不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞体外增殖及凋亡的影响

目的观察地塞米松对体外培养人骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响。方法利用1.073g/mLPercoll分离液以梯度密度分离法获取人骨髓间充质干细胞（hMSCs）,进行体外培养。成骨诱导组细胞用地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠处理,分别进行ALP染色和矿化结节染色。实验组细胞分别以10^-9mol/L、10^-8mol/L、10^-7mol/L和10^-6mol/L地塞米松加以干预,MTT法检测各组细胞的增殖率;流式细胞仪定量分析hMSCs的凋亡率。结果成骨诱导组细胞ALP染色和矿化结节染色均为阳性,对照组为阴性;低浓度（10^-9mol/L）地塞米松对细胞的体外增殖无明显影响（P〉0.05）,10^-8mol/L及以上浓度地塞米松可明显抑制细胞的增殖（P〈0.01）;hMSCs凋亡率随地塞米松浓度的增加而升高（P〈0.01）。结论地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠可促使hMSCs成骨分化,10^-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖,地塞米松能促进体外培养的人骨髓间充质干细胞凋亡。     

鱼藤酮对小鼠小胶质细胞 BV-2存活率及一氧化氮含量的影响

目的：研究鱼藤酮对小鼠小胶质细胞BV-2存活率及一氧化氮含量的影响。方法 BV-2细胞以5×10^7/L密度接种到细胞培养板中,分别加入鱼藤酮0、1×10^-11、1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5 mol/L后0、6、12、24、48、72 h等测定细胞存活率。另以1×10^-8 mol/L鱼藤酮干预BV-2细胞48 h,测定上清液中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、总巯基、超氧阴离子和NO含量并与未给予鱼藤酮干预的对照组比较。结果5×10^7/L BV-2细胞于0、6、12、24、48、72 h细胞增殖活力分别为0．035±0．001、0．132±0．006、0．334±0．017、1．073±0．044、2．272±0．172、0．776±0．032,可见48 h达到细胞生长曲线的峰值。鱼藤酮（1×10^-6 mol/L ）干预 BV-2细胞24、48、72 h 细胞存活率分别降低至（63．4±10．1）％、（51．7±12．2）％、（33．9±11．2）％;鱼藤酮（1×10^-7 mol/L）干预BV-2细胞72 h细胞存活率降低至（50．8±2．9）％。1×10^-8 mol/L 鱼藤酮干预48 h 后 BV-2细胞上清液一氧化氮水平达（27．6±6．2）μmol/L,明显高于对照组的（13．3±2．5）μmol/L （t＝-2．135, P＝0．044）。结论鱼藤酮在一定浓度范围内可激活小胶质细胞,但是超出此浓度范围时则可能导致小胶质细胞存活率降低。     

没食子酰芍药苷对白细胞介素8诱导的人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的 研究没食子酰芍药苷（GPF）对白细胞介素8(IL-8)诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）增殖和迁移的影响及潜在分子机制。方法 用100、200和400μmol/L GPF分别处理100μg/L IL-8诱导的HUVECs,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法（Western blotting）分别检测HUVECs细胞中miR-212-3p、激活转录因子2(ATF2)、增殖细胞核抗原（PCNA）和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,四氮唑蓝（MTT）和Transwell实验分别测定HUVECs细胞存活率和细胞迁移,双荧光素酶报告系统验证miR-212-3p与ATF2的调控关系。结果 与对照0μmol/L组相比,100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L的GPF可抑制IL-8诱导的HUVECs增殖和迁移,促进miR-212-3p表达,抑制ATF2表达,呈剂量依赖趋势;低表达miR-212-3p可逆转400μmol/L GPF对IL-8诱导的HUVECs细胞增殖和迁移的抑制作用;miR-212-3p靶向ATF2,调控ATF2的表达;...     

萝卜硫素对饥饿诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的:研究萝卜硫素抑制饥饿诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用。方法:以饥饿培养法诱导HUVECs凋亡。试验随机均分为正常对照(完全培养液)组、模型(模型培养液)组与萝卜硫素高、低浓度(10、5μmol/L)组。观察HUVECs形态;SRB法检测HUVECs存活率;Hoechst 33258染色法观察HUVECs的凋亡程度;吖啶橙染色和Western blot法观察HUVECs自噬水平的变化。结果:在饥饿条件下,萝卜硫素可以有效抑制饥饿HUVECs边缘发亮,脱离皿底的现象随时间延长而愈加明显;提高HUVECs的存活率;抑制HUVECs的凋亡,且具有剂量、时间依赖性;提高HUVECs的自噬水平。结论:萝卜硫素可能通过诱导自噬而起到抑制饥饿诱导HUVECs凋亡的作用。     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

金合欢素对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和迁移的影响及机制研究

目的 探讨金合欢素（Aca）通过调节PTEN诱导激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶（Parkin）通路介导的线粒体自噬对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 将肝癌HepG2细胞分为对照组（正常培养的HepG2细胞）、Aca组（10μmol/L Aca）、PINK1小干扰RNA阴性对照（si-NC）组（转染si-NC）、PINK1小干扰RNA(si-PINK1)组（转染si-PINK1）、Aca+si-NC组（转染si-NC后用10μmol/L Aca处理）、Aca+si-PINK1组（转染si-PINK1后用10μmol/L Aca处理）。CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞迁移；透射电镜观察自噬小体的形成；Western blot检测细胞中自噬相关蛋白[Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ、LC3-Ⅱ]及PINK1/Parkin通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较，Aca组HepG2细胞存活率、迁移细胞数目降低，凋亡率、自噬小体数量、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、PINK1、Parkin蛋白表达水平...     

麝香保心丸促进血管新生作用的活性成分筛选

目的对麝香保心丸中单体入血促进血管新生活性成分进行筛选,以确定其中发挥促进血管新生作用的药效物质。方法采用实时细胞分析仪（xCELLigence系统）检测麝香保心丸及其单体入血成分对内皮细胞增殖、迁移活性的影响,并建立细胞体外成管模型和大鼠主动脉环模型评价麝香保心丸及其入血单体成分的体外血管新生活性。结果细胞增殖、迁移及体外成管实验结果显示,不同浓度的麝香保心丸（10^-4-10^-2μg/ml）、人参皂苷Rg3（1-10μmol/L）和人参皂苷Rh2（1-10μmol/L）能够明显促进人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖、迁移及管腔结构形成（P〈0.05）。此外,与对照组相比,高浓度麝香保心丸（10-2μg/ml）、Rg3（10μmol/L）和Rh2（10μmol/L）具有诱导主动脉环内皮细胞出芽的活性（P〈0.05）。结论麝香保心丸及人参皂苷Rg3、Rh2均在体外具有促进血管新生的活性。     

en橙皮甙对H2O2诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究橙皮甙对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法培养并鉴定SD乳鼠心肌细胞;用H2O2诱导培养的大鼠心肌细胞凋亡,观察不同浓度橙皮甙（10^-8mmol/L、10^-5mmol/L、10^-3mmol/L）对SD乳鼠心肌细胞作用4、8、12h后,用Tunel法检测心肌细胞凋亡。结果橙皮甙组与模型组比较有抑制SD乳鼠心肌细胞凋亡的作用,且效应随橙皮甙浓度的增加和时间的延长而增强（P〈0.01）。结论橙皮甙对HO诱导的心肌细胞凋亡有抗凋亡保护心肌细胞的作用。     

异钩藤碱对缸管平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究异钩藤碱对AngⅡ诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响，并进一步观察其对细胞增殖周期，原癌基因c-fos、骨桥蛋白（OPN）以及增殖细胞核抗原（PCNA）mRNA表达的作用，旨在探讨异钩藤碱作用的分子机制。方法：采用组织块贴壁法培养Wistar大鼠胸主动脉VSMC，利用细胞计数和MTT比色法检测不同浓度异钩藤碱（10^-7、10^-6、10^-5M）和厄贝沙坦（10^-5M）对AngⅡ／（10^-6M）诱导大鼠VSMC增殖的影响；收集细胞培养上清液测定药物对一氧化氮（NO）含量及一氧化氮合酶（NOS）活性的影响；通过流式细胞仪分析药物刘细胞增殖周期的影响；实时荧光定量PCR检测VSMC中c-fos、OPN、PCNAmRNA表达水平。结果：异钩藤碱和厄贝沙均明显抑制AngⅡ诱导的大鼠VSMC增殖，阻滞细胞由GO／GI期向S期转化，升高上清液中NO含量和NOS活性，随着异钩藤碱浓度的增加，c—fos、OPN、PCNAmRNA表达明显减少。     

三苯氧胺对前列腺癌细胞PC-3增殖抑制和诱导凋亡实验研究

目的探讨三苯氧胺（TAM）抑制前列腺癌细胞PC-3增殖以及诱导凋亡的机制。方法不同浓度三苯氧胺干预细胞,通过四氮唑蓝比色法（MTT）、原位细胞凋亡检测（TUNEL）以及流式细胞术等方法检测TAM增殖抑制及诱导凋亡作用。结果 MTT法以及TUNEL法显示0、10-6mol/L TAM对前列腺癌细胞PC-3的生长无明显抑制作用,10-5、10-4、10-3mol/L TAM有显著的抑制增殖及诱导凋亡的作用（P〈0.05）;流式细胞术检测其活化caspase-3的表达情况显示10-4、10-3mol/L TAM活化caspase-3表达显著增高（P〈0.05）。结论 TAM能抑制前列腺癌细胞PC-3增殖和诱导其凋亡,作用呈剂量和时间依赖性,其机制可能通过诱导caspase-3表达活化增强,最终导致细胞凋亡。