北京汉族新生儿胎儿血红蛋白中Gγ/Aγ比值及18例异常者的γ基因图谱分析

493名汉族新生儿胎儿血红蛋白中Gγ/Aγ值分布为:高Gγ(81～89％)3.9％、低Gγ(34～45％)2.6％,其余正常。8例高Gγ的基因型为-Gγ-AGγ-Aγ-/-Gγ-Aγ;10例低Gγ者均为γ基因缺失型,其中7例基因型为-GAγ-/-Gγ-Aγ-。     

二级结构模拟预测HBV脱氧核酶有效作用靶点

目的:通过二级结构模拟预测作用靶点,观察HBV特异性脱氧核酶的体外切割活性,探讨其用于抗病毒制剂的可能性。方法:以HBVX基因mRNA序列为靶设计脱氧核酶DRz-X29,对其特异的切割活性进行体外实验。结果:特定反应条件下,DRz-X29成功对二级结构模拟预测的底物靶点进行了特异切割。结论:底物二级结构模拟能够有效预测HBV脱氧核酶作用靶点,为其发展成一种新型抗病毒制剂奠定了实验基础。     

脱氧核酶对人食管癌细胞增殖的影响

目的 :探讨针对增殖细胞核抗原 (PCNA)基因起始密码AUG的脱氧核酶 (DNAzyme)对人食管癌细胞(EC970 6 )增殖的影响。方法 :设计合成DNAzyme ,应用脂质体转染法将其转入体外培养的hEC。采用流式细胞仪测细胞周期 ;四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法分析hEC增殖活性。采用免疫组化 (SABC法 )检测PCNA蛋白表达。结果 :2 .0 μmol/LDNAzyme干预EC970 6 3d后 ,MTT比色吸光度值低于对照组 (P <0 .0 1)和反义寡聚核苷酸 (ASODN)组 (P<0 .0 5 )。DNAzyme和ASODN对吸光度值的抑制呈剂量依赖性。细胞干预 2d后 ,DNAzyme和ASODN均减少细胞核中棕黄色颗粒的表达 ;DNAzyme、ASODN和对照组的G0 /G1期细胞的比率分别为 72 .5 %、6 6 .8%和 5 6 .7%。结论 :针对PCNA的DNAzyme能调控细胞周期 ,有效抑制EC970 6的体外增殖。     

新疆新生儿血红蛋白F中Gγ与Aγ比值测定及二例异常者的γ基因图谱分析

以聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了新疆地区533例以维吾尔族为主的少数民族新生儿脐血血红蛋白F中Gγ与Aγ比值。结果显示:低Gγ(31～47％)者占1.3％;高Gγ(86～93％)者占1.7％。对其中二例低Gγ者的染色体DNA进行了基因图谱分析,确定其基因型为-GγAγ-/-Gγ-Aγ-。     

Bcr/abl同靶点小干扰RNA与反义寡核苷酸对K562细胞的作用比较

目的比较靶向Bcr／abl基因b3a2融合位点的小干扰RNA（small interferon RNA,SiRNA）及作用靶点完全相同的反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）对人白血病K562细胞的增殖抑制作用,并联用三氧化二砷（As2O3）,比较二者对K562细胞化疗增敏作用。方法体外转录方法合Bcr／abl b3a2融合住点SiRNA,lipofectamine^TM2000转染,改良MTT法检测药物对K562细胞增殖的抑制作用。结果SiRNA和相同作用靶点的ASODN均显示出明显的细胞增殖抑制效应,SiRNA抑制K562细胞的IC50为97．47nmol／L,ASODN抑制K562细胞的IC50为10．71μmol／L;50nmol／L SiRNA与As2O3联用后,明显提高K562细胞对As2O3的敏感性,相同浓度的ASODN对细胞无明显化疗增敏作用。结论本实验结果提示针对Bcr／abl基因融合位点设计的极低浓度的SiRNA即能显著抑制K562细胞增殖,提高细胞对化疗药物的敏感性,其效果明显强于同靶位点的ASODN,显示了RNAi技术应用于慢性髓系白血病的良好前景。     

Aurora A 在人前列腺癌中的表达

目的观察Aurora A在人前列腺癌中的表达情况,探讨Aurora A是否在前列腺癌发生发展中起一定作用。方法采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blot,检测在前列腺癌组织及其细胞系中Aurora A mRNA和蛋白表达。同时,在前列腺癌细胞系PC3中导入靶向Aurora A mRNA的DNA核酶,观察抑制Aurora A对前列腺癌细胞生长的影响。结果91%的前列腺癌组织和三种前列腺癌细胞系(PC3、LNCaP和Du145)中Aurora A表达阳性,而且,靶向Aurora A mRNA的DNA核酶导入PC3细胞后抑制了Aurora A表达,使PC3细胞停滞在G2/M期,并促进细胞凋亡。结论Aurora A可能在前列腺癌形成中起一定作用,Aurora A可望成为前列腺癌治疗中有价值的靶点。     

沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及抗氧化应激的影响（摘要）

目的鉴定G6PD缺陷型人皮肤黑色素瘤稳转细胞株;观察其生长增殖及对Diamide、H2O2或UV诱导的氧化应激反应;比较与外源性抑制G6PD剂作用的异同;探讨G6PD与肿瘤细胞生长和抗氧化应激的关系.方法通过荧光显微镜观察GFP表达的稳定性、Western blotting检测G6PD蛋白表达量和紫外法测定G6PD比活性,以鉴定G6PD缺陷型人皮肤黑色素瘤A375稳转细胞株（A375-G6PD△）;MTT法、平板克隆法和流式细胞仪（FCM）检测观察A375-G6PD△与野生细胞（A375-WT）生长增殖能力和凋亡率的差异;比较两种细胞对巯基氧化剂二酰胺（Diamide）处理后细胞存活率以及NADPH、GSH和H2O2指标的改变;通过FCM对比Diamide、H2O2或UV处理前后A375-G6PD△和A375-WT细胞凋亡率和凋亡蛋白（P53、Bcl-2、Casepase-3）的变化;并观察G6PD非竞争抑制剂DHEA协同Diamide作用与Diamide单独作用相比,两种细胞抗氧化能力和凋亡结果的异同.结果通过反复冻存及多次传代,A375-G6PD△的GFP荧光表达稳定,与A375-WT相比,G6PD表达降低了88.8%,比活性减少了78.5%;A375-G6PD△的生长速度比A375-WT减慢了24.4～37.5%,单细胞克隆形成率也降低25%,凋亡率增加了40%;A375-G6PD△和A375-WT的Diamide半致死量分别为1.2mM和1.8mM;用1.8mMDiamide处理后,与A375-WT相比,A375-G6PD△的NADPH和GSH下降了2.4倍和8.8倍,H2O2增加了7.3倍;FCM检测的凋亡结果显示,A375-G6PD△在Diamide、H2O2或UV作用后,较A375-WT的凋亡率增加了1.8倍、1.7倍和1.1倍;与A375-WT相比,A375-G6PD△在Diamide处理后P53下降2.3倍、Casepase-3升高2.5倍,而在UV作用后P53增加1.4倍;两种细胞Bcl-2的水平在Diamide、H2O2和UV作用后均有所下调;此外,DHEA对A375-G6PD△和A375-WT的G6PD比活性的抑制程度相近,在Diamide联合DHEA的作用后的凋亡数值也相似,二者的P53表达均降低约60%、Casepase-3增加近1倍.结论 A375-G6PD△是稳转的G6PD缺陷人皮肤黑色素瘤细胞株;沉默G6PD表达可减慢A375细胞生长增殖速度,与外源性G6PD抑制剂DHEA作用相似,都能使A375细胞对氧化应激诱导的凋亡更敏感.这说明G6PD不仅能促进人皮肤黑色素瘤细胞的生长增殖,也对调节该肿瘤细胞内由ROS所致的氧化--抗氧化失衡起重要作用.     

反义寡核苷酸治疗白血病的研究现状

反义核酸技术是近十年来肿瘤治疗研究的热点,它包括反义寡核苷酸(又称反义DNA,Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)、反义RNA、核酶及RNA干扰等技术.其中反义寡核苷酸技术的主要作用原理是根据碱基互补配对原则,利用合成的寡核苷酸选择性地与靶基因mRNA互补结合,干扰或阻止其基因产物的形成,从而达到治疗肿瘤的目的.     

反义核酸类药物的药理学研究进展

反义核酸技术是 2 0世纪 80年代出现的一种以应用反义核酸类药物来抑制特定基因表达为目的的基因治疗技术。反义核酸类药物包括反义寡核苷酸和核酶。前者是人工设计合成的与特定基因互补的寡核苷酸 ,它能通过Ｗ Ｃ配对与特定基因结合来抑制其表达。核酶是具有ＲＮＡ裂解活性的ＲＮＡ。它能与与其互补的靶基因的ｍＲＮＡ进行反式结合并能对其进行定点切割。应用反义核酸类药物可以特异 ,高效的抑制某种基因的表达 ,有望成为较理想的基因治疗手段。然而反义核酸要想真正成为一种药物用于临床尚存在一些问题 ,如 :他们必须先找到靶细胞 ,然后通…     

脂质体介导10-23脱氧核酶对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :研究针对增殖细胞核抗原 (PCNA)基因特异性的 10 - 2 3脱氧核酶 (DNAzyme)对人血管平滑肌细胞(VSMC)PCNA的表达和细胞增殖的影响。方法 :应用脂质体转染法将不同寡聚核苷酸转入体外培养的人脐动脉VSMC。采用3 H -TdR掺入法观察空白对照组、脂质体组和等摩尔浓度 (1.0 μmol/L)的DNAzyme、反义寡核苷酸 (A SODN)、mDNAzyme在干预 2d后VSMC的DNA合成速率 ;免疫组化检测 1.0 μmol/L的DNAzyme和ASODN转染 2d后对PCNA表达的影响 ;四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法分析不同剂量的DNAzyme(0 .12 5、0 .2 5、0 .5、1.0、2 .0 μmol/L)转染5d后VSMC增殖活性。结果 :1.0 μmol/LDNAzyme和ASODN转染 2d后 ,VSMC的3 H -TdR掺入量均较对照组显著减低 (P <0 .0 5 ) ,DNAzyme较ASODN更显著减低 (P <0 .0 5 ) ;1.0 μmol/LDNAzyme作用 2d后细胞增殖抑制率为 6 4 .5 % ,高于ASODN组 (37.7% )、mDNAzyme组 (11.9% )和脂质体组 (3.3% )。DNAzyme和ASODN处理细胞 2d后 ,PCNA的表达水平 (平均光密度值 )分别为 0 .2 95 6± 0 .0 2 5 1和 0 .3880± 0 .0 92 5 ,明显低于空白对照组 0 .7342± 0 .2 136 (P <0 .0 1)。转染 5d后 ,DNAzyme的作用呈剂量依赖性 ,0 .12 5 μmol/LDNAzyme处理后VSMC的增殖较对照组低 (P <0 .0 5 )。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

经络腧穴理论的形成与发展

从<脉书·十一脉><黄帝内经>等文献人手,梳理了血气、经络、腧穴理论的形成与发展,简要介绍了四肢部的基本腧穴、躯体部要穴,以及腧穴配伍的基本要义.     

心肾不交与基因/蛋白质失联之相关性及其临床意义

根据DNA与蛋白质相互作用原理,以及DNA-蛋白质与中医心肾关系的认识,通过分析中西医临床研究,发现中医"心肾不交"与"基因-蛋白质失联"有诸多吻合之处。认为两者相互印证、互补长短、相得益彰的深入研究,将会使中医交通心肾方法与方药得到更多的开发与推广应用。     

Exosomes与肾脏生理及疾病

胞外体（exosomes）是由细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中直径30～100nm的膜性小囊泡,内含来源细胞的mRNA、miRNA和蛋白质等成分,能反映来源细胞的生物学信息,可能成为潜在的生物学标志物。Exosomes在信号转导、诱导机体抗肿瘤和免疫耐受等方面的作用是近年来研究的热点,并已成为一种新型治疗手段。尿液exosomes与肾脏生理功能及疾病之间有着密切的关系,但其研究尚处于初期阶段。文章就exosomes的生物学特性、生理功能、分离纯化及其在肾脏疾病方面的标志物作用和治疗价值的研究进展作一综述。     

大鼠/小鼠证候及辨证论治方法学的探索与发展

从大鼠/小鼠四诊和辨证方法的提出与创建,大鼠/小鼠计量化辨证方法的建立,荷瘤小鼠证候发生和演变的揭示,大鼠/小鼠异病同证、同病异证的研究,荷瘤小鼠个体化辨证论治及计量化疗效评价,以及不同证候荷瘤小鼠神经—内分泌—免疫网络基因转录与剪接的特征等方面,总结项目组长期以来所提出的系列假说及开展的大量研发工作,对所解决的学术问题,以及该领域存在问题、前沿和发展趋势做了评述。     

浅谈梅毒的流行与防治

本文报告了梅毒的流行、预防和各期的治疗及胎传梅毒的治疗。     

疟疾知信行现状和影响因素

疟疾是世界范围内的重要公共卫生问题。疟疾相关知识、态度和行为的调查有助于了解当地居民对疾病的认知水平,为制定有效的防控措施提供重要依据。本文综述了疟疾相关知信行调查研究现状及其影响因素。     

Hyperuricemia and gout among Taiwan Aborigines and Taiwanese-prevalence and risk factors

Gout is a metabolic disorder which normally undergoes 4 stages: hyperuricemia, acute gouty arthritis, an intercritical period, and final tophus. Priority associated with gout is hyperuricemia. Only 5%-10% of patients with hyperuricemia will develop gout. Indeed, the serum uric acid level is correlated with the prospects of gouty attack.1 Therefore, study of gout epidemiology should focus on the hyperuricemia of a community or ethnic population. Twenty-three million people live in Taiwan, among them, an ethnic minority of 330 000 native inhabitants (called "Aborigines"), who live mainly in high mountain areas. The rest are "ethnic Taiwanese", most of whom came from the southern Mainland Chinese provinces some 400 years ago. Some of the "ethnic Taiwanese" arrived from the central and northern areas of Mainland China 50 years ago. The languages, dietary habits and cultures of the Taiwanese and Aborigines are completely different.2