RNA干扰技术

在基因治疗领域里，继反义RNA、核酶和三链DNA技术之后，现在又掀起了RNA干扰技术，这项技术在2002年度里荣登美国著名“科学”杂志评选出的世界十大科技进展之榜首，现将有关RNA干扰技术作一介绍。     

RNA干扰及其技术的应用

RNA干扰(RNAi)是细胞内由双链RNA诱导降解与其配对的特定mRNA的过程。细胞内双链RNA在酶的作用下,形成20-25碱基大小的小干扰RNA(si RNAs),由si RNAs进一步掺入多组分核酸酶并使其激活,从而精确降解与si RNAs序列相同的mRNA,抑制该基因在细胞内的翻译表达。介绍了RNA干扰的分子机制、制备方法、以及RNA干扰技术在功能基因组学、微生物学、基因治疗和信号转导等研究领域里的应用。     

基于RNAi的肿瘤基因治疗研究

RNA干扰技术与应用 RNA干扰(RNA interfcrence,RNAi)是一种由双链R-NA诱发的"基因沉默"。RNAi现象是1998年首次发现的,其过程的天然功能是一种古老的生物基因组的防御系统,它被用来对抗诸如转座子、病毒等可操作的遗传物质的侵犯,调控细胞内     

RNA干扰技术在治疗肿瘤及制药方面的优势

RNA干扰技术是近年发展起来的一项新技术,与内源mRNA同源的小片段外源双链RNA导人细胞,产生约21～23bp的小干扰RNA,导致特定基因表达沉默.自1998年RNA干扰技术出现伊始,得到了迅猛发展,连续三年被评为十大科技突破之一,Andrew Fire和Craig Mell曾凭借在RNA干扰技术方面的杰出贡献荣获诺贝尔奖.本文就其在肿瘤治疗及制药方面的优势作一介绍.     

RNA干扰技术的演进及其在基因功能和基因治疗研究中的应用

RNA干扰（RNA interference, RNAi）是指双链RNA（double strands RNA, dsRNA）引起的mRNA水平互补序列基因表达的关闭,即序列特异性转录后基因沉寂,是生物体进化过程中抵御外来基因和病毒感染的进化保守机制。RNA干扰技术不仅被广泛地运用于基因功能研究,而且在基因治疗中显示出极大潜力。体外RAN干扰技术包括双链RNA的合成、基因导入及干扰作用评价等。本文阐述了近年来这一新兴生物学技术的发展与演进以及在基因功能及基因治疗研究中的应用和前景。     

RNA干扰技术及其在椎间盘退变研究中的进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发展起来的一种新兴的基因沉默技术,它是由双链RNA介导的靶向基因序列特异性转录后的沉默机制.RNA干扰序列特异性的抑制效应较反义DNA、抗体封闭技术等传统基因调节方法 有着明显的优势.在哺乳动物细胞中,RNAi可由21～25个核苷酸长度的小干扰RNA(sm...     

RNA干扰技术在结肠癌基因靶向治疗应用的研究

RNA干扰技术以其特异性和高效性抑制基因表达,已经成为研究基因功能的重要工具。它能够沉默同源基因的表达,在肿瘤的基因靶向治疗中发挥的作用日趋明显。最近,RNA干扰技术应用于结肠癌靶向基因沉默为结肠癌的基因靶向治疗开辟了新的途径。现就RNA干扰技术在结肠癌基因靶向治疗的研究进行综述。     

利用RNA干扰治疗高脂血症的方法学研究进展

目的研究和开发小RNA分子降血脂药物为目的。方法从对RNA干扰靶基因的选择,药用小RNA分子的来源,小RNA分子的修饰和RNA干扰效率,给药方法以及存在的问题等方面综述了利用RNA干扰技术降血脂研究的进展。结果在利用RNA干扰降血脂的研究中,与胆固醇合成、代谢以及转运相关的关键酶基因都可能作为潜在的药物靶标。结论虽然RNA干扰是机体天然防御外物侵袭的固有机制,但体外生产的siRNA药物大量用于疾病治疗的安全性研究相对较少。相信随着对siRNA相关作用机理研究的不断深入和siRNA操作技术的不断改进,siRNA分子是今后利用RNA干扰进行降血脂研究和治疗的重点方向。     

构建RNA干扰载体特异性抑制绿色荧光蛋白表达的研究

目的:利用PCR构建RNA干扰质粒载体的方法,促进RNA干扰技术的广泛开展.方法:PCR方法获得小鼠U6 27启动子序列,以及干扰绿色荧光蛋白(EGFP)表达的siRNA的相应DNA模板序列.将其序列克隆入pUC19,获得RNA干扰载体pU6-siEGFP.将pU6-siEGFP及pcDNA3.1/EGFP共转导COS-7细胞,观察EGFP表达情况.结果:所构建的pU6-siEGFP能够成功干扰COS-7细胞中EGFP的表达.结论:PCR方法成功构建了RNA干扰载体,为RNA干扰技术在更多实验室的广泛开展奠定基础.     

小干扰RNA研究概况

小干扰RNA(siRNA)技术是RNA研究最为热门的领域。小干扰RNA是被广泛公认的能够沉默许多或所有的基因的核糖核酸,小干扰RNA通过与目标基因或是目标基因的信使RNA结合,抑制其基因的表达,阻碍蛋白质的表达,从而实现其功能。小干扰RNA已经被应用于许多疾病的研究治疗中,其中最为广泛的是癌症的治疗。虽然小干扰RNA已趋近于完善,但还有很多需要解决的问题。     

RNA干扰技术及其在防治SARS中的应用

0 引言 RNA干扰是一种由双链RNA诱发的序列特异性基因沉默,大量的体外实验研究已经显示出该技术在基因功能研究中的前景和治疗人类疾病的巨大潜力。最近发现RNA干扰可能对SARS病毒有一定的抑制作用,为传染病的防治带来曙光。本文综述了RNA干扰的作用机制及其在防治SARS中的应用前景。     

RNA干扰黏着斑激酶抑制人肝癌细胞sk-hep-1生长的实验研究

目的 通过运用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),干扰人肝癌细胞系sk-hep-1的黏着斑激酶(FAK)的表达,初步探讨干扰效果.方法 在体外,用转染试剂FugeneHD将靶向FAK基因的小发夹RNA质粒(pshFAK)转染至sk-hep-1细胞中,通过流式细胞术、RT-PCR和Western...     

RNAi技术及抗乙型肝炎病毒的实验研究进展

目前寻找新的更有效的治疗乙型肝炎病毒(HBV)的方法成为广大学者关注的焦点,RNA干扰技术的出现为治疗慢性HBV感染开辟了新途径。本文就RNA干扰技术及其在抗HBV感染中的研究进展作一综述。     

RNA干扰在肿瘤治疗中的靶点研究

RNA干扰是一种转录后基因沉默机制.通过RNA干扰技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,进而为恶性肿瘤的治疗提供一种崭新的手段.本文就RNA干扰的机制、作用靶标及相关的临床应用做一综述.     

抗病毒治疗的新方法:RNA干扰

RNA干扰技术已经迅速的被发展成为一种治疗手段,用于特异的下调基因从而减轻病痛.这一技术特别适用于由于病毒感染的疾病.现在大量的研究已经表明无论在体内还是在体外,RNA干扰都可以抑制病毒.这里有一个基本原则:每一个的病原物RNA干扰治疗都必须量身定做,其中包括:1.发挥干扰的RNA的导入方法途径,2.给药途径,3.目的 基因,4.RNA干扰作用的持续时间.尽管对于每种病毒都可以制定有效的策略但是他们都面临着同样的挑战.重要的是,治疗策略必须考虑到在病毒基因组可能出现的极快速进行,以及利用计算和生物信息学方法来辅助治疗策略以防止病毒逃逸.此外,所有的RNA干扰治疗策略都需将发挥干扰作用的核酸序列导入到靶细胞中,这将受益于基因设计和导入方法的发展.这里我们总结了在抗病毒RNA干扰方面取得的重要进展,讨论如何将这些发现有效的应用到诊断治疗中.     

RNA干扰沉默claudin-4基因表达对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

目的:采用RNA干扰技术沉默claudin-4基因在子宫内膜癌细胞Ishikawa中的表达,探讨claudin-4表达下调对Ishikawa细胞增殖力和侵袭力的影响;比较RNA干扰前后差异表达的蛋白质,探讨claudin-4基因在子宫内膜癌发病机制中的作用。方法:设计靶向claudin-4的小干扰RNA(si RNA),转染人子宫内膜癌细胞Ishikawa。采用CCK分析法检测干扰前后细胞增殖能力的变化,Transwell小室实验检测干扰前后细胞侵袭能力的变化。应用双向凝胶电泳和质谱分析检测RNA干扰前后蛋白质表达的差异。结果:claudin-4基因沉默可以显著降低子宫内膜癌细胞的增殖能力和侵袭能力(P<0.05)。应用蛋白质组学技术比较claudin-4 si RNA干扰前后蛋白质表达的差异,共鉴定出5种差异蛋白质。结论:claudin-4基因具有促进子宫内膜癌细胞增殖和细胞侵袭的作用,这种作用可能通过改变差异蛋白的表达得以实现。     

基于RNA干扰的非病毒递送载体研究进展

干扰RNA和微小RNA均由约20个碱基对组成,具有调控基因表达的功能,已广泛应用于肿瘤、心血管、组织再生等疾病的诊断、治疗中。利用可逆性的RNA干扰技术调控体内基因的表达以实现对疾病的治疗已受到越来越多的研究者的关注。但干扰RNA和微小RNA本身存在如带负电荷、易降解、细胞摄取低、核酸酶降解及内涵体释放困难等问题,因此,一种高效低毒的基因递送系统对于提高基于RNA干扰的治疗效果具有重要的作用。随着对纳米递送系统的开发,出现各种各样的基因递送系统,本文主要对非病毒递送系统在递送干扰RNA和微小RNA上作用进行综述,分析递送系统的设计思路、方法和作用机制,为未来设计递送RNA干扰核酸的非病毒载体提供一定的指导。     

RNA干扰与神经退行性疾病的研究进展

神经退行性疾病是人类神经系统的严重疾病之一,目前尚无有效的方法对神经退行性疾病进行治疗。近年来,RNA干扰作为一种崭新的技术,已被广泛应用于生命科学的各个领域。在神经科学上,尤其在神经退行性疾病中利用RNA干扰技术特异性沉默突变基因的研究逐渐成为热点并取得了显著进展,为神经退行性疾病发病机制的揭示和治疗提供了新的途径。现将RNA干扰的作用机制及其在这一领域中的应用做一综述。     

RNA干扰及其在肿瘤研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是近年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,该技术通过双链RNA的介导,可以特异性地阻断或降低相应基因的表达。在肿瘤研究中,通过RNAi技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。本文综述了小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)的生成和作用机制以及RNAi在肿瘤研究中的应用。     

RNA干扰技术在肿瘤基因治疗中的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,也称为基因沉寂疗法(Gene Silencing),是利用双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发对宿主细胞特异性RNA转录的抑制,从而抑制特异目的基因表达的方法.也即双链RNA在细胞内RNA酶Ⅲ的作用下,被裂解成21～23个核苷酸(nucleotide,nt)的小干扰性RNA(small interference RNA,siRNA),进而启动细胞内RNAi反应,特异性地阻断靶基因表达的过程.