喉癌病变过程中细胞周期调控因子的流式检测及意义

目的：探讨细胞周期调控基因cyclin E、cyclin D1、p21、p16在喉癌发生、发展中的作用。方法：选取23例声带息肉、69例喉癌前病变、33例喉癌石蜡包埋组织为研究对象,切片脱蜡后制备成细胞悬液,采用流式细胞术检测cyclin E、cyclin D1、p21、p16基因的荧光表达情况。结果：在声带息肉、喉癌前病变、喉癌组织中,cyclin E的阳性表达率分别为13.04%、20.29%和42.42%;cyclin D1的阳性表达率分别为26.09%、43.48%和93.94%;p16的阳性表达率分别为61.90%、40.98%和14.28%;p21的阳性表达率分别为47.62%、23.81%和26.23%。提示cyclin D1、cyclin E的阳性率表达形成声带息肉→喉癌前病变→喉癌组织阳性强度逐渐增强的梯度现象,而p21、p16的阳性表达强度则呈逐渐减弱的现象。结论：①细胞周期调控因子的异常表达是喉癌发生的分子事件;②正性调控因子cyclin D1、cyclin E高表达,负性调控因子p16、p21低表达,即多个与细胞周期相关的正负调控因子失衡在喉癌的发生中可能起着重要作用。     

喉癌前病变p53过度表达的研究

采用标记链霉菌素－生物素免疫酶技术结合微波炉处理方法，对１５例成人型喉头状瘤，１０例喉部不典型增生，２例喉原位癌，１０例声带息肉以及６例正常喉的组织标本进行了检测，结果发现：在７３．３％喉乳头状瘤，４０％喉不典型增生和５０％喉原位癌中检测到ｐ５３蛋白过度表达，而１０例声带息肉和６例中正常组织无一例出现ｐ５３的过度表达。     

喉鳞状细胞癌DNA含量的FCM定量分析

选择24例未经治疗的喉鳞状细胞癌患者术后新鲜肿瘤标本,通过流式细胞仪(FCM)测定DNA含量的3个主要参数,异倍体(aneuploid)、DNA指数(DNA Index,DI)和S期细胞比例(S-phase fraction,SPF),探索3个参数与肿瘤组织学分级、临床分期以及淋巴结转移之间的关系.结果表明,24例喉鳞状细胞癌中,异倍体检出率为83.3%(20/24).DI与肿瘤组织学分级和淋巴结转移无关,与肿瘤临床分期有关(P＜0.05).SPF与肿瘤组织学分级无关,与临床分期及淋巴结转移有关(P＜0.01,P＜0.05).提示:(1)DNA异倍体是喉鳞状细胞癌的重要特征之一;(2)DI和SPF可作为预测喉鳞状细胞癌生物学特性的重要指标.     

喉癌前病变钬激光治疗的临床观察

1998年 9月～ 2 0 0 1年 9月 ,我们对病理诊断为癌前病变的 1 8例患者采用支撑喉镜下钬激光治疗 ,取得满意效果。报告如下。1　资料和方法1 8例癌前病变患者 ,男 1 4例 ,女 4例 ;年龄 2 3～ 71岁。临床表现为持续性声音嘶哑 ,其中 1例乳头状瘤患者伴轻度吸气性呼吸困难。采用德国产Wolf 5 0 2 2型频闪喉镜和美国Coherentmedicalgroup生产的钬激光治疗机。先用 1 %地卡因做咽黏膜表面麻醉 ,然后将焦调合适的直管喉镜放入口咽 ,从监视器上获得放大的清晰图像。按顺序检查患者咽喉各部位 ,令患者发“依”音 ,控制器换档用频闪光源观察动态图像…     

CO2激光喉显微手术治疗喉癌前病变的疗效分析

目的探讨CO2激光喉显微手术治疗喉癌前病变的疗效。方法在显微支撑喉镜下,对94例喉癌前病变(喉角化症77例,成人喉乳头状瘤17例)患者,分别采用CO2激光黏膜表皮剥脱术、黏膜下切除术和声带部分切除术。结果对94例患者6个月～5年的随访显示,发声均恢复良好,一次性治愈率为86.2%(81/94);行两次或两次以上手术的有10例,占10.6%(10/94);最终癌变3例,其中喉角化症2例,成人乳头状瘤1例,占3.2%(3/94)。结论CO2激光喉显微手术治疗喉癌前病变,其疗效显著,具有创伤小、术后嗓音恢复快、不易复发等优点;且早期激光干预治疗可以打断癌前病变癌变的病理学基础,使其向良性转归方向发展。     

喉癌前病变及喉鳞状细胞癌微卫星杂合性缺失的变化及其意义

目的:探讨喉癌前病变及喉鳞状细胞癌病变组织上杂合性缺失(LOH)的特征及其意义。方法:选取染色体3p、9p和17p上6个多态性微卫星位点D3S1234、D9S171、D9S1748、D9S162、INFA和p53,利用聚合酶链式反应-简单序列长度多态性-银染技术,对49例喉癌前病变和喉癌组织进行LOH分析。结果:6个微卫星标记物LOH发生率分别为:单纯过度增生3.70%,轻度不典型增生10.81%,重度不典型增生26.03%,喉鳞状细胞癌38.67%。其中LOH的总检出率在不同病理组间差异有统计学意义(χ2=17.686,P<0.01),其频率随病变程度加重而明显升高。6个多态性微卫星位点中,LOH发生率最高的位点D9S171(35.00%)。结论:基因水平的改变发生在喉癌变的早期阶段,微卫星标志物可能成为喉癌前病变早期诊断的有用标志物。     

喉角化病喉癌及喉正常上皮DNA含量的研究

用MPVⅡ型显微分光光度计测量了Feulgen氏染色的4例喉正常上皮、10例喉角化病和5例喉癌组织细胞核的DNA相对含量。结果显示：喉角化病、喉癌与喉正常上皮相比DNA含量有不同程度升高，变异系数加大，叫喉角化病随DNA含量升高其组织异型程度有不同程度增加，变异系数加大，角化病的DNA含量略低于喉癌，位于喉癌与正常喉之间，文中对这些改变的原因和意义进行了讨论。     

神经酰胺在喉组织癌前病变向喉癌转化过程中的作用

目的探讨诱导凋亡的第二信使神经酰胺(ceramide)在喉组织癌前病变向喉癌转化过程中的作用。方法采用回顾分析的方法,取复旦大学附属眼耳鼻喉科医院1991-2001年间声带白斑的病例178例,找出相应的石蜡块,其中转化为喉癌的31例。采用流式细胞仪技术和免疫组化法分析这31例的喉正常黏膜标本(取自喉癌旁的正常组织)、癌前病变时的标本和喉癌组织标本中DNA倍体情况及神经酰胺的表达情况(400倍视野下染色阳性细胞计数×100)。结果31例喉正常黏膜标本均为DNA二倍体; 31个声带白斑标本中3个为DNA二倍体, 28个为DNA异倍体; 31个喉癌标本均为DNA异倍体。31例患者的喉正常黏膜、声带白斑、喉癌标本中神经酰胺的表达依次减少,分别为每400倍视野下阳性表达细胞数( x±s,以下同) ( 400±30 )个、( 180±20 )个、( 10±10 )个,t检验差异有统计学意义(P<0 01)。二倍体细胞内神经酰胺的阳性表达数(400±20)个,明显高于异倍体细胞内(150±10)个,t检验差异有统计学意义(P<0 01)。结论喉组织癌前病变向喉癌转化过程中,神经酰胺起到非常重要的作用。提示诱导凋亡的第二信使神经酰胺逐渐减少可能是喉组织癌变过程中的关键因素之一。     

喉癌前病变及CO_2激光手术治疗

CO_2激光手术是治疗喉癌前病变及早期喉癌的最佳治疗手段,其具有疗效佳、低消耗、恢复快、副作用少、减少出血及能为手术提供清楚视野等优点,且能最大限度的保留和恢复喉的发声功能,是治疗喉癌前病变首选的微创性方法。     

蛋白激酶CK2在喉正常组织及喉癌前病变和喉癌中的表达及意义

目的:探讨蛋白激酶CK2在喉癌的发生、发展、浸润和转移过程中的作用。方法:采用免疫组织化学(SP法)染色技术检测18例正常黏膜、14例声带息肉、11例喉乳头状瘤及50例喉鳞状细胞癌(LSCC)标本中蛋白激酶CK2的表达情况,并用RT-PCR技术检测CK2α及CK2β在50例LSCC中mRNA的表达水平,分析LSCC中CK2α及CK2β表达的相关关系。结果:免疫组织化学显示CK2α及CK2β在正常喉黏膜、声带息肉、癌旁1.0cm组织、颈部非转移性淋巴结→喉乳头状瘤、癌旁0.5cm组织→LSCC组织、颈部转移性淋巴结组织中的阳性表达率逐渐升高,它们之间的差异具有统计学意义,组内各病变间表达的差异无统计学意义。在LSCC组内,CK2α的表达与年龄、颈部淋巴结转移及T分期无关,而与病理分级有关。CK2β的表达与年龄及T分期无关,而与病理分级及淋巴结转移有关,这与RT-PCR检测的其在蛋白质水平的表达一致。在LSCC组织中,CK2α与CK2β在mRNA水平的表达呈正相关。结论:蛋白激酶CK2过表达可能对LSCC的发生和发展有一定的促进作用,检测CK2可作为判定LSCC恶性程度的潜在指标之一,抗CK2可能为肿瘤治疗提供一种新途径。     

鼻咽部恶性肿瘤3306例分析

本文回顾性分析了我院２４年（１９６２～１９８５）经病理确诊的鼻咽部恶性肿瘤３３０６例。男性２５７１例（７７７７％），女性７３５例（２２２３％），男女比为３５∶１。发病年龄平均５３１５岁（男５４０４岁，女５２２２岁），高峰年龄为４１～５０岁（３５１５％）。１５岁以内者２１例，最小年龄：男性３岁，女性７岁。首发症状以颈部肿块（４２４４％）和涕血（３３０９％）最常见。本组以鼻咽癌（ＮＰＣ）最多（９９４２％），肉瘤仅１９例（０５８％）。占我院同期耳鼻咽喉恶性肿瘤的６８８３％；占头颈部的５０４６％；占全身的２００４％。年平均就诊人次为１２５１（１９６２～１９７１）、１４６５（１９７２～１９８１）、１４７５（１９８２～１９８５），表明ＮＰＣ就诊具有稳定性。资料提示鼻咽部恶性肿瘤，以ＮＰＣ在我省常见多发，需加强防治措施。     

彩色多普勒血流显像对中晚期青光眼患者的眼血流动力学研究

为探讨血管因素在中晚期青光眼患者视功能损害机制中的作用,选择中晚期青光眼患者27例、52眼,用彩色多普勒超声检查仪测定每眼的眼动脉、睫状后短动脉及视网膜中央动脉的血流速度,并选择年龄、性别与患者相匹配的正常人25例、50眼为对照组.结果显示,青光眼组的眼动脉、视网膜中央动脉及睫状后短动脉的血流速度明显降低,阻力指数明显增高,而慢性闭角型青光眼及开角型青光眼之间则无明显差异.证明中晚期青光眼视功能损害与视神经的血供不足密切相关.     

耳蜗毛细胞和螺旋神经节及其神经纤维的联合定量观察

目的：将耳蜗基底膜取材技术与耳蜗切片技术相结合以观察同一耳蜗中几个主要结构在病理发展中的相互关系。方法：耳蜗铺片用于定量观察毛细胞，骨性螺旋板切片用于定量观察缰孔内的神经纤维，中轴切片用于定量观察螺旋神经节。结果：将卡铂耳中毒灰鼠的耳蜗标本与正常灰鼠进行比较，显示内毛细胞，神经纤维和螺旋神经节的损失百分比基本一致。结论：卡铂对内毛细胞，神经纤维和螺旋神经节都有破坏作用，至于在卡铂病变早期，究竟哪一     

喉非典型增生和鳞癌的PCNA,p21表达及其意义

为探索增殖细胞核抗原和ｐ２１在喉非典型增生与其转化后的鳞癌中的表达有无差异。     

SOD1基因缺陷型小鼠耳蜗毛细胞和螺旋神经节及神经纤维的定量观察

定量观察了出生后13个月的先天缺失SOD1基因小鼠的耳蜗毛细胞以及螺旋神经节和疆孔内的神经纤维,并与同龄野生型和出生后2个月的野生型小鼠进行了比较.发现毛细胞和螺旋神经节的缺损约为50%,神经纤维的减少则超过50%,提示由于与铜和锌相结合的过氧化物歧化酶的缺失导致了耳蜗神经与终器的严重退变.     

胸锁乳突肌锁骨膜瓣重建声门下喉腔

用胸锁乳突肌锁骨膜瓣重建喉癌切除后声门下喉腔1例.术后9个月复查缺损处出现骨化区,随访1年,呼吸发音良好,喉腔粘膜光滑,无狭窄,肿瘤无复发.对胸锁乳突肌锁骨膜瓣的适应证、手术方法及优点进行讨论.胸锁乳突肌锁骨膜瓣安全可靠,就近取材,血供良好,手术方法简便,可一期完成,并发症少,是重建声门下喉、气管腔的良好组织.     

喉大部切除术后喉功能重建

为23例喉癌患者行喉大部分切除术,采用下列方法重建喉功能,(1)重建声门关闭功能;(2)重建会厌覆盖功能;(3)保留或重建梨状窝;(4)保护喉上神经和喉返神经;(5)保持宽大的下咽部;(6)切断环咽肌.23例中21例获得随访,术后均能发音,术后2～4周拔除鼻饲管,无误吸及呛咳.5年生存11例,生存率47.8%.     

听骨链重建术189耳分析

为达到清除病灶和提高听力的双重目的，作者对１８９耳慢性化脓性中耳炎，行改良根治伴鼓室成形术。随访１～７年，鼓膜愈合率为９４１８％，术后听力提高≥１０ｄＢ为７２４９％，言语频率气、骨导差≤２０ｄＢ为６１３８％。     

药物作用下豚鼠耳蜗血流动力学的研究

探讨改善内耳循环药物的作用机制。方法,利用激光多普勒血流计观察丹参,ＡＴＰ等药对健康豚鼠耳蜗血流量的影响。结果：ＡＴＰ短时间答犯罪 压先下降,后上升。结论ＡＴＰ通过血压影响耳蜗血流量,注射后短时间耳蜗外侧壁有缺血现象,而丹参是直接使务流量增加,与血压无相关性。