Pinacidil对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压和血浆内皮素-1的影响

目的：探讨钾通道开放剂pinacidil对低氧性肺动脉高压（HPH）及对血浆内皮素-1（ET-1）含量的影响。方法：将45只雄性Wistar大鼠分为3组：①对照组;②低氧组,每天低氧8 h,共4周;③治疗组,每天低氧前半小时腹腔注射pinacidil 3 mg/kg,共4周,4周后观察3组平均肺动脉压（mPAP）,右心室肥厚指标、血浆中ET-1的水平。结果：低氧组大鼠mPAP明显高于对照组。右心室肥厚显著,血浆中ET-1含量明显高于对照组;治疗组mPAP明显低于低氧组,右心室肥厚轻于低氧组,血浆中ET-1含量明显低于低氧组。结论：pinacidil能有效降低HPH中肺动脉压力、阻抑右心室肥厚,并影响血浆中ET-1的水平。     

先天性心脏病伴肺动脉高压内皮素-1和内皮型一氧化氮合酶的表达

目的：研究内皮素-1（ET-1）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）对先天性心脏病伴肺动脉高压（PH）的调控作用。 方法： 将40例先天性心脏病患儿按其肺动脉收缩压分为中重度PH组12例、轻度PH组14例、无PH组14例；另选取10例非心脏疾患手术病人10例作为对照组。采用放射免疫、硝酸还原酶、透射电镜、免疫组化等方法，观察各组患儿肺细小动脉超微结构、血ET-1、一氧化氮（NO）浓度及肺细小动脉ET-1、eNOS蛋白表达的变化。 结果： ①血浆ET-1水平，中重度PH组、轻度PH组明显高于无PH组（P<0.01）；血清NO浓度中重度PH组、轻度PH组明显低于无PH组（P<0.01）。 ②电镜下,中重度PH组肺细小动脉中膜平滑肌增生，外膜胶原纤维密集；轻度PH组肺细小动脉中膜平滑肌细胞和外膜胶原纤维增生轻于中重度PH组；无PH组肺细小动脉结构改变不明显。③免疫组化显示中重度PH组、轻度PH组肺细小动脉ET-1平均吸光度值显著高于无PH组(P<0.01)；而中重度PH组、轻度PH组肺细小动脉eNOS平均吸光度值显著低于无PH组(P<0.01)。 结论： ET-1、eNOS可能参与了先天性心脏病PH的形成与肺血管结构重建。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠内源性一氧化氮代谢及其外源性吸入的研究

目的:研究一氧化氮(NO)在大鼠慢性低氧性肺动脉高压发生发展中的代谢变化,观察外源性吸入NO对肺血流动力学的疗效。方法:67只SD雄性成年大鼠,随机分为7组:常氧对照组(n=9),慢性间断性低氧(6h/d,7d/周)1周组(n=7),低氧2周组(n=11),低氧3周组(n=11),L-NAME(NO合成酶抑制剂,30mg/kg,灌饲)处理组(n=10),L-Arg(NO合成前质,10mg/kg,灌饲)处理组(n=9),NO吸入(0.0004%,20min)组(n=10)。插管测肺动脉平均压(MPAP),分离右心室(R)、室间膈+左心室(S+L),计算R/(S+L)(g/g)和R/Wt(Wt:体重,g/kg)。结果:①低氧1周组MPAP显著高于对照组,低氧2周时更高,R/(S+L)和R/Wt也显著高于对照组;②血浆NO₂^-/NO₃^-含量在低氧2周组显著高于对照组,而在低氧3周组显著低于低氧2周组和低氧1周组;低氧1周,血浆ET-1含量显著高于对照组,血浆ET-1含量与MPAP和R/(S+L)均呈显著正相关,r分别为0.43和0.46,P值均＜0.01;③L-NAME组大鼠血浆NO₂^-/NO₃^-含量降低33.2%,R/(S+L)显著增加15.2%,P＜0.05;④L-Arg组大鼠血浆NO₂^-/NO₃^-含量和PAPM无显著改变,但R/(S+L)降低8.7%,P＜0.05;⑤吸入NO,MPAP降低17.8%,P＜0.01。结论:内源性NO在慢性低氧早期(1-2周)继发性增加,但进一步低氧时则减少,血浆ET-1含量的增加在低氧性心肺血管重建中可能具有重要意义,吸入低浓度NO对以肺血管增生和右心室肥大为主要基础的肺动脉高压仍具有明显降低作用。     

内皮祖细胞移植对肺动脉高压大鼠一氧化氮、内皮素的影响

目的研究同种异体内皮祖细胞（EPCs）移植对野百合碱（monocrotaline,MCT）所致肺动脉高压（Pulmonary Artery Hypertensinn,PAH）大鼠的影响,并观察肺动脉血一氧化氮（NO）、内皮素（ET）的变化,探讨其治疗PAH的机制。方法体外培养并鉴定大鼠EPCs,MCT诱发肺动脉高压模型组由尾静脉注入标记的EPCs。在移植EPCs后第21天,测定肺血流动力学参数,计算平均肺动脉压（mPAP）,分别用硝酸还原酶法,放射免疫法测定NO及ET-1值。结果与模型组（29．33±3．01）mm—Hg相比,EPCs治疗组（21．89±2．69）mmHg平均肺动脉压明显下降,肺动脉血的NO值明显增加,（49．28±5．31 vs 21．64±3．06）μmol／L（P〈0．05）,ET-1值由（354．40±36．35）pg／ml降至（259．20±29．08）pg／ml（P〈0．05）。结论同种异体EPCs移植可有效降低肺动脉压力,作用机制可能与其分化为血管内皮细胞,修复损伤的肺血管内皮,调节NO与ET-1的含量有关。     

急性低氧性肺动脉高压与磷脂酶A2活力关系初探

目的：探讨ＰＬＡ２及相关炎症介质在急性低氧性肺动脉高压形成中的作用。方法：用３０只ＳＤ大鼠随机分为三组（各１０只）：正常对照组（Ａ）、低氧组（Ｂ）、低氧加地塞米松组（Ｃ）。测定磷脂酶Ａ２活力（ＰＬＡ２）、血小板活化因子（ＰＡＦ）、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）。结果：Ｂ组低氧３０ｍｉｎ后，平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）、血及肺中ＰＬＡ２活力、ＰＧＥ２、ＴＸＢ２、ＰＡＦ均明显增高；Ｃ组上述指标均明显低于Ｂ组。低氧情况下，ＰＬＡ２与ｍＰＡＰ、ＰＡＦ、ＰＧＥ２、ＴＸＢ２均呈正相关；ＰＡＦ、ＰＧＥ２、ＴＸＢ２分别又与ｍＰＡＰ呈正相关。结论：ＰＬＡ２通过相关炎症介质在急性低氧性肺动脉压的形成中可能起重要的介导作用。     

野百合碱所致肺动脉高压大鼠模型中碱性成纤维细胞生长因子、内皮素-1及其受体的表达和外源性NO的作用

目的:探讨野百合碱(MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、内皮素-1(ET-1)和内皮素A受体(ET_AR)的表达, 并观察吸入外源性NO的作用。方法:通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型;使用NO吸入装置给予大鼠外源性NO;采用免疫组织化学方法定量检测不同组间肺组织中bFGF、ET-1及ET_A受体的表达。结果:模型组肺动脉压、右心室肥厚程度、bFGF、ET-1及ET_A受体的表达明显高于对照组, 外源性NO吸入能明显减低肺动脉压、右室肥厚程度、bFGF、ET-1及ET_A受体的表达。结论:bFGF、ET-1及ET_A受体可能参与了MCT所致肺动脉高压的发生发展, 外源性NO吸入可能通过ET-1及ET_A受体途径阻止或逆转肺动脉高压的发展, 但如何通过bFGF起作用还有待探讨。     

一氧化氮吸入对缺氧性肺动脉高压患者一氧化氮合酶和内皮素-1的影响

目的: 探讨吸入一氧化氮(NO)对缺氧性肺动脉高压患者一氧化氮合酶(NOS)和内皮素-1(ET-1)的影响。方法: 13例肺动脉高压患者行NO吸入,分别于吸入NO前、吸入30 min时、停止吸入2 h和12 h采肺动脉血,测白细胞中的NOS及血浆中的ET-1。结果: 吸入NO前、吸入30 min时、停止吸入2 h和12 h,所测NOS值分别为(0.70±0.21)mol/min·mg^-1、(0.74±0.14)mol/min·mg^-1、(0.64±0.22)mol/min·mg^-1和(0.63±0.17)mol/min·mg^-1;所测ET-1为(78.89±46.59)pmol/L、(88.27±45.41)pmol/L、(80.76±42.66)pmol/L和(61.07±29.44)pmol/L;后三者同吸入前比,P均＞0.05。结论: 缺氧性肺动脉高压患者吸入NO对机体NOS和ET-1未见明显影响。     

内皮素性大鼠门静脉高压模型的建立

目的： 建立内皮素-1(ET-1)引起门静脉压力升高的动物模型。方法: 正常雄性SD大鼠48只，随机分为生理盐水组、ET-1低剂量组(0.3 μg/kg)，ET-1中剂量组(1.0 μg/kg)和ET-1高剂量组(3.0 μg/kg)。生理盐水组大鼠经股静脉注入生理盐水，其余各组大鼠按相应剂量经股静脉注入ET-1溶液，观察门静脉压力和颈动脉压力的变化情况,并筛选出能使门静脉压力升高最适宜的剂量；另取15只大鼠随机分为对照组、ETAR阻断剂(BQ-123)组和ETBR阻断剂(BQ-788)组，实验开始前30 min经各组大鼠股静脉分别注入生理盐水、ETR阻断剂BQ-123(给药剂量为12.5 μg/kg)和BQ-788(给药剂量为15 μg/kg)，然后以选定的适宜剂量匀速注入ET-1溶液，观察各组大鼠门静脉压力变化。结果: 不同剂量的ET-1均能使门静脉压力升高，尤以高剂量组最为明显；而提前注入ETR阻断剂之后，再注入ET-1溶液门静脉压力虽然升高，但升高的幅度较小。结论: 成功创建了内皮素性大鼠门静脉高压模型，此模型可用于研究ET-1在PHT发病机制中的作用和药物对PHT时血中ET-1的影响。     

低氧对人脐静脉内皮细胞一氧化氮和内皮素-1的生成及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的：通过观察低氧对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌一氧化氮(NO）、内皮素-1(ET-1)以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA 表达的影响，探讨低氧性肺动脉高压(HPH)形成的机制。 方法： 在离体培养人脐静脉内皮细胞基础上，采用硝酸还原酶和放射免疫分析方法检测了低氧（3％O2）培养6 h、12 h和24 h人脐静脉内皮细胞分泌NO和ET-1的变化，同时运用半定量RT-PCR对iNOS mRNA表达情况进行分析。 结果： 低氧组各时点培养液中NO2-/NO3-和ET-1水平显著高于常氧组(P<0.01)，同时观察到iNOS基因mRNA的表达也相应增高(P<0.01)。 结论： 低氧能刺激人脐静脉内皮细胞生成释放NO和ET-1, NO生成增多与低氧正调iNOS基因mRNA的表达有关。     

硫化氢供体对大鼠高肺血流性肺动脉高压中内皮素-1及结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨硫氢化钠（NaHS）对大鼠高肺血流性肺动脉高压中内皮素-1(ET-1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:32只雄性SD大鼠随机分为分流组（n=8）、分流+NaHS组（n=8）、假手术组（n=8）和假手术+NaHS组（n=8）。对分流组和分流+NaHS组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型。分流11周后，分别测定大鼠肺动脉收缩压（SPAP）、血浆ET-1含量、肺组织硫化氢（H2S）含量、肺组织ET-1mRNA的表达及肺动脉CTGF蛋白的表达。结果:分流11周，大鼠SPAP明显高于假手术组(P<0.05)；分流组大鼠肺组织ET-1mRNA表达、血浆ET-1含量以及肺腺泡肌型动脉CTGF表达明显高于假手术组；肺组织H2S含量明显低于假手术组(P<0.05)；应用NaHS干预11周，分流+NaHS组大鼠H2S含量明显高于、而SPAP明显低于假手术组(P<0.05)；分流+NaHS组大鼠血浆ET-1含量及肺组织ET-1mRNA的表达明显低于分流组(P<0.05)；分流+NaHS组大鼠肺动脉CTGF蛋白表达明显低于分流组(P<0.05)。结论: NaHS可能通过降低血管活性肽ET-1 及CTGF在肺组织的表达参与调节高肺血流性肺动脉高压的形成。     

大鼠肝前性门静脉高压症形成中一氧化氮和内皮素-1水平的动态变化

目的:观察大鼠肝前性门静脉高压症形成中一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)水平的动态变化,探讨其在门静脉高压症高动力循环中的作用。方法:以部分门静脉结扎(PVL)法复制肝前性门静脉高压症大鼠模型,分别用硝酸还原酶和放免法检测正常组、假手术(SO)组及PVL组术后不同时点的门静脉血浆NO^-₂/NO^-₃、ET-1水平,并同步监测血流动力学指标的动态变化。结果:PVL术后各时点NO^-₂/NO^-₃水平显著高于而ET-1水平显著低于正常组,同时伴有血流动力学的明显变化。结论:门静脉高压症大鼠存在高动力循环状态(HCS)。NO和ET-1参与HCS的形成和维持。     

次声作用后血浆NO、ET-1、SOD、MDA水平的变化

目的：测定8 Hz、130 dB次声不同时间暴露后大鼠血浆一氧化氮（NO）、内皮素（ET-1）、SOD、MDA水平的变化。方法：用8 Hz、130 dB的次声连续作用大鼠1、7、14、21和28 d，每天2 h，测定大鼠血浆NO、ET-1、SOD、MDA水平。结果：在暴露期间，7、14 d时大鼠血浆NO含量显著最低（P＜0.01），1 d、21 d和28 d时正常（P＞0.05）；大鼠血浆ET-1含量均明显升高（P＜0.01），7 d时升高最多，14 d时升高最少；大鼠血浆SOD活性明显降低（P＜0.01）；大鼠血浆MDA水平明显升高（P＜0.01）。结论：次声可引起大鼠血浆NO、ET-1、SOD、MDA水平的变化，发生的改变与次声暴露时间有关。     

梗阻性黄疸大鼠内毒素、内皮素-1和一氧化氮的变化及甘氨酸治疗的实验研究

目的: 观察梗阻性黄疸时内毒素、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)的变化和甘氨酸的治疗作用。方法: 选择标准Wistar大鼠90只, 随机分为3组: 假手术组(A)、胆总管结扎组(B)和胆总管结扎+甘氨酸组(C)。手术结扎胆总管复制梗阻性黄疸模型。甘氨酸用药方法为术前5 d, 术后6 d自由饮用含5%甘氨酸的水溶液, 术后第8 d测胆红素、内毒素、ET-1和NO水平并进行3组间的两两比较。结果: 胆红素、内毒素、ET-1和NO水平, B组和C组均显著高于A组, 且ET-1和NO水平B组也显著高于C组。但胆红素和内毒素水平在B组和C组之间无显著差异。结论: 梗阻性黄疸时, 内毒素、ET-1、NO水平均增高, 甘氨酸能降低内毒素的生物学效应, 减少ET-1和NO的产生, 可能有助于减轻梗阻性黄疸时的病理损伤作用。     

内皮素-1及一氧化氮水平与2型糖尿病听力损害的关系

目的: 探讨内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)与糖尿病听力损害的关系。方法: 共入选88例2型糖尿病患者,所有患者通过相关临床并发症检查排除糖尿病伴视网膜、肾脏及神经病变,并取同期53例正常人群作为对照。对每位患者进行纯音测听判断是否存在听力损害。分别以放射免疫法及硝酸还原酶法检测所有对象血浆ET-1和血清NO水平。结果: 糖尿病伴听力损害患者血浆ET-1显著增高(P<0.01),血清NO水平显著下降(P<0.05)。多因素logistic回归分析发现高糖化血红蛋白(HbA1c)(OR:4.525,P<0.05)、高低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) (OR:2.381,P<0.05)、高血浆ET-1(OR:6.207,P<0.01)和低血清NO(OR:0.862,P<0.05)是糖尿病听力损害的独立危险因素。结论: 糖尿病相关听力损害发生可能早于其它并发症,高血糖、高血脂、高血浆ET-1及低血清NO水平与糖尿病听力损害的发生密切相关。     

低氧诱导因子-1α和内皮素-1基因在大鼠低氧性肺动脉高压中的表达

目的　探讨低氧诱导因子 1(HIF 1α)和内皮素 1(ET 1)基因表达在低氧性肺动脉高压发病过程中的变化和作用。方法　复制低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,测定平均肺动脉压 ,弹力纤维染色显示腺泡内肺动脉 ,用放射免疫法测ET含量 ,原位杂交方法进行检测HIF 1αmRNA。结果　HIF 1αmRNA在低氧各组腺泡内肺动脉有表达 ,低氧 14d组 (0 2 5 6 9± 0 0 46 8)和低氧 2 8d组 (0 2 2 5 8±0 0 45 3)染色强于低氧 5d组 (0 145 5± 0 0 2 72 )和正常组 (0 110 9± 0 0 2 2 4) ;ET 1mRNA在低氧各组腺泡内肺动脉有表达 ,低氧 14d组 (0 412 2± 0 0 783)和低氧 2 8d组 (0 36 84± 0 0 72 9)染色强于低氧5d组 (0 2 0 17± 0 0 34 9)和正常组 (0 185 5± 0 0 36 1) ,HIF 1α和ET 1基因表达在H14d组和H2 8d组明显增加 (P <0 0 5 )。肺动脉血中ET 1含量在H14d组 [(15 8 78± 2 5 14)pg/ml]和H2 8d组 [(142 93± 2 3 38)pg/ml]明显高于H5d组 [(79 6 8± 12 5 4)pg/ml]和正常组 [(6 5 37± 10 82 )pg/ml](P <0 0 5 ) ;H14d组 [(34 0± 5 8)mmHg]和H2 8d组 [(2 9 0± 4 7)mmHg]的mPAP也明显高于H5d组[(19 0± 3 5 )mmHg]和正常组 [(17 0± 2 8)mmHg](P <0 .0 5 ) ,并且与肺动脉血中ET 1含量呈正比(rs=0     

NF-κB的活性和iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压中的变化

目的：探讨NF-κB的活性及iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压（HPH）发病过程中的变化。方法：复制低氧性肺动脉高压大鼠模型，用免疫组化、原位杂交、半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blot等方法进行检测。结果：iNOS mRNA在腺泡内肺动脉（IAPA）的表达，低氧28 d（H28d）组染色强于正常（N）组、低氧5 d（H5d）组和低氧14 d（H14d）组。半定量RT-PCR证实低氧肺组织iNOS mRNA含量在H28d组分别是N组、H5d组和H14d组的2.1倍、1.9倍和1.8倍。H28d组肺组织NF-κB的核染色增多，I-κBα的含量在N组、H5d组和H14d组分别是H28d组的2.7倍、2.8倍和2.5倍。结论：在HPH中NF-κB的激活可能与低氧肺血管构建及iNOS mRNA的表达有关。     

阿托伐他汀对兔急性心肌梗死再灌注后一氧化氮、内皮素-1水平及心功能的影响

目的:评价阿托伐他汀对兔急性心肌梗死再灌注(AMI/R)后一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平的影响及对心功能的作用。方法:新西兰大白兔24只随机分成AMI/R组、阿托伐他汀治疗组(5mg·kg-1.d-1)和假手术组,每组8只。冠状动脉结扎60min,松解120min制备AMI/R模型。梗死前、后和再灌注后均行血流动力学测定,采用硝酸还原酶法检测血浆及心肌组织NO水平,采用放射免疫方法测定血浆及心肌组织ET-1水平。结果:(1)与AMI前相比较,AMI/R组AMI60min和再灌注后120min,心率(HR)、主动脉收缩压(SBP)和舒张压(DBP)、左室收缩压(LVSP)、左心室内压最大收缩和舒张变化速率(±dp/dtmax)及心排量(CO)均显著下降,左室舒张末压(LVEDP)显著升高(P0.05或P0.01)。与AMI前相比,阿托伐他汀治疗组AMI60min和再灌注后120min上述各项指标变化与AMI/R组的变化趋势相似(P0.05或P0.01),但再灌注后120minLVSP、LVEDP、±dp/dtmax及CO比AMI60min有显著恢复(P0.01),且比AMI/R组恢复更显著(P0.05或P0.01);另外,治疗组SBP、DBP下降幅度明显低于AMI/R组(P0.01)。(2)与AMI/R组相比,阿托伐他汀能使AMI再灌注后血浆NO水平显著升高,ET-1水平显著降低(P0.01);而心肌组织NO、ET-1的含量治疗组仅复流区显著降低(P0.05或P0.01)。(3)与AMI/R组相比,阿托伐他汀可促进AMI后心功能的恢复。结论:阿托伐他汀能使缺血再灌注后血浆及心肌NO水平显著升高,ET-1水平显著降低,具有内皮保护作用;可促进AMI后心功能的恢复。