AMG-1对突触体内游离钙水平及大鼠尾动脉收缩力的影响

观察了AMG-1对高钾所致大鼠脑突触体内游离钙浓度[Ca²⁺]i升高,及去甲肾上腺素引起的离体大鼠尾动脉环收缩力的影响。结果表明,AMG-110和100μmol·L^-1可对抗高钾(30mmol·L^-1)引起的[Ca²⁺]i升高,使分别降低19±11%及57±12%;在无钙Krebs-Hensleleit液中,AMG-1能抑制去甲肾上腺素引起大鼠尾动脉收缩力的作用。     

腺苷A1受体和NMDA受体在海马齿状回突触传递活动中的关系

目的探讨腺苷A₁受体阻断剂对海马齿状回(DG)突触传递活动的影响及其与NMDA受体的关系。方法 采用在体记录麻醉大鼠LTP的电生理学方法,观察腺苷A₁受体特异性阻断剂8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤(DPCPX)与NMDA受体激动剂、阻断剂在海马DG基础突触传递活动和高频刺激诱导的LTP中作用的相关性。结果DPCPX(6 mg·L^-1,5 μL,icv)或NMDA(0.2 mg·L^-1,5 μL,icv)不影响大鼠海马DG突触传递活动,DPCPX对icv NMDA后高频刺激诱导已形成的LTP维持也无影响;预先给予DPCPX后则可显著增强NMDA的海马DG基础突触传递活动和LTP;AP₅(0.5 mg·L^-1,5 μL)阻断NMDA受体后对LTP的抑制作用不受DPCPX的影响,但预先给予DPCPX则可取消AP₅对LTP的抑制作用。结论DPCPX不影响海马DG突触传递活动,但可影响NMDA受体的效应,增强NMDA受体在海马DG突触传递活动中的作用。     

对羟吡啶甲基腺苷在大鼠输精管A1与非A1受体作用

为进一步研究对羟吡啶甲基腺苷(HPMA)受体作用特点,用离体大鼠前列腺端输精管,比较了它与A1受体特异性激动剂环己烷基腺苷(CHA)作用异同。结果表明,HPMA有非A1受体样突触后抑制作用,能剂量依赖性地降低外源性PE,NE,ACh引起的输精管收缩反应;在场刺激下它优先作用于突触前;高剂量的HPMA(10^-5mol·L^-1)不仅可完全抑制场刺激引起的输精管收缩反应,同时还使组织对外源性ACh的反应性降低,是突触前抑制和突触后抑制的共同结果。提示HPMA在大鼠输精管同时具有突触前A1受体和突触后非A1受体作用。     

山莨菪碱对乙酰胆碱和去甲肾上腺素引起的兔虹膜释放前列腺素的影响

本文研究了654-2对Ach及NE引起的兔虹膜释放PGE₂及6-keto-PGF_1α作用的影响。Ach及NE使虹膜释放PGs增加,654-2对Ach释放PGs的作用呈剂量依赖性抑制,当654-2浓度为3×10^-5mol/L时,Ach(5x10^-5mol/L)引起的PGE₂及6-keto-PGF_1α的释放量分别降低31%及30%。654-2浓度高于6x10^-5mol/L时显著抑制NE(5x10^-5mol/L)释放虹膜PGs的作用,当654-2浓度为3x10^-4mol/L时,使NE增加虹膜释放PGE:及6-keto-PGF_1α的量分别从62%及34%降至7.5%及4%(p<0.01)。654-2抑制PGs释放对其抗感染性休克等作用可能是有利的。     

多巴胺对大鼠纹状体突触前和突触后膜 Na+,K+-ATP 酶活性调节的差异

用蔗糖-Ficol梯度不连续离心法制备大鼠纹状体突触前膜和突触后膜,研究多巴胺(DA)受体对突触前和突触后膜Na⁺,K⁺-ATP酶活性的调节作用。结果表明,DA(10^-8～10^-5mol·L^-1)显著抑制突触后膜Na⁺,K⁺-ATP酶的活性,单独用选择性D1(SKF38393)或D2(LY171555)受体激动剂均无抑制作用,而当二者合用时则产生与DA相似的抑制效应。DA对Na⁺,K⁺-ATP酶的抑制效应可被单独用选择性D1(SCH23390)或D2(spiperone)受体拮抗剂而逆转。相反,DA却能显著激活突触前膜Na⁺,K⁺-ATP酶的活性,单用spiperone即可逆转此激活效应。结果提示,突触前和突触后DA受体对Na⁺,K⁺-ATP酶的调节存在差异,可能与它们的不同生理功能有关。     

AMP579与腺苷对大鼠和豚鼠心室肌钾离子或钠离子通道作用的比较

目的研究AMP579和腺苷对钾离子与钠离子通道的影响及其作用机制，比较它们对负性变力及抗心律失常作用的离子机制。方法采用膜片钳全细胞记录模式记录大鼠和豚鼠心室肌细胞离子通道电流。结果腺苷对大鼠心室肌瞬时外向钾电流(I_{to)的激动作用强于AMP579，腺苷和AMP579的EC50值分别为2.33与8.32 μmol·L^-1 (P<0.05)；两者激动Ito的作用均可被腺苷A1受体阻滞剂PD116948阻断，表明其作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。腺苷对豚鼠心室肌延迟整流钾电流(IK)的抑制作用强于AMP579，腺苷和AMP579的IC50值分别为1.21与2.31 μmol·L^-1 (P<0.05)；AMP579对内向整流钾电流(IK1)的抑制作用强于腺苷，AMP579和腺苷的IC50值分别为4.15与20.7 μmol·L^-1 (P<0.01)。AMP579和腺苷对大鼠心室肌钠电流(INa)的抑制作用相似，其IC50值分别为9.46与6.23 μmol·L^-1。结论腺苷对大鼠心室肌Ito的激动作用强于AMP579，两者对Ito的作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。AMP579对IK1的抑制作用强于腺苷，而腺苷对IK的抑制作用强于AMP579，两者对INa的抑制作用相似，这些离子机制与两者发挥负性变力与抗心律失常作用有关系。}     

5-单硝酸异山梨酯对兔离体隐动脉交感嘌呤能缩血管反应的影响

采用兔离体隐动脉血管环张力实验及电场刺激诱发交感嘌呤能血管收缩实验，观察5-单硝酸异山梨酯(isosorbide-5-mononitrate，ISMN)对交感嘌呤能缩血管反应的作用，并分析其作用机制。结果表明，电场刺激(电压15 V，波宽1 ms，时程1 s)诱发兔离体隐动脉(去内皮)产生血管收缩反应。该收缩反应呈频率(2～16 Hz)依赖性，可被0.1 μmol·L^-1河豚毒素(tetrodotoxin)完全抑制。α₁受体阻断药哌唑嗪(1 μmol·L^-1)对2～8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应无影响。P2X₁受体激动药α,β-亚甲基ATP(3 μmol·L^-1)脱敏P2X₁受体，同时联合应用哌唑嗪(1 μmol·L^-1)完全抑制电刺激诱发的血管收缩反应。采用一个标本一个浓度给药时，ISMN(0.1 mmol·L^-1)显著抑制8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应，在0.3及1.0 mmol·L^-1时ISMN显著抑制各频率电刺激诱发的血管收缩反应； 1.0 mmol·L^-1 ISMN对电刺激诱发的血管收缩反应的抑制率分别为46%(2 Hz)、 47%(4 Hz)、 34%(8 Hz)和22%(16 Hz)。ISMN(0.3及1.0 mmol·L^-1)对外源性去甲肾上腺素(0.01～100 μmol·L^-1)或腺苷三磷酸(1 mmol·L^-1)诱发的血管收缩反应无影响。以上结果提示，ISMN显著抑制电场刺激诱发的交感嘌呤能血管收缩反应，其作用机制可能是ISMN作用于交感神经末梢突触前膜抑制嘌呤能神经递质产生的血管收缩反应。     

红花黄酮成分抑制血小板激活因子介导的血小板活化作用

目的　观察红花黄酮成分杨梅素(Myr)和山奈酚(Kae)对血小板激活因子(PAF)诱导的兔洗涤血小板聚集、5 HT释放及血小板内游离钙离子浓度升高的影响。方法　以比浊法测定家兔洗涤血小板(WRP)聚集,邻苯二甲醛(OPT)荧光法测定5-HT浓度,Fura-2荧光探针测定血小板内游离钙离子浓度。结果　Myr和Kae体外呈浓度依赖性地抑制PAF诱发的WRP聚集及5-HT释放。Myr抑制WRP聚集的IC₅₀ 为17.5 μmol·L^-1 ;抑制5-HT释放的IC₅₀ 为64.1μmol·L^-1 。Kae抑制聚集、释放作用的IC₅₀ 分别为73.7μmol·L^-1 和128μmol·L^-1 ;同时Myr和Kae均能明显抑制PAF引起的血小板内游离钙增高。结论　Myr和Kae可抑制PAF诱导的血小板活化作用     

四氢巴马汀等异喹啉生物碱对突触体及囊泡摄取[3H]多巴胺的影响

本文报道四氢巴马汀(THP)等异喹啉生物碱对[³H]DA摄取的作用。突触体对[³H]DA的亲和力常数Km为0.23μmol。最大摄取速率Vmax为1.2 nmol/g(5 min)。d-THP,1-SPD和1-THP对突触体摄取[³H]DA均有抑制作用,其IC₅₀分别为0.44,2.24和18.5μmol。d-THP的作用比1-THP约强20倍。nomifensine,苯丙胺和氟哌啶醇亦能有效地抑制[³H]DA摄取(IC₍₅₀₎分别为0.05,0.27和3.18μmol)。动力学研究表明,d-THP和nomifensine为DA摄取的竞争性抑制剂。用低渗溶液处理溶胀的方法研究药物对递质贮存的作用发现,与利血平相似,d-THP显著降低贮存囊泡[³H]DA含量并使囊泡与突触体[³H]DA含量之比明显减小。实验结果表明,THP等能抑制突触体摄取,并直接作用于贮存囊泡抑制[³H]DA贮存,因此具有利血平样排空作用。     

果糖二磷酸钠镁对缺血突触体游离钙浓度及一氧化氮合酶活性的影响

目的研究果糖二磷酸钠镁对缺血突触体游离钙浓度及一氧化氮合酶活性的影响,以探讨其保护脑缺血的作用机制。方法以相分离法制备正常大鼠脑突触体,氧糖剥夺培养建立缺血突触体模型,加入1.3 mmol·L^-1 SMFD,4.0 mmol·L^-1 FDP与之培养60 min后,测定突触体内游离钙浓度和一氧化氮合酶活性。结果1.3 mmol·L^-1 SMFD可明显降低缺血突触体内游离钙浓度,降低一氧化氮合酶活性,其作用强于4.0 mmol·L^-1 FDP。结论SMFD保护脑缺血的作用机制可能与其阻止脑缺血后细胞内钙超载,抑制一氧化氮合酶活性有关。     

Idebenone inhibition of glutamate release from rat cerebral cortex nerve endings by suppression of voltage-dependent calcium influx and protein kinase A

The present study was aimed at investigating the effect and the possible mechanism of idebenone on endogenous glutamate release in nerve terminals of rat cerebral cortex (synaptosomes). Idebenone inhibited the release of glutamate that was evoked by exposing synaptosomes to the K⁺ channel blocker 4-aminopyridine (4-AP), and this phenomenon was concentration dependent. Inhibition of glutamate release by idebenone was prevented by chelating extracellular Ca²⁺, or by the vesicular transporter inhibitor bafilomycin A1, but was insensitive to DL-threo-beta-benzyl-oxyaspartate, a glutamate transporter inhibitor. Idebenone decreased the depolarization-induced increase in the cytosolic free Ca²⁺ concentration ([Ca²⁺]_C),whereas it did not alter the resting synaptosomal membrane potential or 4-AP-mediated depolarization. The inhibitory effect of idebenone on evoked glutamate release was prevented by blocking the Ca_v2.2 (N-type) and Ca_v2.1 (P/Q-type) channels, but not by blocking intracellular Ca²⁺ release or Na⁺/Ca²⁺ exchange. Furthermore, the idebenone effect on 4-AP-evoked Ca²⁺ influx and glutamate release was completely abolished by the protein kinase A (PKA) inhibitors, H89 and KT5720. On the basis of these results, it was concluded that idebenone inhibits glutamate release from rat cortical synaptosomes and this effect is linked to a decrease in [Ca²⁺]_C contributed by Ca²⁺ entry through presynaptic voltage-dependent Ca²⁺ channels and to the suppression of PKA signaling cascade.     

Histamine H3 receptor activation inhibits glutamate release from rat striatal synaptosomes

The release of glutamate from striatal synaptosomes induced by depolarisation with 4-aminopyridine (4-AP) was studied by a method based on the fluorescent properties of the NAPDH formed by the metabolism of the neurotransmitter by glutamate dehydrogenase.Ca²⁺-dependent, depolarisation-induced glutamate release was inhibited in a concentration-dependent manner by the selective histamine H₃ agonist immepip. Best-fit estimates were: maximum inhibition 60±10% and IC₅₀ 68±10 nM. The effect of 300 nM immepip on depolarisation-evoked glutamate release was reversed by the selective H₃ antagonist thioperamide in a concentration-dependent manner (EC₅₀ 23 nM, K_i 4 nM).In fura-2-loaded synaptosomes, the increase in the intracellular concentration of Ca²⁺ ([Ca²⁺]_i) evoked by 4-AP-induced depolarisation (resting level 167±14 nM; Δ[Ca²⁺]_i 88±15 nM) was modestly, but significantly reduced (29±5% inhibition) by 300 nM immepip. The action of the H₃ agonist on depolarisation-induced changes in [Ca²⁺]_i was reversed by 100 nM thioperamide.Taken together, our results indicate that histamine modulates the release of glutamate from corticostriatal nerve terminals. Inhibition of depolarisation-induced Ca²⁺ entry through voltage-dependent Ca²⁺ channels appears to account for the effect of H₃ receptor activation on neurotransmitter release. Modulation of glutamatergic transmission in rat striatum may have important consequences for the function of basal ganglia and therefore for the control of motor behaviour.     

吗啡增强谷氨酸单钠神经毒性及其作用机制

用皮层神经细胞体外培养、形态学观察、单个神经细胞内游离钙检测及乳酸脱氢酶(LDH)测定等方法,观察了吗啡对谷氨酸单钠(MSG)神经毒性增强作用以及纳洛酮对吗啡作用的逆转,分析了其可能的作用机制。结果表明:吗啡能显著增强的MSG的细胞毒作用.纳络酮可逆转这种增强作用,细胞内Ca²⁺超载可能是兴奋性神经毒素引起神经元死亡的共同病理学机制。     

人参皂甙Rb1降低细胞内Ca2+作用的机制

使用荧光探针Fura-2/AM,采用双波长荧光分光光度法观察到,人参皂甙Rb₁(10,50,100μmol·L^-1)能剂量依赖性减少新生鼠脑细胞内钙浓度,并能增加由硫酸亚铁及半胱氨酸所降低的膜流动性,Rb₁(10μmol·L^-1)能使离体大鼠尾动脉去甲肾上腺素量—效曲线右移,最大效应降低;Rb₁(10,100μmol·L^-1)能降低离体鼠基底动脉5-HT所引起的收缩。使用全细胞膜片钳技术发现人参皂甙Rb₁(50,100μmol·L^-1)对钙电流无明显影响;Rb₁在低剂量能增加大鼠突触体Na⁺-K⁺ATPase及Ca²⁺-Mg²⁺ATPase活性。从而揭示Rb₁降低胞内钙含量可能通过增加ATP酶活性而产生。     

番泻甙、大黄多糖和大黄素对脑细胞内游离钙浓度的影响

番泻甙、大黄多糖和大黄素对脑细胞内游离钙浓度的影响林秀珍，靳珠华（天津医科大学药理研究室３０００７０）近年来有关大黄及其有效成分的药理研究和临床应用有较大的进展［１，２］。但大黄有效成分番泻甙（ｓｅｎｎｏｓｉｄｅ，ＳＥＮ），大黄多糖（ｐｏｌｙｓａｃｃ...     

三氟拉嗪对大鼠脑突触体内Ca2+水平和Ca2+, Mg2+-ATP酶活性的作用

用Quin 2法测得大鼠脑突触体内静息游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i)为85±13 μmol·g^-1 protein. 三氟拉嗪(TFP) 1, 5和10 μmol·L^-1对静息突触体[Ca²⁺]_i无明显影响, 但能以剂量依赖方式增高65 mmol·L^-1 KCl所致突触体[Ca²⁺]_i升高, 从192±58 μmol·g^-1 protein分别达到233±63, 431±99和661±173 μmol·g^-1 protein. TFP 5,10和50 μmol·L^-1分别使突触体Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性降低31％, 41％和45％; 使Mg²⁺-ATP#FK酶活性降低30％, 36％和39％, 提示TFP可能是通过抑制钙调素, 进而抑制Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性, 使突触体[Ca²⁺]_i升高, 促进神经末梢释放递质.     

前胡丙素对培养大鼠心肌细胞内游离Ca2+的影响

用Fura-2/AM技术直接观察前胡丙素(Pra-C)对培养大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。结果显示Pra-C浓度为0.1～1.0μmol·L^-1可明显抑制CaCl₂,高K⁺和Bay K 8644引起[Ca²⁺]i增加,并且有剂量—效应关系,对ouabain引起的[Ca²⁺]i增加无明显作用。结果提示Pra-C降低心肌细胞[Ca²⁺]i的作用与抑制电压依赖性钙通道有关。     

硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ-氨基丁酸释放的影响

目的　观察硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ 氨基丁酸 (GABA)Ca2 + 依赖性和Ca2 + 非依赖性释放的影响。方法　制备大鼠前额皮层粗突触体。用人工脑脊液(aCSF)孵育 ,分为 5组 :基础释放组 (Base)、硫喷妥钠 10μmol·L-1组 (THS10 )、硫喷妥钠 30 μmol·L-1组 (THS30 )、硫喷妥钠 10 0 μmol·L-1组 (THS10 0 )、硫喷妥钠 30 0 μmol·L-1组 (THS30 0 ) ,每组含 8份突触体。向每组各等份突触体反应液中加入不同浓度的硫喷妥钠 (Base组不加入 ) ,于 37℃条件下应用 30mmol·L-1KCl或 2 0 μmol·L-1veratridine诱发谷氨酸和GABA释放。应用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定各反应液中的谷氨酸和GABA浓度。观察谷氨酸和GABACa2 + 非依赖性释放时 ,aCSF中不含Ca2 + 。结果　硫喷妥钠 30、10 0、30 0 μmol·L-1可显著抑制KCl或vera tridine诱发的Ca2 + 依赖性谷氨酸释放 (P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 1) ,IC50 分别为 2 5 6 μmol·L-1和 2 6 3μmol·L-1;THS10与THS30组 ,THS30与THS10 0组之间差异有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 1)。硫喷妥钠各浓度组中 ,Ca2 + 依赖性GABA释放及Ca2 + 非依赖性谷氨酸和GABA释放水平与Base组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　硫喷妥钠可剂量依赖性地抑制大     

小檗碱对神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙升高的影响

以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂，利用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子系统测定小檗碱（Ｂｅｒ）对新生大鼠脑细胞静息Ｃａ２＋和神经递质引起的脑细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响．Ｂｅｒ１，１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１对脑静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响．Ｂｅｒ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量依赖的抑制谷氨酸引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高．Ｂｅｒ１０μｍｏｌ·Ｌ－１能降低Ｈａｎｋｓ液有Ｃａ２＋和无Ｃａ２＋时去甲肾上腺素引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，且能降低５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高（在细胞外液有Ｃａ２＋时）．结果提示Ｂｅｒ可降低谷氨酸，去甲肾上腺素和５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，这可能是其抗脑缺血机理之一．