科罗索酸抗肺癌作用机制的初步研究

目的研究科罗索酸(CRA)对人肺癌细胞A549生长的影响,初步探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度下CRA对肺癌细胞A549的体外生长的影响,建立生物发光标记的人肺癌细胞A549裸小鼠荷瘤模型,IVIS小动物活体成像系统检测实体瘤的生长情况,免疫组织化学法分析肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达,以CD34阳性血管数作为微血管密度(MVD)。结果 CRA对A549的体外作用IC50值为26.8μg/ml。体内抗肿瘤实验中,不同剂量的CRA对A549实体瘤均有一定的治疗效果,VEGF和CD34蛋白的含量也有不同程度的影响。结论 CRA对人肺癌细胞A549实体瘤具有一定的治疗作用,其作用机制可能与抑制肿瘤组织中VEGF和CD34蛋白的表达有关。     

枇杷叶提取物中科罗索酸在糖尿病大鼠体内的药动学研究

[目的]建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),测定枇杷叶提取物中科罗索酸在糖尿病大鼠体内的血药浓度,并探讨其在病理模型大鼠体内药动学特征。[方法]SD糖尿病模型大鼠给予枇杷叶提取物灌胃,在不同时间点眼后静脉丛取血,预处理后测定血浆中科罗索酸的浓度,经DAS 2.0软件处理数据。[结果]枇杷叶提取物中科罗索酸在糖尿病大鼠体内的药动学符合二房室模型,科罗索酸在体内较快地被吸收,给药后1.5 h即达到峰浓度,峰浓度为(0.922±0.182) mg/L,其他主要药动学参数:吸收速率常数为(2.754±0.382)/h、分布半衰期为(0.879±0.295)h、消除半衰期为(8.752±3.561)h、24 h药时曲线下面积为(5.528±1.357)mg·h/L。[结论]高效液相色谱法测定血浆中科罗索酸浓度准确、简便,适用于枇杷叶提取物中科罗索酸的药动学研究。     

安徽产枇杷叶指纹图谱的建立及三萜酸成分含量测定研究

目的：优化枇杷叶HPLC指纹图谱色谱条件,测定枇杷叶三萜酸成分含量,为枇杷叶质量鉴定提供依据。方法：选用ChromCore 120 C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^-1,检测波长为210 nm,柱温为25℃。建立起枇杷叶的指纹图谱。结果：从枇杷叶的HPLC指纹图谱共标定了11个共有峰,结合对照品比对指认了2个色谱峰,其中10号峰为齐墩果酸,11号峰为熊果酸,各峰分离度良好,相似度范围在0.952～0.997之间;测定三萜酸成分齐墩果酸和熊果酸的含量范围分别为51.55～116.29μg·g^-1、91.48～182.37μg·g^-1。结论：建立的枇杷叶指纹图谱方法操作简便、稳定可靠,为枇杷叶的质量评价和鉴定提供科学依据。     

新藤黄酸提取工艺的优化研究

目的:探讨回流提取新藤黄酸的最佳工艺。方法:以新藤黄酸含量为考察指标,采用正交试验法优选提取工艺。结果:溶剂的浓度对提取量有显著影响,其次的影响因素为提取时间、提取次数、溶剂的量。结论:提取新藤黄酸的最佳工艺为:12倍量的甲醇,提取3次,每次3 h。     

硬孔灵芝三萜酸提取工艺研究

目的 确定硬孔灵芝三萜酸乙醇回流提取法的最佳工艺. 方法 通过L9(34)正交试验,优选乙醇回流提取硬孔灵芝三萜酸的最佳工艺. 结果 影响95％乙醇回流提取硬孔灵芝三萜酸的因素是:温度＞提取时间＞提取次数＞料液比,最优水平组合为:提取温度60C、提取3次、料液比1:25、提取时间2h.在此条件下,硬孔灵芝三萜...     

酸杨桃总黄酮提取最佳工艺的研究

本文通过利用甲醇浸提、单因素试验和正交试验探讨了从从酸杨桃中提取黄酮的最佳工艺条件.实验结果表明:提取时间为3h,料液比为1∶80,提取温度为70℃.总黄酮提取效率最好.     

珍珠母水解提取氨基酸工艺的初步研究

目的研究珍珠母中氨基酸的提取工艺.方法采用正交试验法,以含氮量及氨基酸的种类含量为指标,考察酸浓度(A)、酸液体积(B)、水解时间(C)3个因素对氨基酸含量的影响.结果 优化的珍珠母水解提取工艺条件为A2B2C2.结论珍珠母水解提取工艺条件为硫酸浓度为6mol/L,酸液体积为珍珠母量的8倍,水解时间为8 h.     

迷迭香叶中鼠尾草酸的提取工艺研究

［摘要］目的　优选迷迭香叶中鼠尾草酸的提取工艺．方法　以鼠尾草酸提取率为定量指标,确定最佳提取溶剂和提取方法．在单因素试验基础上,采用正交试验考察提取时间、料液比和提取次数对鼠尾草酸提取率的影响．结果　采用乙酸乙酯为溶剂,超声提取,料液比1:14,提取4次,每次75 min,在此条件下鼠尾草酸平均提取率达2.479%．结论　优选的鼠尾草酸提取工艺稳定,重复性好．     

元宝枫叶中黄酮类化合物的提取工艺优选

目的优化提取元宝枫叶中黄酮类化合物,并比较不同条件下元宝枫提取物抑制脂肪酸合成酶(FAS)活性的大小。方法采用L16(44)正交试验考察不同提取工艺条件,测定元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其抑制FAS活性的大小。结果黄酮类化合物的最佳浸提工艺:25℃温度下,乙醇体积分数为40%,固液比为1∶15,提取2.5h。结论元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其对FAS的抑制率之间不呈现正相关。其中一部分黄酮类成分对FAS有抑制作用。     

正交试验研究炒麦芽中淀粉酶的提取工艺

目的 采用正交设计法确定炒麦芽中淀粉酶的最佳提取工艺.方法 以淀粉酶的活性为检测指标,采用L9(34)正交试验,考察提取时间(A)、提取温度(B)、料液比(C)及浸提次数(D)4个因素对炒麦芽中淀粉酶活性的影响,并利用碘量法对其酶活性进行测定.结果 确定最佳提取工艺为A2B1C2D3,即25倍量的蒸馏水20 ℃浸提3次,每次60 min.结论 优选得到的炒麦芽中淀粉酶的提取工艺操作简单,稳定可靠,质量可控,方法可行.     

一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法

目的改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA。方法健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组。传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养箱消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞。余步骤同传统组。结果传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重。而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;A260/280比值在1.8～2.0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因。结论酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法。RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达（RT-PCR）的分析,并且重复性好,可以推广。     

正交试验优化六神曲中淀粉酶和蛋白酶的提取工艺

目的采用正交设计法确定六神曲中淀粉酶和蛋白酶的最佳提取工艺。方法以淀粉酶和蛋白酶的活力为检测指标,采用L9(33)正交试验,考察提取温度(A),提取时间(B),料液比(C)三个影响因素对六神曲中淀粉酶和蛋白酶活性的影响,并利用碘量法及紫外可见分光光度法分别对六神曲中淀粉酶及蛋白酶进行酶活力测定。结果六神曲的最佳提取工艺为A3B1C3,即20倍的蒸馏水40℃下浸提0.5 h。结论优选得到的六神曲中淀粉酶和蛋白酶的提取工艺稳定可行。     

介绍一种从全血中抽提DNA的方法

在分子生物学实验中,DNA样本的质量往往是决定实验是否成功的关键因素.很多实验手册中都介绍过DNA抽提法[1,2],而且目前市场上有多家生物公司生产DNA抽提试剂盒.     

HPLC法测定食品中非食用色素酸性橙Ⅱ

目的：为保证食品安全，建立了一套检测食品中非食用色素酸性橙Ⅱ的方法。方法：以甲醇-0．02mol／L醋酸铵水溶液为流动相，梯度洗脱，在484m用紫外检测器进行检测。结果：其重复测定结果的相对偏差为5．9l％，回收率在91．75％～104．20％范围内。结论：本方法适用于食品中合成色素与非食用色素酸性橙Ⅱ的同时测定。     

HPLC法测定食品中非食用色素酸性橙Ⅱ

目的为保证食品安全,建立了一套检测食品中非食用色素酸性橙II的方法.方法以甲醇-0.02mo1/L醋酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,在484nm用紫外检测器进行检测.结果其重复测定结果的相对偏差为5.91%,回收率在91.75%～104.20%范围内.结论本方法适用于食品中合成色素与非食用色素酸性橙Ⅱ的同时测定.     

小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用

目的改良树脂包埋复数小鼠不脱钙胫骨的方法,提高树脂包埋法的效率及稳定性,探索减少树脂切片脱片的方法。方 法取15只B6小鼠共30胫骨,标记、固定、脱水、渗透后将其包埋于直径4 mm的圆柱型树脂块中,胫骨近端1/4处切断后再对剩 余的3/4胫骨包埋。在包埋时将5个胫骨切面贴于平整树脂板并包埋于同一树脂块中。分别在包埋液制备、切片、染色3个阶段 随机将样本分为对照组及实验组,分别在3个改良组中采用以下方案处理,包括：向包埋液冲入CO2;在切面上涂抹包埋液;在脱 塑水化前以95 ℃加热切片15 min。分析树脂凝固时间、切片脱片率及骨形成、成骨细胞定量指标。结果成功包埋6个树脂块, 每个树脂块内有5个胫骨,胫骨横截面于同一平面上,树脂块凝固完全,适于切片。向包埋液冲入CO2可以缩短树脂块凝固时 间,提高凝固成功率。在切面上涂抹包埋液可以显著降低切片时的脱片率（P<0.05）且不影响骨标记的荧光分析（P>0.05）。在 脱塑前加热切片可以显著降低脱塑水化后的脱片率（P<0.05）,且不影响成骨细胞定量分析（P>0.05）。结论复数小鼠不脱钙胫 骨的树脂包埋改良法有效可行,这可能是一种理想的不脱钙骨组织研究方法。     

金线莲RNA提取方法的改进

目的：有效提取金线莲RNA，为研究内生真菌促进其生长机制奠定基础。方法：CTAB法制备RNA，1％琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像仪照相。结果：提取的RNAA260／A230为2．054，A260／A280为1．818，产量达154．35μg/g。电泳条带清晰，RNA完整性好。结论：用该方法能高质高量地制定富含多糖和酚类化合物的药用植物RNA。