抗原化抗体研究进展

抗原化抗体是一个全新的概念,系用基因工程技术将蛋白抗原的决定簇肽段植入抗体的超变环中,赋予肽段接近天然构象,具备天然抗原的免疫原性,也可用于配、受体相互作用的研究,为新型疫苗和药物的设计研制提供了新方法.     

含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成与生物活性

目的:合成由曼氏血吸虫28 Ku GST抗原肽段26-43(P26)、141-153(P₁₄₁)和日本血吸虫26 Ku GST 抗原肽段187-202(J₁₈₇)中的两种不同肽段组成的血吸虫多抗原肽疫苗,通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对实验动物的保护性免疫效果。方法:用Boc 化学和Fmoc 化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性,在无免疫佐剂存在下接种小鼠,ELISA 试验检测血清抗体,并用日本血吸虫尾蚴攻击感染,6 周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果:合成多抗原肽能不同程度地与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合,并能诱导昆明小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。接种(P26)2(J187)2 MAP、(P26)2(P141)2 MAP和(P26)4(P141)4 MAP的昆明小鼠,与对照组比较成虫检获数分别减少40-1 % ,61-1 % 和34-4% ; 每克肝脏虫卵数分别减少48-4% ,67-1 % 和47-4% 。结论:含两种不同抗原肽的合成血吸虫多抗原肽疫苗能够诱导昆明小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力,选择更好的肽段结合在一起将有可能获得免疫保护作用更强的多抗原肽疫苗分子。     

含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成及其对BALB/c小鼠的免疫保护作用

目的　设计合成由曼氏血吸虫 2 8KDaGST抗原肽段 2 6 43(P2 6) ,116 131(P116) ,141 15 3(P14 1)和日本血吸虫 2 6KDaGST抗原肽段 187 2 0 2 (J187)中的两种不同肽段组成的血吸虫混合多抗原肽疫苗 ,通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对BALB/c小鼠的保护性免疫效果。方法　用Boc化学和Fmoc化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗 ,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性 ,在无免疫佐剂存在下接种小鼠 ,ELISA试验检测血清抗体 ,并用日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,6周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果和结论　合成的混合多抗原肽能够与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合 ,并能诱导BALB/c小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。且合成的混合多抗原肽疫苗能够诱导BALB/c小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力 ,这种免疫力不仅降低成虫负荷数 ,还能显著减少肝组织内虫卵检获数 ,其中 (P116) 4(P2 6) 4 MAP的减虫率和减卵率均达 70 %以上 ,因此有希望发展成为有效的抗血吸虫疫苗     

以精子抗原肽为抗原的抗精子抗体ELISA检测方法的建立

目的建立组合多个精子抗原肽为抗原的检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法用PS3全自动多肽合成仪合成4个特异精子肽,并经反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化和质谱鉴定。用ELISA检测4个合成肽的抗原性,基于对这些合成肽抗原活性的评价,将4个精子抗原肽混合后(组合肽)作为抗精子抗体(AsAb)检测用抗原。结果合成了实验所需要的抗原性肽段,RP-HPLC结果显示纯度达95%以上。以组合肽为抗原建立的检测AsAb的间接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为95.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,以组合的精子抗原肽作为包被抗原建立的ELISA方法可提高AsAb检测的灵敏度。     

含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成及其对BALB/c小鼠的免疫保护作用

目的　设计合成由曼氏血吸虫28 KDa GST抗原肽段26-43(P₂₆), 116-131(P₁₁₆), 141-153(P₁₄₁)和日本血吸虫26　KDa GST抗原肽段187-202(J₁₈₇)中的两种不同肽段组成的血吸虫混合多抗原肽疫苗,通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对BALB/c小鼠的保护性免疫效果。方法　用Boc化学和Fmoc化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性,在无免疫佐剂存在下接种小鼠,ELISA试验检测血清抗体,并用日本血吸虫尾蚴攻击感染,6周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果和结论　合成的混合多抗原肽能够与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合,并能诱导BALB/c小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。且合成的混合多抗原肽疫苗能够诱导BALB/c小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力,这种免疫力不仅降低成虫负荷数,还能显著减少肝组织内虫卵检获数,其中(P₁₁₆)₄(P₂₆)₄-MAP的减虫率和减卵率均达70％以上,因此有希望发展成为有效的抗血吸虫疫苗。     

含B细胞表位的重组抗体能诱发构象特异性抗体应答

各种合成肽的免疫原性很低,但当它们被导向抗原递呈细胞表面时,其免疫原性大为增强。作者以抗主要组织相容性复合物Ⅱ类分子I-A~K的小鼠单克隆抗体（Tib92）作为导向抗体,研究所用的模型B细胞表位则来自于流感病毒血凝素分子的免疫显性A环表位。 许多天然折叠蛋白表面的抗原表位都有特定的三维构象,松散的小分子合成肽不易模拟这种构象,A环与抗体分子重链     

宿主免疫生物学与疫苗开发

随着免疫调节机理日益清楚，疫苗和佐剂的设计变得更加科学化，为了理解这些机理，需要清楚三种细胞之间的相互作用，抗原提呈细胞（ＡＰＣ）启动了免疫球蛋白级联反应，这些细胞中最重要的是树害状细胞，该细胞必须首先捕获抗原，颗粒物质，天然或获得性抗体或激活补体能力有助于此过程的进行，然后Ｔ细胞通过加工的抗原肽及以ＡＰＣ表面和分泌的分子的联合作用而被激活，Ｔ细胞介导炎症，发挥细胞毒性作用和有地抗体形成。究系１细     

一种抗-HCV核心多肽ELISA法的敏感性

丙型肝炎病毒(HCV)是非甲非乙型(NANB)肝炎的主要致病因子。作者以HCV核心区的1个抗原决定簇为依据,合成1个由15个氨基酸组成的肽段。用此肽段为原料建立了一种新的抗体检测方法,在下列各组病人中进行评价。A组为225例血友病病人,     

戊型肝炎病毒(HEV)蛋白抗原肽的化学合成及在血清学诊断中的应用

目的：为诊断戊型肝炎,寻找更好的诊断试剂盒。方法:根据戊型肝炎病毒(HEV)蛋白含有2个可能的抗原表位,从戊型肝炎病毒中国株蛋白的氨基酸序列中选取S30,NS33和S42 3段抗原肽,用固相合成法进行化学合成,所得目标肽段纯化后经质谱和氨基酸组成分析确证。结果：本文试剂盒与国外品进行比较,血清分析结果表明,前者质量与日本产品相当,明显优于美国Genelabs试剂盒。结论：以这3个合成的抗原肽作为包被抗原组装的戊型肝炎病毒血清抗体的ELISA诊断试剂盒有较好的灵敏性和专一性,可用于临床检测和流行病调查。     

抗环瓜氨酸肽抗体的研究进展

抗环瓜氨酸肽抗体的ELISA检测试验是一种新型的血清学试验，可用于类风湿关节炎的临床诊断。其对类风湿关节炎的诊断有高度特异性，故其底物抗原的分子结构、检测方法及临床意义成为近年来抗环瓜氨酸肽抗体的研究热点。     

单克隆抗体3F3识别电鳐乙酰胆碱酯酶构象抗原决定簇(英文)

目的:研究天然电鳐乙酰胆碱酯酶(AChE)单克隆抗体3F3针对的抗原决定簇的类型.方法:以酶联免疫吸附试验测定抗原与抗体间的反应.结果:单克隆抗体3F3能与天然AChE反应,而不与还原并烷基化的AChE(RA-AChE)反应;梭曼不影响3F3与AChE的结合;化学合成的含AChE活性中心丝氨酸的24肽不与3F3反应.结论:3F3是识别电鳐AChE活性中心构象抗原决定簇的单克隆抗体,但它不占据AChE活性中心的丝氨酸残基.     

修饰性肽配体的作用机制、应用及筛选进展

修饰性肽配体是在抗原表位的基础上对表位进行氨基酸改造形成的具有免疫调节活性的短肽，已经在治疗自身免疫疾病、恶性肿瘤和病毒感染等疾病方面显示出良好的应用前景。一方面，修饰性肽配体可通过影响天然抗原表位、主要组织相容性复合体和T细胞受体形成的三分子结构发挥特异性免疫调节作用；另一方面，修饰性肽配体还可通过改变抗原呈递细胞内信号、旁路抑制和激发异源性免疫反应等机制发挥治疗作用。结合使用噬菌体展示技术对肽库进行筛选，可获得大量高特异性和高亲和力修饰性肽配体。修饰性肽配体作为潜在抗原特异性药物的重要来源正在受到广泛关注。     

天然pICln蛋白分子存在形式的检测与分析

目的 观察猪肾脏和大鼠肾脏天然pICln蛋白分子存在形式。方法 将猪肾脏和大鼠肾脏匀浆后作蛋白定量，以其为样品进行不变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)，再用抗pICln的肽段抗体等进行Western blot。结果 大鼠肾脏和猪肾脏的天然pICln分别呈现约43、80和120KDa和约40、75和110KDa的三条反应带。结论 大鼠肾脏和猪肾脏的天然pICln分子可能有单体、二聚体和三聚体三种存在形式。     

mHSP70分子中免疫刺激肽段与CD40对接复合物的结构模拟

微生物体内的70 ku热休克蛋白407-426片段可以有效刺激体内CD40+抗原递呈细胞如DC,单核细胞等的成熟,可有效刺激体内产生IL12和TNFα,被认为是CD40L的替代配体,因此对免疫系统有着重要的意义。同时,该片段还可以有效结合外源蛋白分子,因此又是天然的递呈抗原的载体佐剂。该文章以开发新型载体佐剂为目的,使用Discovery studio软件分析经过单片段与两次串联的该肽段结构并预测了它们与CD40分子进行对接后的复合物。经过分析其关键结合位点,阐明了该肽段与CD40分子间参与相互作用的残基,并发现经过2次串联的肽段确实可以比单片段更有效的与CD40进行相互作用。因此,实验结果可为新型肿瘤疫苗的设计提供理论依据。     

宿主免疫生物学与疫苗开发

随着免疫调节机理日益清楚,疫苗和佐剂的设计变得更加科学化。为了理解这些机理,需要弄清楚三种细胞之间的相互作用。抗原提呈细胞(APC)启动了免疫球蛋白级联反应。这些细胞中最重要的是树突状细胞,该细胞必须首先捕获抗原,颗粒物质、天然或获得性抗体或激活补体能力有助于此过程的进行。然后T细胞通过加工的抗原肽以及APC表面和分泌的分子的联合作用而被激活。T细胞介导炎症、发挥细胞毒性作用和有助于抗体形成。究系1型细胞为主还是2型细胞为主,可影响细胞和体液应答的方向。然后激活B细胞,导致抗体形成和更好的抗原提呈。长龄淋巴细胞群中的T细胞和B细胞记忆有助于再次接触抗原时增强免疫反应性。最好的疫苗应能刺激强烈记忆。     

多肽研究XIX:丙型肝炎病毒的免疫选择性

丙型肝炎病毒(HCV)基因组有显著的异源性和高度的可变性。其中E2HV(高变区)认为是宿主识别HCV,并且产生免疫压力的靶目标之一。文中设计并合成了三段多肽抗原P2,P9和P10。抗原性及免疫原性研究结果表明:(1)HCV宿主体内存在抗-E2HV抗体,但这种抗体是非中和性的,或者是抗体滴度太低。不足以中和HC病毒抗原;(2)同一基因型的HCV抗-E2HV抗体有某种共同的结构特点,从而使某一HCV病毒株E2HV抗原能够与其它病毒株抗-E2HV抗体反应,大约有30%的代表性;(3)丙型肝炎病毒E2HV区里碳端398～412多肽片段可以引起动物免疫应答。     

噬菌体展示筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体及其体外实验研究

目的使用噬菌体展示技术筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体并体外观察其对神经来源细胞信号通路及细胞聚集的影响。方法以L1纤黏连蛋白FN2-3区肽段为抗原,利用噬菌体抗体库(DAb library)筛选并纯化相应人源结构域抗体,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫荧光观察抗体与抗原结合特性。给予神经来源SK-N-SH细胞抗体,使用蛋白质印迹(Western blot)观察24 h时其对L1下游信号通路Erk及Akt1激活的影响。使用结晶紫进行细胞染色观察抗体对细胞聚集的影响。结果成功筛选出与L1FN2-3区肽段结合的结构域抗体H2-1,与SK-N-SH细胞内源性L1结合良好。与溶剂对照组相比,该抗体可有效促进SK-NSH细胞中L1下游信号分子Erk1/2及Akt1磷酸化激活(分别为P<0.01和P<0.05),并可促进神经突生长及神经细胞聚集。结论 L1激动型结构域抗体可激活L1相关信号分子,促进神经突生长等作用,具有进一步实验治疗脊髓损伤等神经系统创伤性疾病的研究价值。     

试谈肾小球肾炎的治标与治本

Comlron就肾炎的治疗提出了针对免疫反应的三个环节的治疗方案:(1)针对抗原:避免接触抗原,排除抗原。(2)针对抗体:抑制、排除抗体或增加抗体。(3)针对免疫效应:如降低补体的活性,抑制纤维蛋白的形成,抑制白细胞趋化因子和抑制激肽系统等。     

携带病毒表位的抗体可制成较好疫苗

现代疫苗主要依赖合成肽,合成肽起抗原作用以激发对特定病原体的细胞和体液免疫应答。但是,肽作为疫苗有明显缺点:半衰期短,通常不能激发足够的免疫应答,所以,必须与佐剂结合。美国Mount Sinai医学院的Bona等提出,理想的表位载体是人抗体。抗体可循环     

新的合成疫苗

有效的免疫接种意味着有免疫原性和保护性的特异抗原决定簇的参与,也包括有非特异性免疫增强成分在内。Arnon(1971年)观察到抗合成肽的抗体能够识别天然蛋白之后,近来人们对发展人工疫苗作了许多尝试。这些疫苗含有合成的抗原,配以适当载体与佐剂使用。尽管弗氏完全佐剂(FCA)极为有效,但不能考虑用于临床。1974年合成了细菌细胞壁的活性亚单位胞壁酰二肽(MDP),可代替FCA中的分枝杆菌。