血平板培养法鉴定到种的符合率分别为46.15% 和89.01%,无鉴定结果率分别为47.25% 和3.30%, 错误鉴定率分别为3.30% 和4.40%。2 种方法鉴定到种的符合率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平 板培养法鉴定到种的符合率高于4 h 肉汤增菌法。2 种方法对革兰阴性菌鉴定到种的符合率分别为58.82% 和 94.12%,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平板培养法高于4 h 肉汤增菌法。2 种方法对革兰阳性菌鉴定到 种的符合率分别为30.00% 和82.50%,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平板培养法高于4 h 肉汤增菌法。 结论 4 h 血平板培养质谱鉴定法可快速鉴定血培养阳性标本中的病原菌。     

腔隙莫拉菌致尿路感染1例

患者,女,４９岁。因肾衰并尿路感染、尿毒症,出现嗜睡、深大呼吸、贫血、面部有红色丘疹,入院治疗。查体：体温３８－７℃。血常规：ＷＢＣ１９×１０９／Ｌ,ＲＢＣ２－２３×１０１２／Ｌ,Ｈｂ６１ｇ／Ｌ,血尿素氮５２－９ｍｍｏｌ／Ｌ,血肌酐１２３３μｍｏｌ／Ｌ,尿常规：外观混浊,蛋白「,脓球＋,白细胞管型４～５／低,颗粒管型２～３／低。尿液细胞菌培养为腔隙莫拉菌。尿液接种于Ｌ增菌液培养基、血平板、麦康培养,经３７℃ＣＯ２培养箱孵育２４小时,麦康平板无菌生长,Ｌ增菌液培养基及血平板上都生长。血平板上长出灰…     

洛菲不动杆菌致脑出血患者严重感染1例

患者 ,男性 ,78岁。因脑出血入院。行脑室及脑血肿引流术后病情反复。 WBC计数和体温持续升高 ,并发严重肺部感染。给予头孢他啶、激素等药物治疗 ,无明显效果。期间多次作脑脊液及痰培养 ,均检出洛菲不动杆菌 ,且药敏试验无敏感抗生素 ,直至发生感染性休克、死亡。细菌鉴定 :脑脊液增菌培养 2 4小时阳性 ,转种血平板 ;痰直接接种血平板。两者均 37℃培养 2 4小时可见灰白色、圆湿、边齐、直径 1mm左右不溶血菌落 ,伊红平板上为浅粉色、圆湿、较小菌落 ,SS平板上不生长 ,革兰染色为阴性球杆菌。生化反应 :氧化酶( - )、葡萄糖氧化 ( - )、…     

68例真菌感染药敏分析

由于广谱抗生素、激素和细胞毒性药物的广泛使用,深部真菌感染的病例越来越多,真菌耐药现象日趋严重。本文对我院2 a来临床科室送检标本中检出的68株真菌进行药敏分析,希望指导临床合理用药。1资料与方法1.1菌株来源68株真菌来源于我院2002年1月至2003年12月临床科室送检的标本。其中取自痰46份、小便9份、大便5份、血4份、脑脊液3份、胆汁1份。1.2质控菌株白色假丝酵母菌(ATCC14053)。1.3培养与鉴定及药敏试验痰、小便种血平板,大便种血平板及SS平板,血液、脑脊液、胆汁增菌后转种血平板。血平板上菌落经染色镜检为真菌,再用法国生物-梅…     

口腔颌面部感染厌氧菌培养及药敏试验结果分析

口腔颌面部多间隙感染是口腔颌外科常见病 ,但口腔颌面部多间隙感染标本在做一般需氧培养时 ,有部分标本不能检出致病菌或只检出部分需氧菌 ,而将厌氧菌漏掉 ,常给临床治疗带来许多困难 ,因此厌氧菌的培养越来越显得重要。近 1a来 ,我院细菌室对高度怀疑有厌氧菌感染和需氧培养未检出致病菌的 4 6例口腔颌面部多间隙感染患者的脓液标本 ,分别进行了需氧与厌氧培养及药敏试验 ,现将结果分析如下。1　材料和方法1.1　培养基制备1.1.1　普通血琼脂平板和伊红美兰血琼脂平板　按常规要求制备。1.1.2　厌氧血平板　在普通血琼脂平板内加入维生素 …     

细菌变异的3例报告

我室在进行细菌培养时，发现几例较有特点的变异菌株，现报告如下； 例１：患者，泌尿道反复感染近一年，多种抗生素治疗效果不佳，做尿培养。经接种血平板及伊红美蓝平板，３７℃、２４小时培养后，在血平板上生长出：圆形、较凸起、大小约３ｍｍ左右、光滑湿润红色不透明，有乙型溶血的Ｓ型菌落。伊红美蓝上生氏菌落中心为紫黑色，有金属光泽的菌落。经转种ＳＳ平板后该平板生长出粉红色较大有明显酸臭味的菌落，转种普通平板后该平板也生长出３ｍｍ左右红色的ｓ型菌落。涂片染色结果为Ｇ- 球杆菌。 该细菌氧化酶（一），生化反应（编码常…     

血培养直接药敏试验分析

目前临床上对细菌血症的诊断和治疗主要依赖实验室数据 ,如何快速准确地报告血培养结果已成为微生物室的当务之急。为此本文认为主要解决两个问题 :1,使用快速自动血培养仪争取 4 8小时回报阳性结果。 2 ,将阳性增菌液直接进行药敏试验。本文旨在探讨后者的可行性。1　材料和方法1.1　材料 :美国ＢＤ公司全自动血培养仪ＢＡＣＴＥＣ90 5 0型 ,标准树脂瓶 ,婴儿瓶 ,厌氧瓶 ,ＭＨ平板 ,天坛的药敏纸片 ,35℃孵箱等 .1.2　方法 :按照参考方法作血培养 ,机器自动报告阳性后 ,立刻将培养液作药物敏感试验 (1)涂片染色 ,转血平板 ,第二天再用Ｋ -…     

产气荚膜杆菌L型败血症一例

患者,女性,29岁。不明原因发热39℃～40℃,伴上腹部隐痛,四肢关节肿痛一月余。检查:全身出血点,血培养(-)。给于青霉素、红霉素治疗无效,病情恶化。曾因“血小板减少性紫癜”行脾切除术。取患者血液增菌培养,1、3、5天各移种一次于血平板及L型平板,均未见细菌生长,但在第5天的L型高渗肉汤管中发现混浊,直接涂片有圆球体、巨形体等,呈多形性。加做厌氧培养(细菌型和L型),48h后在L型平板见大量颗粒性菌落及少部分“油煎蛋”样菌落,涂片见G+膨大的球杆菌。细菌经厌氧血平板连续返祖两代,变为典型的中间有芽胞的大杆菌,葡萄糖高层培养汹涌发酵现象,拟为产