拉米夫定治疗对慢性乙型肝炎患者干扰素-γ和白细胞介素-4的影响

目的 观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-4水平的动态变化.方法 ELISA法分别检测66例慢性乙型肝炎患者在拉米夫定治疗前,治疗后第3、6、9、12个月时的血清IFN-γ和IL-4水平.选取20名健康献血员作为健康对照.治疗前后比较用t检验,计数资料采用非参数秩和检验.结果 HBeAg阳性患者拉米夫定治疗前.完全应答组IFN-γ水平为(21.03±4.44)ng/L,明显高于部分应答组的(13.85±3.92)ng/L及无应答组的(10.63±3.11)ng/L(t=7.56,t=11.87,均P<0.01);以IFN-γ为15.66 ng/L为界,治疗前IFN-γ高水平患者完全应答率明显高于低水平患者(31.0%比8.7%,x2=8.391,P<0.01),无应答率明显低于低水平患者(13.8%比52.2%,x2=4.256,P<0.01).治疗后完全应答组患者IFN-γ/IL-4接近或高于对照组,部分应答组和无应答组低于对照组;HBeAg阴性患者拉米夫定治疗后IFN-γ/IL-4缓慢上升,但未达对照组水平.结论 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎可增加IFN-γ释放,抑制IL-4释放,治疗应答程度与治疗后辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的恢复及治疗前IFN-γ水平有关.     

慢性乙型重型肝炎患者外周血IL-18IL-4、TFNγ变化的研究

分析IL-18、IL-4、IFNγ在慢性乙型重型肝炎中的作用。采用固相夹心法酶联免疫吸附试验检测25例正常人,35例慢性乙型肝炎,45例慢性乙型重型肝炎患者血清IL-18、IL-4、IFNγ的水平。结果发现1.IL-18、IL-4三组间均有显著性差异,IFNγ慢性肝炎与慢重肝无显著性差异,但均显著高于正常对照组;2．IL-18、IL-4生存组显著低于死亡组（P〈0．05）,IFNγ两组间无显著性差异;3．重型肝炎重症期与康复期比较,IL-18、IFNγ康复后均显著性下降（P〈0．05）;4．慢重肝组IL-4与IL-18呈正相关（r=0．6,P〈0．01）;IL-4与IFNγ呈正相关（r=0．54,P〈0．01）,TL—18、IL-4、IFNγ参与了重型肝炎的发病及转归过程,在慢性重型肝炎的免疫病理中有重要作用。     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.     

慢性乙型肝炎患者干扰素应答与外周血单核细胞IFN—α和IL-18表达的关系

目的分析慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单核细胞（PBMC）干扰素-α（IFN—α）及白细胞介素18（IL-18）mRNA的诱导表达差异，评价慢性乙型肝炎患者PBMC细胞免疫功能。方法对2004年6月至2005年5月华中科技大学同济医学院附属协和医院52例门诊和住院CHB患者，聚肌胞苷酸（PolyIC）体外刺激正常对照组和CHB组患者PBMC，取培养上清利用病毒保护试验测定IFN—α2b治疗前后PBMC表达的干扰素抗病毒生物学活性。同时用脂多糖（LPS）体外刺激不同组PBMC，RT—PCR检测PBMCIL-18 mRNA水平的变化。结果治疗前干扰素治疗应答组（n=13）和无应答组（n=27）PBMC分泌的干扰素生物学活性均显著低于对照组（n=20）（均P〈0．01）。应答组干扰素活性随治疗时间延长而增加，1个月时已显著高于无应答组（P〈0．01）；无应答组干扰素活性始终处于低下水平。治疗前，应答组和无应答组PBMC IL-18 mRNA水平也显著低于对照组（均P〈0．01）；治疗后，应答组IL-18 mRNA水平随治疗时间延长而升高，1个月时也著显高于无应答组（P〈0．01），无应答组IL-18 mRNA水平始终较低。PBMC IFN—α活性和IL-18 mRNA水平有良好的正相关性（r=0．922，P〈0．01）。结论慢性HBV感染患者的细胞免疫功能受损，不能正常表达IFN—α和IL-18，但应答组患者经干扰素治疗后表达能力逐渐恢复。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-18、IFN-γ的检测及临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清IL-18、IFN-γ水平的变化及其临床意义.方法:应用ELISA法检测49例CHB患者血清IL-18、IFN-γ水平,并同时检测肝功能和乙肝病毒标志物.结果:CHB患者血清IL-18、IFN-γ水平均显著高于对照组(P＜0.001),其升高水平依次为重度＞中度＞轻度,以CHB重度增高最为显著;血清IL-18、IFN-γ水平与血清ALT、TBil呈正相关(P＜0.01或P＜0.05);HBeAg阴性组血清中IL-18水平较HBeAg阳性组明显升高(P＜0.001),而IFN-γ则无明显变化.结论:血清IL-18、IFN-γ参与了CHB的病理生理过程,并且与肝炎的病情变化密切相关,检测血清IL-18、IFN-γ水平有助于了解肝组织炎症活动及肝细胞损伤程度.同时,IL-18在抗病毒方面发挥着重要作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞TLR4水平与干扰素临床疗效的关系

目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者应用干扰素(IFN)治疗前后外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)表达及血清IL-6水平的变化。方法用流式细胞仪检测65例CHB患者(CHB组)、30例健康人(对照组)IFN治疗前后外周血单核细胞表面TLR4的表达,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 CHB组外周血单核细胞TLR4表达水平及血清IL-6水平均较对照组明显升高(P<0.05或<0.01)。IFN治疗后,随着患者乙肝病毒载量下降,外周血单核细胞TLR4水平及血清IL-6水平均呈下降趋势。结论 TLR4可能与CHB发病有关,IFN抗病毒治疗可降低外周血单核细胞TLR4水平。     

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者血清IL-4和IL-10水平变化

目的：探讨恩替卡韦（ETV）对慢性乙型肝炎（CHB）患者血清白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素-10 （IL-10）水平的影响及其临床意义.方法：检测健康对照人群及CHB患者恩替卡韦抗病毒治疗24周前后血清ALT、HBV DNA、IL-4及IL-10的浓度,分析治疗前后4种指标的变化情况.结果：CHB患者血清中IL-4和IL-10水平高于健康对照组,差异有统计学意义（P均＜0.05）;CHB患者血清中ALT、HBV DNA、IL-4及IL-10水平在恩替卡韦抗病毒治疗后较治疗前均下降,差异有统计学意义（P均＜0.05）.结论：恩替卡韦能有效抑制HBV复制,降低CHB患者血清IL-4和IL-10的水平,并减轻肝脏炎症,改善CHB患者的免疫功能.     

乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞内IL-2、IL-4和IFN-γ检测及意义

目的研究辅助性T淋巴细胞Th1/Th2细胞与乙型肝炎病毒（HBV）感染状态的关系。方法 25例慢性乙型肝炎患者（CHB组）、5例健康志愿者（健康对照组）、5例HBV感染后自然痊愈者（既往感染组）及5例CHB抗病毒治疗后完全应答者（完全应答组）的外周血单个核细胞（PBMC）经PMA诱导后,用流式细胞术检测其Th1和Th2细胞分泌IL-2、IL-4和IFN-γ的水平。结果慢性乙型肝炎患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1602±0.0657）、IL-2（0.1616±0.0639）,明显低于健康对照IFN-γ（0.4680±0.0377）、IL-2（0.5000±0.0625）和既往感染者IFN-γ（0.336±0.2908）、IL-2（0.256±0.17799）（P〈0.001）。CHB抗病毒治疗完全应答患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1620±0.0396）、IL-2（0.1940±0.0416）,亦明显低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（0.5096±0.1329）,明显高于健康对照IL-4（0.2820±0.0622）（P〈0.001）。既往感染者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.336±0.29082）、IL-2（0.256±0.17799）低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（1.29±0.16778）明显高于健康对照组、CHB患者组和HBV感染完全应答患者组（0.2820±0.0622、0.5096±0.1329、0.5740±0.06693）（P〈0.001）。结论 Th1/Th2细胞的功能与HBV感染的发展过程相关。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-18、IL-18BP水平及临床意义

目的探讨IL-18及其结合蛋白（IL-18BP）在慢性乙型肝炎（CHB）及乙肝后肝硬化（肝硬化）中的表达及意义。方法ELISA法检测30例CHB患者、63例乙肝后肝硬化患者血清中IL-18、IL-18BP及TB、ALT、AST、凝血酶原活动度（PTA）、C反应蛋白（CRP）水平,另设对照组20例。结果CHB及肝硬化患者IL-18BP水平均高于对照组,肝硬化患者IL-18水平亦高于对照组;IL-18水平与TB、CRP和AST呈正相关,与PTA呈负相关;IL-18BP与IL-18、TB、AST水平呈正相关,与PTA呈负相关。结论IL-18、IL-18BP参与了宿主对HBV的免疫应答,IL-18的作用受IL-18BP的调控。     

慢性乙型肝炎患者血清IL018、IFN0γ的检测及临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清IL18、IFNγ水平的变化及其临床意义。方法:应用ELISA法检测49例CHB患者血清IL18、IFNγ水平,并同时检测肝功能和乙肝病毒标志物。结果:CHB患者血清IL18、IFNγ水平均显著高于对照组(P<0.001),其升高水平依次为重度>中度>轻度,以CHB重度增高最为显著;血清IL18、IFNγ水平与血清ALT、TBil呈正相关(P<0.01或P<0.05);HBeAg阴性组血清中IL18水平较HBeAg阳性组明显升高(P<0.001),而IFNγ则无明显变化。结论:血清IL18、IFNγ参与了CHB的病理生理过程,并且与肝炎的病情变化密切相关,检测血清IL18、IFNγ水平有助于了解肝组织炎症活动及肝细胞损伤程度。同时,IL18在抗病毒方面发挥着重要作用。     

慢性乙型肝炎患者干扰素应答与外周血单核细胞IFN-α和IL-18表达的关系

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞(PBMC)干扰素-α(IFN-α)及白细胞介素18(IL-18)mRNA的诱导表达差异,评价慢性乙型肝炎患者PBMC细胞免疫功能。方法对2004年6月至2005年5月华中科技大学同济医学院附属协和医院52例门诊和住院CHB患者,聚肌胞苷酸(PolyIC)体外刺激正常对照组和CHB组患者PBMC,取培养上清利用病毒保护试验测定IFN-α2b治疗前后PBMC表达的干扰素抗病毒生物学活性。同时用脂多糖(LPS)体外刺激不同组PBMC,RT-PCR检测PBMCIL-18mR-NA水平的变化。结果治疗前干扰素治疗应答组(n=13)和无应答组(n=27)PBMC分泌的干扰素生物学活性均显著低于对照组(n=20)(均P<0.01)。应答组干扰素活性随治疗时间延长而增加,1个月时已显著高于无应答组(P<0.01);无应答组干扰素活性始终处于低下水平。治疗前,应答组和无应答组PBMCIL-18mRNA水平也显著低于对照组(均P<0.01);治疗后,应答组IL-18mRNA水平随治疗时间延长而升高,1个月时也著显高于无应答组(P<0.01),无应答组IL-18mRNA水平始终较低。PBMCIFN-α活性和IL-18mRNA水平有良好的正相关性(r=0.922,P<0.01)。结论慢性HBV感染患者的细胞免疫功能受损,不能正常表达IFN-α和IL-18,但应答组患者经干扰素治疗后表达能力逐渐恢复。     

慢性乙型肝炎免疫治疗进展

目前核苷和核苷酸类药物及IFNα对慢性乙型肝炎(CHB)患者的治疗效果仍有限,因此,开发更有效的治疗策略来提高CHB的疗效至关重要。介绍了CHB的免疫治疗,包括治疗性疫苗(蛋白类疫苗、DNA疫苗、树突状细胞疫苗)和细胞调节治疗。认为免疫治疗是治疗HBV感染的一个很有前景的治疗方案。随着对HBV感染后临床转归机制的进一步深入研究,CHB的免疫治疗研究也取得了显著进展。     

慢性乙型肝炎免疫治疗新策略

慢性乙型肝炎(CHB)是全球重要的传染病之一,目前主要的治疗药物为干扰素与核苷和核苷酸类药物,具有较好疗效,但尚未达到彻底清除人体内HBV的最终目标。因此,探索治疗新策略以及研发新的治疗药物有重要意义。HBV的持续感染与机体内免疫状态密切相关,目前研究表明免疫治疗有助于实现彻底治愈CHB。结合CHB患者的免疫状态,综述了Toll样受体激动剂、细胞治疗、治疗性疫苗等免疫治疗新策略的研究进展。     

慢性乙型肝炎患者自然杀伤细胞干扰素γ的表达及其与病情的关系

目的 探讨NK细胞在慢性乙型肝炎患者发病中的作用.方法 收集慢性乙型肝炎108例,其中轻度43例,中度28例,重度37例.流式细胞胞内细胞因子染色法检测肝组织、外周血NK细胞分泌IFNγ的水平.数据行t检验.结果 CHB重度患者肝组织、外周血NK细胞IFNγ的分泌水平为(8.12±4.26)%、(4.59±2.95)%,显著高于CHB轻度患者的(3.53±1.56)%和(2.26±0.61)%(t=3.80,t=4.30;均P<0.05),也高于CHB中度患者的(4.59±1.98)%和(2.48±1.05)%(t=2.62,t=3.28;均P<0.05).但CHB轻,中度之间肝组织、外周血NK细胞IFNγ的分泌水平差异无统计学意义(t=0.99,t=1.27;P>0.05);CHB重度重症期患者肝组织和外周血NK细胞IFNγ的分泌水平为(10.02±4.15)%和(6.78±2.91)%,恢复期为(6.13±2.01)%和(3.13±1.52)%(t=1.89,t=1.74;P<0.05).结论 NK细胞在乙型肝炎的发病中可能有加重病情的作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of natural killer cells (NK cells) in patients with chronic hepatitis B (CHB). Methods Blood samples and liver biopsies from 108 CHB patients including 43 mild, 28 moderate and 37 severe CHB patients were collected. The levels of interferon (IFN) gamma in liver tissues and peripheral blood were detected by intracellular cytokine staining.The data were analyzed by t test. Results The levels of IFN gamma produced by NK cells in liver tissues and peripheral blood of patients with severe CHB were (8. 12±4. 26) % and (4. 59±2. 95) % ,respectively, which were significantly higher than those in patients with mild CHB [(3. 53±1. 56)%and (2. 26±0.61)%, respectively; t=3. 80 and t = 4. 30, respectively; both P<0. 05] and those in patients with moderate CHB [(4. 59±1. 98)% and (2. 48±1. 05)%, respectively;t=2. 62 and t =3. 28, respectively; both P<0. 05]. While there were no differences of IFN gamma produced by NK cells both in liver tissues and peripheral blood between mild and moderate CHB patients (t=0. 99 and t=1. 27, respectively; both P>0. 05). The levels of IFN gamma produced by NK cells in liver tissues and blood samples in severe phase of severe CHB were (10. 02 ± 4. 15)% and (6. 78 + 2. 91)%, respectively, those in recovery phase were (6. 13±2. 01)% and (3. 13± 1. 52)%, respectively (t = 1. 89 and t=1. 74, respectively; both P<0. 05]. Conclusion NK cells may play a pivotal role in the pathogenesis of severe CHB.     

HBsAg动态变化与慢性乙型肝炎进程的关系

随着HBs Ag定量检测在临床上的运用,近年研究发现HBs Ag水平不仅反映了双链共价闭合DNA的转录活性,而且可以预测疾病进展风险与慢性HBV感染患者的抗病毒治疗应答。现就HBs Ag水平在HBV感染自然病程中的变化作一综述,并指出HBs Ag水平的变化可能为慢性乙型肝炎的治疗提供一个新思路。     

慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量与PMBC分泌IFN-γ、IL-6水平相关性研究

目的探讨不同HBVDNA载量慢性乙型肝炎（CHB）患者经拉米夫定治疗前后外周血单核细胞（PM-BC）分泌IFN-γ、IL-6水平变化规律及其临床意义。方法血清HBVDNA载量采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定,PMBC分泌IL-6、IFN-γ水平采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（DAS-ELISA）测定。结果治疗前CHB患者IFN-γ水平显著低于正常对照组（P〈0.01）,IL-6水平显著高于正常对照组（P〈0.01）;拉米夫定治疗后HBV高、中载量组IFN-γ水平较治疗前显著升高（P〈0.01和P〈0.05）,IL-6水平较治疗前显著降低（P〈0.01和P〈0.05）,治疗后中、低载量组IFN-γ水平仍低于正常对照组（P〈0.01）,IL-6的水平高于正常对照组（P〈0.01）;患者INFγ水平变化与HBVDNA载量呈负相关（r=0.89,P〈0.001）,IL-6水平变化与HBVDNA载量和ALT呈正相关（分别为：r=0.92,P〈0.001;r=0.74,P〈0.001）。结论不同HBVDNA载量CHB患者经拉米夫定治疗应答与IFN-γ、IL-6水平程度有关,IFN-γ和IL-6的含量能较好的反映TH1/TH2的水平,且可以作为CHB疗效参考指标。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎获得HBsAg清除与血清白细胞介素17水平的关系

目的探讨聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)发生HBsAg清除与血清白细胞介素(IL)17水平的关系。方法选择2012年1月-2015年1月于北京佑安医院就诊的HBeAg阴性CHB患者13例,经PEG-IFN治疗24周,其中6例获得HBsAg清除(R组),7例未获得HBsAg清除(NR组)。用Luminex技术检测患者基线、治疗12周和24周血清IL-17水平。同时检测10例健康人和6例急性乙型肝炎(AHB)患者发病时的血清IL-17水平。计量资料两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 AHB组基线血清IL-17水平最高,其次是CHB组,健康对照组最低,3组间比较差异有统计学意义(P0.05)。CHB患者经PEG-IFN治疗24周后,IL-17水平较基线明显下降(P=0.044)。R组基线血清IL-17水平高于NR组,而且在PEG-IFN治疗后明显下降;而NR组IL-17升高或降低不明显。结论 PEG-IFN治疗HBeAg阴性CHB患者,IL-17基线高水平和治疗过程中明显降低可能有利于HBsAg清除。     

阿德福韦酯和拉米夫定对慢性乙型肝炎患者IFN-γ和IL-4的影响比较

观察阿德福韦酯和拉米夫定治疗前后慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的变化,对照观察其抗乙肝病毒的免疫效应.214例CHB均为参加阿德福韦酯Ⅲ期临床试验的患者,用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测治疗前、治疗后4、12、24及48周末患者血清HBV DNA,其中40例患者利用双抗体夹心ELISA法检测相应时间点的血清中IFN-γ和IL-4的水平.结果显示:慢性乙肝患者ALT和AST治疗后两组间改善值基本相同;HBV DNA改善值拉米夫定(LAM)组从4周末起明显高于阿德福韦酯(ADV)组(P＜0.05),在48周末两组改善值基本相同;LAM组IFN-γ水平在12周末达到高峰,而ADV组在48周末IFN-γ水平才明显上升,LAM组IFN-γ在4周末明显高于ADV组(P＜0.05);ADV组IL-4在48周末与LAM组比增高有明显差异(P＜0.05).两种核苷类似药物抗病毒后均能使机体免疫部分恢复或增强,这种作用可能都是随着治疗后病毒载量下降和CD4 T淋巴细胞活性的重建而出现的.     

慢性阻塞性肺疾病与白介素—4、8和干扰素—γ的关系

以细胞毒性T细胞，巨噬细胞及中性粒细胞为主的气道壁及肺泡隔的慢性炎症和进行性发展的气流阻塞是慢性阻塞性肺疾病（COPD）的两大特点，其慢性炎症由多种细胞因子尤其是白介素-8（IL-8），干扰素-γ（IFN-γ）等介导，IL-8在COPD的发病过程中贯穿始终，在其气道炎症的发生发展过程以及气流阻塞中起着至关重要的作用，IFN-γ与COPD的关系也日益受到重视，有可能是连接COPD发病机制中细胞分子生物学和蛋白酶/抗蛋白酶系统失衡的桥梁。     

干扰素在慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞分泌IL-12中的作用

探讨干扰素治疗慢性乙型肝炎 (CHB)患者对外周血树突状细胞 (DCs)分泌IL - 12的影响。采集并分离2 3例干扰素治疗前、后CHB患者的外周血单个核细胞 ,在rhIL - 4和rhGM -CSF的作用下培养 10天 ,收集上清液检测IL - 12的水平 ,以 8例健康人作为对照。干扰素治疗前患者DCs分泌IL - 12的水平显著低于对照组 (P <0 0 1) ,治疗 4个月时DCs的分泌水平较治疗前显著增加 (P <0 0 5 )。进一步分析发现 ,治疗后IL - 12的水平仅在完全应答组较治疗前显著性增加 (P <0 0 1)。提示CHBDCs分泌IL - 12的水平低下 ,干扰素治疗可以促进DCs产生IL -12 ,且其增加的程度与干扰素的疗效有关