胃癌组织FAT10与突变型p53表达及其相互关系

目的 检测FAT10与突变型p53在胃癌组织中的表达情况及相互间关系.方法 采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测FAT10和突变型p53在62例胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织(距癌边缘2～5 cm)及正常胃组织(距癌边缘>5 cm)中的表达水平,统计分析两者表达间的关联性及FAT10与胃癌预后之间的关系.结果 FAT10蛋白和突变型p53蛋白在胃癌组织中的表达阳性率分别为51.61%(32/62)和45.16%(28/62),显著高于癌旁组织[12.90%(8/62)和14.51%(9/62),χ2值分别=21.26和20.69,P值均<0.01]及正常胃组织[6.45%(4/62)和9.68%(6/62),χ2值分别=13.91和19.61,P值均<0.01].胃癌FAT10蛋白及mRNA的表达上升主要与胃癌的淋巴转移及TNM分期密切相关(P值均<0.05).胃癌组织中FAT10表达在蛋白及基因水平均与突变型p53表达呈正相关性(r值分别=0.865和0.761,P值分别<0.05和0.01).FAT10蛋白阳性表达或mRNA表达水平高者,其累计生存时间显著低于FAT10阴性者(P值均<0.05).结论 FAT10与突变型p53在胃癌组织中表达上调且呈正相关性,两者可能共同参与胃癌的形成与发展,FAT10对评价胃癌的预后可能有较好的价值.     

胃癌死亡相关蛋白激酶基因甲基化对其信使核糖核酸和蛋白表达的影响

目的 研究胃癌组织死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子区甲基化对原发性胃癌组织中DAPK mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用逆转录(RT)-PCR法检测62例原发性胃癌及癌旁组织DAPK mRNA表达,甲基化特异性PCR(MSP)法检测DAPK启动子区CpG岛甲基化状态,对其中34例胃癌组织甲基化阳性者的DAPK蛋白表达进行Western印迹法检测.结果 胃癌组织中DAPKmRNA和蛋白表达水平明显低于癌旁组织,分别为0.2863±0.2027比0.5736±0.1968、0.2616±0.0913比0.6529±0.1808,差异均有统计学意义(P值均＜0.01).DAPK在胃癌组织和癌旁组织中的甲基化频率分别为54.8%和17.7%,差异有统计学意义(P＜0.01).在胃癌组织中,甲基化组DAPKmRNA表达明显低于非甲基化组(0.1399±0.0835比0.4640±0.1569,P＜0.01).DAPK基因甲基化与胃癌TNM分期显著相关(P=0.04).结论 原发性胃癌组织DAPK mRNA和蛋白表达缺失或低下与其启动子甲基化程度增高显著相关.     

hTERT、P53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的探讨端粒酶逆转录酶（hTERT）基因、p53蛋白在胃癌（GC）及癌前病变中的表达及相关性。方法采用免疫组化和原位杂交方法分别检测130例GC及癌前病变组织标本中p53和hTERT mRNA的表达。结果p53蛋白在慢性表浅性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、非典型增生（DYS）、GC中的表达率分别为5％、25％、50％、62．5％,其中GC与CSG、CAG比较有统计学差异：hTERT mRNA在CSG、CAG、DYS及GC中的表达率分别是0、10％、30％、78．75％,GC与CSG、CAG、DYS比较有统计学差异。p53阳性的GC组织中hTERT表达均为阳性,p53阴性的GC组织中hTERT阳性表达率为66．7％。结论hTERT是一个比p53更好的恶性肿瘤标记物;p53基因突变可导致端粒酶活化,但端粒酶激活可能不完全依赖于p53基因的调控。     

端粒酶逆转录酶和c-myc基因在肺癌中表达的研究

目的　研究端粒酶逆转录酶 (hTERT)和c myc基因在肺癌中的表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用端粒重复序列扩增 (TRAP)法对肺癌组织以及癌旁非癌肺组织的端粒酶活性进行测定。用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测上述组织标本中hTERTmRNA与c myc蛋白表达。结果　端粒酶活性在肺癌组织中阳性率为 73 .2 % (3 0 /4 1) ,在癌旁非癌肺组织为 6.3 % (2 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌及癌旁非癌肺组织中hTERTmRNA阳性表达率分别为 78.0 % (3 2 /4 1)和 9.4% (3 /3 2 ) ,P <0 .0 1,c myc蛋白阳性表达率分别为 80 .5 % (3 3 /4 1)和 15 .6% (5 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌组织hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈显著正相关 (r =0 .70 7,P <0 .0 1) ,同时c myc蛋白与hTERTmRNA表达亦呈明显正相关 (r =0 .60 9,P <0 .0 1)。 结论　hTERTmRNA表达增强不仅参与肺癌的发生 ,而且可能是调节肺癌端粒酶活性的限速步骤。c myc蛋白可能通过激活hTERTmRNA表达而促进肺癌的形成     

microRNA-101和环氧合酶-2在胃癌中的表达及其临床意义

背景：microRNAs是一类对靶基因表达具有转录后调控作用的非编码小RNA。microRNA-101（miR-101）在多种恶性肿瘤中呈低表达,而过表达外源性miR-101可发挥肿瘤抑制作用。前期体内、外实验发现外源性miR-101可抑制胃癌细胞增殖和环氧合酶-2（COX-2）表达。目的：检测胃癌组织中的miR-101、COX-2表达并探讨其临床意义。方法：收集手术切除胃癌组织和配对癌旁非癌组织标本30例,以实时荧光定量RT—PCR检测miR-101、COX-2mRNA表达,分析两者间以及两者与胃癌主要临床病理特征的关系。结果：绝大多数胃癌组织中miR-101表达低下,COX-2mRNA则呈过表达。胃癌组织与癌旁非癌组织间miR-101、COX-2mRNA表达量差异显著（P〈0．01）,且两者表达在癌组织和癌旁组织中均呈负相关（癌组织：r=-0．767,P=0．000;癌旁组织：r=-0．718,P=0．000）。TNMⅢ、IV期胃癌和伴淋巴结转移的胃癌中,miR-101表达分别显著低于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）,COX-2mRNA表达分别显著高于TNMI、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例（P〈0．05）。结论：miR-101与COX-2之间的负相关性可能有助于胃癌的临床诊断;miR-101表达低下伴COX-2过表达与胃癌临床进展和转移有关,对预后判断有一定参考价值。     

人结肠癌中凋亡抑制基因Survivin的表达

背景:细胞增殖和凋亡失衡将导致肿瘤的发生,并直接影响肿瘤的生物学行为。survivin是一种新的凋亡抑制基因,在大多数肿瘤中显著高表达。目的:探讨survivin基因在人结肠癌发生、发展中的作用,及其与p53基因的表达和结肠癌生物学行为的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测33例结肠癌组织及其相应癌旁组织和正常结肠黏膜中survivinmRNA和p53mRNA的表达,分析survivinmRNA的表达与p53mRNA的表达和结肠癌生物学行为的相关性。结果:69.7%的结肠癌组织中有survivinmRNA表达,表达率显著高于癌旁组织和正常结肠黏膜(42.4%和21.2%,P<0.01);survivin表达阴性癌组织的相应癌旁组织和正常结肠黏膜无一例有survivinmRNA表达。结肠癌组织中survivinmRNA的表达值显著高于癌旁组织和正常结肠黏膜(P<0.01)。33例结肠癌组织中仅2例p53mRNA表达缺失,癌旁组织和正常结肠黏膜中均有p53mRNA表达。结肠癌组织中p53mRNA的表达值与癌旁组织和正常结肠黏膜无显著差异;survivin表达阳性癌组织中p53mRNA的阳性表达率和表达值与survivin表达阴性组无显著差异。survivinmRNA和p53mRNA的表达与结肠癌的生物学行为无显著相关性。结论:survivin基因在人结肠癌组织中表达上调,提示其可能通过抑制结肠癌细胞凋亡,在结肠癌的发生、     

端粒酶基因hTR在乳腺癌中的表达

用原位杂交的方法检测端粒酶基因hTR在46例乳腺及其癌旁组织，53例乳腺良性病变中的表达和分布情况。结果显示，46例乳腺癌中hTR表达阳性率为91．3％；癌旁组织中为0；53例乳腺良性病变中为3．9％。乳腺癌组织中hTR的表达与癌旁组织、良性病变比较差异有显著性（P均＜0．01）。乳腺癌组织中hTR的表达与肿瘤分期相关（P＜0．05），与病理类型、淋巴结转移、肿瘤大小无相关性（P均＞0．05）。认为端粒酶基因hTR表达检测在乳腺癌诊断中有一定价值。     

肺癌患者人乳头瘤病毒16,18型,P53蛋白及端粒酶活 …

目的 探讨人乳头瘤病毒１６、１８（ＨＰＶ１６、１８）型感染,Ｐ５３蛋白表达,端粒酶活性在不同民族原发性肺癌组织中是否存在差别及其意义。方法 分别应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、免疫组化技术测定１１０例肺癌组织中ＨＰＶ１６、１８－ＤＮＡ、Ｐ５３蛋白表达,用以ＰＣＲ为基础的端粒重复扩增法（ＰＣＲ－ＴＲＡＰ）测定其中２２例肺癌新鲜组织内端粒酶活性。结果 肺癌组ＨＰＶ１６、１８总阳性率为４０．０％,与正常对照     

端粒酶催化亚单位和p53基因在大肠癌中表达的研究

目的　研究端粒酶催化亚单位 (hTERT)和p5 3基因在大肠癌组织中的表达 ,进而探讨大肠癌发生过程中端粒酶活化的分子机制。方法　分别采用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和端粒重复序列扩增 (TRAP)法检测 46例大肠癌及其相应正常组织中hTERTmRNA表达与端粒酶活性。用免疫组化S P法测定上述组织标本中的p5 3蛋白表达。结果　hTERTmRNA与端粒酶活性在大肠癌组织中阳性表达率分别为 87 0 % (4 0 /4 6)和 80 4% (3 7/4 6) ,均明显高于相应正常组织 (P <0 .0 1)。大肠癌中hTERYmRNA表达与端粒酶活性明显相关 (r=0 .696,P <0 .0 1)。p5 3蛋白在大肠癌中阳性表达率为 67 4% (3 1/4 6) ,而正常组织未见阳性表达 ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。大肠癌组织p5 3蛋白表达与hTERTmRNA表达或端粒酶活性无显著相关性 (P >0 .0 5 )。结论　端粒酶激活与大肠癌的发生密切相关 ,hTERTmRNA表达上调可能在大肠癌端粒酶活性调节中发挥重要作用。p5 3蛋白表达增强可能与端粒酶激活无直接相关     

胃幽门螺杆菌感染与抑癌基因失活的关系

目的探讨胃癌及癌前病变组织中幽门螺杆菌(H.pylori)感染与抑癌基因失活间的相互关系.方法运用DNA-PCR技术检测H.Pylori感染,采用PCR-RFLP,PCR-SSCP,RT-PCR及免疫组化技术分析182例胃癌及癌前病变及正常胃粘膜中抑癌基因APC,MCC,DCC,YNZ22及p53基因的杂合缺失、突变、mRNA及蛋白异常表达.结果胃癌及癌前病变组织中H.pylori的感染率(IM61.7%,Dys 63.3%,GC 42.3%)显著高于正常胃粘膜(17.5%,P＜0.05).但胃癌及癌前病变间H.pylori感染率无显著差别(P＞0.05),胃肠两型胃癌中H.pylori感染率分别为47.1%及42.2%,两者无显著差别(P＞0.05).胃癌及癌前病变组织中存在多种抑癌基因失活.H.pylori感染与癌前病变-肠化生中APC基因异常蛋白表达有关(Hp+43.2%vsHp-13.0%,P＜0.05).胃癌组织H.pylori感染阳性组中APC基因突变(50.0%)及蛋白表达(63.6%)、p53基因蛋白表达率(59.1%)显著高于阴性组(vs16.7%,P＜0.05;vs30.0%,P＜0.01;vs20.0%,P＜0.01).结论幽门螺杆菌感染及多种抑癌基因失活可能与胃癌的发生发展相关,H.pylori感染与APC,p53基因失活可能相关.     

血管紧张素转移酶mRNA在胃癌中的表达

目的 定量分析血管紧张素转移酶(ACE)mRNA在胃癌组织和癌旁组织的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测34例胃癌组织及对应癌旁组织ACE mRNA表达水平,分析其与分化程度、临床分期和转移状态等临床病理特征的相关性.结果 ACE mRNA在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P=0.003).胃癌组织ACE mRNA表达与分化程度、临床分期和转移状态等临床病理特征无相关性(P＞0.05).结论 ACE mRNA在胃癌组织中呈明显高表达,提示其与胃癌的发病密切相关.     

胃癌患者CK20和Ki-67的表达及其临床意义

背景:有关CK20和Ki鄄67在肿瘤组织中表达的研究虽较多,但其临床意义尚无定论。目的:研究胃癌患者外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测40例胃癌患者术前外周血CK20mRNA的表达,采用免疫组化染色检测相应癌组织中CK20、Ki鄄67的表达。结果:随着胃癌临床分期的增高和分化程度的降低,外周血CK20mRNA的阳性率相应增高(P<0.001和P=0.038),癌组织中CK20、Ki鄄67的表达亦增强(P<0.001和P<0.01;P<0.001和P<0.001)。癌组织中CK20、Ki鄄67的表达越强,外周血CK20mRNA的阳性率越高(P=0.009和P<0.01),且癌组织中Ki鄄67的表达随CK20表达的增强而增强(P=0.002)。外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达均与胃癌的组织学类型无关(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达与胃癌的临床分期和分化程度关系密切,可作为预测胃癌转移和评估预后的指标。     

胃癌及癌前组织端粒状态的分析

目的　探讨不同胃粘膜病变端粒状态的变化规律。方法　采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交技术，检测３５ 例胃癌及相应的３３ 例癌旁和１９ 例手术切缘组织端粒限制性片段长度（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔＴＲＦ） 。结果　与癌旁和／或手术切缘组织比较，在３５ 例肿瘤组织中，ＴＲＦ缩短、无变化及延长分别占２０（５７．１％ ）、１２（３４．３ ％） 及３（７ ．６％ ） 例；进一步研究发现，由正常胃粘膜（Ｎ） →慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）→肠上皮化生（ＩＭ）→异型增生（Ｄｙｓ） →胃癌（ＧＣ） 的发展过程中，ＴＲＦ有逐渐缩短的趋势，且ＧＣ 组ＴＲＦ长度明显短于Ｎ 及ＣＡＧ 组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ；肿瘤组织ＴＲＦ与患者性别、肿瘤大小、分化程度、临床分期及端粒酶活性大小等临床病理指标无明显相关性，而与患者年龄有一定的关系。结论　由于受多种因素的影响，与肿瘤组织中端粒酶阳性率相比较，端粒限制性片段长度可能不宜作为衡量肿瘤生物学行为的一个良好的指标。     

多重耐药蛋白-1在胃癌中的表达及意义

目的:研究胃癌组织中多重耐药蛋白(MRP)-1的表达规律.方法:用免疫组织化学染色(SP法)检测30例慢性浅表性胃炎(CSG)、30例胃黏膜肠上皮化生(IM)、45例异型增生(Dys)和65例胃癌(GC)组织标本中MRP-1阳性表达情况,RTPCR技术检测MRP-1 mRNA的表达情况.均数的比较采用t检验,样本率的比较采用χ2检验,两因素的相关分析用直线相关分析.结果:在CSG→IM→Dys→GC的过程中,MRP-1的表达呈逐步递增趋势,MRP-1的阳性表达率GC组与Dys,IM组,均具有显著性差异(43/65 vs 19/45,6/30,P＜0.05),GC组MRP-1以及MRP-1 mRNA阳性表达率均高于相应癌旁组,差异具有非常显著性(66.2% vs 33.3%,63.1% vs 28.9%,P＜0.01);MRP-1与MRP-1mRNA表达强度呈正相关(r=0.598,P＜0.05).结论:胃癌形成过程中,MRP-1与MRP-1mRNA表达逐渐上调.     

胃癌前病变不同转归中p53,bcl—2基因的表达以及细胞增？…

目的 探讨ｐ５３、ｂｃｌ－２基因和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）等生物学指标在胃癌前病变不同转归中的作用。方法 采用免疫组化（ＬＳＡＢ）法检测５２例胃癌患者胃癌及癌的病变组织标本及５６例非胃癌患者有病变「胃黏膜中度以上肠上皮化生和（或）异型增生」组织标本的ｐ５３、ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达。结果 ⑴在癌前病变中,ｐ５３、ｂｃｌ－２在癌组与非癌组之间的表达差异无显著性（ｐ〉０．０５）,ＰＣＮＡ标记指数（     

贲门腺癌组织中RKIP、E-cadherin的表达变化及相关性

目的 观察Raf激酶抑制蛋白（RKIP）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）在贲门腺癌组织中的表达变化,并探讨其相关性.方法 应用免疫组化SP法检测160例贲门腺癌组织及癌旁非肿瘤组织中RKIP、E-cadherin的蛋白表达情况,分析其表达与临床病理参数的关系以及两者表达的相关性.结果 RKIP和E-cadherin在贲门腺癌组织中表达明显低于癌旁组织（P均＜0.05）.RKIP和E-cadherin在高分化、中分化和低分化的贲门腺癌组织中的表达差异有统计学意义（P均＜0.01）,在有淋巴结转移的贲门腺癌组织中表达低于无淋巴结转移的组织（P均＜0.05）.RKIP和E-cadherin在贲门腺癌组织中的表达呈正相关（r=0.388,P＜0.05）.结论 RKIP和E-cadherin 在贲门腺癌组织中表达降低,且两者表达呈正相关.