甲酰四氢叶酸拮抗乙醇发育毒性的体外小鼠胚胎实验研究

目的探讨甲酰四氢叶酸对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用植入后全胚胎培养技术，将GD8．5的ICR小鼠胚胎用乙醇（4．0g／L）染毒，然后用不同浓度甲酰四氢叶酸（10^-5mol／L、10^-4mol／L、10^-3mol／L）干预。培养48h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果随甲酰四氢叶酸干预浓度的增高，反映胚胎生长发育的指标得分与阳性对照组相比，均有不同程度的提高。其中，10^-5mol／L甲酰四氢叶酸干预后，后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉系统形态分化方面有明显提高，与阳性对照组相比，差异有显著性（P〈0．05）。10^-4mol／L甲酰四氢叶酸对胚胎颅臀长、头长明显增长，10^-3mol／L对体节数明显增加，与阳性对照组相比，差异均有显著性（P．〈0．05）。结论甲酰四氢叶酸可能有拈抗乙醇发育毒性的作用。     

乙醇对小鼠胚胎脑发育毒性的体外实验研究

目的　探讨乙醇的脑发育毒性及其可能的作用机制。　方法　采用植入后全胚胎培养(whole embryo culture,WEC)和微团培养技术。　结果　全胚胎培养结果显示 ,随着乙醇浓度的增加(1.0 0 ,2 .0 0 ,4.0 0 g/ L) ,胚胎脑畸形率明显上升 ,呈剂量反应关系 ,最常见的脑畸形为脑神经管未闭。中脑细胞微团培养结果表明 ,随着染毒剂量的增加 ,不同浓度乙醇 (1.0 0～ 16.0 0 g/ L )对中脑细胞的增殖和分化有明显的抑制作用 ,呈剂量反应关系 ,ID5 0 (50 %细胞分化抑制浓度 )、IP5 0 (50 %细胞增殖抑制浓度 )分别为 8.89g/ L和 12 .2 1g/ L。　结论　乙醇抑制胚胎脑细胞的增殖和分化可能是器官形成期乙醇脑发育毒作用的重要机制之一     

儿童维生素B_(12)缺乏症的研究进展

儿童因其生理、病理特点,发生维生素B12(VB12)缺乏时其临床症状和预后不同于成人。儿童VB12缺乏典型症状临床少见,而常表现为一些非典型症状。该症的非典型血液系统改变和不可逆的神经精神改变影响儿童体格和神经系统的正常发育,故儿童VB12缺乏症逐步受到人们的重视。诊断维生素B12(VB12)缺乏症经典的方法主要依赖血液系统出现巨幼红细胞性贫血,或者依据中性粒细胞分叶过多诊断轻度VB12缺乏。近年由于实验室技术的发展出现新的诊断亚临床VB12缺乏的检测方法。该文综述了近年来儿童VB12的吸收及代谢,VB12缺乏症的病因、非典型VB12缺乏症的临床表现和诊断方面的研究进展。     

维生素B_(12)影响同型半胱氨酸对大鼠认知能力的作用

目的:观察同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠空间认知能力的影响及维生素B12(VB12)的干预作用。方法:大鼠随机分为对照组,实验组及VB12干预组。测定各组血浆Hcy,血清VB12水平和Y迷宫学习记忆情况,并对大鼠海马区进行乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)免疫组化分析。结果:实验组血浆Hcy水平比对照组升高,并出现空间认知障碍,且两组差异有显著性;实验组海马区AChE阳性纤维减少,呈弱阳性(+)。VB12干预组血浆Hcy水平与对照组比无明显变化,但VB12升高,无空间认知障碍发生;VB12干预组海马区有大量的AChE纤维,呈强阳性(+++)。结论:高同型半胱氨酸可引起大鼠空间认知障碍,而VB12可降低Hcy水平并干预空间认知障碍的发生。     

母乳中叶酸与维生素B_(12)研究进展

作为合成DNA、RNA重要辅酶的叶酸和维生素B12对生命早期的生长发育非常重要。母乳中叶酸、维生素B12缺乏可能会造成新生儿出现相应的营养素缺乏症状,引起生长发育迟缓、巨幼红细胞贫血、血液或神经系统异常等多种症状。母乳叶酸、维生素B12的检测方法目前仍不明确。本文综述了母乳叶酸、维生素B12的存在形式、功能及检测方法的研究进展,为今后的研究提供依据。     

维生素B_(12)对肉鸡增重和造血机能的影响

目的:探讨维生素B12(VB12)对肉用雏鸡生长发育和造血机能的作用。方法:在全植物性日粮中添加不同剂量的VB12 饲喂0～3 w龄商品代Arbor Acres肉用雏鸡,测定肉用雏鸡的体重生长(BWG)和血液机能状态指标。结果:日粮VB12缺乏能导致肉用雏鸡血液红细胞减少、血红蛋白含量降低、红细胞体积增大、血小板含量降低,发生巨幼红细胞性贫血。在日粮中添加0.008 mg/kg VB12将极显著提高肉用雏鸡的增重和饲料转化效率。添加0.016 mg/kg VB12后,肉用雏鸡的造血机能得到显著改善,血液中红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞压积(PCV)和血小板含量(PLT)均显著提高(P <0.05),平均红细胞体积(MCV)显著减小(P <0.05)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)显著降低(P <0.05)。并且肉用雏鸡的BWG、 RBC、Hb、PCV、PLT、MCV和MCH与日粮VB12添加量存在显著的相关关系。结论:VB12缺乏将导致肉用雏鸡生长发育抑制和造血机能障碍;0～3 w龄肉用雏鸡维持正常造血机能的VB12适宜需要量为0.020～0.030 mg/kg。     

氯化三丁基锡对体外培养小鼠胚胎毒性研究

目的观察氯化三丁基锡的体外培养小鼠胚胎毒性。方法采用全胚胎培养技术,将8.5 d龄昆明种小鼠胚胎置入含有不同浓度氯化三丁基锡的大鼠离心血清中旋转培养48 h,观察体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的变化。结果氯化三丁基锡在0.05 mg/L以上时能诱发卵黄囊生长和血管分化不良,胚胎发育异常率增高;高浓度组能诱发脑小、心脏畸形(心小和心包积液)、前肢芽小或无、无后肢芽。结论体外实验条件下,氯化三丁基锡对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性。     

外源性核苷酸拮抗乙醇发育毒性的体外研究

目的探讨外源性核苷酸对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用啮齿类动物植入后全胚胎培养技术,将胎龄8.5 d的ICR小鼠胚胎以4.0g/L乙醇染毒,然后用不同剂量(0.16mg/L,4mg/L,100mg/L)的外源性核苷酸干预。培养48 h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果剂量为0.16mg/L及100mg/L的核苷酸干预可使胚胎颅臀长增大,体位、后神经管评分明显升高,卵黄囊直径增大,且与阴性对照组相比差异无统计学意义。中剂量(4mg/L)核苷酸干预还可使头长增大,对体位、心脏、后神经管、后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉、前肢芽及后肢芽均有改善,且与阴性对照组相比差异无统计学意义。结论外源性核苷酸可能有拮抗乙醇发育毒性的作用。     

维生素A缺乏对小鼠胚胎Hox基因表达的影响

目的：观察维生素Ａ（ＶＡ）缺乏对小鼠胚胎ＨｏｘＣ４（３．５）和ＨｏｘＤ１０（４．５）基因表达量的影响。方法：初断乳的昆明小鼠,雌鼠４０ 只均分为正常对照组（Ａ）和维生素Ａ缺乏组（Ｂ）,分别饲含ＶＡ４０００ ＩＵ／ｋｇ 饲料和ＶＡ ０ ＩＵ／ｋｇ 饲料。雄鼠饲以普通饲料。在饲养的第１７ 周按雌∶雄＝ ２∶１ 合笼交配。在怀孕的第１２ 天和第１４ 天,分别对孕鼠颈椎脱臼处死,立刻剖腹取出胎鼠,迅速置于液氮中速冻后置于－ ７０℃冰箱保存。用地高辛标记的探针,采用原位杂交方法探测小鼠胎儿ＨｏｘＣ４（３．５）和ＨｏｘＤ１０（４．５）基因ｍ ＲＮＡ含量。结果：ＶＡ缺乏时,ｍ ＲＮＡ的含量明显减少。结论：ＶＡ缺乏导致Ｈｏｘ 基因表达量下降,从而影响小鼠胚胎的正常发育。     

重组人钙调素对小鼠早期胚胎体外发育的影响

目的:探讨外源重组人钙调素(recombinant human calmodulin rhCAM)对小鼠早期胚胎体外发育的影响。方法:小鼠超数排卵,收集2-细胞胚胎放入含有不同浓度rhCAM的CZB培养液中,观察并记录胚胎形态及测定囊胚细胞数。结果:HCG(human chorionic gonadotropin)注射120h后,20μg/mlrhCAM添加组囊胚率、扩张囊胚率和孵化囊胚率显著高于对照组(P<0.05),200μg/mlrhCAM添加组囊胚率、扩张囊胚率和孵化囊胚率显著低于其它各组(P<0.05)。各组囊胚细胞计数无显著差异。结论:rhCAM可促进早期胚胎体外发育,但高浓度rhCAM抑制胚胎发育。     

人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的　探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法　采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果　随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论　在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。     

全反式视黄酸对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的为研究全反式视黄酸（atRA）的发育毒性及其可能的作用机制，本研究采用植入后体外全胚胎培养方法研究atRA对小鼠胚胎生长发育的影响。方法孕8．5日龄小鼠胚胎移植于atRA终浓度为0、0．01、0．1、0．2、0．4、1．0、10．0μmol／L的全胚胎培养基中，体外连续培养48h，观察atRA对胚胎发育和器官形态分化的影响。结果atRA可影响小鼠胚胎在体外的生长发育，并呈现剂量-效应关系；0．1μmol／L组，atRA明显影响卵黄囊直径、颅臀长、前脑、中脑、听觉系统、视觉系统、心脏、体位和前肢芽等指标，与对照组比较，差异有显著性（P〈0．05）；≥0．20μmol／L组，卵黄囊体积减小、表面皱缩、血管减少及分化程度降低，神经系统、心脏、腮弓和颅面等多种器官出现畸形，所有器官形态分化指标均显著低于对照组（P〈0．05）。结论atRA有致畸性和胚胎毒性，在器官形成期可以引起神经系统、心脏、腮弓和颅面等多种器官的发育畸形。     

维生素C对甲醛胚胎发育毒性抑制作用

目的 探讨维生素C(VC)对甲醛诱导胎鼠发育毒性的影响.方法 应用体外全胚胎培养模型,观察100μg/mL VC对终浓度为9,27,81 μmol/L甲醛诱导昆明种小鼠胚胎发育毒性的影响.结果 与对照组比较,9μmol/L甲醛可使胚胎头长、颅臀长、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量分别升高到(1.66±0.21),(3.48±0.40)mm,(47.70±2.12)me,/(g·prot),(4.27±0.62)nmol/(mg·prot),差异有统计学意义(P<0.05);27 μmol/L甲醛使胚胎脏层卵黄囊(VYS)直径、头长、颅臀长、体节数、GSH含量分别下降到(4.35±0.65),(1.48±0.30),(3.19±0.43)mm,(25.2±1.2)对,(40.25±4.38)mg/(g·prot),MDA含量升高到(6.29±0.47)nmol/(mg·prot),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);VC能明显改善上述指标,但与对照组比较差异无统计学意义(P<0.01);VC不能明显改善81 μmol/L甲醛诱导的毒性损伤.结论 VC对一定剂量范围内的甲醛胚胎毒性具有明显抑制作用.     

维生素B12缺乏对女性和儿童健康的影响

维生素B12是维持人体正常代谢和机能所必需的一种微量营养素.B12缺乏对人体健康的影响已成为一个新的医学研究热点.该文对近年来有关B12缺乏和神经管畸形、流产、早产、先兆子痫等不良妊娠结局和妊娠并发症的关系、B12缺乏对新生儿和婴幼儿的影响、B12缺乏和乳腺癌的关系及B12缺乏和其他疾病的关系等的研究进行了综述,以期为进一步的研究和干预提供思路和依据.     

应用植入后大鼠体外全胚胎培养研究酒精对胚胎发育的影响

为探讨孕期饮酒对胚胎生长发育的影响,应用植入后全胚胎培养（ｗｈｏｌｅｅｂｒｙｏｃｕｌｔｕｒｅ,ＷＥＣ）进行研究,将孕９．５天龄鼠胚胎移植于酒精终浓度分别为０、０．４０、１．００、２．００、４．００ｇ／Ｌ的全胚胎培养基中,于体外培养４８小时,观察酒精对胚胎发育和器官形态分化影响。     

同型半胱氨酸对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

采用着床后体外全胚胎培养方法 ,观察同型半胱氨酸 (homocysteine,HCY)对大鼠胚胎生长发育的影响。将孕 9.5日龄大鼠胚胎移植于 HCY终浓度为 0、0 .15、1.5、2 .0、4.0、6 .0、8.0、10 .0 mm ol/L的全胚胎培养基中 ,于体外培养 48小时 ,观察 HCY对胚胎发育和器官形态分化的影响。结果显示 :HCY可影响大鼠胚胎在体外的生长发育 ,并呈现剂量 -效应关系 ;随着 HCY浓度的增加 ,卵黄囊体积减小、表面皱缩、血管减少及分化程度降低 ;胚胎生长发育迟缓并逐渐加重 ;同时伴有形态分化异常 ,出现多种畸形 ,主要畸形部位为神经系统和心脏等。上述结果提示 :HCY可能对胚胎有直接致畸作用 ,亦可能通过引起卵黄囊功能障碍而导致发育毒性。     

甲基维生素B_（12）、维生素B_（12）降低甲基汞含量及免疫与行为毒性作用的研究

研究发现２．０～３．０ｍｇ／ｋｇ甲基维生素Ｂ_（１２）、维生素Ｂ_（１２）均可使孕鼠脑、肝、肾中甲基汞含量明显低于甲基汞组，而对胎仔脑及胎盘中甲基汞含量有明显减少。甲基维生素Ｂ_（１２）、维生素Ｂ_（１２）并可增强机体特异性细胞免疫功能与机体非特异性免疫功能，可改善动物多种行为不良作用。     

Dietary source of vitamin B12 intake and vitamin B12 status in female elderly Koreans aged 85 and older living in rural area

Recently, we found and analyzed vitamin B₁₂ in some Korean traditional plant foods which had not reported, yet. This study was to investigate vitamin B₁₂ intake and its dietary sources and the vitamin B₁₂ status in the very old elderly Koreans. We measured serum vitamin B₁₂ level and estimated the amounts of vitamin B₁₂ intake from different dietary sources in female elderly Koreans aged 85 and over who had consumed a relatively low animal traditional diet for the whole life. The average age of the subjects (n = 127) was 98.0 years (85-108 years). The assessment on energy and nutrient intake involved a one-day 24-hour recall, and serum vitamin B₁₂ concentration was measured by radioimmunoassay. Overall diet pattern was not different between the 85-99 yr-old group and centenarians, except centenarians were taking more dairy product. The average ratio of plant food to animal food consumption was 87.5:12.5 in weight. The average vitamin B₁₂ intake of our subjects was 3.2 µg/day, and 52.7% of subjects consumed under estimated average requirement, 2.0 µg/day. On dietary source, 67.3% of dietary vitamin B₁₂ was from meat, eggs and fishes and 30.6% was from plant foods, such as soybean-fermented foods, seaweeds, and kimchi. The average serum vitamin B₁₂ concentration was 450.5 pg/mL, and low serum vitamin B₁₂ (< 200 pg/mL) was found in 9.6% of subjects. Dietary vitamin B₁₂ intake was significantly lower in subjects with low serum vitamin B₁₂ (0.79 µg/day) than those with normal serum vitamin B₁₂ (3.47 µg/day). There were no significant difference in vitamin B₁₂ intake and its dietary sources and serum vitamin B₁₂ level between the 85-99 yr-old group and centenarians. In conclusion, several plant-origin foods including seaweed, soybean-fermented foods, and kimchi, may contribute significantly to good vitamin B₁₂ status in very old elderly Koreans.