Twist1基因对膀胱癌上皮间质转化的影响

目的：探讨Twist1基因对膀胱癌上皮间质转化（EMT）过程的影响。方法：上调Twist1基因的表达,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测膀胱癌细胞中EMT相关基因表达情况。结果：Twist1基因成功转染进膀胱癌T24细胞,转染Twist1的细胞中Twist1 mRNA表达量是转染空载细胞中的11920倍。转染Twist1组表达量为空载组snail11.2倍,snail21.2倍,E-cadherin 0.8倍,Fibronectin 3.2倍,N-caderin 1.5倍和Vimentin mRNA 1.2倍。结论：Twist1在膀胱癌细胞EMT过程中起到一个正性调控作用,能够促进膀胱癌细胞EMT过程。     

膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化分析

目的探讨膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR方法检测40例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱粘膜组织中DBCCRI基因甲基化程度,x^2检验分析其甲基化程度与膀胱癌病理分级分期之间的关系。结果正常膀胱组织未检测到DBCCR1基因启动子甲基化,在膀胱移行细胞癌启动子甲基化扩增阳性化率达42．5％,与膀胱癌病理分级分期没有相关性（P〉0．05）。结论DBCCR1基因启动子异常高甲基化是其失活的主要机制之一,也是膀胱移行细胞癌中一早期事件。     

膀胱移行细胞癌组织中MTS1基因mRNA的检测及意义

目的：研究多肿瘤抑制基因MTS1在膀胱移行细胞癌细胞中的表达方法。方法：应用原位分子杂交方法检测46例膀胱移行细胞癌标本中抑癌基因MTS1的分布与表达。结果：46例膀胱组织中MTS1基因mRNA表达的阳性率为52.0%，其阳性率随膀胱癌病理分级、临床分期的上升而降低，MTS1 mRNA表达阳性者3年生存率明显高于阴性者。结论：MTS1 mRNA的表达与膀胱移行细胞癌的分化程度相关，可用于评估膀胱癌的恶性度及预后。     

膀胱移行细胞癌中RASSF1A基因的表达及其临床意义

目的研究RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达及其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应检测45例膀胱TCC及其相应癌周正常组织中RASSF1A基因mRNA表达情况,采用免疫组织化学方法检测38例膀胱TCC及18例癌周正常组织中RASSFIA蛋白表达情况。结果与癌周正常组织相比,60.0%(27/45例)的膀胱TCC组织中发现RASSF1A mRNA表达异常下调。RASSF1A蛋白在膀胱TCC组织中的阳性表达率为36.8%,明显低于癌周正常组织中的83.3%(P<0.05)。不同临床分期和病理分级间RASSF1A mRNA表达异常和RASSF1A蛋白阳性表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论RASSF1A的失表达可能参与膀胱TCC的发生。     

抑癌基因PLCδ1在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因磷脂酶C-δ1(PLCδ1)在膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)中的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR法检测56例膀胱移行上皮细胞癌组织和15例非肿瘤膀胱组织中基因PLCδ1的表达情况.结果 56例膀胱移行细胞癌组织中PLCδ1的表达缺失率是58.9%(33/56),15例非肿瘤膀胱组织全部表达PLCδ1(P<0.05);其表达异常与BTCC组织淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、性别、病理分级、临床分期和肿瘤数目无关.结论 PLCδ1基因的表达异常可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展及预后中起重要作用,PLCδ1可作为反映膀胱移行细胞癌生物学行为的指标之一.     

上皮性卵巢癌转移抑制基因KAI1的表达及预后意义

上皮性卵巢癌是严重威胁妇女健康和生命的常见妇科恶性肿瘤,超过70％的患者在诊断时已有卵巢外转移。应用分子生物学方法探索有价值的预后指标对指导卵巢癌的治疗有积极意义。在多种肿瘤中证实转移的肿瘤往往伴有转移抑制基因KAI1表达下降或缺失。KAI1基因表达下降则转移率增加,肿瘤临床进展更快,患者存活期缩短。     

nm23-H1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨nm23-H1基因与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测50例膀胱移行细胞癌组织nm23-H1基因表达。结果nm23蛋白弥散于胞浆及胞膜，nm23-H1的表达与膀胱癌的分级、分期有密切关系，有转移性癌组织nm23-H1基因表达明显高于无转移癌组织（P＜0.01）。结论：nm23-H1基因表达是一个判断膀胱移行细胞癌恶性程度有价值的指标。     

卵巢上皮性癌相关抗原基因FXR1的表达及其临床价值

目的：探讨FXR1基因在卵巢上皮性癌中的表达及其临床价值。方法：用RT-PCR法检测FXR1基因在36例卵巢上皮性癌、15例卵巢良性肿瘤、13例正常卵巢组织中的表达。结果：FXR1基因在卵巢上皮性癌（0.915±0.6883）、良性肿瘤（0.5778±0.4785）、正常组织（0.2855±0.2335）中均有一定程度表达。癌组织中的相对表达水平高于良性卵巢肿瘤,但差异无统计学意义（P〉0.05）;癌组织中的FXR1基因相对表达水平高于正常组织（P〈0.05）;良性卵巢肿瘤组织中的相对表达水平高于正常卵巢组织（P〈0.05）;手术—病理分期为Ⅰ-Ⅱ期癌组织中的FXR1基因相对表达水平低于Ⅲ期（P〈0.05）;高分化癌组织中的FXR1基因相对表达水平低于中—低分化癌组织（P〈0.05）。结论：FXR1基因的表达可能与卵巢上皮性癌相关,可能在卵巢上皮性癌的发生、发展过程中起一定作用。     

逆转录病毒介导的MTS1基因在人膀胱癌细胞中的表达

逆转录病毒介导的ＭＴＳ１基因在人膀胱癌细胞中的表达袁建林１，惠宏襄２，黄斌３，柴玉波２，于茂生１，王成济２（１第四军医大学西京医院泌尿外科，西安７１００３３，２第四军医大学分子生物学和生物化学教研室３西安空军电讯工程学院医院）关键词逆转录病毒载体ＭＴ...     

ENTPD5在上皮性卵巢癌组织中高表达:基于Oncomine数据库及生物信息学方法

目的 探讨ENTPD5在上皮性卵巢癌中的表达及临床价值。方法 通过Oncomine、TCGA数据库对ENTPD5在上皮性卵巢癌中的表达水平进行分析,UALCAN数据库分析ENTPD5表达水平与上皮性卵巢癌患者临床性状的相关性,基因富集分析（GSEA）软件分析ENTPD5在上皮性卵巢癌中的可能作用机制,CIBERSORT包探讨ENTPD5的表达量与免疫浸润的相关性。为进一步验证生物信息挖掘结果,RT-qPCR及Western blot检测23例上皮性卵巢癌组织和15例正常卵巢组织中ENTPD5的表达水平,免疫组化法检测50例上皮性卵巢癌石蜡样本和6例正常卵巢石蜡样本中ENTPD5的表达水平。结果 Oncomine、TCGA数据库发现与正常卵巢组织相比,ENTPD5在上皮性卵巢癌组织中表达显著增高（P<0.05）,ENTPD5表达水平与上皮性卵巢癌患者生存呈负相关（P<0.05）。UALCAN数据库发现ENTPD5表达水平与患者年龄相关。GSEA软件分析发现ENTPD5参与ABC转运蛋白、WNT信号通路、胰岛素信号通路以及糖降解等过程,并在其中高度富集。CIBERSORT包分析显示 ENTPD5表达水平与NK细胞、肥大细胞及嗜酸性粒细胞的含量呈负相关（P<0.05）。RT-qPCR结果提示ENTPD5在上皮性卵巢癌组织中的表达水平（2.592±0.339）显著高于其在正常卵巢组织表达水平（1.00±0.123）（t=4.312,P<0.01）。Western blot结果提示上皮性卵巢癌组织中的ENTPD5表达显著高于正常卵巢组织（P<0.05）。免疫组化结果提示ENTPD5在上皮性卵巢癌组织中高表达。结论 ENTPD5在上皮性卵巢癌中高表达,其可能通过参与细胞多种功能过程以及细胞免疫浸润,参与上皮性卵巢 癌的发生发展。     

膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A基因的表达

目的:研究膀胱移行细胞癌中黑色素瘤抗原(MAGE)基因mRNA的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应技术检测35例膀胱移行细胞癌患者癌组织(新鲜标本)MAGE-A1、MAGE-A3及MAGE-A12基因mRNA表达。结果:35例膀胱膀胱移行细胞癌组织中全部(100%)至少表达1种MAGE-A基因,21例MAGE-A1阳性,19例MAGE-A3阳性,24例MAGE-A12阳性,三者均阳性17例。结论:MAGE基因在膀胱膀胱移行细胞癌中有较高表达,可望成为膀胱移行细胞癌免疫治疗的靶基因。     

兔脂肪间充质干细胞诱导成膀胱移行上皮细胞的研究

目的 探讨体外诱导兔脂肪间充质干细胞(rabbit adipose tissue-derived stromal cells,rASCs)向膀胱移行上皮细胞分化的可行性.方法 实验分混合共培养组、条件培养液组和空白对照组.混合共培养组是将兔脂肪间充质干细胞rASCs(GFP标记)与兔膀胱移行上皮细胞按1∶1比例混合培养;条件培养液组是将兔膀胱移行上皮细胞上清液与rASCs一起培养;空白对照组是rASCs与普通培养基常规培养.2周后,用免疫荧光法检测诱导分化的脂肪间充质干细胞中膀胱移行上皮细胞特异性蛋白尿斑素Ib、尿斑素Ⅱ、尿斑素Ⅲ和上皮细胞角蛋白CK18的表达.结果 2周后,免疫荧光检测显示,在混合共培养组中,诱导分化的脂肪间充质干细胞表达膀胱移行上皮细胞特异性蛋白尿斑素Ib和上皮细胞角蛋白18、尿斑素Ⅱ、尿斑素Ⅲ没有检测到.而在条件培养液组和空白对照组,上述膀胱移行上皮细胞特异性标记都没有检测到.结论 rASCs与兔膀胱移行上皮细胞混合培养可以诱导rASCs向膀胱移行上皮细胞分化.     

肝细胞黏附分子基因在膀胱移行细胞癌中的表达

目的研究编码人类免疫球蛋白类细胞黏附分子的肝细胞黏附分子(hepaCAM)基因的表达与膀胱移行细胞癌(TCCB)生物学行为之间的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测在28例正常膀胱黏膜组织、34例TCCB组织及2株TCCB癌细胞株中hepaCAM基因的表达情况,并对TCCB患者hepaCAM基因的表达情况与其临床病理学指标进行分析。结果hepaCAM在正常膀胱黏膜组织标本中的表达均一,82.4%的TCCB组织中表达降低,17.6%的TCCB组织中表达缺失,2株TCCB T24细胞株和B IU-87细胞株中hepaCAM表达完全缺失,TCCB组织中hepa-CAM基因表达半定量值低于正常膀胱黏膜组织(P<0.05)。hepaCAM基因表达与TCCB的病理学分级有关(P<0.05),与临床分期、性别及是否复发无明显相关(P>0.05)。结论TCCB组织中hepaCAM表达降低与其临床病理分级相关,提示其可能与TCCB的恶性改变有关。     

人新基因EOLA1生物信息学分析

目的预测人类新基因EOLA1的生物学功能。方法基于EOLA1全长cDNA序列,应用生物信息方法,从序列比对、染色体定位、基因结构分析、编码蛋白理化性质分析、蛋白质位点和序列模式预测等几个方面对EOLA1进行分析。结果EOLA1编码的蛋白EOLA1经网上同源性比对没有发现与之高度同源的人类已知蛋白;EOLA1与鼠111002L19蛋白高度同源,到目前为止,对鼠111002L19蛋白功能也不清楚;应用辐射杂交细胞系（RH）作图系统发现EOLA1定位于Xq27．4;对其二级结构进行预测发现在EOLA1蛋白分子中存在酪氨酸激酶Ⅱ和蛋白激酶C磷酸化位点以及1个螺旋-转角-螺旋（HTH）基序。结论人新基因EOLA1编码蛋白质的一级和二级结构特征赋予EOLA1信号转导能力,有可能作为信号分子在LIDS激活人血管内皮细胞的过程中发挥作用。     

兔膀胱移行上皮种子细胞的培养及扩增

目的 对膀胱移行上皮细胞进行原代及传代培养，探讨用于膀胱组织工程研究的移行上皮种子细胞的培养方法。方法 采用组织块培养法，将获取的移行上皮组织小块在添加附加成分的无血清F12培养基进行培养，观察培养细胞的形态及生长增殖情况，并对传代培养的细胞进行免疫组化染色鉴定。结果 原代移行上皮组织培养约9-10d时细胞可达90％的汇合，传代培养的移行上皮细胞生长稳定期较长，细胞至5—6代时生长状态仍然良好。免疫组化染色显示培养细胞为移行上皮细胞。结论 采用组织块培养法能成功地原代培养兔膀胱移行上皮细胞，在添加附加成分的F12培养基中移行上皮细胞能够稳定地传代培养，表明该法可为膀胱组织工程的研究提供一定数量活性良好的移行上皮细胞。     

抑制蛋白1及钙黏附蛋白E与上尿路移行上皮癌预后的关系

目的 探讨肿瘤转移抑制蛋白1(MTSS1)和钙黏附蛋白E(E-cadherin)与上尿路移行上皮癌预后的关系.方法 选取2005年1月-2014年1月该院收治的上尿路移行上皮癌患者60例,取癌组织为观察组,相同患者膀胱正常组织为对照组,检测MTSS1和E-cadherin的表达,分析其与上尿路移行上皮癌患者病理特征及预后的关系.结果 观察组MTSS1的阳性表达率为58.3％(35/60),显著低于对照组的100％(60/60),并且与远处转移、淋巴转移显著相关;MTSS1阳性表达患者的中位生存时间显著高于阴性表达患者,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组E-cadherin的阳性表达率为28.3％(17/60),显著低于对照组的65.0％(39/60),并且与组织学分化低、远处转移、淋巴转移显著相关;E-cadherin阳性表达患者的中位生存时间显著高于阴性表达患者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上尿路移行上皮癌组织中MTSS1和E-cadherin呈低表达,提示癌细胞侵袭转移,阴性表达患者生存期短.     

膀胱移行细胞癌患者尿液粘蛋白MUC1定量检测的临床意义

目的研究上皮特异性肿瘤蛋白MUCl在膀胱移行细胞癌患者尿液中的表达，探讨尿液MUCl在膀胱癌早期诊断、疗效评估、预后判断中的价值。方法采用放射免疫法（IRMA）检测31例膀胱移行细胞癌患者、10例腺性膀胱炎患者、10例非膀胱泌尿系良性疾病及10例正常对照组尿液MUC1的表达水平，分析各组组间、不同分期和分级患者、初发与复发患者及术前与术后患者尿液MUC1的差异。结果膀胱肿瘤组患者尿液MUC1同各组尿液MUC1含量相比较。差异无显著性（P〉0．05）。膀胱肿瘤组中，不同分级、分期肿瘤患者尿液MUC1差异无显著性（P〉0．05），初发和复发肿瘤患者尿液MUC1差异无显著性（P〉0．05），而术前与术后肿瘤患者尿液MUC1差异有显著性（P＜0.05）。结论尿液MUC1不能作为膀胱癌的早期诊断筛选指标，但可作为疗效评价、预后判断的指标。MUC1属肿瘤基因表型瘤标。组织学的高表达并不一定平行于血液和尿液，特异性肿瘤基因瘤标应该是膀胱移行细胞癌早期诊断筛选指标的研究方向。