人类白细胞抗原G在肾移植受者外周血的表达探讨

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)G的膜型HLA-G(mHLA-G)、胞内HLA-G(iHLA-G)和可溶型HLA-G(sHLA-G)在肾移植受者外周血的表达及其与术后临床相关性.方法 研究对象为2000年2月至2006年6月解放军第三零九医院全军器官移植中心行肾移植的175例受者,根据4周内是否发生排斥反应分为急性排斥反应组(36例)、功能稳定组(139例),30例健康供者作为对照组.应用流式细胞术检测外周血mHLA-GI、iHLA-G1的表达,酶联免疫吸附法检测血浆sHLA-G5的含量.结果 T淋巴细胞CD~+ mHLA-G1~+、CD8~+ mHLA-G1~+、CD4~+ iHLA-G1~+、CD8~+ iHLA-G1~+平均表达率在对照组分别为0.43%±0.19%、1.23%±0.41%、27%±13%、36%±14%,急性排斥反应组分别为:0.57%±0.34%、1.31%±0.56%、26%±8%、37%±17%,功能稳定组分别为0.61%±0.43%、1.39%±0.47%、26%±9%、37%±17%,3组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05).外周血浆sHLA-G5表达在对照组为(25±14)ng/ml;急性排斥组术前为(24±15)ng/ml,术后为(34±21)ng/ml;功能稳定组术前为(25±11)ng/ml,术后为(56±32)ng/ml;急性排斥组和功能稳定组术前与健康组比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后功能稳定组明显高于急性排斥组(P<0.05).结论 肾移植受者外周血存在一群比率较低的HLA-G~+ T淋巴细胞,mHLA-G1和iHLA-G1的表达与肾移植术后的排斥反应发生无关,sHLA-G5的高表达与排斥反应发生的减少有关.     

系统性红斑狼疮患者血浆sHLA-G表达及其影响因素分析

目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆可溶性HLA-G(sHLA-G)水平,并分析HLA-G基因多态性、病情及药物治疗对其表达的影响. 方法 酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中96例SLE患者及74名正常人血浆sHLA-G水平.聚合酶链式反应(PCR)榆测HLA-G 14bp插入/缺失多态性基因,收集记录SLE疾病活动性指数(SLEDAI)和药物治疗情况,并分析基囚多态性、病情及药物治疗对sHLA-G表达的影响. 结果 血浆sHLA-G水平在SLE患者为230.2±192.2U/ml,显著高于健康体检者的118.3±38.1U/ml(P=0.0001);HLA-G 14bp插入/缺失多态性位点和基因型在血浆sHLA-G水平增高和正常SLE患者中的分布无显著性差异(P>0.05);但血浆sHLA-G水平增高的SLE患者较血浆sHLA-G水平正常患者病情更重(P=0.027),易出现中枢神经系统受累(P=0.007).激素、免疫抑制剂及抗疟药等不同药物治疗在血浆sHLA-G水平增高和正常SLE患者间亦无统计学差异(P>0.05). 结论 SLE患者血浆sHLA-G水平增高,而且与SLE病情较重、中枢神经系统受累有关,提示sHLA-G在SLE病理过程中可能发挥重要作用.     

WT1、PRAME和ERG基因在儿童急性白血病中的表达

目的 研究肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)和ETS相关基因(ERG)在儿童急性白血病(AL)中的表达特点,并分析其在白血病微小残留病灶(MRD)监测中的意义.方法 收集92份AL标本(84例患儿),其中初发标本28份,包括急性淋巴细胞白血病(ALL)标本18份,急性髓系白血病(AML)标本10份;AL完全缓解标本63份,包括ALL标本45份,AML标本18份;AL复发标本1份.采用Real-time PCR法检测AL患者骨髓中WTI、PRAME和ERG mRNA的相对表达量,并以同期住院的10例非恶性血液病患儿为对照.结果 AL初发组患儿的WT1、PRAME和ERG mRNA相对表达量均显著高于缓解组和对照组(P＜0.05),但缓解组和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);AML初发组的PRAME mRNA相对表达量显著高于ALL初发组(P＜0.05).28例初发组WT1、PRAME和ERG mRNA的阳性表达率分别为82.4％、92.9％和64.3％,三者间比较差异有统计学意义(P＜0.05);三种基因联合检测的阳性率为100％.跟踪15例AL初发患者,诱导化疗缓解后三种基因的相对表达量均显著低于诱导化疗前(P＜0.05).1例复发患者初发时三种基因均呈阳性表达,缓解后转为阴性,复发时又变为阳性.结论 与非白血病患者相比,WTI、PRAME和ERG mRNA在AL初发患者的骨髓中高度表达,三种基因联合检测可提高阳性率.AL患者的WT1、PRAME、ERG mRNA表达水平与疾病状态相关,适用于MRD的监测.     

急性白血病P53蛋白表达与化疗效果的关系

目的 探讨急性白血病(AL)P53蛋白表达水平及其与化疗效果的关系.方法 选取AL患者38例(初治组30例,难治复发组8例)、缓解组患者21例、骨髓象正常的非白血病患者16例(对照组);AL各组又分为急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL).使用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)对各组骨髓细胞中的P53蛋白表达状况进行检测.结果 初治组与难治复发组的P53蛋白表达率均明显高于缓解组(均P＜ 0.05),而缓解组P53蛋白表达水平与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).各组AML与ALL患者间P53蛋白表达状况差异无统计学意义@＞0.05).结论 P53蛋白的过度表达参与了AL的发病,P53水平检测可预测AL患者的化疗效果及预后.     

急性白血病患者VEGF与多药耐药关系的初步探讨

目的探讨急性白血病(AL)患者VEGF与MDR的关系.方法用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)检测36例化疗后AL患者血浆VEGF含量;同时以免疫组化法检测其骨髓单个核细胞Pgp的表达.结果 17例难治/复发AL患者血浆VEGF含量(76.01±40.18)pg/ml较对照者(33.13±11.97)pg/ml和完全缓解者(42.07±17.75)pg/ml明显升高(P＜0.01);而完全缓解者VEGF含量与正常对照者之间无显著性差异(P＞0.05);难治/复发AL患者骨髓单个核细胞Pgp表达阳性细胞率(20.47±9.96)%,明显高于完全缓解者(6.00±4.17)%, P＜0.01,且VEGF含量与Pgp表达具有一定的相关性(r=0.668,P＜0.01).结论 AL患者血浆VEGF的检测,可作为了解病情、观察疗效、判断预后的指标之一;AL患者血浆VEGF升高与Pgp高表达有一定的一致性,考虑VEGF可能参与急性白血病MDR的发生.     

高原地区子痫前期患者胎盘及血清HLA-G表达水平及临床意义

目的 探讨青海高原地区子痫前期患者胎盘及血清中人类白细胞抗原G(HLA-G)表达水平及临床意义.方法 收集2010年9月至2011年3月在青海大学附属医院产科分娩的30名子痫前期患者和30名正常妊娠妇女的胎盘组织和血清样品,应用实时定量RT-PCR技术研究HLA-G mRNA在正常妊娠者和子痫前期患者胎盘中的表达差异,并应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中可溶性HLA-G的表达.结果 (1)青海高原地区子痫前期患者胎盘组织中HLA-GmRNA表达水平为1.42±4.92,明显低于正常妊娠组(9.00±9.94),差异有统计学意义(P＜0.01);(2)子痫前期血清可溶性人类白细胞抗原G( soluble HLA-G,sHLA-G)浓度为688.34±181.988 ng/L,明显低于正常妊娠组织(1030.2±238.568ng/L),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 青海高原地区子痫前期胎盘组织HLA-GmRNA表达水平及血清sHLA-G浓度均明显降低,可能与子痫前期的发生有关.     

急性白血病血清中血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的：探讨急性白血病患者化疗前血清中血管内皮生长因子(VEGF)水平与白血病发生及复发之间的关系。方法：应用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测88例急性白血病和30例正常人血清中及白血病细胞培养上清液中VEGF含量。结果：初发白血病及复发白血病患者化疗前血清及细胞上清液VEGF含量明显高于正常人(均P＜O．01)；血清VEGF含量与外周血幼稚细胞数及骨髓中原始细胞数呈显著正相关(r＝0．446，0．421．均P＜0．05)。结论：血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、复发潜能的有效指标。一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量和疾病状态。     

初发急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的表达探讨

目的探讨初发急性白血病患者外周血中相关T淋巴细胞亚群表达情况。方法选取2017年2月~2019年3月于我院诊治的34例初发急性白血病患者作为研究对象(试验组),选择同期于我院体检的34例健康体检者作为对照组。检测两组外周血中相关T淋巴细胞亚群指标,对两组CD~(3+)、CD~(4+)、CD~(8+)、CD~(4+)/CD~(8+)、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10进行比较。结果试验组初发急性白血病患者CD~(3+)、CD~(4+)、CD~(4+)/CD~(8+)水平分别为(61.20±4.64)%、(30.53±3.70)%和(1.02±0.23),均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);而试验组初发急性白血病患者CD8+水平为(44.14±3.50)%,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);试验组初发急性白血病患者IL-2为(11.60±1.13)pg/m L、IFN-γ为(23.25±2.50)pg/m L,均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。试验组初发急性白血病患者IL-4、IL-10分别为(41.36±3.50)pg/m L和(34.50±2.75)pg/m L,均明显高于照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论初发急性白血病患者外周血中CD~(3+)、CD~(4+)、CD~(4+)/CD~(8+)、IL-2、IFN-γ表达下降,CD~(8+)、IL-4、IL-10表达提升。     

人类白细胞抗原G及其受体在肾移植术后监测的临床意义

目的 探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)作为判断肾移植预后的生物标记物的价值并分析HLA-G受体的表达与HLA-G作用机制的相关性.方法 选取2006年2月至2008年6月解放军第三○九医院全军器官移植中心施行初次肾移植受者215例,根据术后临床状况分为肾功稳定组(n=173)和急性排斥组(n=42),采集外周血用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测可溶性人类白细胞抗原G5(sHLA-G5)表达含量,流式细胞术分析HLA-G受体免疫球蛋白样受体2(ILT-2)在T、B淋巴细胞的表达及杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)2DL4在自然杀伤(NK)细胞的表达.采用受试者工作特征(ROC)曲线运算sHLA-G5阈值,预测肾移植术后排斥反应.运用回归分析验证sHLA-G5与急性排斥反应发生的相关性.结果 sHLA-G5水平预测急性排斥反应组的最适域值为139.0μg/L,其敏感度为63.6%,特异度为82.1%,曲线下面积(AUC)为0.780.二元Logistic回归分析显示sHLA-G5是肾移植术后急性排斥反应发生的独立影响因素(P=0.019,OR=0.039,95%可信区间为2.091～5.661).急性排斥组CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞表面的ILT-2表达均低于肾功稳定组(21%±7%比52%±17%,23%±6%比39%±16%,21%±7%比39%±16%,均P＜0.05).急性排斥组NK细胞表面的KIR2DLA表达也低于肾功稳定组(31%±10%比57%±21%,P＜0.05).结论 sHLA-G5表达水平对预测肾移植术后排斥反应具有较高的敏感度和特异度,HLA-G诱导免疫耐受的机制可能与淋巴细胞表面ILT-2、KIR2DLA的高表达密切相关.     

急性白血病患者P-糖蛋白的表达及功能分析

目的:研究P-糖蛋白(P-gp)在急性白血病(AL)患者中的表达及功能.方法:用免疫组化检测CD34、P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的表达、功能.结果:CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关(P=0.001,r=0.475;P=0.003,r=0.429),P-gp表达与功能呈正相关(P=0.031,r=0.341).初治急性早幼粒细胞白血病(APL)组中无P-gp表达 、P-gp功能 ,明显低于初治急性髓细胞白血病(AML)组(41.1%,35.3%,P＜0.05).初治急性淋巴细胞白血病(ALL)组中P-gp表达 28.6%,P-gp功能 28.6%,与初治AML组无差异(P＞0.05).初治AL组P-gp表达 25%,复发/难治组中P-gp表达 33.3%,两组无差异(P＞0.05);P-gp功能 22.7%,低于复发/难治组P-gp功能 66.7%(P＜0.05).＜50岁初治AL组P-gp表达 26.3%,与≥50岁初治AL组无差异(P＞0.05);P-gp功能 15.8%,低于≥50岁初治AL组(P＜0.05).结论:P-gp功能的检测对AL的化疗更有临床指导意义.