复方火炭星胶囊抗鼠白血病病毒作用实验研究

目的观察复方火炭星胶囊体内抗鼠白血病病毒作用。方法BALB/C小鼠60只,随机分成正常组、模型组、复方火炭星胶囊大、中、小剂量组(剂量分别为1000/500/100mg·kg-1·d-1),叠氮脱氧胸苷(AZT)组(剂量为150mg·kg-1·d-1);除正常组外,其他组小鼠均腹腔接种Friend型鼠白血病病毒(FLV),复制小鼠艾滋病模型;病毒攻击后4h,各组均按设计剂量给药,连续给药21d,剖杀小鼠,观察火炭星对模型小鼠的脾指数(质量比)及脾指数抑制率、外周血白细胞、红细胞和淋巴细胞计数的影响。结果复方火炭星胶囊高剂量组能抑制模型小鼠的睥肿大(P<0.05),改善病毒引起的外周血白细胞、红细胞异常升高和淋巴细胞异常降低等血象指标变化(P<0.05或P<0.01),与模型组比较差异均具有显著性意义。结论复方火炭星胶囊对小鼠体内感染鼠白血病病毒具有显著抑制作用。     

白藜芦醇对Friend鼠白血病病毒抑制作用及其机制研究

目的:探讨白藜芦醇抗Friend鼠白血病病毒(以下简称Friend病毒)感染的疗效和作用机制.方法:将雌性Balb/C小鼠61只随机分为5组,分别为模型组12只,AZT(齐多夫定)组12只,正常组12只,白藜芦醇高剂量组(100mg·kg-1·d-1)13只,白藜芦醇低剂量组(20mg·kg-1·d-1)12只.除正常组外,其余小鼠腹腔注射100倍ID50剂量的10%脾悬液攻毒.后分别给予相应药物,连续30天,其后处死小鼠,称取脾重和体重,计算脾指数.流式细胞仪测定外周血CD3和CD19淋巴细胞的比率,Real-Time PCR定量病毒栽量方法评价白藜芦醇抗Friend病毒活性.结果:模型组小鼠在攻毒后第9天腹部触诊可以扪到肿大的脾,攻毒后第14天及第29天各死亡1只,其中1只在死亡前几小时表现出神经系统症状,如后肢瘫痪、痉挛状不停侧身翻滚.其余各组小鼠无死亡.攻毒30天后脾指数正常组与AZT组最低,与模型组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);白藜芦醇高剂量组也较低,与模型组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).模型组CD19、CD3细胞显著降低,正常组、AZT组CD19、CD3细胞百分比均较高,与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P＜0.05,P＜0.01).白藜芦醇高剂量组CD3细胞较模型组高(P＜0.05),但CD19细胞与模型组无差异.与模型组比较,AZT组血清病毒栽量降低了86.6%(P＜0.01),白藜芦醇高荆量组降低了68.7%(P＜0.05),结论:白藜芦醇对Friend病毒感染小鼠有保护作用,能够抑制病毒导致的脾肿大,提高感染小鼠的T淋巴细胞,降低血清病毒栽量.     

灵芝孢子油HPLC指纹图谱研究

目的:建立灵芝孢子油的HPLC指纹图谱,为科学评价与有效控制灵芝孢子油质量提供新方法。方法:采用HPLC法测定10批灵芝孢子油样品。色谱条件:Kromasil-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-异丙醇(53∶47)为流动相;体积流量0.8 mL/min;蒸发光散射检测器检测;柱温30℃;进样量10μL。结果:测定10批次灵芝孢子油样品,标定共有峰13个,相似度较高,各色谱峰分离较好,达到中药指纹图谱研究的技术要求。结论:该方法简便、快速、精密度高、重现性好,为灵芝孢子油的定性鉴别及内在质量评价提供了科学依据。     

口服灵芝孢子油对小鼠的扶正及减毒作用研究

目的观察灵芝孢子油的扶正减毒作用。方法以正常和H11荷瘤小鼠为对象，通过检测外周血WBC数、骨髓有核细胞数、脾脏指数、胸腺指数来观察口服灵芝孢子油（2．5，1．25，0．625g/kg）对于环磷酰胺（Cy）化疗及^60Co放疗的减毒作用；通过小鼠碳廓清实验、血清溶血素测定实验检测药物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果灵芝孢子油中高剂量组均可明显对抗由大剂量Cy、^60Co照射造成的正常及荷瘤小鼠外周血WBC，骨髓有核细胞数，脾脏指数和胸腺指数下降（P〈0．01，P〈0．05）。灵芝孢子油各剂量均可显著提高荷瘤小鼠吞噬系数α，中高剂量组可明显提高荷瘤小鼠的血清半数溶血值（P〈0．01，P〈0．05）。结论灵芝孢子油可减低Cy和^60Co所致的骨髓抑制毒性，并可显著提高小鼠细胞和体液免疫功能。     

灵芝孢子油对化学性肝损伤保护作用的研究

目的探讨灵芝孢子油对化学性肝损伤的保护作用。方法分别以0.17g/Kg、0.33g/Kg、1.00g/Kg三个剂量对小鼠每日灌胃给予灵芝孢子油,空白对照组和模型对照组给予玉米油。30天后将各组动物禁食16h,模型组及灵芝孢子油各剂量组动物按0.1ml/10g一次灌胃给予CCl4制作模型,灵芝孢子油各组造模4h后继续给予灵芝孢子油。24h后摘取小鼠眼球取血,分离血清,测定ALT、AST,同时处死动物,取肝脏进行组织病理学检查。结果CCl4模型组小鼠的ALT、AST含量比空白对照组显著升高(P<0.05),低、中、高各剂量组的ALT值及AST值与CCl4模型组比较,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。结论灵芝孢子油对CCl4化学性肝损伤具有保护作用。     

灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能影响浅释

[目的]观察灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能的影响。[方法]测定灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞亚群的含量变化、IL-2的活性和ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应。[结果]灵芝孢子油可显著升高正常小鼠外周血CD4+T细胞比例,降低CD8+T细胞比例,升高CD4+/CD8+比值。可以促进正常小鼠诱生IL-2。促进ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖反应。[结论]灵芝孢子油能促进小鼠T淋巴细胞的免疫功能。     

灵芝孢子油软胶囊增强免疫力的研究

目的观察中科灵芝孢子油软胶囊对小鼠免疫力的影响。方法将120只健康雌性小鼠分为3个实验组，每组分高、中，低和对照4个剂量组，连续灌胃给药30d后，分别进行小鼠炭粒廓清试验、DNFB诱导小鼠DTH试验、血清溶血素测定试验，测定相关的免疫学指标。结果各剂量组对DNFB诱导小鼠DTH均有明显影响（P〈0．01；高、中剂量组能增加小鼠炭粒廓清的吞噬指数和HC50，与对照组比较差异性显著（P〈0．05）。低剂量对各项指标均无明显影响。结论中科灵芝孢子油软胶囊对小鼠的免疫力具有一定的增强作用。     

灵芝孢子油中麦角甾醇含量测定方法研究

目的:建立灵芝孢子油的含量控制方法。方法:采用HPLC色谱法建立了灵芝孢子油中的麦角甾醇含量测定方法。结果:能准确的测定原料及制剂中的该成分的含量,该方法操作简便,重现性高,特异性强,麦角甾醇在0.316~580 mg/ml范围内呈良好的线性关系;回归方程:Y=1.08581X 1.58888,r=0.9999;平均加样回收率在99.37%~103.80%之间,RSD为1.54%。结论:可作为控制灵芝孢子油类产品质量的有效方法和依据。     

口服灵芝孢子油对小鼠免疫功能的影响

灵芝是担子菌纲多孔菌科(polyproraceae)灵芝属(gano-derma)真菌赤芝G.Lucidum Karst.和紫芝G.JaponicumLloyd的总称,是祖国中医药宝库中的珍品,素有“仙草”之誉。基于灵芝的确切临床治疗作用,近年来对其化学成分及作用机理进行了大量的研究,对灵芝的生殖细胞———孢子药用价     

灵芝孢子油的总三萜测定研究及HPLC鉴别

目的:研究灵芝孢子油质量控制的有效方法。方法:以分光光度法测定总三萜含量。HPLC方法采用Kromasil-C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),乙腈-异丙醇(53∶47)为流动相,流速0.5 mL/min;蒸发光散射检测器检测;柱温30℃。结果:采用分光光度法测定,灵芝孢子油及食用油中总三萜含量均高于20%;HPLC法测定灵芝孢子油中三油酸甘油酯含量大于20%,食用油中三油酸甘油酯含量小于9%。结论:分光光度法测定灵芝孢子油总三萜无专属性。HPLC方法简便、迅速、准确、专属性强,通过HPLC定性相似度比较可作为控制灵芝孢子油的有效方法。     

灵芝孢子油通过下调miR-21促进人肺腺癌SPC-A1细胞凋亡

目的:通过检测灵芝孢子油对人肺腺癌细胞SPC-A1增殖、凋亡与miR-21及其靶基因表达的影响,探讨灵芝孢子油的抗肿瘤机制。方法:灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞SPC-A1 24 h以及48 h后,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡,Real-time PCR检测miR-21及其靶基因PTEN和PDCD4的表达。结果:灵芝孢子油剂量、时间依耐性地抑制人肺腺癌SPC-A1细胞的增殖;当灵芝孢子油体积分数达到0.2%时,细胞形态发生明显变化;Annexin-V/PI双染检测提示,灵芝孢子油在低浓度下就可促进细胞凋亡;灵芝孢子油显著下调SPC-A1细胞中miR-21的表达并相应上调PTEN以及PDCD4基因的表达。结论:灵芝孢子油能显著抑制人肺腺癌细胞SPC-A1细胞增殖,引起细胞形态学改变。通过下调miR-21的表达,上调抑癌基因PTEN以及PDCD4的表达,从而促进肺癌细胞凋亡,达到抗肿瘤的作用。     

七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病L1210细胞的体内外作用研究

目的 探讨七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病L1210细胞的体外增殖抑制作用和体内抗白血病作用.方法 采用MTT法观察七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病细胞L1210的体外增殖抑制作用;建立L1210小鼠白血病移植模型,观察七叶皂苷钠对荷瘤小鼠生命的延长率,以及对化疗药阿霉素的增敏作用,并绘制生存曲线.结果 七叶皂苷钠(20～60 μg/mL)对L1210细胞具有一定的增殖抑制作用,作用呈时间和剂量依赖性,体外作用72 h的IC50为(24.86±2.23)μg/mL;体内实验结果显示,七叶皂苷钠中、高剂量组能明显延长荷瘤小鼠的生命期,生命延长率分别为32.3%和25.8%(P＜0.01),低剂量组对常规化疗药阿霉素具有增敏作用.结论 七叶皂苷钠能有效抑制L1210细胞体外增殖,对体内L1210白血病小鼠移植模型也具有一定的治疗效果.     

桂枝挥发油抗甲型流感病毒作用

目的:观察桂枝挥发油及其主要成分桂皮醛体外对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)增殖的影响及对该流感病毒株感染小鼠的治疗作用。方法:MTT法检测受试药物对狗肾传代细胞(MDCK)的半数中毒浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC0);血凝法测定甲型流感病毒(H1N1)对MDCK细胞的感染性;MTT法和细胞病变法(CPE)测定两种药物体外抑制流感病毒增殖的有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)。计算肺指数及HE染色观察药物对流感病毒(H1N1)感染小鼠的治疗作用。结果:桂枝挥发油和桂皮醛对MDCK细胞的TC50分别为5.38×10-3mg/ml和5.49×10-3mg/ml,TC0均为2.5×10-3mg/ml。桂枝挥发油和桂皮醛能抑制流感病毒在MDCK细胞内的增殖,其IC50分别为5.80×10-5mg/ml与5.31×10-5mg/ml,TI分别为92.82和103.35。桂枝挥发油0.174mg/kg和桂皮醛0.132mg/kg连续灌胃5d,明显降低病毒感染小鼠的肺指数,抑制率分别为26.7%和27.4%,并对病理组织形态有改善作用。结论:桂枝挥发油与桂皮醛体外明显抑制甲型流感病毒(H1N1)在MDCK细胞中的增殖,并对流感病毒株感染小鼠有较好的治疗作用。表明桂枝挥发油及桂皮醛具有抗甲型流感病毒作用,桂皮醛是桂枝挥发油抗病毒效应的主要有效成分之一。     

荆芥挥发油及其主要成分抗流感病毒作用研究

目的:观察荆芥挥发油及其主要成分薄荷酮、胡薄荷酮在鸡胚内及小鼠体内的抗流感病毒作用。方法:分别以预防(鸡胚感染病毒前1h给药)和治疗(鸡胚染毒后1h给药)两种给药方式,经鸡胚尿囊腔和卵黄囊两种给药途径将不同浓度的药物注入鸡胚,孵育48h后收取鸡胚尿囊液进行血凝试验来评价药物在鸡胚内的抗病毒效应。分别以预防(小鼠感染病毒前5d开始给药,连续5d)和治疗(小鼠感染病毒后当天开始给药,连续5d)方式给药,计算肺指数来评价药物的体内抗病毒效应。结果:胡薄荷酮0.1×2-8ml/胚剂量经尿囊腔预防给药后鸡胚尿囊液的血凝滴度明显降低;荆芥挥发油0.05×2-15ml/胚剂量经尿囊腔治疗给药后尿囊液血凝滴度明显降低;荆芥挥发油0.1×2-12、0.05×2-12、0.025×2-12ml/胚剂量与胡薄荷酮0.1×2-8、0.05×2-8、0.025×2-8ml/胚剂量经卵黄囊预防给药后尿囊液血凝滴度明显降低;荆芥挥发油0.1×2-12、0.05×2-12ml/胚、薄荷酮0.05×2-6ml/胚剂量及胡薄荷酮0.1×2-8、0.05×2-8、0.025×2-8ml/胚剂量经卵黄囊治疗给药后尿囊液血凝滴度明显降低。荆芥挥发油0.226ml/kg、薄荷酮0.5ml/kg、胡薄荷酮0.19 ml/kg剂量治疗方式给药明显降低病毒感染小鼠的肺指数。结论:荆芥挥发油及其主要成分胡薄荷酮在鸡胚内具有较好的抗流感病毒作用,且以卵黄囊途径给药效果为优,薄荷酮的抗病毒效应不明显。荆芥挥发油、薄荷酮及胡薄荷酮治疗方式给药对流感病毒感染小鼠有良好保护作用,但预防给药效果不明显。     

米托蒽醌为主中西医结合治疗急性白血病临床观察

目的：观察米托蒽醌及中西医结合治疗急性白血病的临床疗效。方法：将６０ 例急性白血病患者随机分为两组,对照组２７例,采用米托蒽醌为主的联合化疗;治疗组３３例,在用米托蒽醌为主联合化疗的基础上,加用健脾和胃,清热解毒中药。结果：治疗组获完全缓解（ＣＲ）２１例,部分缓解（ＰＲ）１０例,总有效率９３．９４％,明显优于对照组７０．３７％（Ｐ＜０．０５）,且临床未见明显毒副反应。结论：米托蒽醌为主联合方案治疗急性白血病疗效良好,毒副反应较轻,合用健牌和胃、清热解毒中药,可提高疗效,减轻毒副反应。     

荆芥挥发油及其主要成分抗流感病毒作用与机制研究

目的:体内、体外实验观察荆芥挥发油及主要成分薄荷酮、胡薄荷酮的抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1 N1)作用及其Toll样受体/干扰素(toll-like receptor/interferon,TLR/IFN)信号通路机制.方法:制备流感病毒性肺炎模型小鼠,以预防和治疗方式给药,测定模型动物肺组织病毒滴度以评价药物体内抗H1N1效应.ELISA法观察药物对模型小鼠血清干扰素-α(interferon-alpha,IFN-a),干扰素-β(interferon-beta,IFN-β),白介素-2(interleukin-2,IL-2),白介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)水平的影响及病毒感染狗肾传代细胞(Madin-Darby canine kidney cell,MDCK)上清液中IFN-β分泌水平的影响.实时荧光定量RT-PCR法观察药物对病毒感染MDCK细胞白介素1受体相关激酶-4(IL-1R-associated kinase-4,IRAK4)与Toll样受体3(toll-like receptor-3,TLR3) mRNA表达水平的影响.结果:体内实验表明,荆芥挥发油0.226 mg·kg-1、薄荷酮0.5 mg·kg-1及胡薄荷酮0.19 mg·kg-1治疗方式给药明显降低感染小鼠肺组织病毒滴度;荆芥挥发油0.226 mg·kg-明显升高感染小鼠血清IFN-α,IL-2含量;薄荷酮0.5 mg· kg-1显著提高血清IFN-β含量.薄荷酮0.5mg-kg-1、胡薄荷酮0.19mg·kg-1明显降低病毒感染小鼠血清IL-6含量.荆芥挥发油0.452,0.226 mg·kg-1及胡薄荷酮0.19 mg·kg-1明显降低模型小鼠血清TNF-α含量.体外实验显示,荆芥挥发油0.1g.L-1、胡薄荷酮0.1g·L-1显著升高感染细胞上清液中IFN-β含量,并使细胞IRAK4 mRNA表达水平显著升高;薄荷酮0.25 g· L-1使感染细胞IRAK4mRNA表达显著增强,但明显降低TLR3 mRNA表达.结论:荆芥挥发油、薄荷酮及胡薄荷酮治疗方式给药能显著降低病毒感染小鼠肺组织病毒滴度,显示出体内抗病毒作用,但预防给药效果不明显.体内抗病毒感染机制与提高感染小鼠干扰素(IFN-α,IFN-β),IL-2水平,抑制IL-6,TNF-α分泌有关;细胞模型结果提示药物通过TLR3和TLR7信号通路影响IFN-β的表达.     

黄芪注射液联合拉米夫定治疗乙型肝炎相关性肾炎临床观察

目的探讨黄芪注射液联合拉米夫定治疗乙型肝炎相关性肾炎(HBV-GN)的疗效及作用机制。方法将55例HBV-GN患者按双盲法随机分为2组,对照组25例予拉米夫定100 mg,每日1次口服,治疗组30例在对照组的基础上加用黄芪注射液40 mL,每日1次静脉滴注。2组均24周为1个疗程。2组均在治疗前、治疗第122、4周及随访6个月后行症状积分评定各1次,并观察2组临床疗效。结果2组治疗后各症状积分与本组治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01);2组治疗后食欲及腹胀积分比较差异均有统计学意义(P<0.01),乏力及水肿积分比较差异无统计学意义(P>0.01)。2组证候及尿蛋白疗效比较差异均有统计学意义(P<0.05)。其他实验室指标疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪注射液联合拉米夫定治疗HBV-GN在改善证候及尿蛋白方面优于单纯拉米夫定治疗。