六味地黄丸对OLETF 鼠糖尿病发病的干预研究

目的通过观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病OLETF大鼠脂肪组织脂联素的影响,探讨六味地黄丸对2型糖尿病发病的干预作用。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组。干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃。定期口服葡萄糖耐量试验。于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠。采用半定量逆转录PCR方法,检测脂肪组织脂联素mRNA表达水平。结果六味地黄丸能够显著降低OLETF鼠血糖升高程度,延缓高血糖的出现。与对照组相比,干预组脂肪组织脂联素mRNA表达量明显增加。干预组糖尿病的发病率显著低于同时期对照组(P<0.01)。LETO组无IGT或糖尿病发生。结论六味地黄丸能明显增加OLETF鼠脂肪组织脂联素表达水平;六味地黄丸可显著降低2型糖尿病动物模型OLETF鼠糖尿病的发病率,有效预防糖尿病的发生。     

六味地黄丸对OLETF鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型OLETF鼠胰岛素抵抗的影响。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组;LETO鼠10只作为正常对照组。干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4mg/(kg.d)灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃。定期OGTT试验,监测各组大鼠摄食及体重增长情况,每周称量大鼠体重和摄食量。于8,32和40周龄时分批宰杀大鼠。检测血浆胰岛素。结果对照组和干预组OLETF鼠摄食量显著高于LETO组(P<0.01)。对照组和干预组OLETF鼠体重从第6周开始显著高于LETO组(P<0.05)。干预组血浆胰岛素显著低于对照组(P<0.05),与LETO组相比差异无显著性(P<0.05)。结论六味地黄丸能够显著降低OLETF鼠血糖升高程度,延缓高血糖的出现;六味地黄丸能够显著降低血浆胰岛素。     

六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素水平的影响

目的 观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型血浆脂联素水平的影响.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组.干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4 mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃.定期OGTT试验,监测各组大鼠摄食及体质量增长情况,每周称量大鼠体质量和摄食量.于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠.检测血浆脂联素、血浆胰岛素水平.结果 与对照组相比,干预组的血浆脂联素水平均明显增加.对照组血浆脂联素水平与LETO组相比显著降低.结论 OLETF鼠血浆脂联素水平与胰岛素敏感性呈正相关.六味地黄丸早期干预能明显增加OLETF鼠血浆脂联素水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗.     

六味地黄丸对自发性糖尿病OLETF鼠脂代谢的影响

目的　观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型OLETF鼠脂代谢的影响。方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组。干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4mg•kg-1•d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃。定期OGTT试验。于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠。检测血清甘油三酯、血清胆固醇、血清游离脂肪酸。结果　干预组的发病率显著低于同时期对照组(P<0.01) 。LETO组无IGT或糖尿病发生。干预组血清甘油三酯、胆固醇和血清游离脂肪酸显著低于对照组（P<0.05）,与LETO组相比无显著性差异（P<0.05）。结论　六味地黄丸可显著降低OLETF鼠2型糖尿病的发病率,有效预防糖尿病的发生;六味地黄丸能够显著降低血清甘油三酯、胆固醇和血清游离脂肪酸。     

六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠内脏脂肪分布的影响

目的 研究六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠内脏脂肪堆积的影响．方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为预防组和对照组,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。预防组于8周龄起以六味地黄丸2.4mg／kg每天1次灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃。监测体质量,定期口服糖耐量试验检测血糖,分批宰杀分离并称量腹部脂肪。结果 随病程进展,OLETF鼠内脏脂肪／体质量逐渐高于LETO组（P〈0．05）,在40周龄六味地黄丸预防组内脏脂肪／体质量显著低于对照组（P〈0．01）：结论 六味地黄丸能有效减少OLETF鼠内脏脂肪的堆积。     

六味地黄丸对OLETF大鼠胰腺凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响.方法:OLETF大鼠(自发性2型糖尿病)40只,随机分为六味地黄丸治疗组和模型组,每组20只;另同系LETO大鼠(非糖尿病)10只作为正常对照组.六味地黄丸治疗组于大鼠8周龄起,用六味地黄丸按2.4 g·kg-1·d-1灌胃,余组用等量蒸馏水灌胃.每周记录大鼠体质量;采用口服葡萄糖耐量试验监测血糖;定期处死大鼠,分离胰腺并称重;采用逆转录-聚合酶链反应检测bcl-2和Bax在胰腺组织中的表达.结果:大鼠40周龄时,六味地黄丸治疗组bcl-2 mRNA的表达水平为(1.25±0.07),较模型组(1.01±0.16)明显增高(P<0.01);Bax mRNA的表达水平为(0.57±0.11),较模型组(1.18±0.28)有明显降低(P<0.01).六味地黄丸治疗组的胰腺/体重比,较模型组增高,但差异无统计学意义.六味地黄丸治疗组的糖负荷能力明显高于模型组(P<0.05或P<0.01).结论:六味地黄丸在转录水平可上调bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA的表达,可能具有抗细胞凋亡的作用.     

自发性2型糖尿病大鼠血浆低脂联素血症导致胰岛素抵抗

目的观察自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。饲养13和40周后,行口服葡萄糖耐量试验;于8、32和40周分批宰杀,检测血糖、血浆脂联素、胰岛素、血清甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平。结果 8周龄时OLETF鼠血浆APN水平显著低于LETO组(P<0.05),并进行性降低。32周龄和40周龄时OLETF组大鼠血浆胰岛素水平和甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸显著高于LETO组(P<0.01)。结论 OLETF鼠血浆APN水平与胰岛素抵抗显著负相关,且先于胰岛素抵抗和葡萄糖耐量受损发生;低脂联素血症可能是导致胰岛素抵抗的重要原因。     

六味地黄丸改善OLETF鼠肝脏胰岛素抵抗的实验研究

目的探讨六味地黄丸改善2型糖尿病大鼠模型中肝细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法以正常LETO鼠为LETO组,
OLETF鼠分为不加药的对照组以及予六味地黄丸加药的干预组,分别于8、32、40周龄随机处死,收集肝组织。制作病理切片观
察各组肝脏组织形态学改变,RT-PCR检测PEPCK表达改变以及免疫印迹（Western blot）检测IRS-1、IRS-2蛋白表达。结果与
LETO组相比,对照组肝脏细胞随着时间延长出现明显的小叶结构破坏以及肝脏脂肪变性,而干预组小叶结构基本正常,仅有轻
度脂肪变性。RT-PCR检测显示对照组PEPCK表达显著高于LETO组(P<0.01),而给予六味地黄丸的干预组PEPCK的表达则
显著低于对照组(P<0.01)。免疫印迹检测对照组p-IRS-1和p-IRS-2蛋白表达水平显著低于LETO组以及干预组（P<0.05）。结
论六位地黄丸通过抑制肝脏中糖异生关键酶PEPCK的活性以及提高胰岛素信号通路中IRS-1和IRS-2的表达,改善肝细胞的
胰岛素抵抗。
     

Chemerin基因在自发性2型糖尿病大鼠脂肪组织中表达的研究

目的：研究网膜及皮下脂肪组织中Chemerin在自发性2型糖尿病OLETF大鼠中的基因表达水平,探讨Chemerin与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病发病关系的机制。方法：4周龄正常不出现糖尿病的LETO大鼠10只作为对照组,4周龄OLETF大鼠10只,2型糖尿病的OLETF大鼠9只,于42周时处死。取网膜及皮下脂肪组织,以实时荧光定量法检测网膜及皮下脂肪组织Chemerin基因的表达水平。皓果：模型组的网膜及皮下脂肪组织Chemerin的基因表达明显高于LETO对照组（P〈0．01）;模型组大鼠网膜脂肪组织Chemerin的基因表达明显高于皮下脂肪组织（P〈0．01）。结论：脂肪因子Chemerin基因表达水平的变化是肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病发病的机制之一。     

开郁清热方对自发2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能的影响

[目的]观察开郁清热中药对自发2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能的影响[。方法]引进自发性2型糖尿病大鼠(OLETF)及正常对照组同系非糖尿病大鼠(LETO),将已发病OLETF大鼠分为模型组、罗格列酮组、开郁清热组,灌胃12周,检测其口服糖耐量、胰岛素分泌、胰岛素分泌指数、免疫组化法检测胰岛细胞胰岛素表达。[结果]开郁清热组口服葡萄糖曲线下面积较模型组下调,胰岛素曲线下面积较模型组上调,胰岛素分泌指数增加,免疫组化胰岛素染色阳性面积增加,积分下吸光度上调。[结论]开郁清热方对自发2型糖尿病大鼠糖代谢有较好干预作用,其机制与改善胰岛β细胞功能有关。     

脂联素在OLETF大鼠脂肪组织中的表达及意义

目的观察自发2型糖尿病动物模型OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达的变化。方法选择4周龄的雄性OLETF大鼠20只,LETO大鼠10只作为对照组,饲养28周后,行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);取空腹血清测甘油三酯、游离脂肪酸、胆固醇和血浆胰岛素水平;取大网膜脂肪组织,RT-PCR检测脂联素mRNA表达。结果OGTT试验结果显示,OLETF组大鼠负荷后0.5h和1h血糖明显高于LETO大鼠(P<0.05);OLETF组大鼠血清甘油三酯和血浆胰岛素水平显著高于LETO组(P<0.05)。OLETF组大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达量明显低于LETO组(P<0.05)。结论OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达水平明显降低。     

束缚应激致亚健康状态大鼠脑组织Bax、c-Fos的表达及中药干预作用

目的 观察束缚应激致亚健康模型大鼠的脑组织Bax、c-Fos表达情况以及抗衰老片和六味地黄丸的干预作用.方法 取雄性SD大鼠20只,体重320-360g,随机分成4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组5只,采用每天限制活动3 h模拟人类束缚应激,建立大鼠亚健康状态模型,造模同时,用抗衰老片、六味地黄丸进行干预.造模14 d结束后,测定大鼠大脑皮质及海马区Bax和c-Fos的表达.结果 造模14 d后,模型对照组大鼠脑组织皮质、海马区Bax的表达面积显著增加（P〈0.05）;给予抗衰老片和六味地黄丸后,大鼠大脑皮质及海马区Bax表达量明显减少（P〈0.05,P〈0.01）;模型对照组大鼠脑组织皮质、海马区c-Fos表达量增加;给予抗衰老片和六味地黄丸后,大鼠的大脑皮质及海马区c-Fos表达有不同程度的减少（P〈0.05,P〈0.01）.结论 束缚应激致亚健康状态的大鼠大脑皮层、海马区Bax、c-Fos表达量增加.抗衰老片和六味地黄丸可减少束缚应激致亚健康状态大鼠脑组织Bax、c-Fos的表达,预防和减少应激引起的神经元损伤,从而改善亚健康状态.     

饲料脂肪酸组分与OLETF大鼠胰岛素抵抗的关系

目的研究不同脂肪酸组分与OLETF大鼠胰岛素抵抗的关系。方法以标准饲料喂养40只雄性OLETF大鼠和10只雄性LETO大鼠至14周,随后将40只OLETF大鼠随机均分为4组,分别以标准饲料(A组)、高脂饲料(C组)、高脂富含n-6多不饱和脂肪酸(PUFA)饲料(D组)和高脂富含n-3 PUFA饲料(E组)喂养至24周,同时10只LETO大鼠以标准饲料喂养至24周(作为对照组)。第24周禁食10～14 h后,行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),采血测定C肽和免疫反应性胰岛素(IRI)等生化指标。采用正常血糖高胰岛素钳夹技术,评价其胰岛素抵抗状态。结果24周时,对照组大鼠空腹血糖、葡萄糖负荷后120 min血糖和IRI与E组大鼠的差异无显著性(P>0．05),但均明显低于A、C、D组大鼠(P值均<0．05)。各组大鼠间空腹和葡萄糖负荷后120 min的C肽水平的差异均无显著性(P值均>0．05)。对照组和E组大鼠的葡萄糖输注率均明显高于C组和D组大鼠(P值均<0．05)。结论OLETF大鼠较LETO大鼠的血糖水平高,而胰岛素敏感性差。进食高脂富含n-3 PUFA饲料可改善OLETF大鼠的糖代谢和胰岛素抵抗。     

OLETF鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素mRNA水平的关系

目的探讨OLETF大鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素(APN)mRNA水平的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。监测体质量,定期口服葡萄糖耐量试验(OGTT),于8、32和40周分批处死大鼠,检测血糖(BG)、胰岛素、血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CHOL)和血浆APN水平。分离并称量腹部脂肪,并检测脂肪组织APN的mRNA水平。结果随病程进展,OLETF鼠体质量和内脏脂肪/体质量逐渐高于LETO组(P<0.05),并表现出糖耐量受损。血浆胰岛素、TG、FFA、CHOL显著高于LETO鼠(P<0.05),血浆APN水平不同周龄均显著低于LETO组(P<0.05)。脂肪组织APN的mRNA水平8周龄与LETO组无显著差异(P>0.05),在32和40周龄显著降低(P<0.01)。结论血浆APN水平可较好地反映OLETF鼠胰岛素抵抗和内脏脂肪含量。内脏脂肪APN转录水平降低不是初期血浆APN降低的主要原因。     

罗格列酮对OLETF鼠股骨病理变化及成骨细胞Bcl-xL表达的影响

目的：探讨罗格列酮对OLETF鼠股骨病理变化及成骨细胞Bcl-xL表达的影响及机制。方法：OLETF雄性大鼠20只,定期口服葡萄糖耐量试验（OGTT）监测血糖。喂养至30周时,共有成模OLETF鼠12只,随机分为罗格列酮组和模型组（每组6只）,LETO鼠8只作为对照组,各组均给药12周。处死大鼠后,测股骨灰干重比。HE染色光镜观察股骨病理变化,并运用免疫组化方法检测成骨细胞Bcl-xL蛋白表达情况。结果：与模型组相比,罗格列酮组股骨灰干重比、成骨细胞计数及Bcl-xL阳性表达强度降低（P〈0.05或P〈0.01）,空骨陷窝率、破骨细胞计数升高（P〈0.01）;与模型组相比,对照组股骨灰干重比、成骨细胞计数及Bcl-xL阳性表达强度升高（P〈0.05或P〈0.01）,空骨陷窝率、破骨细胞计数降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论：2型糖尿病本身可影响骨组织的形成和吸收的动态平衡,使骨吸收加快而骨形成不足。罗格列酮对自发肥胖型2型糖尿病大鼠股骨有进一步的损害作用。