实验性脑出血血肿灶周脑血流量变化与细胞凋亡的相关性研究

目的　探讨脑出血 (ICH)后血肿灶周脑血流量变化与细胞凋亡的相互关系。方法　健康家犬 2 7只 ,随机分为对照组和ICH组 (3h、6h、12h、2 4h、4 8h、72h、7d和 15d)。ICH模型采用立体定向自体血额叶皮层注射法建立。应用磁共振灌注加权成像 (PWI)和流式细胞术 (FCM ) ,动态检测不同时间点血肿灶周相对脑血流量 (rCBF)与凋亡峰 /凋亡率的变化。结果　①脑血流量变化 :PWI显示血肿灶周 12h之内rCBF明显降低 ,呈低灌注状态 ,12～ 2 4hrCBF回升 ,出现血流再灌注 ,或高灌注现象 ,4 8h以后接近对侧 ,呈持续稍低灌注状态。②细胞凋亡变化 :FCM显示血肿灶周区凋亡峰 /凋亡率 6h开始出现 ,72h最高 ,7d下降。③血肿灶周凋亡峰值与凋亡率的变化呈正相关 (r =0 84 6 ,P <0 0 5 )。结论　ICH后血肿灶周脑血流量呈中 -轻度降低 ,细胞凋亡主要存在于血肿灶周区 ,72h是血肿灶周细胞凋亡的时间窗。     

实验性脑出血脑组织血流动力学变化的灌注磁共振成像研究

目的　研究脑出血后脑组织血流动力学的变化规律。方法　采用立体定向自体血脑内注入法制作犬额叶脑出血模型 10只 ,分别于造模前和造模后 0 .5h、3h、6h、12h、2 4h、4 8h、72h、7d、15d进行PWI动态扫描。结果　血肿区 0 .5～72h无灌注 ,7～ 15d无或微灌注 ;血肿周边区 0 .5～ 6h低灌注 ,12h血供开始逐渐回升并接近对侧呈稍低灌注 ,部分有高灌注 ;远隔区 0 .5h～ 15d普遍稍低灌注。结论　脑出血后脑组织血流灌注普遍性降低 ,12h是血肿周边组织血流灌注变化的时间转折点。PWI是客观研究和评价脑出血后脑组织血流动力学变化的有效手段。     

实验性脑出血灶周MMP-9的表达及意义

目的 观察脑出血后不同时间出血灶周脑水肿和MMP-9表达的动态,变化,并初步探讨其关系.方法 健康雄性Wistar大鼠48只随机分成假手术组和脑出血组,大鼠尾壳核区注入自体非抗凝动脉血建市脑出血模型,采用于湿重法测量脑组织水含量,免疫组织化学方法观察术后不同时间点MMP-9的动态变化.结果 血肿形成后脑水肿产生迅速,从脑出血后3h开始增加,72h达高峰;脑出血后3h时,血肿周围组织中开始出现少量的深棕赞色MMP-9阳性染色细胞,72h达高峰,以后逐渐下降,至7d时仍维持存较高水平.结论 脑出血后出血灶周MMP-9的表达上调.脑水肿的形成与脑出血灶周MMP-9的表达上调有关.     

超急性期及急性期脑出血低场强MR成像的表现

【目的】探讨超急性期与急性期脑出血低场强磁共振特点。【方法】对35例经0.2TMRI检查并通过临床证实的脑出血患者(超急性期18例,急性期17例)的MRI表现进行回顾性分析。【结果】18例超急性期脑出血T2WI高或稍高信号13例,等信号5例;T1WI呈等信号15例,稍低信号3例。17例急性期脑出血T2WI高或稍高信号11例,信号欠均匀,等信号5例,低信号1例;T1WI呈等信号或稍低信号15例,等信号内间杂小片状高信号2例。病灶周边多有渗出环,T1WI为低信号,T2WI为高信号,并伴占位效应。【结论】在低场强MR扫描中,超急性期脑出血的MRI表现与高场强MR基本相似,而急性期脑出血的MRI表现具有与高场强MR不同的特点。低场MRI是诊断超急性和急性期脑出血的一种有效手段。     

脑出血扩散加权磁共振表现

目的 观察脑出血不同时期扩散加权(DWI)磁共振表现.方法 根据患者发病时间与磁共振检查间隔时间,将22例脑出血患者分为5组,其中超急性期3例;急性期3例;亚急性早期5例;亚急性晚期7例;慢性期4例.回顾性分析各组患者的常规及扩散加权磁共振表现.结果 DWI显示超急性期及亚急性晚期两组血肿呈高信号;急性期、亚急性早期及慢性期血肿呈低信号.超急性期血肿边缘可见低信号环;超急性期、急性期及亚急性早期血肿周边可见高信号环.结论 脑血肿各时期DWI表现有其独特的特点.DWI是鉴别脑血肿和脑梗死的重要手段.     

超急性期脑出血低场强MR诊断研究

本研究旨在通过总结一组超急性期脑出血MR表现,提高MR对超急性期脑出血的诊断价值.     

fMRI评价NGF基因治疗对犬脑出血血肿灶周神经功能修复的影响

目的探讨fMRI在评价神经生长因子(NGF)基因治疗犬脑出血疗效中的价值.方法健康家犬24只,随机分为3组:NGF组(n=12),脑出血组(n=8)和对照组(n=4).在脑出血后1天、3天、10天、28天四个时间点进行MR扫描、Purdy评分和透射电镜观察.结果 NGF组1～3天时血肿、水肿体积与脑出血组比较无显著性差异(P>0.05),血肿灶周ADC、rCBF与脑出血组比较有显著性差异(P<0.05).10～28天血肿、水肿体积和血肿灶周ADC、rCBF均显著好于脑出血组(P<0.05),且fMRI动态演变与临床神经功能转归和病理结果相一致.结论 fMRI能客观、有效地定性和定量评价NGF基因治疗脑出血的疗效.     

3.0T MR扩散加权b0图像诊断急性期脑出血

目的 探讨3.0T MR扩散加权成像(DWI)b0图像对急性脑出血的诊断价值.方法 回顾性分析105例发病3天内接受第1次MR检查、并在我院住院治疗确诊的急性脑卒中患者的影像学资料.以同期梯度回波序列为标准,评价DWI b0图像诊断出血的敏感度及可靠性.结果 105例患者中,急性脑出血48例,DWI b0图像清晰显示其中47例,诊断急性脑出血的敏感度为97.92%,特异度100%,阳性预测值100%,阴性预测值98.25%.血肿核外层环状低信号是较早期血肿的共同特征,环状低信号在DWI b0图像上显示最佳,其次是梯度回波序列.结论 3.0T MR DWI可以明确区分急性出血性和非出血性脑卒中.DWI及常规T1WI、T2WI的快速成像方案可以快速、准确地判断脑出血,有助于临床治疗方案的制定.     

实验性脑出血灶周Caspase-3和Bcl-2的表达及意义

目的 观察脑出血后不同时间出血灶周凋亡细胞、Caspase-3、Bcl-2的表达.方法 健康雄性Wistar大鼠48只随机分成假手术组和脑出血组,大鼠尾壳核区注入自体非抗凝动脉血建立脑出血模型,采用TUNEL法检测凋亡细胞,免疫组织化学方法观察术后不同时间点Caspase-3和Bcl-2的动态变化.结果 脑出血组大鼠出血灶周凋亡细胞及Caspase-3、Bcl-2的表达较假手术组显著增强（p〈0.01）.结论 脑出血后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与,且与Caspase-3和Bcl-2蛋白表达有关.     

护城河征：超急性期脑实质血肿的特异性MR表现

目的：在低场MR上超急性期血肿不易与脑肿瘤、脑梗塞等疾病相鉴别,本文主要探讨超急性期脑实质内血肿周边的MR表现,试图总结超急性期脑实质内血肿的特征性MR征象。方法：回顾性分析48例经CT证实的超急性期脑实质内血肿的周边MR表现。结果：超急性期脑实质内血肿的周边MR表现包括：占位效应、周边长T1长T2水样信号窄带——笔者称之为“护城河征”、脑室内或蛛网膜下腔出血等。结论：几乎全部超急性期脑实质内血肿周边均可见“护城河征”,通过对比其它脑实质内病变的周边表现,“护城河征”对超急性期脑实质内血肿具有特征性诊断价值。     

实验性脑出血周围组织局部脑血流变化的CT灌注成像

目的探讨急性期大鼠脑血肿周围组织局部脑血流变化机制。方法健康成年雄性SD大鼠70只，随机分为注血组和对照组，每组分为注血(或注射)后1h、3h、6h、12h、24h、48h及72h7个实验小组，分别将40μl新鲜自体血或生理盐水通过微量注射泵注入大鼠脑右侧尾状核制备脑出血模型。利用CT灌注成像对大鼠进行动态增强扫描，通过计算机辅助脑灌注成像软件制作大鼠脑CT灌注参数图，并对血肿周围局部脑血流量(rCBF)、局部脑血容量(rCBV)和对比剂平均通过时间(MTT)进行测定。结果注血组血肿周围脑组织存在不同程度低灌注，低灌注梯度依色阶变化表现为多层彩色环绕带，呈“靶样”改变。血肿边缘区rCBF和rCBV显著低于血肿外层区；血肿周围局部脑血流量呈波动性改变，注血后1h rCBF降至最低，其后逐渐回升并再次下降；血肿周围rCBV在注血后1h最低，以后逐渐增加，并于注血后24h增加至峰值。结论脑出血发生后血肿周围局部脑血液动力学发生异常改变，血肿占位效应及其所致的颅内压增高，以及脑血流最初下降所促发的脑血流自身调节，在血肿周围脑血流变化中发挥着重要作用。     

脑出血患者血肿周围组织炎性反应与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨脑出血患者血肿周围组织炎性反应与细胞凋亡的关系。方法对30例手术的脑出血患者于血肿旁约1cm处取少许脑组织作为试验组，按发病到手术的时间将试验组分为〈6h（6例）、6～12h（7例）、12～24h（5例）、24～72h（6例）、〉72h（6例）。从前两组中选7例患者于手术入颅路径上远隔血肿处取少许脑组织作为对照组。应用苏木素-伊红（HE）染色、免疫组化染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别观察组织病理、炎性细胞浸润和小胶质细胞增生、凋亡细胞、促凋亡基因（Bax）、抗凋亡基因（Bcl-X）的变化情况。结果光镜观察显示：对照组和试验组6h内脑组织基本正常，试验组6～12h损伤较轻，12～24h损伤较重，24～48h损伤严重，以后逐渐好转，8d时与对照组相似。免疫组化显示：中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸润从6～12h逐渐明显，12～24h达高峰（P均〈0．01），小胶质细胞增生从24～72h开始，72h以后明显增强（P均〈0．01）；凋亡细胞、Bax蛋白表达从6～12h开始增加，12～24h达高峰（P〈0．05或P〈O．01）。Bcl—X蛋白及其mRNA表达从12～72h有增加的趋势，但差异无显著性。RT—PCR显示：Bax mRNA表达与免疫组化结果相似；相关分析显示：中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸润和小胶质细胞增生与凋亡细胞、Bax蛋白和BaxmRNA表达呈显著正相关（P〈0．05或P〈0．01）．与Bcl—X蛋白及其mRNA表达无相关性（P均〉0．05）。结论脑出血后血肿周围组织的炎性反应与细胞凋亡关系密切，并与组织病理损伤相一致。     

大鼠脑出血血肿周围组织病理变化的动态观察

目的 了解脑出血后血肿周围组织的病理变化及规律。方法用胶原酶注入到大鼠尾状核的方法制作脑出血模型。将大鼠分为脑出血、假手术组、正常3组。分别观察各组在脑出血后第6h、12h、24h、2d、3d、5d、7d时血肿周围及对侧相应组织、额叶、小脑在光镜下的病理改变。结果大鼠在胶原酶注入6小时后形成稳定的血肿，病灶可分为血肿区、血肿周围区及相邻的正常脑组织区。血肿周围以细胞肿胀、细胞毒性及血管源性水肿、神经元坏死和变性为主要表现，水肿在第3d最突出，第7d仍未完全消退；出血12h血肿周围开始出现中性粒细胞，第3d开始出现泡沫细胞。结论脑出血血肿周围以细胞肿胀、水肿、神经细胞坏死、变性为主要表现，中性粒细胞及泡沫细胞的出现说明血肿周围存在炎症反应。血肿周围组织是今后治疗的目标。     

神经生长因子对脑出血血肿灶周神经元和神经胶质细胞的影响

目的 探讨神经生长因子（NGF）对脑出血血肿灶周神经元和神经胶质细胞的影响。方法 健康家犬28只．随机分为两组：NGF组（n=20）：注血后0．5h，将NGF 2000 AU立体定向导入血肿灶周区；脑出血（ICH）组（n=8）：只注血，不注药。在ICH后1、3、10、28d四个时间点进行以下检测：①采用Purdy评分观察临床神经功能恢复情况。②采用免疫组化SP法，检测外源性NGF在血肿灶周脑组织中的有效表达。③激光共聚焦显微镜检测血肿灶周神经元烯醇化酶（NSE）、神经纤维酸性蛋白（GFAP）荧光单标阳性细胞的数目。结果 ①1～3d Purdy评分两组比较无显著性差异（P〉0．05），但10～28d评分NGF组显著好于ICH组（P〈0．05）。②NGF组血肿灶周免疫阳性细胞3d时大量出现，染色较深。持续10d，而ICH组表达量少且持续时间短（P〈0．05）。③NGF组激光共聚焦显微镜下NSE、GFAP单标阳性细胞数均明显多于ICH组（P〈0，05）。结论 外源性NGF立体定向导入血肿灶周区，早期能够通过保护神经元提高存活率；晚期能够通过促进胶质细胞适度增生、神经纤维生长来促进血肿灶周神经功能的修复。     

实验性脑出血大鼠血肿周围不同时间点组织形态学的动态变化

目的:研究大鼠实验性脑出血各病变期间炎症、水肿、神经元改变及胶质增生等因素的动态变化特征。方法:实验于2003-06/2004-06在河北医科大学第二医院神经内科实验室完成。用24只SD大鼠,实验组将自体血注入右尾状核,假手术组做对照。取血肿周围脑组织进行光学显微镜观察。结果:血肿周围脑组织内部分神经元变性坏死;出血后6h即可见少数单个散在炎性细胞浸润,48h达高峰,以中性粒细胞为主;72h后可见血肿周围及血肿内胶质细胞、血管增生;7d时血肿明显缩小,胶质细胞及血管增生明显。结论:脑出血后血肿周围炎性细胞浸润,神经元变性、坏死,胶质细胞和血管增生可能是脑水肿加重和病情加重的主要原因之一。     

脑出血周围组织脑血流变化CT灌注成像与早期缺血性损伤的动物实验

目的探讨血肿周围局部脑血流变化与周围组织早期缺血性损伤的关系.方法雄性SD大鼠70只,随机分为注血组和对照组,采用自体血注射法制备大鼠脑出血模型,利用GE LightSpeed螺旋CT扫描机灌注成像及计算机辅助系统制作大鼠脑CT灌注参数图,对血肿周围局部脑血流量(rCBF)、局部脑血容量(rCBV)和对比剂平均通过时间(MTT)脑血流动力学参数进行定量测量,并与大鼠脑TTC染色和HE-染色进行比较.结果血肿周围存在不同程度低灌注,低灌注梯度依色阶变化表现为多层彩色环绕带,呈"靶样"改变;血肿周围局部脑血流量呈波动性改变,血肿周围rCBF和rCBV在注血后1 h降至最低,其后逐渐回升.TTC染色血肿周围未见白色梗死区;HE-染色可见血肿周围组织疏松,细胞不同程度水肿,星形细胞肿胀,神经细胞变性.结论大鼠脑注血后血肿周围局部脑血流显著降低可引发周围组织早期缺血性损伤,CT灌注成像可在活体下显示血肿周围异常的脑血流动力学变化,可为脑出血临床救治提供有价值信息.     

实验性脑出血后细胞凋亡与神经损伤的关系

目的 探讨脑出血后血肿周嗣组织细胞凋亡、Bcl-2和Bax蛋白表达与神经功能损伤的关系。方法 SD大鼠70只，随机分为实验组和对照组，每组各35只。实验组采用胶原酶诱导尾状核脑出血模型，分别于术后6h、12h、24h、48h、72h、7d、14d共7个时相点（每个时相点5只）评测其神经功能缺损情况。之后处死大鼠，采用TUNEL法、免疫组化SP技术，检测血肿周嗣脑组织细胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白的表达。结果脑出血后大鼠出现不同程度的神经功能缺损，以术后48h左右损害严重．出血后6h血肿周嗣组织出现TUNEL阳性细胞，48h达高峰。Bcl-2和Bax蛋白表达高峰期分别是脑出血术后6h和48h。结论 脑出血后细胞凋亡与神经损伤程度一致，细胞凋亡在脑出血后神经功能损伤中起重要作用。     

脑出血患者血肿周围星形细胞内皮素-1表达的变化

目的探讨内皮素-1与星形细胞之间相互关系及其在脑出血的作用. 方法采用内皮素-1抗体 SP免疫组化技术对脑出血患者尸检材料血肿周围脑组织反应性星形细胞内皮素-1表达水平进行检测. 结果发现脑出血组反应性星形细胞增生、肥大变性,存在内皮素-1的表达,而对照组星形细胞形态基本正常,偶见阳性. 结论内皮素-1及反应性星形细胞可能参与脑出血的病理机制.