枸杞糖缀合物及糖链的化学结构与免疫活性

为研究枸杞多糖的化学结构 ,免疫活性并探讨其构效关系 ,应用色谱法 ,凝胶过滤法和十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术从枸杞粗多糖 (LBP)中分离纯化了 5个组分 (LBP1 LBP5) ,并进一步从LBP1,LBP3,LBP4中纯化得到组分均一的糖缀合物LbGp1,LbGp3和LbGp4及其糖链LbGp1 OL ,LbGp3 OL和LbGp4 OL ,用甲基化 ,部分酸水解和核磁共振 (NMR)技术基本阐明了其化学性质 ,糖组成 ,氨基酸组成及主要结构特征 ,并用小鼠脾细胞增殖反应研究免疫活性表明 ,6个样品均具有直接增强小鼠脾细胞增殖反应的作用 .结果提示 ,枸杞子中具有免疫活性的有效成分是一类结构复杂的糖缀合物 ,其糖链部分可能是其发挥免疫活性的主要活性结构 .     

钝顶螺旋藻糖缀合物SPPA-1的理化性质及活性的研究

目的　研究螺旋藻多糖中的均一组分SPPA 1的分离方法、糖组成、分子量及生物活性。方法　采用丙酮分部沉淀 ,三氯乙酸去蛋白 ,再经SephadexG 75和CM SephadexC 5 0柱色谱得到SPPA 1,用气相色谱法测定单糖组成 ,GPC法测定分子量 ,IR和NMR法确定糖苷键类型。结果　经高压液相色谱和毛细管电泳鉴定为均一性组分。其总糖含量为 91 70 % ,N含量为 0 96 % ,分子量为 6 9 0 0× 10 4 Da。糖组成分析表明其由单一的葡萄糖组成 ,红外光谱、核磁共振1HNMR谱分析表明 ,其单糖类型为α 吡喃型。ESR研究表明SPPA 1具有清除O·2 自由基活性。结论　SPPA 1为一具抗氧化活性的葡聚糖     

钝顶螺旋藻糖缀合物SPPA-1的理化性质及活性的研究

目的　研究螺旋藻多糖中的均一组分SPPA-1的分离方法、糖组成、分子量及生物活性。方法　采用丙酮分部沉淀,三氯乙酸去蛋白,再经SephadexG-75和CM-SephadexC-50柱色谱得到SPPA-1,用气相色谱法测定单糖组成,GPC法测定分子量,IR和NMR法确定糖苷键类型。结果　经高压液相色谱和毛细管电泳鉴定为均一性组分。其总糖含量为91.70%,N含量为0.96%,分子量为69.00×10⁴Da。糖组成分析表明其由单一的葡萄糖组成,红外光谱、核磁共振¹HNMR谱分析表明,其单糖类型为α-吡喃型。ESR研究表明SPPA-1具有清除O^-₂自由基活性。结论　SPPA-1为一具抗氧化活性的葡聚糖。     

枸杞糖缀合物和糖链对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的确定巨噬细胞是枸杞糖缀合物和糖链免疫作用的靶细胞之一。方法应用中性红吞噬实验和鸡红细胞吞噬实验测定了枸杞糖缀合物LbGp4和糖链LbGp4-OL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用硝酸根还原法、酶联免疫吸附实验(ELISA)和生物活性测定法测定了巨噬细胞产生一氧化氮(NO)、IL-1β和TNF-α含量和生物活性的变化。结果LbGp4和LbGp4-OL在(10~100)mg.L-1剂量范围内均可剂量依赖性地促进静息巨噬细胞吞噬中性红的能力,增加活化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数;增加巨噬细胞培养上清NO、IL-1β和TNF-α的浓度,并增强对L929细胞的杀伤活性,促进胸腺细胞的增殖反应。结论LbGp4和LbGp4-OL对静息和活化的腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的促进作用,对巨噬细胞产生NO、分泌IL-1β和TNF-α的含量和生物活性亦具有明显的促进作用,表明巨噬细胞是LbGp4和LbGp4-OL免疫作用的靶细胞之一。     

枸杞粗多糖的免疫活性

为进一步分离纯化枸杞多糖并进行深入的免疫药理学研究 ,应用淋巴细胞增殖 ,溶血空斑 ,杀伤性T淋巴细胞 (CTL)杀伤活性测定 ,酶联免疫测定法和噻唑蓝等方法研究了枸杞粗多糖 (LBP)的免疫活性特点 .结果发现 :口服给予LBP对LACA小鼠脾细胞增殖反应和抗体生成反应均具有明显的促进作用 ,但对CTL细胞特异性杀伤P815瘤细胞的杀伤活性无明显影响 ;明显增加快速老化模型小鼠(SAMP8)脾抗体生成细胞的数目 ,升高脾细胞产生抗体IgG水平 .结果提示 ,LBP是枸杞子中主要免疫活性成分 ,促进或改善体液免疫功能可能是其对免疫系统的主要作用之一 .     

芡实多糖理化性质及抗氧化活性研究

采用水提醇沉、脱蛋白等工艺制备中药芡实多糖,并通过纤维素柱和葡聚糖凝胶柱分离纯化。精多糖分子量为15 367 Da,其单糖组成为葡萄糖：鼠李糖（0．0142：0．0026）,理化反应和红外光谱均符合多糖特征。体外抗氧化实验表明,芡实多糖能够显著清除DPPH、超氧阴离子和过氧化氢等自由基,并具有较强还原力。体内抗氧化实验显示,芡实多糖能够显著提高D-半乳糖所致衰老小鼠的SOD、CAT、GSH—Px水平,降低MDA水平。结果表明,芡实多糖具有广泛的研究前景。     

黑果枸杞花青素的提取工艺及抗氧化活性研究

目的对黑果枸杞花青素的提取工艺进行响应面优化并检测其抗氧化活性。方法以黑果枸杞花青素的提取量为考察指标,采用4因素3水平的Box-Behnken实验设计优化黑果枸杞花青素的提取工艺参数并检测其抗氧化活性。结果在温度为50℃、料液比为1︰20、乙醇体积分数为50%的条件下提取3.0h时,花青素含量最高。黑果枸杞花青素的还原能力为64.3%;羟自由基的清除能力为60.5%;超氧阴离子的清除能力为87.2%;DPPH·的清除能力为78.3%。结论响应面法能够全面、准确地确定黑果枸杞花青素的提取工艺参数。黑果枸杞花青素在一定质量浓度范围内能够清除体内多余的自由基,具有一定的抗氧化活性,为黑果枸杞的功能研究奠定了基础。     

绞股蓝多糖的理化性质及体外抗氧化活性研究

采用水提醇沉法从绞股蓝中提取、分离纯化获得一种均一多糖(GPP),并对其理化性质及体外抗氧化活性进行了研究。选用大孔树脂和DEAE-52离子交换纤维素对水提醇沉获得的绞股蓝粗多糖进行分离纯化,以HPLC、红外光谱法等对获得的均一多糖的纯度、光谱特性、单糖组成等多种理化性质进行了测定,并通过测定羟自由基、ABTS清除能力以及亚铁离子螯合能力对其体外抗氧化活性进行了初步研究。绞股蓝多糖GPP由甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖以及少量的木糖和鼠李糖组成,端基碳为α构型,其具有显著的羟自由基、ABTS清除能力以及亚铁离子螯合能力,可以用来作为一种潜在的抗氧化剂。     

川明参多糖的理化性质和免疫活性研究

目的 研究精制川明参多糖的分子量分布范围和单糖组成等理化性质及其免疫药理活性.方法 采用水相高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量的分布;TLC和GC分析多糖的单糖组成和摩尔比;碳粒廓清实验和血清溶血素实验研究川明参多糖的免疫药理作用.结果 川明参多糖重均分子量为9.7632×105,数均分子量为5.2270×104;多糖的单糖组成为甘露糖和葡萄糖,二者摩尔比为1:16.2;川明参多糖高剂量组对小鼠碳粒廓清指数和血清溶血素吸光度的影响与空白对照组比较有显著性差异.结论 确定了川明参多糖的部分理化性质,并证明高剂量的川明参多糖能够显著增强小鼠特异性和非特异性体液免疫功能.     

枸杞化学成分及药理活性研究进展

枸杞属植物在我国药用历史悠久,宁夏枸杞的果实为中药枸杞子具有滋补肝肾,益精明目的作用,其根皮为中药地骨皮有凉血除蒸,清肺降火的功效.枸杞化学成分多样,主要含有生物碱类,黄酮类,多酚类等成分.为进一步了解枸杞化学成分,研究其药理活性物质基础,对其化学成分及药理活性等方面进行综述,可为枸杞进一步拓展应用提供参考.     

枸杞子糖缀合物及其糖链对LDL氧化修饰的抑制作用

目的　研究枸杞子糖缀合物及其糖链对LDL氧化修饰的抑制作用。方法　在Cu²⁺诱导的LDL氧化模型中测定了脂质过氧化产物硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的含量及LDL在琼脂糖凝胶电泳上的迁移率以反映从枸杞子中分离、纯化得到的糖缀合物及糖链对LDL氧化修饰的抑制作用。结果　枸杞子糖缀合物及糖链抗LDL氧化的能力是不同的,其中LbGp5可明显的抑制LDL的氧化。结论　枸杞子糖缀合物具有抗LDL氧化作用,而糖链不具有抗LDL氧化的作用。     

枸杞子活性多糖的研究

目的　对4个均一枸杞多糖：LBP1a-1,LBP1a-2,LBP3a-1和LBP3a-2进行结构研究和药理评价。方法采用凝胶柱色谱、酸水解、过碘酸氧化和波谱学等方法测定多糖样品的分子量、单糖组成及连接方式,并以小鼠脾淋巴细胞增殖反应为免疫活性指标对多糖样品进行活性评价。结果　4个多糖样品的分子量分别为11.5×10⁴,9.4×10⁴,10.3×10⁴,8.2×10⁴,LBP1a-1,LBP1a-2为1,6连接的葡聚糖;LBP3a-1,LBP3a-2具有1,4连接的多聚半乳糖醛酸主链,及微量的半乳糖和阿拉伯糖分支。4个多糖均具有免疫促进作用。结论　4种多糖首次从枸杞子中分离得到,具有1,4连接多聚半乳糖醛酸主链结构的多糖活性较强。     

枸杞子中免疫活性成分的分离、纯化及物理化学性质的研究

从宁夏枸杞子提取得到的糖缀合物LBP经DEAE-celulose柱色谱得到5个组分,其中Lbp3,Lbp4和Lbp5分别经CM-SephadexC-50,SephadexG-100,SephadexG-50柱色谱得到均一组分LbGp3,LbGp4和LbGp5。N含量:LbGp30.83%,LbGp41.72%,LbGp59.58%。总糖含量:LbGp393.6%,LbGp485.6%,LbGp58.6%。分子量:LbGp39.25×10⁴,LbGp4 21.48×10⁴,LbGp52.37×10⁴。糖组成为:LbGp3:Ara∶Glc=1∶1,LbGp4:Ara∶Gal∶Rha∶Glc=1.5∶2.5∶0.43∶0.23,LbGp5:Rha∶Ara∶Xyl∶Gal∶Man∶Glc=0.33∶0.52∶0.42∶0.94∶0.85∶1。初步分析表明LbGp4是O-连接的糖蛋白。     

升麻甙F的分离和结构

升麻甙Ｆ的分离和结构李从军，李英和，肖培根（中国医学科学院，中国协和医科大学药用植物资源开发研究所北京１０００９４）升麻属（Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ）植物是毛莨科升麻族植物（Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇｅａｅ，ｓ．１．）的主要成员，但在化学成分上，以其特征性成分环...     

吡虫啉在枸杞中的残留动态研究

目的:研究20%吡虫啉可溶性液剂在枸杞中的消解动态。方法:采用高效液相色谱法,样品经甲醇提取,二氯甲烷萃取,层析柱净化,采用十八烷基键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;检测波长270nm。结果:样品的添加回收率为87.6%～96.0%,RSD 为1.5%～3.1%。吡虫啉在枸杞中的半衰期为1.63 d,施药10 d 后残留量降至0.0126 mg·kg~(-1),最终残留量在0.002 mg·kg~(-1)以下。结论:在正常喷药浓度的加倍剂量2000倍条件下,安全采收间隔期为5 d 以上。     

不同产地宁夏枸杞果实品质比较研究

目的检测不同产地枸杞子药材的主要品质指标,比较各产地药材的异同。方法在对不同产地的枸杞子进行外观品质指标测量的基础上,采用分光光度法进行枸杞多糖和甜菜碱含量测定,应用滴定法进行枸杞总糖含量测定。结果青海产枸杞果实百粒质量最高,河北最低,总体呈现青海>甘肃>新疆>宁夏>内蒙古>河北的变化趋势。枸杞果实主要药用成分多糖以宁夏、甘肃和新疆栽培的枸杞果实含量相对最高,且三者间差异不显著,其次为内蒙古产枸杞,河北和青海产枸杞果实多糖含量最低;总糖含量以宁夏和青海最高,其次为内蒙古、甘肃和新疆,且三者差异不显著,河北产枸杞总糖含量最低。甜菜碱含量以河北产枸杞最高,其次为青海、甘肃、内蒙古和新疆,而以宁夏产枸杞最低。结论不同产地枸杞质量存在差异,且不同产地枸杞果实百粒质量大小与主要有效成分含量间无准确的对应关系,提示现行枸杞商品等级划分标准尚需进一步完善。     

薄层色谱法鉴别枸杞子的实验研究

归纳枸杞子的薄层色谱展开条件,经系列实验确立最佳展开系统为:甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶4∶0.2)。     

不同产地枸杞药材中多糖的含量测定

目的建立枸杞多糖的含量测定方法,并测定不同产地枸杞药材中多糖的含量。方法采用水提醇沉法制备枸杞多糖,将枸杞多糖脱蛋白后制得精制枸杞多糖,以精制枸杞多糖测得枸杞多糖对葡萄糖的换算因子后,用苯酚-硫酸法测定不同产地枸杞药材中多糖的含量。结果平均回收率为98.8%,测得不同产地枸杞药材中多糖含量分别为4.03%、7.55%、2.92%、4.99%、3.54%和4.67%。结论该法操作简单,结果较接近真实值;不同产地枸杞中多糖含量的差异较大,该结果为枸杞多糖质量控制和药效评价的进一步研究奠定了基础。