粘附式细胞仪快速分析细胞膜脂质流动的方法

用荧光探针ＮＢＤ－Ｃ６－ＨＰＣ标记体外培养４８ｈ的小鼠肝细胞，细胞膜磷脂用５７０型粘附式细胞仪激光漂白局部，细胞膜，然后测定荧光的重新分布。结果显示，荧光恢复率为７６％，膜流动性（１．４９±０．０５７）×１０＾－９ｃｍ＾２／ｓ。     

粘附工细胞仪测定主动脉平滑肌细胞膜电位的方法

采用亲脂性阴离子荧光染料ＤｉＢＣ４（３）标记兔主动脉平滑肌细胞，以ＡＣＡＳ５７０粘附肷我观察去极化剂氧化钾（ＫＣｌ）对平滑肌细胞膜电位的影响。结果，加入ＫＣｌ后荧光强度迅速升高，１２４ｓ后达最高值，之后荧光强度 较高水平，此法可监测活馔 速的膜电位变化，不损伤细胞，简单，快捷。     

粘附式细胞仪测定主动脉平滑肌细胞膜电位的方法

采用亲脂性阴离子荧光染料ＤｉＢＡＣ＿４（３）标记免主动脉平滑肌细胞，以ＡＣＡＳ５７０粘附式细胞仪观察主极化剂氯化钾（ｋＣｌ）对平滑肌细胞膜电位的影响。结果，加入ＫＣｌ后荧光强度迅速升高，１２４ｓ后达最高值，之后荧光强度维持一较高水平。此法可监测活细胞快速的膜电位变化，不损伤细胞，简单，快捷。     

粘附式细胞仪测定巨噬细胞内游离钙的方法

采用荧光素染色法，以５７０型粘附式细胞仪动态观察到离子通道蛋白卡西霉素（ＩｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７）可使体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞游离钙显著增多，于第２５ｓ达到最高值，后逐渐降低，７５ｓ后基本恢复至基值水平。本法灵敏性高，快捷简便，适用面广，并可同时显示游离钙在细胞内的分布，是当前最有效的细胞内游离钙检测手段之一。     

细胞荧光差异对间隙连接通讯测定的影响

用粘附式细胞仪（ACAS570）对细胞内荧光强度强且相当的两个细胞与荧光强度相差悬殊的两个细胞的细胞间间隙连接通讯进行测试，结果前者的通讯功能要比后者好（上升的荧光百分比分别为11％和0.9％）。     

培养细胞缝隙连接通讯功能测定的新方法

用粘附式细胞仪检测了培养细胞缝隙连接通讯功能，预先用荧光探针６－羟基荧光素乙酰乙酸盐进行细胞染色，然后光漂白细胞中的荧光分子。由于邻近细胞中未漂白的荧光分子通过缝隙连接扩散到漂白的细胞内，故可监测漂白细胞荧光强度的恢复，根据荧光恢复的比较，了解缝隙连接通讯功能的的状态。     

铜绿假单胞菌体外粘附肠上皮细胞对其细胞膜生物特性的影响

目的 探索铜绿假单孢菌粘附肠上皮细胞后细胞膜生物特性的变化规律及可能的机制。方法 采用体外肠上皮细胞培养模型，研究绿脓杆菌粘附后对肠上皮细胞活力、细胞膜磷脂酶A2、细胞内钙、细胞膜磷脂成分、膜流动性的影响。结果 细菌粘附后3h肠上皮细胞活力明显下降，PLA2活性增高，细胞内钙离子浓度增加，肠上皮细胞膜荧光偏振度、微粘度和分子排列有序性系数即出现增加，膜流动性降低，细胞膜磷脂含量降低，磷脂酶肌醇（PI）、磷脂酰胆碱（PC）含量逐渐降低。结论 绿脓杆菌粘附后肠上皮细胞胞内钙超载所导致的膜PLA2活化以及肠上皮细胞膜磷脂降解是导致膜流动性降低的根本原因。     

石榴皮对红细胞膜脂质过氧化的保护作用

目的研究石榴(Punica granatum L.)皮提取物对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法采用3种活性氧产生体系诱发脂质过氧化为实验模型,设立模型对照组(MC)、正常对照组(NC)以及3个石榴皮提取物给药组,观察比较各组的丙二醛(MDA)含量。结果同MC组相比,三组石榴皮提取物对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、H2O2及UV照射3种方法引起的细胞膜脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的生成增加均有抑制作用,且有一定的剂量依赖关系。结论石榴皮对自由基引起的细胞膜脂质过氧化损伤有保护作用。     

粘附式细胞仪测试高温对培养巨噬细胞DNA荧光强度的影响

将体外培养４－５天的小鼠腹腔巨噬细胞分成４组，分别置于３７℃、３９℃、４１℃、４３℃恒温环境再培养２ｈ。细胞用４，６－二脒基－２－苯基吲哚（ＤＡＰＩ）染色后，用ＡＣＡＳ５７０激光细胞仪进行测试和分析。以综合荧光量和平均荧光量作为判断高温对细胞中ＤＮＡ荧光强度影响的主要参数，结果显示，３９℃组细胞中ＤＮＡ荧光强度降低，但４１℃、４３℃组的又缓慢上升，形成弧形曲线。     

虎杖甙对内毒素刺激的单个巨噬细胞内游离钙动态变化的影响

用荧光染料Indo-1标记小鼠腹腔巨噬细胞内游离钙,在粘附式细胞仪检测下观察细胞内游离钙的动态变化，在大肠杆菌O55：B5内毒素刺激下细胞内游离钙迅速升高，于第400s达峰值．经虎杖甙处理的巨噬细胞加入内毒素后，胞质游离钙无明显增高．因细胞浴于无钙环境，故胞内游离钙升高不是由于细胞外的Ca2+进入细胞，而是由于内毒素影响胞内钙库调节功能．虎杖甙可能保护胞内钙库中胞质钙的某种调节机制，从而避免胞质游离钙升高．     

一种提高细胞膜色谱精确性和灵敏性的方法

目的改进细胞膜色谱模型,提高细胞膜色谱法的精确性和灵敏性,评价此法用于亚型受体研究的科学性和可行性。方法质粒转染得稳定高表达HEK293α1B细胞株,构建HEK293α1B细胞膜色谱系统,测定9种α-肾上腺素受体配体在系统中的容量因子（k＇HEK293α1B）,对其亲和力排序,并分别与大鼠肝脏组织匀浆和原代培养的肝细胞制备的细胞膜色谱系统测得的容量因子进行相关性研究。结果细胞膜色谱法测定9种配体的亲和力顺序与文献报道完全一致,配体在HEK293α1B细胞膜色谱柱的保留时间最长,在大鼠肝脏组织匀浆细胞膜色谱柱的保留时间最短。结论细胞膜色谱法用于亚型受体的研究准确、可行;与大鼠肝脏组织匀浆和原代培养的肝细胞制备的细胞膜色谱系统比较,应用HEK293α1B细胞株制备的细胞膜色谱系统具有更高的精确性和灵敏性。     

青龙衣提取物对荷瘤小鼠细胞膜流动性的影响

目的　探讨青龙衣提取物对 S1 80 和 H2 2 荷瘤小鼠细胞膜脂流动性的影响。方法　选取 S1 80 和 H2 2 作为瘤株 ,于正常小鼠腋下接种 S1 80 瘤液 ,腹腔接种 H2 2 瘤液 ,荷瘤小鼠分别每天 ip青龙衣冷醇提取物 (191.37、95 .6 8、4 7.84mg/kg)、热醇提取物 (12 1.17、6 0 .5 8、30 .2 9mg/kg)、环磷酰胺 (2 0 mg/kg,为阳性对照 )、生理盐水 (阴性对照 ) ,给药 7d后处死小鼠 ,制备肿瘤细胞和红细胞悬液。以 1,6 - diphenyl- 1,3,5 - hexatriene (DPH)为探针剂 ,用荧光偏振法测定荧光偏振度 (P)值和微黏度 (η) ,观察青龙衣提取物对细胞膜脂流动性的影响。结果　青龙衣冷醇、热醇提取物均能使 S1 80 小鼠的肿瘤细胞膜流动性提高 ,使 H2 2 小鼠的肿瘤细胞膜流动性降低 ,与生理盐水组比较 ,两种提取物均能降低 H2 2 小鼠红细胞膜流动性 (P<0 .0 5 )。结论　青龙衣提取物可能通过对肿瘤细胞膜的影响起到抑瘤作用 ,而对维持红细胞膜的稳定性起积极作用。     

一种骨髓单个核细胞新型示踪方法——细胞膜染料DiD标记法

 目的 检测细胞膜染料DiD对骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells, BM-MNC)的染色效率和造血功能的影响,并用DiD示踪BM-MNC活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的顺利归巢。方法 体外流式细胞术分析方法和激光共聚焦扫描显微镜成像方法检测BM-MNC的DiD染色效率;CCK-8细胞活性-增殖实验和造血集落形成实验,检测DiD染料对BM-MNC的造血功能的影响;单/双光子共聚焦显微镜下活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的归巢。结果 BM-MNC的DiD染色效率高达90%以上,且DiD对BM-MNC的细胞活性-增殖和造血能力均无明显的毒性影响(P＞0.05);单/双光子共聚焦显微镜下,在活体小鼠颅骨骨髓内可直观观察到DiD标记的BM-MNC的顺利归巢。结论 细胞膜染料DiD对BM-MNC的染色效率高、均一,无明显细胞毒性,荧光不易被淬灭,且受机体自身组织的背景干扰少,用于活体示踪时DiD标记的BM-MNC可顺利归巢到骨髓。     

细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选中的应用进展

采用细胞作为筛选模型的生物色谱技术,即细胞膜色谱技术,将活性筛选、检测与化合物的分析鉴定进行集成,已逐渐成为中药药效物质基础研究的重要手段。概述了细胞膜色谱技术的原理和特点,综述了以4种常用细胞（血管细胞、肝细胞、红细胞、血小板）为筛选模型在中药活性成分筛选中的应用现状,并探讨了细胞膜色谱技术的应用特点和存在问题。     

红细胞膜脂质成分的变化与白细胞计数假性增高的关系

目的:探讨全自动血细胞分析仪测定血常规时出现白细胞计数假性增高与红细胞膜脂质成分变化的关系。方法:应用酶法在全自动生化分析仪上进行正常对照组和白细胞计数假性增高组病人红细胞膜胆固醇()及磷脂cholesterol,Ch()含量的测定。phosphor,PL结果:白细胞计数()假性增高组病人胆固醇含量比正常对照组显著增高(WBCP<),0.05而磷脂含量比对照组显著降低(P<)且也有显著差异(0.05Ch/PLP<)。0.01结论:白细胞计数假性增高与红细胞膜脂质成分的变化有密切关系。     

海嘧啶对H22小鼠完整细胞膜脂流动性及人胃腺癌细胞内DNA含量影响的研究

目的 研究海嘧啶对H22荷瘤小鼠红细胞膜的影响以及对人胃腺癌细胞DNA合成的影响。方法 采用荧光分光光度法及激光扫描共聚焦显微镜进行研究。结果 海嘧啶可使荷瘤小鼠红细胞微粘度下降，膜脂流动性升高，体外实验对胃腺癌细胞内DNA荧光强度降低，DNA合成减少。结论 海嘧啶可改善荷瘤机体的血液循环，提高红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力，同时通过影响肿瘤细胞内DNA的合成发挥抗肿瘤作用。