甲苯达唑、阿苯达唑和吡喹酮对小鼠细粒棘球蚴囊壁延胡索酸酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和丙酮酸激酶的影响(英文)

细粒棘球蚴囊壁的延胡索酸酶(FH)活力为911—14333,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)与丙酮酸激酶(PK)的活力之比为2.2—2.7,表明囊壁的糖代谢以酵解途径为主,感染小鼠用甲苯达唑、阿苯达唑或吡喹酮ig治疗,剂量各为25—50,300和500mg·kg~(-1)·d~(-1),连给7—14d,未见对FH有明显的影响,而PK和PEPCK则可明显被前二种药物所抑制。     

锌对大鼠成骨细胞内游离钙离子浓度和钙调蛋白活性的影响

实验旨在阐明锌对体外培养大鼠成骨细胞胞内游离钙离子浓度 ( [Ca2 +]i)及钙调蛋白 (CaM)活性的影响 .各研究因素分别作用于成骨细胞 3d或短时作用后 ,分别测定 [Ca2 +]i 和CaM活性 ;采用CaM PDE实验体系深入研究锌对CaM可能存在的潜在作用 .结果表明 :无论是长期或短时作用 ,锌对大鼠成骨细胞 [Ca2 +]i 及CaM活性均无影响 ;在CaM PDE实验体系中 ,低浓度锌可以激活CaM ,但高浓度抑制CaM ,这可能与锌竞争结合CaM上钙结合位点有关 .在本实验条件下 ,锌对Ca2 +/CaM信号途径无影响 ,但具有潜在激活或抑制CaM的生物学效应     

汉防己甲素对钙调蛋白依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的双相作用研究

汉防己的有效成份汉防己甲素(Tet)在较低浓度时能抑制钙调蛋白(CaM)依赖性环核苷酸磷酸二酶(PDE)的活性(IC_(50)=43μmol/L),并且这种抑制能被 CaM 所对抗;而在较高浓度(>300μmol/L)时,无论有无 Ca~(2 )和 CaM 的存在,Tet 均能非 Ca~(2 )依赖性激活 PDE,这种激活不受 CaM 拮抗剂三氟拉嗪和氯丙嗪的影响。结果提示,Tet 既具有抗 CaM 作用,又能在较高浓度时直接与 PDE 相互作用而部分模拟CaM 的作用,这可能均与 Tet 的水、脂两性分子特性有关。该实验为阐明中药的作用机理及 CaM 与其靶酶相互作用的研究提供了新线索。     

铅对大鼠脑突触体钙调素的抑制作用

用体外法,将大鼠脑突触体膜,在不同浓度的Pb~(2+)作用下分别测定CaM依赖的Ca~(2+)-ATP酶和CaM活性的IC_(50)值。结果表明,Pb~(2+)对Ca~(2+)-ATP酶活性IC_(50)为 1.62mM;对CaM活性IC_(50)为3.85mM。当向不含CaM的脑突触体加入3.0～10.0μg的外源性CaM后,被Pb~(2+)抑制的Ca~(2+)-ATP酶活性均有显著的逆转而恢复或接近正常水平。推测Pb~(2+)主要直接作用在脑突触体膜的CaM,通过CaM分子构象改变,抑制Ca~(2+)-ATP酶,这可能是铅神经毒性的分子基础。     

吗丙嗪和雷佐生抑制兔红细胞膜钙调蛋白活力的比较

比较了抗癌结构类似物吗丙嗪和雷佐生对红细胞膜钙调蛋白 (CaM)活性的影响 .观察兔红细胞膜Ca2 +,Mg2 + ATP酶 (CaM的靶酶 )活性反映膜CaM激活ATP酶的活性 .结果显示吗丙嗪 ( 0 .1～ 1mmol·L- 1)浓度依赖性抑制CaM激活ATP酶活性 (下降11%～ 32 % ) .雷佐生在高浓度 ( 0 .5mmol·L- 1)仍未显示抑制CaM激活ATP酶活性的作用 .吗丙嗪在低浓度 ( 0 .0 2～ 0 .1mmol·L- 1)能增加N 乙酰神经氨酸( 0 .2mmol·L- 1)抑制CaM激活ATP酶活性的作用 .结果表明吗丙嗪对CaM活性的抑制作用强于雷佐生 ,因而可能在CaM介导的抑瘤途径的作用较雷佐生强 ,且其作用可能与神经氨酸 (唾液酸 )有关     

人参茎叶皂甙在体外对兔脑Ca~(2+)-ATP酶和Mg~(2+)-ATP酶活力的影响

体外实验发现,人参茎叶总皂甙(GNS)、人参茎叶三醇组皂甙(PTS)均能显著抑制兔大脑Ca~(2+)-ATP酶和Mg~(2+)-ATP酶的活力;而人参茎叶二醇组皂式(PDS)在10和100mg/L时,显著兴奋Ca~(2+)—ATP酶的活力,在1000mg/L时,则显著抑制Ca~(2+)—ATP酶活力,对Mg~(2+)-ATP酶的活力也具有抑制作用;氯丙嗪(CPZ,0.35和0.70mmol/L)对Ca~(2+)-ATP酶和Mg~(2+)—ATP酶的活力均呈现非常显著的抑制作用。     

二甲双胍对大鼠垂体-性腺轴钙调蛋白mRNA表达的影响

目的研究二甲双胍(metformin,MF)对大鼠垂体—性腺轴钙调蛋白(calmodulin,CaM)mRNA表达的影响。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,系统观察MF对大鼠垂体—性腺轴钙调蛋白mRNA表达的影响。结果MF270mg·kg-1·d-1,ig,连续给药21d,可抑制大鼠睾丸细胞CaM mRNA的表达(P<0.01),而对垂体分泌细胞CaM mRNA的表达则无明显影响。结论二甲双胍可抑制大鼠睾丸细胞CaM mRNA的表达。     

和厚朴酚对钙调素拮抗作用的研究

采用钙调素(CaM)依赖性环核苷酸磷酸二酯酶及丹磺酰标记CaM,研究和厚朴酚对CaM的作用.发现和厚朴酚能抑制CaM刺激环核苷酸磷酸二酯酶的活性,随着CaM浓度的增加,IC_(50)也相应增加。在Ca~(2+)存在下.和厚朴酚能降低丹磺酰标记的CaM的荧光强度,使其荧光发射光谱峰位红移。实验结果提示,和厚朴酚在Ca~(2+)存在下,能与CaM结合.从而拮抗其对靶酶——磷酸二酯酶的激活。另外,和厚朴酚对CaM依赖性磷酸二酯酶基础活性具有刺激作用。     

钙离子与三氟拉嗪对标记蛋白轴浆转运的作用

<正> 作者曾证明,在体坐骨神经中注射Ca~(2+)或其络合剂ECTA以改变轴浆中Ca~(2+)浓度均使微管减少或消失。而Ca~(2+)可通过钙调素(CaM)抑制离体管蛋白聚合成微管,神经内注射CaM     

钙调蛋白拮抗剂苄基异喹啉类化合物对培养的成纤维细胞的作用机理研究

本文将牛血清白蛋白(BSA)与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)交联作为抗原,制备抗体,运用酶联免疫吸附法(ELISA)建立了测定CaM含量的标准曲线,通过EL ISA和流式细胞光度计观察了CaM拮抗剂0—(1—ethoxyl—bUtyl)berbarmine(EBB)对培养的成纤维细胞的CaM和DNA的影响,探讨了EBB的作用机理。     

联苯双酯(DDB)对Bel-7402人肝癌细胞株一些表型的作用及其机理

Bel-7402人肝癌细胞在DDB(10^-4mol·L^-1)处理后,生长和克隆形成受到明显抑制,电子显微镜观察到DDB作用过的细胞核仁减少或消失,核与胞浆比例缩小。Bel-7402细胞内环化腺苷酸(cAMP)和钙调蛋白(CaM)的含量,经DDB处理不同时间后皆显示明显高于对照组。此外,DDB还能降低从Bel-7402细胞内提取出的DNA拓扑异构酶II(ToPoII)活力。说明DDB对Bel-7402人肝癌细胞的作用机理与cAMP,CaM和ToPoII有关。     

苄普地尔对实验性心肌缺血的保护作用

本文对我院合成的苄普地尔的抗心肌缺血作用作了实验研究。在家兔结扎左冠状动脉的前降支造成急性心肌梗塞中,Bep5mg·kg~(-1)和Pro1mg·kg~(-1)均能使ECG的∑ST,NST,NQ降低,与NS组比较P<0.01,ST段恢复至等电位线的时间提前.梗塞心肌占全心重量的百分比减少,CPK测定值比NS组降低。Iso诱发大白鼠心肌缺血的实验中.Bep5,10mg·kg~(-1)与Pro5mg·kg~(-1)均可使∑ST↑↓的总mV数减少,与NS组比较P<0.01,病理组织学检查心肌损伤亦减轻。     

阿片类药物对NG108-15细胞Ca~(2 )/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的作用

目的　观察阿片类依赖时Ca2 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)活性。结果　DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h可使细胞浆和细胞核CaM和CaMKII活性升高 ,该变化可被CaM特异性拮抗剂W 7所抑制 ;CaMKII特异性抑制剂KN 6 2可抑制CaMKII活性的增高 ,而对CaM活性无明显影响。DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h后 ,加入纳洛酮 ,CaM活性、CaMKII活性进一步增高。结论　Ca2 CaMKII信息通路参与了阿片依赖的机制。     

阿片类药物对NG108-15细胞Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的作用

目的　观察阿片类依赖时Ca²⁺ 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG108-15细胞作为体外的细胞模型,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ-³² P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)活性。结果　DPDPE作用NG108-15细胞48h可使细胞浆和细胞核CaM和CaMKII活性升高,该变化可被CaM特异性拮抗剂W-7所抑制;CaMKII特异性抑制剂KN-62可抑制CaMKII活性的增高,而对CaM活性无明显影响。DPDPE作用NG108-15细胞48h后,加入纳洛酮,CaM活性、CaMKII活性进一步增高。结论　Ca²⁺ CaMKII信息通路参与了阿片依赖的机制。     

亚慢性铅接触大鼠体内钙调素和腺嘌呤核苷三磷酸酶的影响

大鼠以1.318、5.272和10.545mmol醋酸铅染毒3个月。各染毒组大鼠全血中钙调素(CaM)含量和红细胞膜钙-腺嘌呤核苷三磷酸酶(Ca~(2+)-ATPase)活力显著下降,呈剂量-效应关系。高剂量组红细胞钠-钾-腺嘌呤核苷三磷酸酶(Na~+-K~+-ATPase)活力明显抑制。电镜细胞化学观察,肝细胞腺嘌呤核苷三磷酸酶电子密度变浅、分布减少。     

对—羟基苯甲醛和对—羟基苯甲酸对单胺氧化酶活性的影响

小鼠灌服对一羟基苯甲醛(PHBAD)和对一羟基苯甲酸(PHBZA)能明显抑制脑和肝组织的单胺氧化酶(MAO)活性,且对MAO—B的抑制作用强于MAO—A。PHBAD(200～400mg·kg~(-1)对小鼠脑MAO—B抑制作用强于PHBZA。体外实验证明,二者对MAO—B的抑制作用随浓度增加而明显增强。另外,PHBAD对MAO—B呈竞争型抑制;对MAO—A呈混合型抑制;而PHBZA对MAO-B、MAO—A均呈混合型抑制。     

橙皮苷对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响

目的探讨橙皮苷(hesperidin)对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响。方法采用高浓度胰岛素(INS)持续作用HepG2 12h建立胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型,同时培养液中给予不同质量浓度橙皮苷(10,40和60μg.mL-1)或盐酸二甲双胍(30μg.mL-1)干预。药物作用12h后,换含低浓度INS的培养液培养细胞12h,使细胞同步化。然后,测定各组细胞葡萄糖消耗量、细胞内肝糖原含量、己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)的活力。结果与正常组相比,模型组细胞葡萄糖消耗量、肝糖原含量及HK和PK酶活力显著下降(P<0.01);与模型组相比,40和60μg.mL-1的橙皮苷可极显著增加IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量、肝糖原合成量及HK酶活力(P<0.01),显著增加PK酶活力(P<0.05)。结论橙皮苷可增加IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用,增加肝糖原合成量,提高HK、PK活力,从而促进IR-HepG2细胞糖代谢,改善胰岛素抵抗能力。     

Comparative effects of bepridil and verapamil on isolated vascular smooth muscle and myocardium (英

AIM: To clarify the difference in inhibitory effects of bepridil (Bep) and verapamil (Ver) on aorta, renal artery and myocardium. METHODS: Compare the inhibitory effects of Bep and Ver on phenylephrine (Phe)-and high K~ -evoked contractions of rat aorta and renal artery, and     

双参通冠方药物血清对缺氧/复氧心肌细胞Ca~(2+)-CaM-CaMPKⅡ信号系统的影响

目的考察双参通冠方(SSTG)药物血清对缺氧/复氧心肌细胞Ca2+-CaM-CaMPKⅡ信号系统的影响。方法培养心肌细胞,建立缺糖缺氧/复氧损伤模型。运用血清药理学方法研究SSTG药物血清对缺糖缺氧/复氧损伤心肌的作用。荧光分光光度法测定心肌细胞胞质[Ca2+]i,RT-PCR法测定CaM、CaMPKⅡδmRNA表达。结果正常心肌细胞[Ca2+]i、CaM、CaMPKⅡδmRNA表达很低。缺氧/复氧后[Ca2+]i较正常组增高,CaM、CaMPKⅡδmRNA表达增高(P<0.05),SSTG提取物大鼠灌胃剂量为22.5、45、90 mg.kg-1所取得的药物血清(体积分数为0.1)处理组[Ca2+]i降低,CaM、CaMPKⅡδmRNA表达降低,与空白血清处理组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧/复氧损伤可导致心肌细胞Ca2+超载,CaM、CaMPKⅡδmRNA表达增高;SSTG药物血清可对抗心肌细胞Ca2+超载,抑制其胞内受体CaM及Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶CaMPKⅡδ的活性。     

间尼索地平对5-羟色胺诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中Ca2+/CaM/CaN通路的影响

探讨Ca²⁺/CaM/CaN信号通路在5-羟色胺 (5-HT) 诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs) 增殖中的作用以及间尼索地平 (m-Nis) 对此的影响。采用细胞培养、噻唑蓝 (MTT) 比色检测、激光共聚焦显微镜及反转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 等方法, 研究5-HT (1 μmol·L⁻¹) 对大鼠PASMCs细胞增殖的影响以及m-Nis对此的抑制作用, 并通过检测m-Nis对5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖中Ca²⁺/CaM/CaN通路的影响深入探讨其作用机制。结果显示, 5-HT (1 μmol·L⁻¹) 可明显诱导大鼠PASMCs增殖 (P < 0.01), m-Nis对此有明显的抑制作用, 并呈现一定的浓度依赖性 (P < 0.05或P < 0.01); 另外, m-Nis还明显抑制了5-HT引起的[Ca²⁺]_i的升高 (P < 0.01)、CaM和CaN mRNA的表达以及CaN活性的升高 (P < 0.05或P < 0.01)。结果表明, Ca²⁺/CaM/CaN信号通路在5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖中起重要作用, m-Nis抗5-HT诱导的增殖作用可能与抑制[Ca²⁺]_i增高从而阻断了Ca²⁺/CaM/CaN信号通路有关。