大鼠卵泡发育过程中基质金属蛋白酶-2，-9的作用

目的：探讨基质金属蛋白酶-2,-9（MMP-2,-9）在大鼠卵泡发育的组织重建中的作用。方法：采用原位杂方法检测动情周期大鼠卵泡中MMP-2,-9mRNAs的基因表达变化,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果：在动情周期中,各情期卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡的膜细胞中均可检测到MMP-2m-RNA的杂交信号;MMP-9mRNA的表达始于已发育良好的窦前卵泡的膜细胞,此后在小窦状卵泡、窦状卵泡及排卵前卵泡的膜细胞中均检测到MMP-9mRNA的杂交信号。结论：MMP-2,-9可能通过其基因的表达变化参与卵泡的发育过程。     

雾化吸入γ-干扰素对免疫低下大鼠某些细胞因子的影响

目的 研究雾化吸入γ-干扰素（IFN-γ）对免疫低下大鼠细胞因子的影响。方法 醋酸考的松皮下注射并气管内注射白色念珠菌复制大鼠免疫低下肺感染模型,检测雾化吸入IFN-γ1、3、7d的免疫低下大鼠和对照组大鼠肺泡巨噬细胞（AM）培养上清中TNF- α活性和IL-1β、IL-6水平,支气管肺泡灌洗液（BALF）IFN-γ、TNF-α活性,肺组织IFN-γ、TNF-α活性,肺组织IFN-γ、TNF-α、TNF-1β、IL-6表达,以及血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平,结果 吸入IFN-γ组大鼠AM培养上清中TNF-α的活性和IL-1β、IL-6水平显著高于对照组大鼠。吸入IFN-γ组大鼠BALF中IFN-γ、TNF-α活性高于对照组大鼠（第7天TNF-α除外）,吸入IFN-γ组大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β的表达高于对照组,TNF-α表达低于对照组,IL-6表达二组无显著差异,吸入IFN-γ组大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平,除第3天IL-1β外,与免疫低下大鼠组相比差异不显著,结论 雾化吸入IFN-γ可明显提高肺内IFN-γ、TFN-α、IL-1β、IL-6水平,但对相应血清细胞因子无明显影响。     

灰树花多糖对人外周血单个核细胞白细胞介素-2及干扰素-γ表达的影响

目的探讨灰树花多糖（GRN）对人外周血单个核细胞（PBMCs）白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）表达的影响。方法使用不同浓度GRN与人PBMCs共培养,对照组以不加GRN的PBMCs培养相同时间。RT-PCR检测人PBMCs中IL-2 mRNA的表达,应用流式细胞术检测Th1细胞中IFN-γ的表达。结果经GRN处理的人PBMCs中,IL-2 mRNA的表达较对照组呈显著增高（P〈0.01）;Th1细胞中IFN-γ的表达与对照组相比也显著增高（P〈0.01）。结论 GRN可提高PBMCs中IL-2 mRNA及IFN-γ的表达,提高细胞免疫功能。     

基质金属蛋白酶-2、-9在大鼠卵巢黄体中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶-2、-9（MMP-2、-9）在大鼠卵巢黄体发育、维持和退化的组织重建中的作用。 方法采用原位杂交（insituhybridization）方法检测假孕大鼠卵巢黄体中MMP-2、-9mRNAs的基因表达变化，并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果MMP-2、-9mRNAs主要在假孕第1天黄体中表达，以后逐渐降低，到假孕第14天其mRNAs表达降低到最低程度。结论MMP-2、-9主要参与黄体的发育过程，而不参与黄体的退化过程。     

TNF-α和IFN-γ对Hep-2喉癌细胞MMPs表达的调节作用

目的:研究喉癌Hep-2细胞系中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和MT1-MMP的表达及TNF-α和IFN-γ对MMPs表达的调节作用.方法:分别在细胞生长的不同时期收集细胞,采用半定量RT-PCR方法,分析Hep-2细胞MMP-2、MMP-9、MT1-MMP和TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达水平.结果:细胞接种后24 hMMP-2和MMP-9的mRNA水平最高.Hep-2细胞在第2、3天MT1-MMP mRNA的表达水平最高,细胞表达相对恒定的TIMP-1而细胞内TIMP-2 mRNA的表达水平比TIMP-1高2倍.TNF-α可增强Hep-2细胞的MMP-2 mRNA的表达, IFN-γ可抑制MMP-2的表达. 两种因子联合应用时其作用可相互抵消.MT-MMP和TIMP-1对TNF-α和IFN-γ的调节不敏感.TIMP-2 mRNA的水平可被TNF-α抑制1倍,而IFN-γ能够增强TIMP-2 mRNA的水平.结论:细胞因子对MMPs的转录有调节作用,IFN-γ能够降低MMP-2、MMP-9的表达,可成为一种很有价值的喉癌辅助治疗药物.     

急性脑梗死患者血清中基质金属蛋白酶2、9与IL-18、IFN-γ的变化研究

目的 通过检测急性脑梗死患者基质金属蛋白酶2,9(MMP-2、9)、白细胞介素-18(IL-18)和干扰素-γ(IFN-γ)的血清水平值,探讨MMP-2、MMP-9、IL-18、IFN-γ在急性脑梗死发病中的作用,以及IL-18、IFN-γ与基质金属蛋白酶变化的关系.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测急性脑梗死患者血清MMP-2、MMP-9、IL-18、IFN-γ浓度值,并与正常对照比较. 结果 急性脑梗死患者血清MMP-2、MMP-9、IL-18和IFN-γ浓度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).且患者血浆IL-18与IFN-γ水平呈显著正相关,差异有统计学意义(P<0.05);对照组IL-18与IFN-γ无显著相关性,差异无统计学意义(P>0.05).急性脑梗死组IL-18、IFN-γ与MMP-2、MMP-9具有正相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论 急性脑梗死患者血清IL-18、IFN-γ均有显著增高,且与MMP-2、MMP-9明显相关.提示IL-18、IFN-γ参与了急性脑梗死发生、发展的炎性反应过程.     

IFN-γ、IL-32、IL-1β在原因不明习惯性流产中的临床意义

目的探讨干扰素-γ、白介素-32和白细胞介素-1β在原因不明习惯性流产中的表达及临床意义。方法ELISA法检测URSA组、正常妊娠组和健康对照组血清中IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度,并进行统计学分析。结果URSA组IFN-γ、IL-32和IL-1β的血清浓度水平显著高于健康对照组和正常妊娠组（P〈0．01）;正常妊娠组较健康对照组的IFN-γ、IL-32和IL-1β血清浓度水平均显著下降（P均〈0．01）。结论IFN-γ、IL-1β、IL-32反馈环可能参与了URSA的发生,对其血清浓度的检测可作为监测URSA病人治疗效果和再次妊娠结局的指标。     

系统性红斑狼疮患者血清TGF-β IFN-γ IL-10的检测及意义

目的探讨血清转化生长因子-β（TGF-β）系统性红斑狼疮和Th1型细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、Th2型细胞因子白细胞介素-10（IL-10）（SLE）发病的关系。方法根据SLEDAI评分法,将54例SLE患者分为活动组和静止组,应用ELISA方法测定54例SLE患者及20名正常对照组血清TGF-β、IFN-γ、IL-10水平。结果 SLE患者血清中TGF-β水平显著低于对照组（P〈0.01）,IFN-γ、IL-10水平显著高于对照组（P〈0.01）;TGF-β的表达量与血红蛋白量、血小板量和红细胞数成正相关;IFN-γ的表达量与补体C3、C4成负相关,与抗C1q抗体、抗核小体抗体、免疫球蛋白IgG成正相关;IL-10的表达量与抗核小体抗体、免疫球蛋白IgG成正相关。结论 Th1型及Th2型细胞因子均可能参与了疾病的发生。联合检测SLE患者血清TGF-β、IFN-γ、IL-10水平,对指导治疗及病情的评估具有实际意义。     

基质金属蛋白酶—9与糖尿病肾病微量蛋白尿产生的相关性

①目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达与糖尿病肾病微量蛋白尿产生的相关性.②方法观察2型糖尿病病人(包括有和无微量蛋白尿者)外周血单个核细胞(PBMC)中MMP-9的mRNA表达情况,并进行半定量分析.③结果有微量蛋白尿的糖尿病病人PBMC中MMP-9的mRNA表达较无微量蛋白尿者及正常对照组明显增高,差异均有极显著意义(F＝108.25,q＝6.36,20.11,P＜0.01).④结论PBMC中MMP-9mRNA的异常表达可能与2型糖尿病微量蛋白尿产生有关.     

IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及其相关性

目的 探讨IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及相关性.方法 采集32例肿瘤患者(肿瘤组)和34例健康体检者(对照组)外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA的表达.结果 肿瘤组IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA表达水平较对照组明显降低,差异有统计学意义.IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1相互之间都具有正相关性.其中IFN-γ与Bcl-2的相关系数为0.984,IFN-γ与MMP-9的相关系数为0.982,IFN-γ与STIM-1的相关系数为0.985;Bcl-2与MMP-9的相关系数为0.980,Bcl-2与STIM-1的相关系数为0.956,MMP-9与STIM-1的相关系数为0.951.结论 肿瘤患者IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA表达较健康人明显降低,并且在肿瘤患者中4项指标之间均呈正相关.     

两株SIV_(mac)的滴定和特性

SIVmac251的MID100为32TCID，而SIVmac239的MID100高于320TCID。体内滴定感染成功的5只猴（SIVmac2513只，SIVmac2392只）和用ZMID100SIVmac251感染的7只猴感染后有全身淋巴结肿大，并出现规律性的血浆病毒血症和抗体反应。SIVmac251感染的7只恒河猴和2只食蟹猴的淋巴结和脾脏的病理组织学检查，显现规律的SIVmac感染后的组织学变化。上述结果表明两株SIVmac均能诱发SIVmac感染猴的系列表现和变化，可应用于抗艾滋病药物猴体疗效的评价。     

建设研究型医院的探索与实践

研究型医院的提出,与研究型大学有关,但有关这方面的理论和实践鲜见报道.作者认为,研究型医院的定义是:以完成临床医疗工作为基本任务,以培养优秀人才为突出优势,以创新性科学研究为重要使命,以制定和修定临床医学标准和规范为水平标志的大型综合型医院.文中作者还根据自己的研究和在解放军总医院的建设实践,对研究型医院的特征、功能、分类及评估做了系统讨论,对我国未来研究型医院的建设目标提出了初步设想;明确了建设研究型医院的基本思路和主要措施;特别讨论了建设研究型医院需要处理好的四个关系.     

饮用水高氟碘对8～10岁儿童血清免疫物质水平的影响

目的：研究自然条件下,饮水高氟、碘对8～10岁儿童血清白细胞介素21（IL-21）水平及IgM、IgG含量的影响。方法选择饮水氟＞2.0 mg/L、碘中位数＞150 mg/L自然村8～10岁儿童90名为研究组,饮水氟＜1.0 mg/L、碘中位数50～80 mg/L自然村8～10岁儿童90名为对照组,检测其血液中IL-21水平及IgM、IgG含量。结果研究组儿童IL-21测定结果范围为432.4～7790.9 pg/mL,中位数为912.01 pg/mL,对照组测定结果范围为302.3～4324.8 pg/mL,中位数为588.84 pg/mL,二者差异有统计学意义（P<0.01）;研究组IgM含量1.11～4.02 mg/mL,对照组0.78～3.54 mg/mL,二者差异无统计学意义;研究组IgG含量8.81～19.98 mg/mL,中位数为13.34 mg/mL,对照组7.14～20.46 mg/mL,中位数为12.53 mg/mL,二者差异有统计学意义（P<0.05）。结论自然状态条件下,饮水高氟、碘时8～10岁儿童IL-21水平明显升高,从而抑制自体免疫水平,致使血清IgG含量明显降低,但对IgM含量尚无明显影响,提示饮水高氟碘将导致8～10岁儿童自体免疫水平降低。     

关于“聚于胃,关于肺”的儿科临证体会

“聚于胃,关于肺”指出咳嗽与肺胃相关。脾胃受损,气机升降失调为小儿久咳的根本原因,调理脾胃是治疗小儿久咳的关键。     

杨梅素体内外分析方法研究

目的:建立杨梅素体内外分析方法。方法:采用HPLC法,Century SIL BDS C18(200 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相:甲醇-水-磷酸(57∶43∶0.02),检测波长:254 nm,流速:10 m L/min,柱温:30℃。结果:杨梅素溶液在体外的线性范围是8.72μg/m L~17.44μg/m L,体内的线性范围是30μg/m L~130μg/m L。结论:该方法简便、准确、重现性好,可作为制剂的含量测定方法。     

低血清钾伴发低血清镁7例分析

对 8 0例低血清钾患者作血清镁测定 ,发现其中 7例患者伴有低镁血症 ,并对其进行分析 ,提示临床对严重复合性酸碱失衡、电解质失衡患者应作全套电解质分析 ,给患者以正确治疗     

Comparison of cleavage activity in vitro between two ribozymes targeted against different sites of PDGF receptor β subunit

Objective: To compare the cleavage activity of ribozymes directed against 2 sites of PDGF receptorP subunit cDNA gene in vitro. Methods: The 608 bp fragment of PDGF receptor β subunit cDNA was clonedinto T-vector under the control of T7 promoter, named pPDGFR-β. Two ribozymes were designed to cleavethe CUU sequence at codon 45 and codon 252 of PDGF receptor β subunit mRNA respectively. These 2 ham-merhead ribozyme genes were cloned into vector PI. 5 between 5' -cis ribozyme and 3' -cis ribozyme to gener-ate the plasmids of pRZ1 and pRZ2. The pPDGFR-β, pRZl and pRZ2 were linearized and then transcribedwith T7 promoter in vitro. Results: The RZ1 showed high cleavage activity in vitro, but the RZ2 showed nocleavage activity under the same condition. Conclusion: The cleavage site selection is an important factor in-fluencing the cleavage activities of ribozymes.     

中法医学教育制度的异同及启示

笔者于2004年11月至2005年10月作为FFI（实习住院医生）工作于法国里昂一大附属Edouard Herriot医院烧伤整形中心，对法国的医学教育制度有了较深切的体会。现将其与中国的医学教育制度进行对比，分析它们的异同点。并结合目前国内一些不容乐观的教育和医疗现状，提出几点启示。     

非甾体类抗炎药对卵巢癌细胞生长的抑制作用

目的 比较2种非甾体类抗炎药Celecoxib和Aspirin对人卵巢癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响,以及Celecoxib对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤成瘤性的影响.方法 不同浓度Celecoxib和Aspirin作用于卵巢癌细胞不同时间后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法检测卵巢癌细胞的增殖;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞技术(FCM)测定卵巢癌细胞凋亡;裸鼠皮下移植瘤实验检测卵巢癌细胞体内成瘤性.结果 Celecoxib和Aspirin均对卵巢癌细胞的增殖有抑制作用,呈剂量依赖关系,且24 h就已表现出较强的抑制SKOV3细胞增殖效应,以Celecoxib作用最显著,24 h肿瘤细胞半数抑制剂量(IC50)所需Celecoxib浓度为5×10-5 mol/L,而所需Aspirin浓度约为7×10-3 mol/L; Celecoxib和Aspirin作用后,部分细胞出现形态不规则、细胞浆空泡化,尤以Celecoxib更明显;5×10-5 mol/L Celecoxib和7×10-3 mol/L Aspirin组癌细胞凋亡率分别为47.1%、15.7%,均高于对照组(4.8%,P均＜0.05);3种不同剂量的Celecoxib对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率分别为25.20%、33.00%、38.60%,尤以Celecoxib 50 mg/(kg·d)组更为明显,且对裸鼠肝肾胃肠等重要脏器无明显影响.结论 Celecoxib和Aspirin均能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖和诱导其凋亡,且Celecoxib作用强于Aspirin.     

食管癌切除胃置纵隔位颈部胃食管吻合20例体会

目的探讨食管癌切除胃置纵隔位颈部胃食管吻合的手术方法及效果。方法对住院手术治疗的20例食管癌患者的临床资料进行回顾性分析总结。结果术后2例发生颈部吻合口瘘,经局部换药短期内瘘口愈合,2例发生喉返神经损伤,无心肺并发症和死亡。术后存活2年达70%,存活4年达30%。3个月后进食基本正常。结论对于食管癌患者的手术操作,尽量采用创伤小,减轻心肺干扰,降低术后并发症的发生,达到根治效果,提高术后远期疗效的方法。