断乳后铝暴露对大鼠学习、记忆的影响及其机制的初步研究

目的研究断乳后不同浓度慢性铝暴露的大鼠海马细胞内钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)表达变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从断乳后分别自由饮用蒸馏水、Al3+浓度为15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用跳台法测试大鼠学习记忆能力;Western blot法测定大鼠海马内CaN蛋白表达;免疫组化方法测定大鼠海马CA1、CA3区的CaN阳性细胞平均积分光密度。结果与对照组相比,两铝暴露组大鼠跳台实验反应时间明显延长而潜伏期明显缩短,5min内错误次数明显增加,且两铝暴露组间的差异具有显著性;与对照组相比,两铝暴露组大鼠海马内CaN蛋白表达明显增加、CaN阳性神经元平均积分光密度明显增加,且两铝暴露组间差异亦具有显著性。结论断乳后铝暴露损害了大鼠的学习与记忆行为,可能与海马内CaN的表达增加有关。     

出生前后铝暴露对大鼠学习记忆及海马NO、nNOS的影响

目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露后年轻大鼠海马NO含量和nNOS表达的变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从孕期开始分别自由饮用蒸馏水15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用原子吸收石墨炉法测定血铝和脑铝含量;跳台法测试学习记忆能力;硝酸还原酶法检测NO含量;免疫组化方法观察nNOS阳性细胞表达。结果与对照组相比,两铝暴露组大鼠血铝和脑铝含量明显升高,学习记忆能力明显下降,海马NO含量明显降低且nNOS阳性神经元表达明显减少。结论出生前后慢性铝暴露损害了大鼠的学习记忆行为,可能与海马NO含量减少及nNOS神经元表达降低有关。     

大鼠染铝对中枢神经系统脂质过氧化的影响

目的：通过对大鼠海马组织MDA（丙二醛）、GSH（还原型谷胱甘肽）含量,GSH-Px（谷胱甘肽过氧化物酶）、GR（谷胱甘肽还原酶）和γ-GCS（γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶）酶活性的检测,从脂质过氧化角度来阐明染铝对中枢神经系统的损伤作用。方法取刚出生Wistar大鼠40只,分为对照组、低剂量染铝组（0.2%AlCl3）、中剂量染铝组（0.4%AlCl3）和高剂量染铝组（0.6%AlCl3）4组。对照组给予蒸馏水;各染铝组给予含AlCl3蒸馏水,亚慢性连续染铝90 d。将各剂量染铝组大鼠处死取海马组织后用脂质过氧化试剂盒法检测大鼠海马组织MDA、GSH含量及GSH-Px、GR和γ-GCS的酶活性。结果随着染铝剂量的增加,大鼠海马组织MDA含量逐渐升高而GSH水平逐渐下降,并均呈一定的剂量-效应关系（P＜0.05）,而GSH-Px及GR酶活性下降,γ-GCS酶活性升高。结论染铝可以使大鼠海马组织中MDA含量升高,GSH水平降低,GSH-Px及GR活性降低,γ-GCS活性升高。染铝可以对中枢神经系统造成损伤。     

铜对大鼠学习记忆和海马区超微结构的影响

目的观察铜负荷饮食对大鼠空间学习记忆行为和海马超微结构的影响。方法 40只雄性大鼠随机分为模型组和空白对照组各20只,采用Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,采用原子吸收法检测肝、脑组织铜元素含量,电镜技术观察海马区超微结构变化。结果 Morris水迷宫实验:模型组大鼠在定位航行试验中平均逃避潜伏期较正常对照组显著延长,空间探索试验中穿越平台次数较正常组明显减少(P<0.01),与正常对照组比较,模型组大鼠肝、脑组织铜含量明显增加(P<0.01),海马组织内模型组大鼠神经元突触间隙明显变宽(P<0.05),突触后致密物厚度明显变薄(P<0.05)。结论铜可能通过损伤海马超微结构引起大鼠学习记忆功能障碍。     

淫羊藿苷对Aβ_(25-35)诱导的阿尔采末病大鼠海马突触素和突触后密度蛋白95表达的影响

目的探讨淫羊藿苷(Ica)对阿尔采末病(AD)大鼠海马突触素(SYN)和突触后密度蛋白95(PSD-95)表达的影响。方法雄性SD大鼠43只,随机分为对照组(n=13)、模型组(n=15)及Ica120 mg·kg-1组(n=15),每日灌胃给药1周后,右侧海马内注射Aβ25-3510μg制备AD模型,制模后继续给药3周。HE染色法光镜观察大鼠海马形态学变化,透射电子显微镜观察大鼠海马神经元超微结构,Western blot法检测大鼠海马SYN和PSD-95蛋白的表达。结果 HE染色显示模型组大鼠海马神经元排列稀疏,并有大量变性神经元,给予Ica治疗后,神经元排列较整齐,变性神经元数量减少;电镜观察发现模型组大鼠海马CA3区神经元数目减少,结构模糊,胞膜不完整,线粒体肿胀呈空泡样变,染色质成块状聚集,突触数目减少,Ica治疗后大鼠海马CA3区神经元数目较多,结构较清晰,线粒体肿胀减轻,染色质较均匀,突触数目增多;Western blot结果显示模型组大鼠海马SYN及PSD-95的表达较对照组明显降低(P<0.05),而Ica组大鼠海马SYN和PSD-95的表达显著增加(P<0.05)。结论 Ica可能通过增加突触标记蛋白SYN和PSD-95的表达改善Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆能力。     

低频经颅磁刺激对颞叶癫(癇)海马超微结构的影响

目的:研究低频经颅磁刺激(rTMS)对颞叶癫(癇)大鼠海马超微结构的影响.方法:用清洁级Wistar大鼠制备氯化锂-匹罗卡品诱导的颞叶癫(癇)大鼠模型,随机分为对照组和rTMS组,每组5只,对rTMS组大鼠进行rTMS治疗.利用电子显微镜从神经元、神经纤维、突触、胶质细胞和毛细血管5个方面观察颞叶癫(癇)对海马超微结构的病理损伤和rTMS对颞叶癫(癇)海马区病理损伤的作用.结果:颞叶癫(癇)对海马区超微结构具有明显病理损伤,包括神经元出现凋亡和坏死,核浓缩,染色质聚集,线粒体嵴断裂,神经细胞和胶质细胞突起明显水肿,神经纤维局部髓鞘降解,轴浆内微管、微丝排列紊乱,血管内皮细胞肿胀,胶质细胞损伤.rTMS后海马超微结构明显改善,包括脑组织水肿减轻,凋亡和损伤细胞减少,突触和神经毡病变改善和血管水肿减轻.结论:rTMS可改善颞叶癫(癇)对海马超微结构的病理损伤,具有神经保护作用.     

趋化因子MCP-1对大鼠海马区NMDA受体介导的兴奋性突触后电流的影响

目的研究趋化因子MCP-1对大鼠海马CA1区NMDA受体介导的兴奋性突触后电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术,记录2.3 nmol·L~(-1)MCP-1对大鼠海马脑片CA1区NMDA受体尤其是其重要受体亚型NR2BR介导的兴奋性突触后电流的影响,观察MCP-1是否对海马CA1区神经元有易化兴奋性作用;应用微管相关蛋白-2(MAP-2)抗体染色的方法,观察海马CA1区神经元轴突结构的完整性,研究在NMDAR、AMPAR、CCR2受体拮抗剂分别存在的情况下,MCP-1引发海马脑片神经元结构损害的差异,观察上述各种拮抗剂是否对MCP-1导致的神经细胞结构损害有保护作用。结果灌流液内加入MCP-1能明显增加EPSCs、EPSCAMPAR、EPSCNMDAR电流幅度(P<0.05),MCP-1能增加EPSCNR2BR的电流幅度,冲洗掉MCP-1后上述电流可恢复到接近给药前基础值,说明MCP-1对EPSCNR2BR的易化和促进作用是可逆的。在海马脑片上所做的MAP-2免疫组化染色的实验结果显示MCP-1对神经元轴突结构有损害作用,该作用可被NMDA和AMPA受体拮抗剂或CCR2受体拮抗剂逆转。结论 MCP-1对大脑海马CA1区NMDA受体,尤其是NR2B受体介导的突触后神经元的兴奋性有明显易化作用,神经元过度兴奋引发兴奋性神经毒性而导致神经损伤。NMDA和AMPA受体拮抗剂或CCR2受体拮抗剂对MCP-1诱导的神经元轴突结构损伤起到明显保护作用,这些拮抗剂的神经保护效应可为寻找神经退行性疾病的潜在治疗方法提供非常有价值的线索。     

锌对染铅大鼠海马神经元亚细胞结构及突触参数的保护作用

目的　探讨铅对海马CA1 区亚细胞结构的损伤及锌的拮抗作用。方法　给Wistar大鼠饮用6 15mmol L醋酸铅(染铅组)及含3 10mmol L硫酸锌的上述溶液(铅锌组) ,喂养40d ,采用原子吸收法检测各组动物血铅和海马铅含量;电镜下观察各组动物海马CA1 区神经元及其突触的亚细胞结构变化;对照组饮用蒸馏水。每组10只动物。结果　与对照组和铅锌组相比,染铅组大鼠血铅和海马铅含量明显升高(P <0 0 5 ) ;染铅大鼠海马CA1 区神经元内的含粗面内质网、线粒体减少,有些已发生空泡化;染铅大鼠海马CA1 区放射层的含5 0个以上突触囊泡的突触结构明显减少(P <0 0 1)。而含10个以下囊泡的突触结构则明显增加(P <0 0 1)。突触前后膜面积均明显减小(P <0 0 1)。但铅锌组和对照组之间无明显差别。结论　锌对铅引起的大鼠海马CA1 区神经元亚细胞结构变化有拮抗作用。     

BCPT对CUS大鼠大脑皮质BDNF、Bax及海马超微结构的影响

目的观察细脚拟青霉代谢物提取物(BCPT)对慢性应激抑郁模型大鼠行为、海马组织超微结构、大脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)和Bax的影响。方法采用慢性不可预见性应激法(CUS)造成大鼠抑郁模型;采用Openfield法观测大鼠行为;采用免疫组织化学的方法对BDNF和Bax进行染色,并用图像分析仪进行半定量分析;用电镜观察海马超微结构的变化情况。结果慢性应激抑郁模型大鼠水平和垂直运动次数明显减少,BDNF阳性神经元数目明显减少,Bax阳性神经元数目明显增加,电镜显示海马超微结构出现病理变化,而BCPT对其有明显的保护作用。结论BCPT具有抗抑郁作用,增加BDNF表达、降低Bax表达、改善海马超微结构的病理变化有关。     

美洛昔康对慢性铝过负荷大鼠PGES-PGE2-EPs信号通路的影响

目的观察美洛昔康对慢性铝过负荷大鼠海马PGES-PGE2-EPs信号通路的影响。方法 SpragueDawley大鼠口服给予葡萄糖酸铝(Al3+200 mg·kg-1),每周5 d,1次·d-1,共20周,建立慢性铝过负荷大鼠神经元退变模型。美洛昔康(3 mg·kg-1),在每次给予铝盐后1 h口服给予。Morris水迷宫检测大鼠空间学习与记忆能力,HE染色观察大鼠海马神经元形态变化,生化酶学方法观察大鼠海马超氧歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量变化,酶联吸附法(ELISA)检测大鼠海马前列腺素PGE2含量变化,Real-time PCR与Western blot分别检测大鼠海马m PGES-1、EP2、EP4、EP3 m RNA与蛋白表达。结果慢性铝过负荷大鼠空间与学习记忆能力明显下降,海马神经元明显核固缩;海马SOD活性明显降低、MDA含量明显增加;PGE2含量明显增加;m PGES-1、EP2、EP4 m RNA与蛋白表达明显增加,EP3 m RNA与蛋白表达明显降低。给予美洛昔康能显著改善慢性铝过负荷大鼠空间学习与记忆能力损害,减轻慢性铝过负荷大鼠海马神经元损伤,升高海马SOD活性、降低MDA与PGE2含量,同时能显著降低慢性铝过负荷大鼠海马m PGES-1、EP2、EP4 m RNA与蛋白表达,并增加EP3 m RNA与蛋白表达。结论美洛昔康对慢性铝过负荷神经元退变大鼠具有神经保护作用,其机制可能涉及抗氧化应激反应与重建PGES-PGE2-EPs信号通路平衡。     

PAS-Na对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构的影响

目的研究对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构改变的影响。方法雄性大鼠腹腔注射(ip)二氯化锰15mg/(kg·d),每周5天,连续3周。然后每日背部皮下注射PAS-Na100或200mg/kg(L-或H-PAS),连续5周。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,透射电镜观察大鼠海马CA1区超微结构变化。结果染锰组第4和5天逃避潜伏期、游泳总路程与正常对照组差异较大;H-PAS组测得值接近正常组,但是差异无统计学意义(P﹥0.05)。染锰组穿环轨迹路线比较分散,H-PAS组穿环轨迹路线集中于第一象限目标区,与对照组相似。染锰大鼠海马神经元出现变性、凋亡和胀亡,神经元突起肿胀,神经原纤维排列紊乱、中断,线粒体嵴间隙增宽,崩解呈空泡状。PAS-Na治疗后大鼠海马胀亡神经元形态不典型,线粒体结构恢复接近正常,在H-PAS组较为明显。结论在本试验条件下,PAS-Na对锰致海马神经元的损害可能有干预作用。     

氯胺酮对大鼠学习记忆功能及海马神经元的影响

目的了解多次氯胺酮给药对学习记忆功能的影响及机制。方法SD大鼠30只随机分为高剂量组、低剂量组和1个对照组,高、低剂量组大鼠分别予以氯胺酮50和10 mg/kg腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。对照组予以等量生理盐水。用水迷宫测试各组大鼠寻找隐匿台的逃避潜伏期和空间搜索能力,原位检测海马神经元凋亡情况,电子显微镜观察神经元超微结构变化。结果高剂量组逃避潜伏期显著延长(P<0.01),并且空间搜索能力明显降低(P<0.01);高剂量组海马神经元凋亡指数显著高于对照组(P<0.01);电子显微镜显示高剂量组海马神经元有明显变性。结论多次使用氯胺酮对学习记忆有损害,这种损害作用可能与海马神经元病变有关。     

镧影响大鼠海马CaMKIV、CREB磷酸化和BDNF基因表达的研究

目的研究镧对大鼠海马钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaMKIV)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化和脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响,探讨镧损害学习记忆能力的机制。方法随机将Wistar雌性成年大鼠分成对照组和低、中、高剂量染镧组,低、中、高剂量染镧组孕鼠在产仔后分别饮用0.25%、0.5%和1.0%LaCl3溶液。各染镧组仔鼠在断乳前经吸吮母乳染镧,断乳后自行饮用0.25%、0.5%和1.0%LaCl3溶液染镧1个月。然后对仔鼠进行水迷宫和跳台试验,并测定仔鼠海马镧含量、CaMKIV和CREB磷酸化以及BDNF mRNA表达水平。结果水迷宫和跳台测试时,各染镧组仔鼠的学习记忆能力明显低于对照组,呈一定的剂量-效应关系。染镧组仔鼠海马镧含量显著高于对照组,且随染毒剂量增加而增加。中、高剂量染镧组仔鼠海马CaMKIV、CREB磷酸化以及BDNF mRNA表达水平显著低于对照和低剂量染镧组。结论在该试验条件下,镧损害大鼠学习记忆能力的机制可能与海马CaMKIV、CREB磷酸化和BDNF基因表达水平下降有关。     

低频经颅磁刺激对颞叶癫痫大鼠海马超微结构的影响

目的 低频重复经颅磁刺激（repetitive Transcranial Magnetic Stimulation, rTMS）能否成为治疗癫痫的新手段,其抗癫痫的作用机制到底是什么,是当前神经病学领域亟待解决的问题之一。用电镜从神经元、神经纤维、突触、胶质细胞和毛细血管五个方面观察颞叶癫痫对海马超微结构的病理损伤,研究低频经颅磁刺激（rTMS）对颞叶癫痫海马超微结构的影响。方法 制备氯化锂-匹罗卡品诱导的颞叶癫痫大鼠模型,应用电镜观察颞叶癫痫对海马超微结构的病理损伤和TMS对颞叶癫痫海马区病理损伤的作用。 结果 颞叶癫痫对海马区超微结构具有明显病理损伤,包括神经元出现凋亡和坏死,核浓缩,染色质聚集,线粒体嵴断裂,神经细胞和胶质细胞突起明显水肿,神经纤维局部髓鞘降解,轴浆内微管、微丝排列紊乱,血管内皮细胞肿胀,胶质细胞损伤。rTMS后海马超微结构明显改善,包括脑组织水肿减轻,凋亡和损伤细胞减少,突触和神经毡病变改善和血管水肿减轻。 结论 TMS可改善颞叶癫痫对海马超微结构的病理损伤,具有神经保护作用。     

五味子乙素对慢性铝中毒大鼠海马突触超微结构的影响

目的 研究五味子乙素对慢性铝中毒大鼠海马突触超微结构及学习与记忆功能的影响.方法 用AlCl3水溶液拌入饲料中连续喂养大鼠建立慢性铝中毒模型.按照随机分组方法,将慢性铝中毒动物模型的大鼠分为5组:模型组、阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组.阳性对照组用吡拉西坦按40 mg·kg-1灌胃给药;低、中、高3个剂量实验组用...     

芦丁对慢性脑低灌注大鼠海马组织神经元损伤及RhoA/ROCK信号通路的影响

目的 探讨芦丁对慢性脑低灌注大鼠海马组织神经元损伤及Ras同源基因家族成员A（RhoA）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）信号通路的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芦丁低剂量组（20 mg/kg）、芦丁中剂量组（40 mg/kg）、芦丁高剂量组（80 mg/kg）、RhoA抑制剂组（Rhosin hydrochloride,40 mg/kg）,每组9只。除假手术组外,其余各组大鼠均通过结扎颈动脉构建慢性脑低灌注大鼠模型,按照各组给药剂量进行干预处理,每天给药1次,持续4周。采用Morris水迷宫实验测定大鼠的认知功能和记忆能力,苏木素-伊红染色观察大鼠海马组织神经元状态,TUNEL染色检测大鼠海马组织神经元凋亡情况,透射电镜观察大鼠海马组织神经元超微结构,蛋白免疫印迹法检测大鼠海马组织凋亡相关蛋白[胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）]及RhoA/ROCK通路相关蛋白表达情况。结果 与假手术组相比,模型组大鼠海马组织神经元数量减少,神经元超微结构、细胞器结构严重受损,逃避潜伏期、海马组织神经元凋亡率、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bax）、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达显著升高（P<0.05）,穿越平台次数显著减少（P<0.05）;与模型组相比,芦丁各剂量组及RhoA抑制剂组大鼠神经元数量显著增多,神经元超微结构、细胞器受损等均得到一定的恢复,逃避潜伏期、海马组织神经元凋亡率、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bax）、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达显著降低（P<0.05）,穿越平台次数显著增多（P<0.05）,且芦丁各剂量组呈剂量依赖效应;芦丁高剂量组与RhoA抑制剂组上述指标比较差异均无统计学意义。结论 芦丁可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路缓解慢性脑低灌注引起的大鼠神经元损伤。     

JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。     

文冠果壳苷对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的改善作用及机制初探

目的考察文冠果壳苷对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的改善作用,并从改善突触功能的角度,探讨其作用机制。方法利用大脑中动脉阻塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,TTC染色法计算脑梗死面积,HE染色法观察海马CA1区神经细胞病理形态改变,透射电镜观察大脑皮层缺血半暗带区神经元及突触超微结构改变,Western blotting检测突触相关蛋白SYP、PSD95及GAP43的表达。结果文冠果壳苷显著改善模型大鼠神经功能缺失症状,减少脑梗死面积,改善海马CA1区神经细胞的病理改变,并改善脑缺血半暗带区神经元及突触超微结构的损伤,增加突触相关蛋白SYP、PSD95及GAP43的表达。结论文冠果壳苷可显著改善大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤,其机制可能与促进突触重塑和/或减轻突触结构与功能的损伤有关。     

电离辐射对海马CA-1区神经元损害的组织病理及超微结构研究

目的探讨电离辐射对海马CA-1区神经元的损害。方法大鼠经过辐射后海马CA-1区病理组织学的改变和图象分析。结果电离辐射后海马组织病理学检查发现神经元有明显的损害。结论电离辐射可引起海马CA-1区神经元特异性损害。     

四逆散干预创伤后应激障碍及睡眠障碍大鼠海马的超微结构研究

目的研究四逆散对创伤后应激障碍导致大鼠睡眠障碍的干预作用。方法按照体重将大鼠随机分为5组,每组10只:空白对照组、模型组、阴性对照组、阳性对照组、实验组。除了空白对照组以外,其他4组动物均制备模型。空白对照组和模型组不给药,阴性对照组灌胃等量0.9% NaCl,阳性对照组灌胃盐酸帕罗西汀溶液0.42 mg·m L^-1,实验组灌胃四逆散水煎液(含生药0.24g·mL^-1)。于应激造模前1 h,每组大鼠灌胃给药10 mL·kg^-1,每天灌服1次,共计7 d。用透射电镜观察比较各组大鼠给药前后的海马CA1区、CA3区超微结构改变。结果空白对照组的海马CA1、CA3区神经元突触结构清晰,突触间隙明显,突触小泡可见。与空白对照组比较,模型组的海马CA1、CA3区神经元突触结构明显改变,突触小泡减少,突触结构不清晰。与模型组比较,阴性对照组变化与其相似,提示0.9%NaCl灌胃对大鼠没有产生明显的影响。与阴性对照组比较,阳性对照组和实验组的海马CA1神经元突触结构明显恢复,且2组变化相似。结论用4万倍透射电镜观察的创伤后应激障碍所致睡眠障碍大鼠的海马CA1、CA3区超微结构特征性强。