三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡作用机制研究进展

三氧化二砷治疗白血病和其他肿瘤的机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡。其诱导白血病细胞凋亡的途径主要有降解融合蛋白，线粒体途径，激活Caspase家族，抑制NF-κB、细胞增殖和端粒酶活性等。现就其诱导白血病细胞凋亡的作用机制作一综述。     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡作用机制研究进展

三氧化二砷治疗白血病和其他肿瘤的机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡.其诱导白血病细胞凋亡的途径主要有降解融合蛋白,线粒体途径,激活Caspase家族,抑制NF-κB、细胞增殖和端粒酶活性等.现就其诱导白血病细胞凋亡的作用机制作一综述.     

As2S2诱导K562细胞凋亡的分子机制初步研究

目的　探索As2 S2 对K5 6 2细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法　细胞凋亡的检测用流式细胞分析、基因组DNA电泳、细胞形态学观察等方法 ,Westernblot方法用于蛋白表达的检测 ,基因表达的变化用半定量RT PCR方法。结果　 3～ 5 μmol L的As2 S2 作用 4 8～ 72h即可诱导K5 6 2细胞凋亡。 3μmol LAs2 S2 作用 72h时 ,细胞凋亡率达 (34.4± 3.3) % ;5 μmol LAs2 S2 作用 4 8,72h时 ,细胞凋亡率分别为 (2 1.8± 3.6 ) %和 (4 6 .0± 5 .2 ) %。 5 μmol LAs2 S2 作用下 ,As2 S2 可降低Bcr Abl和JAK2的蛋白含量。As2 S2 从基因水平上调bax表达 ,下调c myc表达。As2 S2 作用后 ,Caspase 3被激活。As2 S2 也能诱导慢性粒细胞性白血病 (CML)患者单个核细胞凋亡。结论　As2 S2 可诱导CML细胞凋亡 ,Bcr Abl含量的降低可能起了很重要的作用。bax表达的增加、c myc表达的减少、JAK2蛋白含量的降低以及Caspase 3激活也可能参与了该细胞凋亡机制。     

三氧化二砷和曲古抑菌素A协同诱导HL-60细胞凋亡的作用及分子机制研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)和曲古抑菌素A(TSA)在体外诱导急性早幼粒白血病细胞HL-60凋亡过程中的协同作用.方法 采用MTT法检测As2O3和(或)TSA对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达.结果 As2O3和TSA联用较单独用药能明显抑制细胞,引起细胞周期阻滞和凋亡,Bax基因表达升高,Bcl-2基因表达降低,Bax/Bcl-2比值升高.结论 As2O3和TSA均能够引起HL-60凋亡,二者具有协同效应,其机制是引起细胞周期阻滞,且上调Bax与Bcl-2比值.     

丁酸钠增强U937细胞凋亡敏感性的分子机制研究

目的 探讨丁酸钠（NaBu)对细胞周期检测点效应及对U937细胞凋亡的敏感性。方法 以U937-ASPI3K（ATM阴性）,U937-pZeosv2( )（野生型ATM基因）两种U937的变异细胞系作为细胞模型。用免疫沉淀及激酶活性测定p38MAPK,ERK1的激酶活性。用免疫印迹分析Bad磷酸化灭活。结果 经NaBu预处理的U937-pZeosv2( )细胞经^137Gs照射后。细胞凋亡敏感性呈NaBu剂量依赖性增强,这种增强效应可被p38MAPK阻滞剂OLM阻断,但不能被p34cdc2激酶的特异性抑制剂ALP及CDK2阻滞剂CDK-2-Ⅰ阻断,经NaBu预处理的U937-ASPI3K细胞经^137Cs照射后,细胞凋亡敏感性进一步增强,这种增强效应可被OLM阻断,放射线可显著增强p38MAPK激酶活性,抑制ERK1激酶活性;NaBu预处理与放射线联用后,对p38MAPK激酶活性的增强有极其显著的协同效应,放射线诱导U937-ASPI3K细胞Bad蛋白磷酸化灭活,在NaBu协同作用下,Bad蛋白磷酸化灭活效应进一步增强。结论 NaBu通过p38MAPK激酶活性,增强细胞凋亡敏感性,该效应与ATM基因是否缺失无关,与ATM失活增强的细胞凋亡敏感性各为独立通路。     

砷剂对恶性肿瘤作用机制研究近况

自三氧化二砷对复发的急性早幼粒白血病可达到很高的临床缓解率报道后,引起了国内外学者对砷剂研究的极大兴趣。相继有三氧化二砷在食管癌,神经母细胞瘤,胃癌,头颈部癌等实体瘤治疗研究中的报道,因此有必要将近年来国内外关于砷剂对恶性肿瘤作用机制的研究报告作一综合评述。     

硫化砷对白血病细胞的生长抑制及作用机制

 目的 研究硫化砷（As4S4）通过体外培养对白血病细胞HL-60细胞的生长抑制作用及其分子机制。方法 以不同浓度（7.5 ~ 60 mmol／L）的As4S4作用于体外培养HL-60细胞12 ~ 48 h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪观察细胞凋亡率,免疫组化法检测bcl-2、p53蛋白表达,应用RT-PCR法检测HL-60细胞中p53 mRNA表达。结果 不同浓度的As4S4作用12 ~ 48 h后,可显著抑制HL-60细胞的生长,呈时间浓度依赖性,并诱导细胞发生凋亡,凋亡率为30.18 % ~ 70.98 %,不同作用时间、不同浓度间凋亡率差异有统计学意义（P＜0.01）,RT-PCR结果显示As4S4作用24 h后,下调p53 mRNA的表达。免疫组化结果显示,bcl-2、p53蛋白表达逐渐降低,并呈浓度依赖性。结论 As4S4能够显著抑制HL-60细胞的生长。诱导其凋亡,并下调bcl-2、p53的表达,可能是其重要机制。     

砷剂对肿瘤细胞的诱导凋亡作用

近年来，国内外对砷剂与肿瘤的研究发展很快。已证实它对肿瘤的作用主要是通过诱导凋亡作用实现的。其具体作用机制包括：开放MPT，活化caspase家族；改变细胞内氧化还原状态；快速调变PML－RARα融合蛋白的亚细胞定位；抑制Bcl-2基因；抑制NF-κB的活化；使胞质Ca^2 浓度升高。     

Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡分子机制的实验研究

目的：观察Ｒａｊｉ细胞抵抗职霉素诱导细胞凋亡的分子机制，从细胞凋亡的角度探讨肿瘤细胞耐药机制。方法：ＭＴＴ方法测定阿霉素和肽素诱导的细胞毒实验，碘化丙啶染色ＦＡＣＳ和ＤＮＡ降解断裂法分析阿霉素诱导的细胞凋亡，ＦＡＣＳ分析Ｒａｊｉ细胞ｂｃｌ－２的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｏｌｔ观察Ｒａｊｉ细胞ｐ５３、ｂａｘ分子的表达，ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＤＲ１、ＭＲＰ和ＧＳＴπ的表达水平。结果：Ｒａｊｉ细胞对阿霉素和肽     

Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡分子机制的实验研究

目的 :观察 Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡的分子机制 ,从细胞凋亡的角度探讨肿瘤细胞耐药机制。方法 :MTT方法测定阿霉素和肽素诱导的细胞毒实验 ,碘化丙啶染色 FACS和 DNA降解断裂法分析阿霉素诱导的细胞凋亡 ,FACS分析 Raji细胞 bcl- 2的表达 ,Western bolt观察 Raji细胞 p5 3、bax分子的表达 ,RT- PCR检测 MDR1、MRP和 GSTπ的表达水平。结果 :Raji细胞对阿霉素和肽素均产生明显药物耐受 ,同时抵抗药物诱导的细胞凋亡 ;Raji细胞中 bcl- 2分子呈诱导性表达 ,不表达或弱表达 bax、p5 3分子 ;Raji细胞组成性高表达 MDR1、MRP、GSTπ等耐药相关分子。结论 :Raji细胞抵抗药物诱导的细胞凋亡是化疗耐受的重要原因。其中细胞膜表面分子 MDR1、MRP的高表达 ,细胞质中 bcl- 2诱导性高表达 ,bax、p5 3分子的弱表达是导致药物耐受和抵抗细胞凋亡的重要因素。     

survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制

目的 研究survivin反义寡核苷酸（ASODN）诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法 在脂质体介导下,分别以100mmol／L、300mmol／L和500mmol／L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H44624h、48h和72h后,用RT-PCR和Western blot检测survivin mRNA及蛋白表达,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡;Rh123染色法检测细胞线粒体膜电位（△ψm）变化;ELISA法检测胞浆细胞色素C（cyt C）浓度;比色法检测胞浆内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9（caspase-9）、caspase-3的活性;Western blot检测caspase-8蛋白表达;加入环孢霉素A（CsA）后,以FCM检测细胞凋亡。结果 与各对照组相比,survivin ASODN显著下调了survivin mRNA表达,且呈时间和浓度依赖性,其中以500mmol／L作用72h时效果最佳,抑制率达62．7％,其蛋白表达也显著下调。NCI-H446细胞的凋亡指数（AI）为48．35％,明显高于对照组（3．75％）、空脂质体组（3．41％）、无义寡核苷酸（NSODN）组（4．69％）、100和300mmol／LASODN组（19．85％和34．39％）;增殖指数（PI）为24．38％,明显低于上述各组（75．54％、73．12％、71．76％、51．03％和38．94％,P均〈0．01）。survivin ASODN导致细胞△ψm逐渐下降,并相继引起cytc的释放、caspase-9和caspase-3的激活,而caspase-8酶原无变化。CsA显著抑制了survivin ASODN诱导的细胞凋亡。结论 survivin通过调控线粒体凋亡途径发挥抗肺癌细胞凋亡作用;survivin ASODN能够显著下调survivin mRNA及蛋白表达,诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

氧化砷诱导人小细胞肺癌细胞凋亡的研究

目的 研究砷剂（As2O3)对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用以及干扰素（IFNα－2b)对As2O3作用的影响。方法 采用DNA电泳、TUNEL原位末端标记和免疫细胞化学染色检测不同浓度As2O3作用不同时间对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用及相关主相关基因蛋白的表达。结果 在一定的浓度范围内,As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,并且随浓度的升高和作用时间的延长,凋亡细胞数增加,相关基因蛋白Bcl-2、PCNA表达降低。联合使用IFNα-2b可增强凋亡诱导作用。结论 As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,且与药物浓度和作用时间有关。IFNα-2b可增强此作用。     

恶性淋巴瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的抵抗及其分子机制

目的:探讨在体外恶性淋巴瘤细胞对TRAIL(TNF-related apoptosis-inducingligand)诱导凋亡的抵抗作用及其分子机制.方法:TRAIL处理恶性淋巴瘤U937细胞后,在不同的时间采用MTT法检测药物时细胞的毒性作用:流式细胞术检测细胞周期;Western-blot法检测Bax蛋白质水平变化;实时荧光定量RT-PCR法检测BaxmRNA的表达情况.结果:TRAIL的浓度在5000μg/L时可抑制U937的细胞生存,但其抑制率低于正常对照细胞Hmy2.ciR;TRAIL阻滞U937细胞周期于G0/G1期;但这种阻滞效应较Hmy2.ciR细胞明显减弱.Western-blot法检测TRAIL处理的U937细胞Bax蛋白表达水平下降;实时荧光定量RT-PCR法检测BaxmRNA的表达水平却未见差异性改变.结论:TRAIL在诱导恶性淋巴瘤细胞凋亡过程中出现抵抗,这种作用可能与促凋亡蛋白Bax表达水平下降有关.Bax蛋白表达水平的下降可能是由于翻译后修饰导致Bax蛋白降解.     

人类白血病诱导分化和凋亡的细胞及分子机制研究

在国家自然科学基金、863计划、上海市自然科学基金和卫生部科学研究基金项目的资助下，“人类白血病诱导分化和调亡的细胞及分子机制研究”项目组，从临床、细胞生物学和分子生物学等诸方面，对急性早幼粒细胞白血病（APL）的分化、凋亡调控进行了系统的、创造性的研究。项目组在原有全反式维甲酸（ATRA）对APL分化诱导治疗的基础上，进一步探索改进疗效的方法，发现小剂量A～（15lug／天）可取得与常规剂量（45lug／天）相同疗效，而副作用明显降低。还比较了不同缓解后的治疗方案的效果，证实化疗与ATRA合用的疗效最佳。该项目发现…     

氯化镉诱导骨肉瘤细胞凋亡的效应及其分子机制

目的 通过观察氯化镉诱导的骨肉瘤细胞凋亡与细胞特异性周期阻滞及caspase活化的影响,阐明氯化镉诱导的细胞凋亡效应及其分子机制.方法 应用AnnexinV/PI和API等标记,流式细胞仪对人骨肿瘤细胞凋亡及周期特异性的检测,运用RT-PCR的方法检查Caspase-3、Caspase-9活化情况.结果 处于静止期的外周血对氯化镉凋亡诱导不敏感,而G1期氯化镉诱导骨肉瘤细胞出现了明显的细胞凋亡.氯化镉诱导的细胞凋亡主要是在细胞周期的G1期发生.观察组采用氯化镉凋亡诱导,对照组未做处理,结果显示观察组的Caspe-3、Caspase-9 mRNA的表达值显著高于对照组.结论 氯化镉诱导的细胞凋亡与骨肉瘤细胞的细胞周期相关,存在G1期细胞周期阻滞的周期特异性,且此过程中发生了caspase活化,参与细胞凋亡.     

四硫化四砷对人宫颈癌细胞Hela环氧合酶表达和PGE2产生的影响

目的研究中药雄黄主要成分四硫化四砷(As4S4)对子宫颈癌细胞Hela增殖和凋亡作用的影响及其作用机制。方法以不同浓度(7．5、15、30、60 mg/L)的As4S4对Hela细胞分别处理不同的时间(12、24、36、48、60 h),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖反应;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达;用放射免疫法榆测细胞PGE2释放水平。结果As4S4对Hela细胞增殖有明显的抑制作用(P<0．01),并呈明显的时效和量效关系,作用24 h时IC50的As4S4作用浓度为30 mg／L。As4S4可诱导Hela细胞凋亡,与对照组相比,差异有极显著意义(P< 0．01),并呈浓度依赖性。As4S4可明显抑制Hela细胞COX-2的表达(P<0．05),随着As4S4浓度的增加,其COX-2蛋白表达水平逐渐降低。不同浓度As4S4作用24 h,可明显抑制Hela细胞PGE2的分泌水平,与对照组比较差异有极显著意义(P<0．01)。结论As4S4对Hela细胞增殖具有抑制作用,可促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制细胞COX-2表达和PGE2分泌水平有关。     

四硫化四砷对人宫颈癌细胞Hela环氧合酶表达和PGE2产生的影响

目的研究中药雄黄主要成分四硫化四砷（As4S4）对子宫颈癌细胞Hela增殖和凋亡作用的影响及其作用机制。方法以不同浓度（7．5、15、30、60mg／L）的As4S4对Hela细胞分别处理不同的时间（12、24、36、48、60h）,用四甲基偶氮唑蓝（MTY）法测定细胞增殖反应;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达;用放射免疫法检测细胞PGE2释放水平。结果As4S4对Hela细胞增殖有明显的抑制作用（P〈0．01）,并呈明显的时效和量效关系,作用24h时IC50的As4S4作用浓度为30ms／L。As4S4可诱导Hela细胞凋亡,与对照组相比,差异有极显著意义（P〈0．01）,并呈浓度依赖性。As4S4可明显抑制Hela细胞COX-2的表达（P〈0．05）,随着As4S4浓度的增加,其COX-2蛋白表达水平逐渐降低。不同浓度As4S4作用24h,可明显抑制Hela细胞PGE2的分泌水平,与对照组比较差异有极显著意义（P〈0．01）。结论As4S4对Hela细胞增殖具有抑制作用,可促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制细胞COX-2表达和PGE2分泌水平有关。     

姜黄素诱导白血病细胞凋亡相关分子机制的研究进展

姜黄素是从姜科姜黄素属植物中提取的一种多酚类化合物,具有抗感染、抗氧化、抗肿瘤等药理作用.姜黄素的抗肿瘤作用日益受到人们的重视,其对多种肿瘤细胞的产生、增殖及转移均有抑制作用.文章综述近年来姜黄素诱导白血病细胞凋亡的相关分子机制.     

蛇床子素诱导HL-60细胞凋亡及其分子机制研究

目的 研究蛇床子素对急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用的分子机制.方法 CCK8实验检测蛇床子素对HL-60细胞的增殖抑制作用,Hoechst染色观察药物8h作用后细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测HL-60细胞的Bcl-2、Bax mRNA表达变化,Western bolt检测HL-60细胞的活性caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas、FasL蛋白表达变化.结果 蛇床子素可明显抑制HL-60细胞增殖并诱导其发生凋亡,抑制率最高达（90.7±4.5）％,F=138.46,P=0.000;总凋亡率为33.6％,F=27.75,P=0.006.诱导后Bcl-2 mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调,Bax/Bcl-2比值升高（F=210.12,P=0.000）,活性caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas、FasL蛋白表达水平随药物作用时间延长而升高.结论 蛇床子素可抑制HL-60细胞增殖并诱导凋亡,其诱导凋亡机制与同时激活线粒体途径和死亡受体途径相关.     

Pim-3表达下调对舌鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及其分子机制研究

目的:研究Pim-3表达下调对舌鳞状细胞癌细胞凋亡的影响,并探讨其凋亡的相关分子机制。方法:将Pim-3siRNA和对照siRNA分别转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,另设未处理组。利用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分析转染前后3组细胞中Pim-3mRNA和蛋白的表达,利用CCK-8试剂分析转染前后细胞增殖能力的变化,并进一步采用FCM法检测Pim-3表达下调对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡的影响。最后,利用蛋白质印迹法分析转染前后细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Bad、pBad112、pBad136和pBad155表达的变化。结果:Pim-3siRNA能有效下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中Pim-3mRNA和蛋白的表达。Pim-3表达的下调能明显抑制Tca8113细胞的增殖并诱导其凋亡。此外,Pim-3表达下调能显著上调Bax蛋白的表达和下调Bcl-2和pBad112的表达(P<0.05),但不改变总的Bad蛋白和其他Bad磷酸化形式(pBad136和pBad155)蛋白的表达。结论:Pim-3表达下调诱导的细胞凋亡可能与Bax表达水平上升及Bcl-2和pBad112表达水平下降密切相关,因而Pim-3有望成为舌鳞状细胞癌治疗的分子靶点。