白细胞介素-17诱导单核细胞分泌白细胞介素-10的初步机制研究

目的探讨白细胞介素-17(IL-17)诱导单核细胞分泌白细胞介素-10(IL-10)的分子机制。方法收集该院体检中心健康者外周血,经淋巴细胞分离液分离获得单个核细胞后,利用免疫磁珠分选技术纯化CD14阳性的单核细胞,然后在体外用IL-17进行刺激培养,或预先加入信号通路抑制剂孵育1h后再进行刺激培养,酶联免疫吸附试验检测IL-10的水平。结果 CD14阳性的单核细胞经IL-17刺激后明显诱导IL-10的分泌(P0.01),且具有剂量和时间依赖性;加入核转录因子(NK-κB)抑制剂可明显抑制IL-17诱导单核细胞分泌IL-10的作用(P0.05),但MEK1/2抑制剂、p38/MAPK抑制剂和JNK抑制剂则无明显抑制作用。结论 IL-17可能通过NK-κB信号途径诱导单核细胞上调IL-10的分泌,从而发挥免疫抑制作用。     

白细胞介素22诱导胃癌细胞AGS分泌VEGF-A的机制研究

目的探讨白细胞介素22(IL-22)诱导胃癌细胞AGS分泌血管内皮生长因子A(VEGF-A)的分子机制。方法 IL-22刺激体外培养的胃癌细胞系AGS细胞,或预先加入不同的信号通路抑制剂作用1h后再利用IL-22进行刺激,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中VEGF-A的水平。结果 AGS细胞经IL-22刺激后,VEGF-A的分泌显著增加,差异有统计学意义(P0.05),且具有剂量和时间依赖性;加入信号传导转录激活因子3(STAT3)抑制剂预孵育后,IL-22诱导AGS细胞分泌的VEGF-A水平显著下降,差异有统计学意义(P0.05)。但核因子-κB(NF-κB)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、丝裂原活化细胞外信号调节激酶1/2(MEK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38/MAPK)抑制剂预孵育的VEGF-A水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 IL-22可能经STAT3信号通路诱导AGS细胞分泌VEGF-A,从而有助于胃癌的进展。     

晚期糖基化终产物刺激单核细胞产生活性氧的信号传导机制

目的 ：探讨晚期糖基化终产物（advanced glycation end products,AGE）诱导单核细胞产生活性氧的机制。方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞,经AGE修饰的人血清白蛋白（AGE-HSA）刺激后,用化学发光法测定活性氧（reactive oxygen species,ROS）的生成;分别应用超氧化物歧化酶（SOD）、NADPH氧化酶特异性抑制剂apocynin、抗AGE受体（RAGE）抗体预处理单核细胞,观察AGE-HSA刺激单核细胞生成ROS的变化。结果 AGE-HSA可以诱导单核细胞产生ROS。SOD可以有效的清除AGE刺激单核细胞后分泌的大量的ROS;抗RAGE抗体、apocynin通过阻断AGE与RAGE的结合及抑制NADPH氧化酶的活性可以有效地抑制ROS产生。结论 AGE可通过RAGE激活NADPH氧化酶产生ROS。     

IL-17A诱导胃癌细胞SGC-7901分泌CXCL13机制研究

目的探讨白细胞介素17A(IL-17A)诱导胃癌细胞SGC-7901分泌CXCL13的分子机制。方法体外培养胃癌细胞SGC-7901,利用IL-17A刺激或预先加入信号通路抑制剂孵育后再进行IL-17A刺激。刺激后采用酶联免疫吸附法检测培养上清CXCL13水平。结果 SGC-7901细胞经IL-17A刺激后,CXCL13分泌水平显著增加(P0.05),且具有剂量和时间依赖性。信号转导与转录激活因子-3(STAT3)抑制剂预孵育,可显著抑制IL-17诱导SGC-7901细胞分泌CXCL13(P0.05),核因子κB(NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶1/2(MEK1/2)、p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂则无显著抑制作用。结论 IL-17A可通过STAT3信号通路诱导胃癌细胞SGC-7901分泌CXCL13,从而发挥免疫调节作用。     

C反应蛋白激活单核细胞核因子-кB及辛伐他汀干预

目的:观察C反应蛋白(CRP)刺激人外周血单核细胞核因子-κB(NF-κB)活化及白细胞介素-6(IL-6)表达,予辛伐他汀干预,探讨CRP/NF-κB在动脉粥样硬化(AS)致病机制中的作用和辛伐他汀的抗AS效应。方法:密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,免疫细胞化学观察CRP致单核细胞NF-κBp65活化的时间效应,ELISA法观察IL-6产生的时间-浓度效应,其峰值分别与辛伐他汀抑制剂组比较。结果:CRP刺激单核细胞NF-κB活化呈时间依赖性,高峰在2h,单核细胞表达IL-6呈时间与浓度依赖性,在24h达高峰。辛伐他汀(1×10-8mol/L～1×10-6mol/L)呈剂量依赖性抑制NF-κB活化与IL-6表达。结论:CRP激活正常人单核细胞NF-B信号途径,并诱导单核细胞产生IL-6,辛伐他汀抑制单核细胞NF-κB活性与IL-6表达,提示CRP/NF-κB信号途径在促进AS发病机制中起重要作用,辛伐他汀抑制NF-κB有可能减轻或抑制AS进展。     

C反应蛋白激活单核细胞核因子-κB 及辛伐他汀干预

目的观察C反应蛋白(CRP)刺激人外周血单核细胞核因子-κB(NF-κB)活化及白细胞介素-6(IL-6)表达,予辛伐他汀干预,探讨CRP/NF-κB在动脉粥样硬化(AS)致病机制中的作用和辛伐他汀的抗AS效应.方法密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,免疫细胞化学观察CRP致单核细胞NF-κB p65活化的时间效应,ELISA法观察IL-6产生的时间-浓度效应,其峰值分别与辛伐他汀抑制剂组比较.结果CRP刺激单核细胞NF-κB活化呈时间依赖性,高峰在2 h,单核细胞表达IL-6呈时间与浓度依赖性,在24 h达高峰.辛伐他汀(1×10-8mol/L～1×10-6mol/L)呈剂量依赖性抑制NF-κB活化与IL-6表达.结论CRP激活正常人单核细胞NF-B信号途径,并诱导单核细胞产生IL-6,辛伐他汀抑制单核细胞NF-κB活性与IL-6表达,提示CRP/NF-κB信号途径在促进AS发病机制中起重要作用,辛伐他汀抑制NF-κB有可能减轻或抑制AS进展.     

天然辅助细胞通过p38信号通路分泌IL-13

目的 RSV感染后,天然辅助细胞(Natural helper cells,NHC)通过IL-33/ST2途径产生IL-13,对于IL-33激活的下游信号通路尚不明确。IL-33通过其受体ST2激活NF-κB和MAPK信号通路,进而诱导极化的Th2细胞分泌Th2型细胞因子。本研究旨在通过一系列体内外实验探究NF-κB和MAPK信号通路在天然辅助细胞IL-13分泌机制中的作用。方法在IL-33刺激前用特异性NF-κB和p38抑制剂对NHC进行预处理,实时RT-PCR和流式细胞仪技术分别检测mRNA水平及NF-κB和MAPK磷酸化情况。结果 NHC中p38mRNA和磷酸化水平都显著升高;并且,p38特异性抑制剂显著降低NHC中IL-13分泌量。另一方面,NF-kB mRNA及磷酸化水平升高,但NF-κB的特异性抑制剂并没有显著抑制NHC分泌IL-13。结论 RSV诱导的NHC中IL-13的产生依赖于p38信号通路。     

整合素连接激酶通过核因子κB途径介导基质金属蛋白酶9上调促进肺癌细胞迁移和侵袭

目的 探讨整合素连接激酶（ILK）促进肺癌细胞侵袭的相关分子机制.方法 通过细胞转染、siRNA干扰、细胞划痕实验、实时定量PCR、Western Blot方法探讨ILK和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在肺癌A549细胞中的表达及相互关系.结果 在肺癌A549细胞系中,过度表达的ILK诱导MMP-9的表达（P＜0.01）;加入MMP-9抑制剂多西环素显著影响了转染组细胞划痕愈合能力（P＜0.01）,加入抗-MMP-9中和抗体则严重阻碍了细胞迁移能力（P＜0.01）,体外基底膜侵袭实验亦得到了相同的结果（P＜0.01）.ILK的过度表达促进磷酸化和核因子-κB（NF-κB）亚单位p65的核易位（P＜0.01）,并且NF-κB抑制剂BAY11-7028和NF-κBp65siRNA能抑制ILK高表达细胞系中MMP-9的上调（P＜0.01）.结论 本研究结果表明,ILK的过度表达可促进肺癌细胞迁移和侵袭,并且是通过NF-κB途径介导MMP-9上调来实现这一过程.     

感觉神经肽P物质对肉芽组织成纤维细胞核因子-κB的激活及生物学作用

目的:研究感觉神经肽P物质(SP)对肉芽组织成纤维细胞核因子-κB(NF-κB)的激活作用,以探讨其生物学作用的信号机制。方法:采用甲醛注射的方法造成Wistar大鼠局部无菌性炎症反应,提取肉芽组织进行成纤维细胞原代培养;采用凝胶迁移阻滞实验的方法,检测SP对肉芽组织成纤维细胞NF-κB的激活作用,观察其量效和时效关系及NF-κB的亚基组成;观察NK-1受体在NF-κB活化中的作用。结果:SP可有效激活NF-κB,且呈显著的剂量依赖性(r=0.712,P<0.01);在0.1μmol/LSP作用下,NF-κB活性在刺激30min时达到高峰;活化的NF-κB是由p50和p65亚基组成的;NF-κB的活化可被NK-1受体阻断剂所阻断。结论:SP可有效激活肉芽组织成纤维细胞NF-κB,该作用是通过NK-1受体途径实现的。     

核因子-κB途径介导脑源性神经营养因子促进多发性骨髓瘤细胞分泌基质金属蛋白酶-9

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)通过核转录因子(NF)-κB诱导多发性骨髓瘤(MM)细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9分泌的具体机制.方法 培养人MM细胞株RPMI 8226,使用明胶酶谱法检测.RPMI 8226细胞分泌的活性MMP-2、MMP-9水平的变化,用化学发光凝胶电泳迁移率分析(EMSA)法检测RPMI 8226细胞中NF-κB的活性.结果 以25、50、100和200μg/L浓度的BDNF刺激RPMI 8226细胞24 h后,其活性MMP-9的分泌水平分别为2.03±0.48、2.99±0.46、4.63±0.62和5.62±1.29μg/L,均明显高于对照组(P＜0.01),而MMP-2的表达在各浓度组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).当BDNF作用浓度为100μg/L时,预先分别用1 mmol/L的NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂(PDTC)和500 nmol/L的BDNF高亲和力受体TrkB的酪氨酸抑制剂K252a处理15 min和1 h后,K252α和PDTC(P＜0.001)均能显著抑制RPMI 8226细胞MMP-9的分泌(光密度值分别为867.52±101.81、727.98±92.05,对照组为1159.01±233.15,与对照组比,P值均＜0.01).随着BDNF浓度的升高,NF-κB的活化作用明显增强,于100μg/L BDNF加K252α预处理1 h后,6、12、24 h的3个时间点K252α均能明显抑制BDNF对NF-κB的激活作用(P＜0.05),且随BDNF作用时间的延长而增强.结论 BDNF促进MM细胞血管新生的能力可能是通过NF-κB信号转导途径激活MMP-9而实现的.     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

31例误诊哮喘原因分析

目的通过对中央气道不全性梗阻和支气管结核、术后痰栓形成误诊为支气管哮喘的分析,探讨误诊原因及正确诊断的方法。方法对误诊为支气管哮喘的3l例患者的临床资料进行分析。结果临床特征以刺激性咳嗽为主,其次为活动后胸闷、气促,肺部闻及哮鸣音,胸部影像学多无特征性改变或极易漏诊,支气管舒张试验阳性率低,诊断前缺乏气管镜及病理检查,均误诊为支气管哮喘。结论中央气道不全梗阻性病变或炎性病变包括支气管结核、术后痰栓形成时原发疾病症状不典型,肺部影像学检查无异常表现或极易漏诊,故该类以表现为咳嗽、喘息、活动后胸闷,进而出现严重呼吸困难的患者常被误诊为支气管哮喘,延误诊治。支气管镜及病理检查再结合肺CT是鉴别诊断的重要方法。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

乳腺叶状肿瘤的影像分析

目的 分析乳腺叶状肿瘤的X线钼靶摄片和超声表现.方法 收集经手术病理证实的19例乳腺叶状肿瘤,术前均行超声检查,其中15例行X线钼靶摄片,回顾分析其临床特点和影像学表现.结果 19例乳腺叶状肿瘤中,良性8例,交界性6例,恶性5例.15例患者X线钼靶摄片中病灶均为高密度孤立肿块影,呈圆形(8例)或浅分叶状(7例),边界清晰(10例)或部分不清(5例),部分肿块周边见"晕"征(4例).超声检查6例发现囊性变,6例表现为后方回声增强.病灶为圆形(8例)、浅分叶状(8例)或有角状突起(3例).所有病例均未发现腋下转移淋巴结及周围组织浸润等恶性征象.结论 认识乳腺叶状肿瘤的病理类型和临床特点,结合影像表现综合分析,可提高术前诊断率.     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。