过氧化氢存在下极谱催化波法测定桑枝中桑色素的含量

目的 考察过氧化氢(H₂O₂)存在下桑色素的极谱催化波,建立高灵敏度测定桑枝中桑色素含量的方法. 方法 采用电分析化学法. 结果 在0.2 mol•L^-1 醋酸 醋酸钠 (pH值5.3 ± 0.1)和2.0×10-2 mol•L^-1 H₂O₂最佳介质中,桑色素极谱催化波峰电流与其浓度在6.0×10^-8～3.0×10^-6 mol•L^-1范围内有线性关系. 结论 该方法灵敏度高、快速、简便,从电化学角度为桑色素清除氧自由基提供实验依据.     

过硫酸钾存在下极谱催化波法测定氯胺酮

目的:建立一种简便、灵敏的测定氯胺酮(KET)新方法。方法:基于氧化剂存在时 KET 产生的极谱催化波,用线性扫描极谱法快速测定 KET。结果:在1.46×10~(-2)mol·L~(-1)Britton-Robinson(pH 2.09)支持电解质中,KET 于-1.44V(vs.SCE)处产生1个还原波。引入过硫酸钾后,该还原波峰电流增加约10倍,峰电位基本不变,产生一极谱平行催化波。其二阶导数峰峰电流与 KET 的浓度在1.0×10~(-9)～1.0×10~(-7)mol·L~(-1)范围内呈线性关系(r=0.9995,n=11),检出限为4.0×10~(-10)mol·L~(-1)。结论:该方法可用于药剂中 KET 含量的测定。     

克拉霉素的极谱催化波及其应用

目的建立灵敏快速测定克拉霉素的新方法。方法基于氧化剂存在时克拉霉素产生的极谱催化波,用线性单扫描极谱法快速测定克拉霉素。结果在0.24 mol·L^-1 KH₂PO₄-Na₂HPO₄ (pH 6.81)支持电解质中，克拉霉素于-0.79 V (vs SCE)电位处产生1个还原波。加入过二硫酸钾后，该还原波峰电流增加约20倍，峰电位基本不变，产生一极谱催化波。其二阶导数峰电流i_p″与克拉霉素的浓度在4.0×10^-7-5.0×10^-5mol·L^-1呈良好线性关系(r=0.999 1,n=10)，检出限为2.0×10^-7 mol·L^-1。结论该方法可用于药剂中克拉霉素含量的测定。     

Pb2+-NaOH介质中蛋白质水解物的极谱吸附波及其应用Pb2+-NaOH介质中蛋白质水解物的极谱吸附波及其应用

目的建立一种快速、简便、灵敏的蛋白质含量测定的新方法。方法含有巯基或二硫基的蛋白质与0.5 mol·L^-1氢氧化钠、1.5×10^-4 mol·L^-1 Pb²⁺和0.02%四丁基碘化铵的混合溶液在沸水浴中反应5 min，采用单扫描极谱法，测定-0.66 V(vs SCE)处一价导数波高。结果牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）的浓度在7.5×10^-10～3.0×10^-7 mol·L^-1与其波高呈线性关系，BSA和HSA检测限均为3.0×10^-10 mol·L^-1；溶菌酶(Lyso)的浓度在1.4×10^-8～1.3×10^-6 mol·L^-1与其波高呈线性关系，Lyso的检测限为7.0×10^-9 mol·L^-1。结论该方法取样量少、体系简单、灵敏度高，可用于人血清样品中蛋白质含量的测定。     

昆布多糖硫酸酯对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用Δ

目的研究昆布多糖硫酸酯(LAPS)对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法分次消化法分离原代培养的乳鼠心肌细胞,建立H2O2诱导心肌细胞损伤模型;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度LAPS对心肌细胞的保护作用;试剂盒检测LAPS对细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量的影响;利用荧光探针二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果100μmol/L的H2O2能明显造成心肌细胞损伤,LAPS能改善H2O2所造成的心肌细胞损伤;LAPS能够明显降低的过氧化损伤心肌细胞外液中LDH和CK含量、明显降低过氧化损伤心肌细胞内MDA和活性氧(ROS)的含量、明显提高过氧化损伤心肌细胞内SOD、GSH-Px和CAT的活力。结论 LAPS对心肌细胞的过氧化损伤有保护作用,与其降低或阻断脂质过氧化反应,降低细胞内ROS含量,进而阻断因ROS对细胞造成的损害,及时修复受损细胞有着密切关系。     

甲醛存在下阿米卡星的单扫描示波极谱法测定

研究了在Britton-Robinson(pH8.0)介质中,阿米卡星(AMK)甲醛衍生物的单扫描示波极谱行为,并对其电极反应机理作了研究。在选定条件下,AMK浓度在6.0×10^-7～5.0×10^-5mol·L^-1范围内与峰电流呈线性,相关系数为0.9998,检测限为2.4×10^-7mol·L^-1。方法无需前处理即可用于针剂、尿及血清样品中痕量AMK测定,回收率90%～110%,相对标准偏差小于4.1%。     

极谱氧电极法测定过氧化氢酶的活性

过氧化氢酶的活性国内主要采用分光光度法测定。用极谱氧电极法测定酶活性操作简便,测试快速,灵敏度高。此法测的是溶液中氧的变化,故不受被测液物理状态如澄明度、粘度、颜色等干扰,可用于临床分析。     

异亚丙基莽草酸对H2O2损伤血管内皮细胞的保护作用

目的研究异亚丙基莽草酸(ISA)对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法倒置显微镜下观察细胞形态学改变,MTT比色法检测细胞活性,用硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO的含量。放射免疫法测定细胞培养液中前列环素代谢物6-酮-前列腺素F_1α(6-keto-PGF_1α)含量,比色法测定培养液及细胞裂解液的乳酸脱氢酶(LDH)活性并计算LDH的释放率。结果ISA可明显改善H₂O₂所致的内皮细胞变形、皱缩等损伤表现。1～100 μmol·L^-1 ISA可浓度依赖性的减轻H₂O₂引起的细胞活性降低和LDH释放,并促进H₂O₂诱导的血管内皮细胞释放NO和前列环素。结论异亚丙基莽草酸对H₂O₂损伤血管内皮细胞具有保护作用。     

洋参抗衰合剂对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的 考察洋参抗衰合剂对H₂O₂致HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用,并初步分析洋参抗衰合剂对H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤的保护机制。方法 以H₂O₂诱导培养的HepG2细胞为模型,检测洋参抗衰合剂对HepG2细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、过氧化氢酶(catalase, CAT)活力和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量的变化,分析洋参抗衰合剂的抗氧化作用。结果 随着洋参抗衰合剂质量浓度的增加,H₂O₂诱导HepG2细胞的谷胱甘肽(GSH) 和过氧化氢酶(CAT)含量上升,丙二醛(MDA)的含量有所下降。结论 洋参抗衰合剂对H₂O₂诱导HepG2细胞损伤有抗氧化作用,其机理可能是通过促进还原物质的合成,增加抗氧化酶的活性进而减少脂质过氧化物。     

INHIBITION OF RAT GLOMERULAR MESANGIAL CELL SODIUM/HYDROGEN EXCHANGE BY HYDROGEN PEROXIDE

1. pH_i regulation In glomerular mesangial cells (GMC) includes both Na⁺/H⁺ and Cl-/HCO₃^- exchange. As a fall in pH_i may protect against H₂O₂-mediated GMC damage during ischaemia-reperfusion, the involvement of these mechanisms in the GMC pH_i response to H₂O₂ was assessed using confluent GMC grown in RPMI medium with 20% fetal calf serum (10–15 passages). 2. Cells were loaded with BCECF-AM and pH_i evaluated using standard fluorometric-ratio techniques. In HEPES buffer, GMC exposure to H₂O₂ dose-dependently (25μmol/L-1 mmol/L) decreased pH_i over 10 rnin from 7.3 ± 0.1 to 6.7 ± 0.1 (at 100 μmol/L) partly due to rapid non-competitive inhibition of amiloride-sensltive Na⁺/H⁺ exchange. 3. BCECF fluorescence in free solution was unchanged by H₂O₂ whereas the pH_i decrease was abolished by nigericin/K⁺ clamp. Buffer capacity by direct titration was not changed by H₂O₂ and averaged 100 ± 9 nmol/2.6±10⁶ cells/pH unit. Similarly, zero-Na⁺/high-K⁺ buffer, used to minimize Passive H⁺ entry, did not prevent the fall in pH_i while GMC H⁺-formation/extrusion, assessed by the rate of extracellular acidification in low-capacity buffer (0.05 mmol/L), was rapidly inhibited. 4. In contrast, following only a brief 3 min exposure to 1 mmol/L H₂O₂, HCO₃-/CO₂ buffer potentiated the inhibition of Na⁺/ H⁺ exchange from 50 to 80% of control and reduced the acidification from pH_i 6.6 ± 0.1 to 7.15 ± 00.05. This effect was reversed (to pH_i 6.8 ± 0.07) by pretreatment with 200 μmol/L DIDS, an inhibitor of Cl-/HCO₃- exchange. 5. Thus, the decrease in GMC pH_i in Fespohsë to H₂O₂ In HEPES, partly mediated by inhibition of Na⁺/H⁺ exchange and a possible redistribution of intraceliular H⁺, is antagonized in HCO₃-/CO₂ through a DIDS-sensitive Cl-/HCO₃^- exchange mechanism. This may act to negate potentially protective effects of low pH_i and potentiate oxidative damage to membrane lipids, enzymes and intracellular organelles on reperfusion.     

催化氢转移还原肟成胺

用甲酸铵/钯-炭的催化氢转移还原体系还原肟类化合物成胺。该法反应条件温和,操作简便,收率可达84～96%。     

醋酸甲羟孕酮的极谱行为及其分析应用

目的:研究醋酸甲羟孕酮(MPA)的电极反应机理,拟定了测定MPA的单扫描示波极谱法。方法:用单扫描示波极谱法、快速扫描循环伏安法、恒电位电解法、紫外分光光度法等多种技术进行研究。结果:在醋酸盐缓冲溶液中,MPA的C=C双键首先发生单电子单质子还原,产生了中间体自由基HMPA·。随后HMPA·可以单电子单质子方式进一步还原,形成产物H2MPA;同时也可以与中性MPA分子形成二聚体自由基HMPA·MPA·。在0.2mol·L^-1HAc—NaAc缓冲液中,MPA还原波的二阶导数峰电流iP″与其浓度C_MPA在2.0×10^-6～6.0×10^-5mol·L^-1范围内成线性关系,相关系数γ=0.998。结论:证实MPA的还原过程有中间体自由基参与。     

慢性肺心病患者脂质过氧化损伤与病情演变的关系

对６４例慢性肺源性心脏病患者血清过氧化脂质及超氧化物歧化酶含量的检测观察。结果显示慢性肺心病患者ＬＰＯ及ＳＯＤ水平高于对照组，差异有显著性；肺心病急性发作期又高于缓解期，差异有显著性。     

糖皮质激素诱导的小鼠记忆功能低下及其作用机理

目的:研究糖皮质激素(GCOR)诱导小鼠记忆功能降低及其作用机理。方法:采用Fura-2/AM 钙离子荧光指示剂和双波长荧光分光光度计测定细胞内[Ca²⁺]i 浓度;用透射电镜和流式细胞仪分别检测细胞凋亡(PCD) 。结果:GCOR 可分别诱导成年及老龄小鼠机体免疫功能降低,胸腺及脾脏脏器指数减小,老龄动物记忆功能降低,胸腺、海马细胞内Ca²⁺ 超载,海马神细胞PCD细胞数增加。体外试验结果亦表明,GCOR 可直接诱导T 淋巴细胞和海马神经细胞[Ca2+]i 超载,细胞凋亡。结论:糖皮质激素可诱导小鼠记忆功能降低。细胞内[Ca²⁺]i 超载可能是引起小鼠免疫功能降低、智力水平下降、衰老和细胞凋亡的主要原因之一。     

过氧化氢诱导牛主动脉内皮细胞损伤和胞内Ca2+升高及钙拮抗剂的抑制作用

为探讨缺氧/缺血过程中自由基损伤与钙超载的关系,观察了过氧化氢(H₂O₂)诱导培养牛主动脉内皮细胞(BAEC)的损伤和胞内游离钙([Ca²⁺]i)的变化。结果表明,H₂O₂可剂量、时间依赖地诱导BAEC活性下降(MTT值下降),脂质过氧化产物丙二醛(MDA)生成显著增加,同时伴有[Ca²⁺]i迅速显著升高。钙拮抗剂硝苯地平可剂量依赖地抑制H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高;同时能显著升高BAEC的MTT值,降低MDA生成,有效对抗H₂O₂诱导的BAEC损伤。提示,H₂O₂诱导内皮损伤可能与升高[Ca²⁺]i有关,Ca²⁺超载可能是活性氧致损伤的途径之一。钙拮抗剂对活性氧损伤具有一定保护作用。     

麦味地黄颗粒剂对阴虚模型动物红细胞免疫功能及脂质过氧化物的影响

麦味地黄颗粒剂与丸剂均能提高阴虚动物红细胞ＣＲ１受体及促进因子活性，阻抑抑制因子活性的增高，也能使升高的脂质过氧化物回到正常水平。实验表明该药两种剂型对红细胞免疫功能有较好的调节作用，有一定的抗脂质过氧化、抗自由基和抗衰老功效。     

大黄素的极谱行为及应用研究

在H₃BO₃-Na₂B₄O₇(pH8.5)底液中,大黄素在单扫示波极谱仪上于-0.75V(vs.SCE)左右有一灵敏的二阶导数峰,峰电流与浓度在1.42×10^-7～5.7×10^-6mol·L^-1和7.1×10^-6～7.1×10^-5mol·L^-1范围内呈良好的线性关系,检测限为0.7×10^-7mol·L^-1。本法操作简便、快速、灵敏、选择性好,应用于中药大黄中大黄素的测定,结果良好。本文还研究了大黄素的极谱行为及电极反应机理,并用电化学方法讨论了大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素清除由邻苯三酚自氧化产生的超氧自由基(O^·-₂)的作用。     

青蒿琥酯抗肿瘤作用的机制研究

青蒿琥酯 (ａｒｔｅｓｕｎａｔｅ ,ＡＳＴ)是我国研制的抗疟药。文献[1,2 ] 报道青蒿琥酯有抗肿瘤作用 ,体外试验还能诱导人肝癌细胞凋亡 ,对Ｐ5 3表达无明显影响。尚未见有青蒿琥酯对在体肿瘤细胞中增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ) ,Ｂｃｌ 2和Ｂａｘ基因的影响的报道。本实验进一步探讨青蒿琥酯抗肿瘤作用及其作用机制。材料与方法　　药物与试剂　注射用青蒿琥酯 ,桂林第二制药厂产品 ,批号 0 0 0 10 1,先用 5 %ＮａＨＣＯ3溶解后用生理盐水配制成所需浓度 ;5 氟尿嘧啶针剂 (5 ＦＵ) ,上海旭东海普药业有限公司产品 ,批号 9912 0 5 ;抗ＰＣ…