献血者中TTV感染情况调查及部分序列分析

目的调查了解淮阴地区献血者中一种新的肝炎相关病毒——TTV的感染情况.方法用巢式聚合酶链反应(nest-PCR)技术对淮阴地区220名专业献血者进行血清中输血传播病毒(TTV)的检测,并在PUC18中对其开放读码框2(ORF2)基因进行了克隆.结果序列分析表明,该序列与国内外发现的TT病毒AB008394(日本株)、AF079173(中国河北株)对应位置核苷酸同源性为98%和97%,献血者中TT病毒阳性率为18%.结论病毒ORF2基因高度保守,献血者中有较高的TTV感染率.     

TT病毒在老年人非甲-庚型肝炎中的检测及序列分析研究

目的：研究分析老年人TT病毒（TTV）感染情况和基因序列变化。方法：用聚合酶链反应（PCR）对98例老年人非甲-庚型肝炎患进行血清TTVDNA检测，并对其中2例进行TTVDNA部分基因核苷酸序列测定。结果：98例非甲-庚型肝炎中43例（43.9％）TTVDNA阳性，对其中2株TTV部分基因克隆测序后，与日本株相比，其核苷酸序列的同源性为98％。结论：本研究提示TTV存在非血源性的感染途径，TTV感染可能是老年人非甲-庚型肝炎的病因之一。     

肝炎患者TTV的检测及意义

目的：了解肝炎患者输血传播病毒（TTV）感染情况，探讨其可能的致病作用。方法：采用套式PCR方法检测25例肝炎患者TTV DNA，对其中3例进行测序分析。结果：25例各型肝炎中，12例TTV DNA阳性，而18例非甲－庚型肝炎中8例阳性，血清ALT水平均有不同程度升高，序列分析与日本株有很高同源性。结论：证实西安地区也存在TTV感染，TT病毒可能有一定肝损伤作用，TT病毒还可与HBV、HCV重叠感染，但似不加重病情。     

一株输血传播病毒新变种的克隆和序列分析

目的：从1例不明原因转氨酶升高的病人血清中克隆输血传播病毒（TTV）DNA，并进行序列分析。方法：用巢式PCR扩增TTVDNA长片段，连接至pGEM-T载体上，挑选一个克隆（56－B）进行测序，将56－B与GenBank中五株TTV进行氨基酸和核苷酸序列的同源性分析，并用最大似然法进行分子进化分析。结果：56－B株与TA278等五株TTV序列的核苷酸同源性分别为42．4％，48．2％，47．9％，61．7％，氨基酸序列的同源性更低，但其5'，和3'两端非编码区的序列仍然很保守。结论：56－B株与其他TTV株之间的同源性很低，有很高的基因异质性，是TT的一个新变种，代表TTV的一个新的基因型。     

TTV在非甲至非庚型肝炎中感染的检测和分析

目的 研究新近报导的1种与输血后肝炎有关的病毒（TTV）在中国郑州地区非甲至非庚型肝炎患中的感染和基因序列变异情况。方法 采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应（nested-PCR)方法对非甲至非庚型肝炎患和正常人血清标本进行检测，并对非甲至非庚型肝炎患中的TTV分离株进行序列测定。结果 TTV DNA在40例非甲至非庚型肝炎患中检出18例，阳性率为45％，在96例正常人中检出17例，阳性率为17.7%，两组阳性率相比差异有统计学意义。TTV分离株序列与日本株（CLON22）相对应位置的核苷酸同源性为99.1%。结论 TTV在非甲至非庚型肝炎患中的感染率较高，可能是非甲至非庚型肝炎的主要致病因子。TTV分离株与日本株可能属同一基因型。     

广州地区献血者中献血传播病毒感染情况调查

目的：了解广州地区献血人群中的输血传播病毒（TTV）感染状况，探讨TTV与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、HBsAg及抗HCV指标的相关性。方法：用聚合酶链反应（PCR）方法对不同献血人群血清标本进行TTV－DNA检测，并对所有标本进行了ALT、HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒及抗－HAV、抗－HEV、抗－HGV筛查。结果：献血者中的TTV－DNA阳性率为7．6％（43／564），其中有偿献血者和无偿献血者中的TTV－DNA阳性率分别为9．4％、5．9％；单－ALT异常无偿献血者的TTV－DNA阳性率明显高于ALT正常无偿献血者（10．6％、4．2％，P＜0．05），HBsAg及抗HCV阳性献血者中的TTV－DNA阳性率分别为11．1％、8．3％。结论：本文结果显示广州地区献血者中存在TTV感染，而且在有偿献血者中感染率相对较高。TTV可以单独感染也可与HBV、HCV重叠感染并与ALT密切相关。     

TT病毒子宫内传播的初步研究

目的：观察TT病毒(TTV)子宫内传播的可能性。方法：采用妊娠中期引产孕妇的静脉血及其胎儿心脏血。以巢式聚合酶链反应检测TTV DNA部分基因，对产物进行基因序列测定和分析，并比较母子TTV部分序列之间同源性。结果：23例孕妇中TTV DNA阳性者5例(21．7％)，其中2例引产儿亦阳性。测序结果与中国北京株TTV DNA同段序列基本一致。两对阳性母子TTV DNA序列同源性极高(98．3％，99．1％)。结论：TTV可在子宫内传播。     

输血传播病毒与人类肝病关系的研究

目的了解各类肝病患者TT病毒的感染率，分析TT病毒与已知肝炎病毒的交叉感染情况，探讨TT病毒与肝硬化、肝癌的关系以及是否是非甲-非戊型肝炎患者的主要致病因子。方法采用微板双探针核酸杂交酶免疫方法对TTV基因扩增产物进行定性检测。结果东营地区不同人群TTV阳性率分别为，甲肝患者37．5％（6／16），乙肝患者40．00％（18／45），丙肝患者44．44％（24／54），戊肝患者31．25％（10／32），不明原因转氨酶升高患者25．93％（7／27）。肝硬化患者47．06％（24／51），肝癌患者31．91％（15／41）。结论东营地区TT病毒存在与已知病毒性肝炎的合并感染。并且血源性传播肝炎的TT病毒感染率明显高于健康志愿人群，是已知肝炎病毒的辅助因子，并可能是肝硬化潜在的致病因子。     

佛山地区TTV感染情况调查

目的：调查佛山地区TT病毒（TTV）感染的情况，了解TTV与肝炎的关系。方法：选取非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者及健康人群（健康义务献血员）血清作TTV-DNA扩增，微板核酸杂交-ELISA技术作TTV检测及TTV基因分型。了解不同人群TTV感染率及TTV的基因分布情况。结果：非甲-庚肝炎患者中检出29例，阳性率7.13％。慢性乙型肝炎患者中检出23例，阳性率6.46％。静脉药瘾者中检出11例，阳性率13.25％。健康人群中检出1例，阳性率0.63％。对64例TTV阳性标本进行基因分型，其中Ⅰ型60例，Ⅱ型4例。64例TTV感染者中6例肝功能检查ALT正常。结论：佛山地区存在TTV感染，基因型以I型为主。其中非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者的感染率较高，为TTV感染的高危人群。TTV为非甲-庚肝炎的病原之一，存在着无症状携带状态。其传播似与血液途径有密切关系，可单独或混合感染致病，其在人群中的感染似与HBV感染存在与否无关。     

新肝炎病毒TTV在各类高危人群中分子流行病学研究

为观察新肝炎病毒TTV在各类高危人群中的感染状况和基因分型,在日本株TTV ORF,保守区合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应(nPCR)两次扩增血清TTV DNA,对各类人群中TTV DNA分别进行了分子克隆和部分基因测序,并与日本报道的TTV DNA基因序列比较。结果显示：从非甲．戊型和非庚型肝炎病人、血清HBsAg阳性的肝炎病人、正常献血员、静脉内吸毒者和女性性乱者中,分别获得的6份TTV DNA克隆,其基因序列与日本株TTV ORF,部分基因核苷酸序列同源性为97％～99％,均属于TTV la型。提示：我国各类高危人群感染TTV 以la型为主;TTV基因型与疾病发生和传播方式关系不大。     

非甲至非戊型肝炎患者TTV检测和部分基因序列分析

目的：研究新近报道的一种与输血后肝炎有关的病毒在中国郑州地区正常人群、HBsAg阳性者、非甲至非戊型肝炎患者中的感染和基因序列变异情况。方法：采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应(nested-PCR)方法对血清标本进行检测,并对非甲至非戊型肝炎患者中的TTV分离株进行序列测定。结果：TTV DNA在非甲至非戊型肝炎患者中检出率为45％(18／40);在正常体检者中检出率为17．7％(17／96);在HBsAg阳性者(ALT≤34 IU／L)中检出率22．7％(10／44)。TTV分离株序列与日本株(CLON22)相对应位置的核苷酸同源性为．1％。结论：TTV在非甲至非戊型肝炎患者TTV的感染率明显高于其他人群,可能是非甲至非戊型肝炎的主要致病因子。     

杭州地区健康献血员输血传播病毒的检测及部分阳性标本的核苷酸序列分析

目的：了解杭州地区健康献血员中输血传播病毒（TTV）的感染情况和病毒基因组片段的变异性。方法：用酚－氯仿法从献血员的血清标本中提取DNA，半套式聚合聚合链反应检测TTV，部分阳性标本的扩增片段T－1克隆后测序。结果：203例献血员血清标本中TTV DNA的阳性率为15．3％，部分阳性标本扩增产物与报道的TTV TA278株的核苷酸和氨基酸序列比较，其同源性分别为63．51％－67．12％和59．46％－66．22％，结论：杭州地区献血员中TTV的携带率比较高。献血员感染的TTV可能是一种新的基因型。     

太原地区TT病毒感染的分子流行病学研究

目的：了解太原地区不同人群TT病毒（TTV）感染状况及基因型的分布情况。方法：采用聚合酶链反应（PCR）法对本地区不同人群血清标本进行检测,并分析其基因型。结果：196例中非甲-庚型肝炎患者31例;职业献血员53例,健康产妇112例,其血清TTV DNA阳性率分别为29.03%、58.49%、8.93%。10例TTV DNA阳性产妇的脐血TTV DNA为阴性。对4株TTV进行部分基因序列检测,结果表明其同源性在90%以上,均属同一基因型。结论：太原地区存在TTV感染,很可能是非甲-庚型肝炎的重要病原,且在职业献血员和慢性肝病患者中存在较高的感染率,本地区TTV主要为1a基因型。     

TT病毒在人类肝病中的感染状况分析

目的了解各类肝病患者TT病毒（transfusion-transmitted virus，TTV）的感染率，分析TT病毒与已知肝炎病毒的交叉感染情况，探讨TT病毒与肝硬化、肝癌的关系以及是否是非甲～非庚型肝炎患者的主要致病因子。方法采用微板双探针核酸杂交酶免疫方法对TTV基因扩增产物进行定性检测。结果东营地区不同人群TT病毒阳性率分别为，甲肝患者37.50%（6/16），乙肝患者40.00%（18/45），丙肝患者44.44%（24/54），戊肝患者31.25%（10/32），不明原因转氨酶升高患者25.93%（7/27），肝硬化患者47.06%（24/51），肝癌患者31.91%（15/41）。结论东营地区TT病毒存在与已知病毒性肝炎的合并感染，并且血源性传播肝炎的TT病毒感染率明显高于健康志愿人群。是已知肝炎病毒的辅助因子，并可能是肝硬化潜在的致病因子。     

海口市吸毒人群TT病毒感染情况的调查

目的：了解TT病毒在吸毒人群中的感染情况和传播途径。方法：对海口市公安局戒毒所收容的221例吸毒进行不同因素分析，采用巢式PCR法检测血清中的TTV DNA，同时检测血清中的甲型肝炎病毒（HAV）、庚型肝炎病毒（HGV）、艾滋病（HIV）和梅毒。结果：211例吸毒血清中TTV DNA阳性检出率为31．6％（70／221），HAV、HBV、HCV、HEV、HGV、HIV和梅毒阳性检出率分别为0．4％（1／221）、45．7％（101／221）、11．8％（26／221）、2．2％（5／221）、10．4％（23／221）、0（0／221）、5．9％（13／221）。结论：吸毒人群是TT病毒感染的高危人群；静脉注射毒品、有非固定婚外性伴侣等因素与TT病毒感染密切相关；TT病毒与甲－庚型肝炎病毒的存在合并感染，其中乙型及丙型肝炎重叠TT病毒感染较常见。另外，我们在1例HAV阳性的血清中也检出TTV DNA，提示TT病毒除存在血液传播途径外，还可能存在非血源性的感染传播途径。     

两例TTV感染者不同TTV克隆的DNA序列分析

目的探讨TTV的基因变异及其与致病性的关系。方法在ORF1区的高变区设计特异性引物建立巢式多聚酶链反应（PCR），扩增献血员与慢性非甲-庚型重型肝炎患者血清中的TTV DNA。PCR产物纯化回收后进行分子克隆，每例挑选10个不同TTV DNA克隆进行测序。不同们TTV DNA克隆之间及其与日本株TA278之间进行序列比较并进行进化树分析。结果成功地构建了TTV DNA克隆。与G1a亚型TA278的序列相比较有74％～95％的同源。献血员存在2种不同的TTV病毒株，其序列有7％的差异，都为G1a亚型。慢性非甲-庚型重型肝炎患者中存在7种不同的TTV病毒株，彼此之间序列有5％～24％不同，分别属于G1a和G1b亚型。结论慢性非甲-庚型重型肝炎患者中TTV的基因变异比献血员中的复杂得多。TTV基因变异的复杂性及其基因变异过程中可能产生的强毒力病毒株均有可能在其致病机制中起一定作用。G1b亚型可能有一定的致病性。     

TTV蛋白抗原在大肠杆菌中的表达

目的：用原核系统表达TTV的重组蛋白抗原,建立诊断TTV感染的特异性方法。方法：采用PCR方法扩增TTV ORF2基因,将之插入到测序质粒载体中进行测序,验证序列正确后再嵌入到原核表达载体pQE30,并转化大肠杆菌M15菌株,进行诱导表达。用SDS－PAGE分析表达产物。表达产物经Ni-NTA 柱层析纯化后,得到纯度为90％的ORF蛋白抗原。用TTV感染者的阳性血清对该蛋白进行了Western-Blot Blotting。结果：经IPTG诱导后,筛选出2株高表达株。结论：该蛋白具有良好的抗原活性。     

非甲－非庚肝炎患者TT病毒的检测及基因型研究

目的：研究兰州铁路局非甲－非庚肝炎患TTV感染状况及基因型。方法：采用TTV基因ORF1区套式PCR技术检测血清中TTVDNA，限制性内切酶进行酶切分型研究。结果：在67例非甲－非庚肝炎患血清中TTVDNA阳性率22．4％（15／67），其中基因型的感染率依次为1a型20％（3／15），1b型26．7％（4／15）、2a型6．7％（1／15）、2b型13．3％（2／15）、1b/2a型20％（3／15）、1b/2b型13．3％（2／15）。结论：兰州地区非甲－非庚肝炎患中有较高比率的TTV感染，存在两种基因型、六种基因表现型，2b,1b/2b为首次发现，基因表现型呈现多样化。     

血液透析患者中TT病毒感染的检测及序列分析

目的：研究血液透析患中TT病毒（TTV）的感染状况及其致病性。方法：针对病毒基因保守区设计引物,采用套式PCR方法对69例血液透析患血清标本进行TTVDFNA检测及序列分析。并同时检测患血清丙氨酸转氨酶（ALT）及丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）。结果：患血清TTVDNA总阳性率为27.5%。对其中1例PCR扩增产物测序。结果与其他TVV分离株如GH1、TA278、TTVCHN1和TTVCHN2的核苷酸序列同源性为89%-100%,推测的氨基酸序列同源性为87%-100%。抗-HCV阳性与阴性患的TTV DNA阳性率无明显差异。所有患均未见ALT明显升高。结论：血液透析患存在较严重的TTV感染与HCV感染无明显相关性。未发现TTV感染导致ALT明显升高的证据。     

400例献血员TT病毒检测与分析

目的探讨靖江地区献血员中TT病毒(TTV)感染情况。方法用套式-聚合酶链反应(nested—PCR)对400名职业献血员作TT病毒检测。结果发现阳性36名，阳性率为9％。从中随机取10名作序列分析，并与日本报道的N22克隆核苷酸序列相比较，发现同源性为89％-99．5％。结论TTV检测对保障输血安全至为重要。