乙型肝炎血清免疫学标志物与HBV DNA定量检测的相关性

目的探讨乙型肝炎病毒血清免疫学标志物(HBV-M)与HBV DNA定量的相关性。方法采用ELISA法和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术分别对245例乙型肝炎患者血清进行HBV-M的定性检测及HBV DNA的定量检测。结果 ELISA检测结果为HBsAg(+)HBsAb(-)HBeAg(+)HBeAb(-)HBcAb(+)共83例(大三阳),其中77例(92.78%)为HBVDNA阳性(HBV DNA>1.0×102copy/mL)。ELISA检测结果为HBsAg(+)HBsAb(-)HBeAg(-)HBeAb(+)HBcAb(+)共150例(小三阳),其中78例(52.00%)为HBV DNA阳性(HBV DNA>1.0×102copy/mL)。大三阳组与小三阳组HBV DNA定量检测的差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果为HBsAg(+)HBeAg(+)的患者体内HBV DNA阳性率为96.55%,且81.60%的HBV DNA在1.0×105~1.0×108copy/mL。结论 HBV DNA的含量与HBV-M检测结果具有相关性,两者联合,对临床诊断、治疗及预后有重要的意义。     

HBsAg阴性HBV DNA阳性的无偿献血者血清学模式及其意义

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性,HBV DNA阳性的无偿献血者的其他乙型肝炎病毒标志物(HBVM)模式,分析HBsAg阴性血液的安全性。方法应用化学发光法检测乙型肝炎5项标志物;应用实时荧光PCR技术检测HBV DNA。结果 100 281例HBsAg阴性献血样本,HBV DNA检测总阳性率为0.71‰,在HBVDNA阳性的献血者中,单独HBsAb(+)阳性的模式比例是6.56%,乙肝5项均为阴性的模式组和HBsAb(+)、HBcAb(+)模式组分别占18.03%和13.11%,HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占14.75%,HBcAb(+)模式组占27.87%,HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占19.67%。结论 HBsAg阴性的血液仍可能存在低水平的HBV复制,核酸检测(NAT)能增加血液筛查的检出率,降低输血残余风险率,保证血液安全。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床分析

目的探讨乙型肝炎病毒前S1抗原(HBV-preS1)、乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)与乙型肝炎病毒(HBV)表面标志物(HBV-M)的关系。方法从临床乙型肝炎标本中筛选出乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性病例475例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV标志物5项、HBV-PreS1抗原,HBV-DNA采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法。结果 475例HBsAg阳性标本中前S1抗原及HBV-DNA阳性率分别为54.7%(260/475)和61.1%(290/475),两组相比差异无统计学意义(P>0.05);159例HBeAg阳性标本中,前S1抗原及HBV-DNA阳性率分别为89.3%(142/159)和97.5%(155/159),两组相比差异无统计学意义(P>0.05);而HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)和HBsAg(+)HBcAb(+)两组,前S1抗原与HBV-DNA的检出率则分别为41.3%、35.0%和46.5%、41.3%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PreS1抗原与HBV呈不同程度相关性,是病毒感染复制的指标,同时在乙型肝炎诊断和治疗中具有重要临床意义。     

HBcAb单项或HBcAb与HBeAb二项阳性时HBsAg定量检测分析

目的用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物,若乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)单项或HBcAb与乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)二项阳性,再进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量和HBV载量测定,了解HBV携带及病毒复制情况。方法 ELISA检测HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,选取1 098例HBcAb阳性、966例HBeAb和HBcAb二项阳性样本及832例HBV标志物全阴性标本为对照,用化学发光法定量复检HBsAg,并用PCR的方法检测HBV载量。结果 1 098例HBcAb单项阳性检测出HBsAg定量436例(39.7%)、PCR-DNA230例(20.9%);966例HBeAb、HBcAb二项阳性的标本分别定量检测出HBsAg定量387例(40.1%)、PCR-DNA 212例(21.9%),HBV标志物全阴性的HBsAg定量和PCR-DNA比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBV标志物时,若只HBcAb阳性或HBcAb与HBeAb二项阳性,仍可检出表面抗原和病毒的复制,需做进一步的检测,以免漏检,造成医疗风险。     

时间分辨荧光免疫法定量检测乙肝病毒血清标志物的临床意义

目的探讨时间分辨荧光免疫法用于定量检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时对196例患者HBV血清标本进行5项指标检测。结果 TRFIA法检测患者标本乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的阳性率分别为59.7%、24.5%、25.5%、29.1%、78.6%。ELISA法检测患者标本HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb的阳性率分别为52.1%、18.4%、21.4%、23.5%、67.9%。TRFIA法检测的阳性率均显著高于ELISA法(P<0.05)。结论 TRFIA法测定乙肝病毒血清标志物的相对灵敏度高,的可为临床疗效观察及乙肝疫苗的接种提供科学依据。     

Elecsys HBsAg COI灰区标本再分析探讨

目的探讨电化学发光免疫分析(ECLIA)法乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)cut off指数(COI)灰区标本再次进行确证分析的临床价值。方法被检血清标本均来自2014年1月至2015年3月该院就诊的门诊和住院患者,应用Elecsys HBsAg确证试验对213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本进行再分析并对受检标本HBV血清标志物两对半(以下简称乙肝两对半)模式进行回顾性分析。结果 213份标本中ECLIA法检测HBsAg COI结果为0.80~0.99 31例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性2例[6.45%(2/31)];HBsAg COI结果为1.0~1.99弱反应性标本93例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性92例[98.92%(92/93)];HBsAg COI结果为2.0~6.99 89例,经Elecsys HBsAg确证试验均为阳性,阳性率为100.00%(89/89);213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本经Elecsys HBsAg确证试验阳性183例,检出6种乙肝两对半模式,其中HBsAg、HBV e抗体(HBeAb)、HBV核心抗体(HBcAb)阳性模式155例,占大多数[72.77%(155/213)];经Elecsys HBsAg确证试验阴性30份标本中检出7种乙肝两对半模式,其中HBeAb、HBcAb阳性模式16例,检出率为7.51%(16/213)。结论 ECLIA法乙肝两对半定量检测HBsAg临界或较低水平的弱反应性标本、乙型肝炎感染模式不常见的标本时需经Elecsys HBsAg确证试验再分析以防止假阴性或假阳性结果的出现。     

HBsAg阴性献血者隐匿性HBV感染的血清学特征及其与病毒载量的关系

目的了解苏州地区HBsAg阴性合格献血者隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志物的状况及其与病毒载量水平的相关性,为采供血机构制定血液安全保障措施提供参考依据。方法使用两种ELISA试剂对献血者血液进行HBsAg筛查,阴性标本应用核酸检测技术进行HBV DNA检测,收集HBsAg阴性HBV DNA阳性献血者标本进行乙肝血清标志物检测及HBV DNA实时荧光PCR定量分析。结果两种ELISA检测均为HBsAg阴性的标本有29 890份,其中31份为HBV DNA阳性。31份HBsAg阴性的HBV DNA阳性标本经化学发光检测,发现其中3份为HBsAg假阴性标本,另28份为HBsAg阴性HBV DNA阳性。28份标本中有2份(7.1%)为疑似"窗口期"感染,26份(92.9%)为疑似"隐匿性"感染,经核酸检测后HBV残余风险可降低9.37/万。26份隐匿性感染标本中乙肝血清学以HBsAb、HBcAb共阳性及单独HBcAb阳性两种模式为主;HBsAb阴性组的HBV DNA载量水平显著高于HBsAb阳性组(P0.05)。结论 ELISA法检测HBsAg阴性的献血者经输血传播HBV的残余风险依然存在,感染状况多以隐匿性感染为主。核酸检测的应用能提高血液的安全性。HBsAg阴性合格献血者隐匿性HBV感染呈现特定的血清学模式,其中HBsAb阴性人群可能存在较高的输血传播HBV的风险。     

HBV DNA定量检测及其与HBV标志物的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA与不同类型HBV免疫标志物之间的关系,为临床诊断和治疗提供有价值的判断标准。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对220例血清标本进行HBV免疫标志物检测,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA含量。结果 96例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性(+)标本中HBV DNA阳性检出率为91.7%(88/96);100例HBsAg(+)/抗-HBe(+)抗-HBc(+)标本中HBV DNA阳性检出率为20.0%(20/100)。HBsAg阳性组与HB-sAg阴性组、HBeAg阳性组与HBeAg阴性组的DNA载量比较差异有统计学意义。结论 FQ-PCR可以检测HBV感染的真实性和复制情况,其与ELISA法检测HBV血清标志物相结合,对乙型肝炎的临床诊断及治疗方案的选择、疗效观察及预后判断具有极其重要的作用。     

乙型肝炎病毒前S1抗原的检测及其与病毒复制的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(PerS1-Ag)的检测及其与病毒复制的关系。方法用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测275例血清中的HBV-DNA,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中前S1抗原和乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M),同时进行PerS1-Ag在乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)(+)组和HBeAg(-)组中HBV-DNA检测率的分析。结果 PerS1-Ag在HBeAg(+)组中的检出率明显高于HBeAg(-)组,差异有统计学意义(P<0.05);在HBsAg(+)、抗-HBc(+)组中的检出率高于在HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)组中的检出率,但差异无统计学意义(P>0.05);PerS1-Ag在HBeAg(+)组和HBV-DNA(+)组中的检出率分别为93.75%、96.88%,二者差异无统计学意义(P>0.05),85例HBV-DNA PCR(+)标本中,PreS1(+)48例,HBeAg(+)32例。结论 PerS1-Ag与HBV复制的关系密切,作为HBV复制的一个新的标志物,PerS1-Ag比HBeAg更优越。     

ECLIA法定量检测乙肝血清标志物的临床应用

目的：探讨采用电化学发光免疫分析（ECLIA）法检测某院医务人员乙型肝炎（乙肝）血清标志物（HBV‐M）及HB‐sAg临界或弱反应标本进行ElecsysHBsAg确证试验的临床应用价值。方法对1847例血清标本经RocheModularE170进行HBV‐M半定量分析,并对所有HBsAg处于临界或低浓度的标本进行了确证试验分析。结果检出HBsAg阳性标本共52例,其中HBsAg、HBeAg、HBcAb结果有反应性3例,检出率0．16％;HBsAg、HBeAb、HBcAb结果有反应性47例,检出率2．54％;HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb结果有反应性1例,检出率0．05％;HBsAg、HBcAb结果有反应性1例,检出率0．05％。HB‐sAg阴性标本共1795例,其中单HBsAb结果有反应性538例,检出率29．13％;HBsAb、HBeAb、HBcAb结果有反应性330例,检出率17．87％;HBsAb、HBcAb结果有反应性276例,检出率14．94％;HBsAb、HBeAb结果有反应性2例,检出率0．11％;HBe‐Ab、HBcAb结果有反应性14例,检出率0．76％;单HBcAb结果有反应性60例,检出率3．25％;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBe‐Ab、HBcAb结果均无反应性575例占受检人数的31．13％。将HBsAg处于临界或低浓度的标本进行了确证试验,半定量试验COI结果为0．80～0．99的8例标本,经ElecsysHBsAg确证试验结果均为无反应性;1例半定量试验COI结果为3．81的标本,经ElecsysHBsAg确证试验结果为阳性;5例半定量试验COI结果分别为9．13、10．86、11．15、11．11、10．42的标本,经ElecsysHB‐sAg确证试验结果均为阳性。HBV‐M半定量检测与ElecsysHBsAg确证试验的符合率为100％。结论ECLIA法在HBV‐M半定量检测及确证试验过程中具有重要临床应用价值,为乙型肝炎临床诊断及病情的治疗监测提供了科学的实验室依据。     

麻疹病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒多重RT-PCR法的建立

摘要：目的：建立针对麻疹病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒的多重RT-PCR 检测方法。 方法：分别根据麻疹病毒M基因、风疹病毒E基因和腮腺炎病毒M基因设计3 对引物,建立同时检测3种病毒的多重RT-CR,并评估其灵敏度和特异性。 结果：建立的多重RT-PCR可同时或分别扩增的3种病毒的111 bp、352 bp和274 bp基因片段,其灵敏度分别达到2.1、2.1、2.2 lg_{CCID 50}/mL;而与脊髓灰质炎病毒和乙型脑炎病毒无交叉反应。 结论: 建立的多重RT-PCR可用于麻疹病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒的快速检测。     

Poxvirus oncolytic virotherapy

Introduction: Over the last decade, advances in biological therapies have resulted in remarkable clinical responses for the treatment of some previously incurable cancers. Oncolytic virotherapy is one of these promising novel strategies for cancer therapy. A successful oncolytic virus promotes tumor cell oncolysis and elicits a robust long-term anti-tumor immunity.

Areas covered: Oncolytic poxviruses (Vaccinia virus and Myxoma virus) demonstrated encouraging results in multiple pre-clinical tumor models and some clinical trials for the treatment of various cancers. This review summarizes the advances made on poxvirus oncolytic virotherapy in the last five years.

Expert opinion: Many challenges remain in poxvirus oncolytic virotherapy. Two key goals to achieve are enhancing the efficiency of viral delivery to tumor sites and overcoming local tumor immune-evasion. Additional efforts are necessary to explore the best combination of virotherapy with standard available treatments, particularly immunotherapies. By addressing these issues, this new modality will continue to improve as an adjunct biotherapy to treat malignant diseases.     

Emergence of amantadine-resistant influenza A viruses: epidemiological study

At present, three licensed antiviral influenza agents are available in Japan: amantadine, zanamivir, and oseltamivir. These antiviral agents can be used for controlling and preventing influenza, but they are not a substitute for vaccination. Amantadine is an antiviral drug with activity against influenza A viruses, but not influenza B viruses. Persons who have influenza A infection and who are treated with amantadine can shed sensitive viruses early in the course of treatment and later shed drug-resistant viruses, especially after 5–7 days of therapy. Such persons can benefit from therapy even when resistant viruses emerge. In screening for amantadine susceptibility, enzyme-linked immunoassays, plaque reduction assays, and TCID₅₀/0.2ml titration are employed. The molecular changes associated with resistance have been identified as single-nucleotide changes, leading to corresponding amino acid substitutions in one of four critical sites, amino acids 26, 27, 30, and 31, in the transmembrane region of the M2 protein. The polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism analysis method is quite useful. Resistant viruses have been circulated in outbreak situations at nursing homes where amantadine was used not only for treating influenza virus infection but also for Parkinson's disease. Measures should be taken to reduce contact, as much as possible, between persons taking and those not taking antiviral drugs for treatment or chemoprophylaxis.     

麻疹病人咽拭子标本的麻疹病毒分离结果

目的收集麻疹病人的咽拭子标本进行麻疹病毒分离,为我国麻疹病毒流行毒株基因型的鉴定提供更多的分离株。方法2005年5￣8月,选择南京市第二医院收治入院的疑似麻疹病人109例采集了咽拭子标本,接种EB病毒转化的狨猴淋巴母细胞(B95a细胞)。结果分离到麻疹病毒46株,分离阳性率为42.20%。结论此次南京第二医院与江苏省CDC合作分离到麻疹野病毒,标本量大,阳性率高,分析原因,与采集的时间、操作人员的技术及冷链储运和及时运输密切相关。     

臭氧水对水泡性口炎病毒灭活效果的检测

经检测，在２０～２６℃室温下，浓度为５０±１ｍｇ／Ｌ的臭氧水溶液，作用３０ｓ，可灭活悬液中水泡性口炎病毒；用其冲洗、作用１ｍｉｎ，可灭活干燥于玻璃片上的水泡性口炎病毒。     

Replication and expression of a recombinant Sindbis virus in mosquitoes

A recombinant Sindbis virus, TE/3'2J/ANTI-S, containing LaCrosse virus small segment cDNA in antisense orientation, was inoculated into Aedes triseriatus mosquitoes. Virus replication and LAC-ANTI-S RNA expression were analysed temporally and spatially. TE/3'2J/ANTI-S virus titre peaked at 5.0 log₁₀ TCID₅₀ in heads 6–9 days post infection (p.i.) and decreased to 3.4 log₁₀ TCID₅₀ by 37 days p.i. Salivary glands contained 4.4 log₁₀ TCID₅₀ of virus 6 days p.i.; titres were lower in other organs. LAC-ANTI-S RNA levels paralleled virus titre. SIN E1 antigen was detected in many mosquito organ systems, but in specific cells and tissues of some organs. TE/3'2J/ANTI-S virus exhibited different cellular tropisms in salivary glands of Aedes and Culex mosquitoes.     

艾滋病病毒感染者合并丙型肝炎病毒感染的临床研究

目的　探讨人类免疫缺陷病毒 (HIV)和丙型肝炎病毒 (HCV)混合感染的临床特点。方法　收集 2 8份HIV合并HCV感染血清、血浆和 2 4份单纯HIV阳性血清、血浆。进行HIV、HCV载量、T淋巴细胞、血常规、肝功能等检测 ,分析 2组实验室检测指标的差别。结果　HIV合并感染者的HCV载量与各项检测指标无明显相关性。HIV感染组的HIV载量 (4 8± 0 9lg拷贝 /ml)高于HIV合并感染组 [(4 1± 1 0 )lg拷贝 /ml,P <0 0 5 ],而前者红细胞和血红蛋白值低于后者 (P <0 0 5 )。HIV合并感染组的丙氨酸转氨酶异常者 [(87 0± 6 9 6 )U/L ,占 6 4 % ]明显高于HIV感染组 [(2 0 6± 13 6 )U/L ,占 10 % ,P <0 0 1]。结论　HIV合并感染组的HIV载量低于HIV感染组 ,而肝功能损害明显重于HIV感染组 ,HCV载量与各项实验室指标无明显相关性。     

丙型肝炎病原学不同检测方法的临床应用价值对比分析

目的探讨抗体、抗原及核酸检测在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法收集2012年1月到2013年12月珠海市香洲区人民医院筛查抗-HCV抗体阳性标本48份。用3种抗体试剂、2种抗原试剂及HCV-RNA复核检测结果。结果复核阳性丽珠37份,科华36份,新创36份,莱博21份,康润18份,HCV-RNA 28份。3种抗体试剂复核均阴性的10份标本中检出HCV-RNA阳性1份,莱博抗原阳性3份,康润抗原阳性1份。3种抗体灵敏度均为96.4%,阳性预测值为72.9%~75.0%;2种抗原试剂灵敏度分别为40.0%和83.3%,阳性预测值分别为57.0%和83.3%。结论丙型肝炎病毒抗体检测具有较高的诊断灵敏度,但诊断特异性较低,对抗-HCV抗体阳性标本采用抗体加抗原模式进行复核对丙型肝炎诊断具有重要的价值,对有疑问的标本再用HCV-RNA进行确证,可预防误诊、漏诊。     

自噬与乙型肝炎病毒复制的关系

目的：探究自噬与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制之间的相互关系。方法利用 HepG2细胞,转染绿色荧光标记的微管相关蛋白轻链3(GFP-LC3),分别在正常和饥饿条件下培养,另共转染 HBV WT 和GFP-LC3,正常条件培养,免疫荧光观察细胞自噬;分别转染1.3 mer HBV 野生型质粒(HBV WT)与 HBV 突变型(HBV X-)质粒,正常和饥饿两种条件下培养,蛋白印迹检测自噬相关蛋白 LC3和乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)的表达;细胞转染 HBV WT 后,分别正常条件培养(对照组),无血清饥饿培养(饥饿组),加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)培养(3-MA 组),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎 e 抗原(HBeAg)的含量。结果转染 HBV WT 质粒的细胞内自噬荧光颗粒较对照组明显增加发生自噬的细胞比例分别为13%和2%;饥饿组 HBsAg 含量(1.856±1.415)较对照组(1.531±0.944)升高,HBeAg 含量(0.533±0.391)较对照组(0.334±0.110)升高,差异具有统计学意义(P <0.05);自噬抑制剂组 HBsAg 含量(1.184±0.759)较饥饿组(1.856±1.415)降低,HBeAg 含量(0.306±0.130)较饥饿组(0.533±0.391)降低(P <0.05);蛋白印迹显示,转染HBV WT 质粒的细胞中 LC3蛋白表达较 HBV X-组增高,且在饥饿条件下,HBc 蛋白的表达增高。结论乙型肝炎病毒可诱导细胞自噬的发生,且自噬可促进乙型肝炎病毒的复制。     

住院患儿急性下呼吸道感染病毒学调查

目的了解住院患儿急性下呼吸道感染（acute lower respiratory infection,ALRI）的病毒感染状况,为临床儿童ALRI提供病毒病原学诊断依据。方法选择2008年10月至2009年5月在九江市妇幼保健院呼吸内科住院的ALRI患儿179例,取其入院当天静脉血,进行呼吸道病毒Ig M检测,包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IV）、副流感病毒（PIV）,并对检测标本阳性的病例进行统计分析。结果 179例送检标本,阳性39例,占21.7%（39/179）。在39例阳性标本中,RSV34例、占87.2%,ADV1例、占2.6%,IV2例、占5.1%,PIV2例、占5.1%。RSV感染的发病高峰在1、12月份,RSV感染多见于3岁以下儿童,男、女发病比例为2.09∶1。结论本院2008年10月至2009年5月住院患儿中,引起ALRI的病毒病原体以RSV为主,IV和PIV次之。