β淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元Tau蛋白异常磷酸化及雌激素的保护作用

目的:研究β淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元Tau蛋白异常磷酸化及雌激素的保护作用。方法:将24只SD大鼠随机分为正常对照组、AD组、AD 雌二醇组,每组8只。除正常对照组以外的16只大鼠海马内注射凝聚态Aβ25-35制成阿尔茨海默病(AD)模型;AD 雌二醇组大鼠于建模后2周,皮下注射雌二醇。三组大鼠Morris水迷宫检测大鼠认知功能,B ielschowsk i染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察Tau蛋白异常磷酸化变化。结果:AD 雌二醇组大鼠Morris水迷宫测试明显优于AD组(P<0.001);海马CA1区Tau蛋白磷酸化阳性细胞数(26.2±3.5、49.2±3.1、61.5±4.5、42.1±2.7、61.2±2.3、24.0±1.6)明显少于AD组(45.4±3.1、106.7±7.6、79.3±3.2、67.7±2.9、97.5±2.9、46.7±5.8)(P<0.01);海马CA1区神经元形态较AD组规则。结论:β淀粉样蛋白可诱导大鼠海马神经元Tau蛋白出现异常磷酸化,雌激素替代治疗,可改善AD大鼠的认知功能,并抑制海马Tau蛋白的异常磷酸化。     

缓激肽对β-淀粉样蛋白所致阿尔茨海默病动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察缓激肽(BK)对β-淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 随机选取20只健康Wister大鼠,进行水迷宫训练后分为4组,在大鼠双侧海马背侧细胞带分别注入蒸馏水5 μl(DW组),BK2.5 μl、DW2.5 μl(BK组),Aβ2.5 μl、DW2.5 μl(Aβ组),Aβ2.5 μl、BK2.5 μl(Aβ+BK组).2周后观察各组大鼠海马、皮层区的磷酸化Tau阳性细胞数.结果 Aβ+BK组海马CA1、CA4区及皮层区磷酸化Tau蛋白免疫阳性细胞积分光密度值明显高于其他各组.结论 Aβ与BK同时注入大鼠海马可产生协同作用,引起Tau蛋白更明显的磷酸化,提示可以用此方法 建立AD动物模型.     

Aβ1-42单克隆抗体对阿尔茨海默病大鼠认知能力及脑组织Aβ和ChAT表达的影响

目的:探讨经颅内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)142单克隆抗体(mAb)对阿尔茨海默病(AD)大鼠的疗效及机制.方法:30只SD大鼠分3组:AD模型组和治疗组各12只,生理盐水组6只.AD模型组和治疗组于侧脑室注入Aβ1-42蛋白片段建立AD大鼠模型,治疗组大鼠在注射后第14天于侧脑室内注入Aβ1-42 mAb,连用3 d...     

神经生长因子对拟AD模型大鼠脑内神经原纤维缠结的影响

目的: 研究神经生长因子对拟阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)模型大鼠海马及皮层中神经原纤维缠结(NFT)的影响.方法: 采用冈田酸(Okadaic Acid,OA)海马CA1区微量多次注射建立拟AD大鼠模型,侧脑室注射神经生长因子(nerve growth factor, NGF)进行预处理,观察大鼠行为学变化,Bielschowsky染色观察海马及皮层神经原纤维缠结(neurobrillary tangles,NFT).结果: OA注射后,大鼠出现认知能力、学习记忆能力减退,海马及皮层出现较多NFT;注射NGF预处理后,上述症状改善,海马及皮层NFT数量减少.结论: NGF可显著改善拟AD大鼠模型学习记忆能力,表明NGF可抑制NFT的形成,改善AD病的症状.     

miRNAs对阿尔茨海默病淀粉样蛋白产生和tau蛋白代谢作用的研究进展

microRNA(miRNA)是一类长约为22 nt的小分子非编码单链RNA,由独立的非编码区RNA或蛋白编码基因的内含子转录而来,通过与其靶mRNA的3’非翻译区结合引起靶mRNA抑制发挥调节作用。近年来,miRNA在阿尔茨海默病中的角色引起广泛关注,本文从miRNA对β淀粉样蛋白和tau蛋白的影响两个方面总结了最新研究进展,以期为相关研究者提供参考。     

远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及海马AchE、ChAT活性的影响

目的建立阿尔茨海默病（AD）的大鼠模型,并观察远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及胆碱能系统的影响。方法将70只大鼠随机分为模型组,远志总皂苷高、中、低荆量组,盐酸多奈哌齐组,正常组和假手术组共7组,每组10只。采用双侧海马内一次性注射13一淀粉样多肽25—35片断（A1325—35）制作大鼠AD模型;连续给药5周后采用水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力;采用生化法检测各组大鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶（AchE）、胆碱乙酰转移酶（CHAT）活性变化。结果与模型组相比,远志总皂苷干预治疗组大鼠进入盲端的次数明显减少、游泳时间明显缩短,同时脑内ChAT活性增强,AchE活性降低,差异均具有统计学意义（P〈0．01、P〈0．05）。结论远志总皂苷对AD模型大鼠的学习记忆能力减退具有改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能系统有关。     

雌激素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马神经元损伤保护作用的研究

目的:观察雌激素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及海马神经元损伤的影响,探讨雌激素神经保护的机制. 方法:选取雌性成年SD大鼠24只,随机分为对照组、AD 雌二醇(E2)组、AD组,每组8只.Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,苏木精-伊红(H-E)染色及Bielschowski染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察Tau蛋白异常磷酸化变化及GSK-3β活性.结果:与AD组相比,AD E2组大鼠迷宫测试明显改善(P<0.01);海马CA1区神经元纤维形态规则,Tau蛋白磷酸化阳性细胞数明显减少(P<0.01),Tau蛋白表达减少,且GSK-3β总量及磷酸化GSK-3β含量均有所增加.结论:雌激素治疗可改善Aβ诱导的大鼠学习记忆障碍及海马神经元损伤,可能通过作用GSK-3β导致Tau蛋白去磷酸化,从而达到保护神经的目的.     

Aβ蛋白和tau蛋白与阿尔茨海默病的相关性研究进展

β淀粉样蛋白(Aβ)沉积可引起突触结构及功能的一系列改变,在阿尔茨海默病(AD)的发生及发展过程中起着关键性作用,而过磷酸化的tau蛋白在AD神经退行性变中也扮演着重要的角色。学界对Aβ和tau的相互关系以及两者与其他相关因素(如PI3K、GSK等酶类)的研究也日趋增多。研究两者在AD发病中的作用及相关性,对AD的治疗及病情评估有重要意义。     

一氧化氮在大鼠短暂性局灶性脑缺血损伤中对神经生长因子和脑源性神经营养因子表达的影响

目的 采用大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,研究大鼠脑缺血再灌注后不同时间点脑缺血半暗带区神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的变化,以及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制剂 N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-argininic methyl ester, L-NAME)对脑缺血大鼠再灌注后NGF和BDNF表达的影响,探讨脑缺血损伤的深层机制。方法 将42只健康雄性Sprague-Dawley大鼠采用数字表法随机分为7组:假手术(Sham)组;MCAO再灌注0 h(MCAO 0 h)组;MCAO再灌注6 h(MCAO 6 h)组;MCAO再灌注12 h(MCAO 12 h)组;MCAO再灌注24 h(MCAO 24 h)组;MCAO再灌注72 h(MCAO 72 h)组以及MCAO 24 h+L-NAME 组(于MCAO前30 min腹腔注射L-NAME,剂量为1 mg/kg)。每组6只大鼠。采用改良线栓法制备大鼠MCAO再灌注模型,于缺血90 min 后拔出线栓进行再灌注。免疫荧光染色法检测再灌注大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF的表达。免疫荧光双标染色法将NO所致的组织损伤标志物3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine, 3-NT)分别与BDNF和NGF共定位。结果 MCAO组大鼠再灌注后0、6 h,脑缺血半暗带区域几乎未见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注12 h,可见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注24 h,半暗带区NGF和BDNF阳性细胞数较再灌注12 h组进一步增多(P<0.05)。至再灌注72 h,半暗带区NGF和BDNF阳性染细胞数较再灌注24 h组减少(P<0.05)。MCAO再灌注24 h组大鼠缺血半暗带区,3-NT分别与NGF和BDNF免疫荧光染色共定位。Sham组大鼠未见3-NT和NGF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和NGF双标阳性细胞。给予L-NAME后,半暗带区3-NT和NGF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少(P<0.05)。Sham组大鼠未见 3-NT和BDNF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和BDNF双标阳性细胞。给予L-NAME后,缺血大鼠半暗带区3-NT和BDNF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少(P<0.05)。结论 脑缺血再灌注可引起大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF表达上调,最初的上调出现在再灌注12 h左右,随再灌注时间延长,NGF和BDNF表达进一步增加,至再灌注24 h达到高峰,随后在再灌注72 h下降。L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO的产生,减少3-NT形成,进而引起NGF和BDNF表达下降,说明脑缺血再灌注过程中,NO促进NGF和BDNF的表达。     

大鼠脑出血后脑组织bax蛋白表达及神经生长因子对其的影响

目的:探讨bax蛋白在脑出血(ICH)后神经损伤过程中的作用以及神经生长因子(NGF)对脑出血损伤的保护机制。方法:采用脑内注射自体新鲜动脉血的方法制作大鼠ICH模型。利用免疫组化方法检测bax蛋白表达的变化。结果:ICH对照组、NGF干预组在ICH后6h即有bax蛋白阳性表达,24h达峰值,之后下降,7d时仍高于生理盐水对照组。NGF干预组与ICH对照组相比较bax蛋白峰值出现的时间无变化,但各时点bax蛋白的表达均较ICH对照组显著减少(P<0.05)。结论:ICH后血肿周围脑组织细胞凋亡增加,加重神经功能损伤。应用NGF可使血肿周围脑组织bax蛋白表达明显下降,起到减轻神经功能损伤,促进神经功能恢复,达到治疗脑出血的目的。     

神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响

目的:应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2和Bax的影响,探讨其神经保护作用的分子生物学机制. 方法:72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组. 应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型,TUNEL法检测各组动物海马区细胞凋亡数,免疫组化染色观察Bcl-2, Bax蛋白的表达. 结果:与假手术组相比,新生大鼠HIBD后海马区存在不同程度的细胞凋亡,Bcl-2表达轻度升高,Bax表达明显升高. 与HIBD组比较,NGF治疗后,凋亡细胞减少(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.01),Bax表达下降(P＜0.01). 结论:HIBD后,新生大鼠海马区细胞存在细胞凋亡,NGF治疗增强Bcl-2表达,减少损伤基因Bax表达,抑制细胞凋亡,具有脑保护作用.     

雄激素和雌激素对人类前列腺间质细胞bFGF、TGF β2以及smoothelin表达的影响

目的研究雄激素和雌激素对培养的人前列腺间质细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子(TGFβ2)表达的影响.方法本实验培养出11株良性前列腺增生症(BPH)病人前列腺间质细胞,并给予双氢睾酮(DHT)和雌二醇(E2)刺激,通过RT-PCR法观察bFGF和TGFβ2的mRNA表达,同时观察了平滑肌细胞分化特异性抗原(smoothelin)的mRNA表达.结果DHT能明显上调bFGF表达,E2能明显上调TGFβ2和smoothelin表达,且TGFβ2和smoothelin表达量成正相关.结论DHT能诱导bFGF表达,E2能诱导TGFB2表达.E2诱导向平滑肌的细胞转化可能与TGFB2有关.     

雄激素和雌激素对人类前列腺间质细胞bFGF、TGFβ2以及smoothelin表达的影响

目的 研究雄激素和雌激素对培养的人前列腺间质细胞碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和转化生长因子（TGFβ2）表达的影响。方法 本实验培养出11株良性前列腺增生症（BPH）病人前列腺间质细胞，并给予双氢睾酮（DHT）和雌二醇（E2）刺激，通过RT-PCR法观察bFGF和TGFβ2的mRNA表达，同时观察了平滑肌细胞分化特异性抗原（smoothelin)的mRNA表达。结果 DHT能明显上调bFGF表达，E2能明显上调TGFβ2和smoothelin表达，且TGFβ2和smoothelin表达量成正相关。结论 DHT能诱导bFGF表达，E2能诱导TGFβ表达，E2诱导向平滑肌的细胞转化可能与TGFβ2有关。     

鼠神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后巢蛋白表达的影响

目的观察鼠神经生长因子(mNGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后巢蛋白(nestin)表达水平的影响,研究内源性神经干细胞增殖情况,探讨m NGF可能的神经保护机制。方法新生7 d龄Wistar大鼠108只按完全随机法分为对照组、HIBD组和治疗组,每组36只。结扎大鼠左侧颈总动脉和8%低氧暴露2 h,制作新生大鼠HIBD模型。对照组仅暴露游离左侧颈总动脉,不结扎左侧颈总动脉和低氧暴露。治疗组大鼠于左侧股二头肌部位肌肉注射m NGF (10μg/kg),1次/d,连用3 d。HIBD组大鼠于相同部位注射等量生理盐水3 d。每组随机取12只大鼠分别于术后4 d、7 d、14 d处死后,制备大鼠海马部位脑组织HE及免疫组化切片。利用计算机图像分析技术检测各组nestin阳性细胞计数。结果对照组海马部位椎体细胞排列整齐,HIBD组海马部位椎体细胞排列紊乱,可见较多凋亡神经细胞,治疗组可见海马部位椎体细胞排列较整齐,可见少量凋亡神经细胞;对照组、HIBD组及治疗组大鼠术后4 d nestin阳性细胞个数分别为(15.25±3.02)个、(24.67±3.37)个、(40.33±2.6...     

神经生长因子对大鼠坐骨神经半切损伤后的作用观察

目的：观察坐骨神经半切损伤后神经生长因子（ＮＧＦ）的作用和治疗效果。方法：采用大鼠坐骨神经半切致伤方法,按给药剂量将动物分成：假手术组、生理盐水对照组、小剂量组、中剂量组、大剂量组,每组１０只,观察时间为１０ｄ。结果：１０ｄ治疗组动物的感觉诱发电位（ＳＥＰ）与生理盐水对照组相比潜伏时缩短（Ｐ〈０．０５）,运动诱发电位（ＭＥＰ）治疗各组与生理盐水组比较Ｎ１、Ｐ１、Ｎ２、Ｐ２各波的峰潜时均缩短（Ｐ〈０     

神经生长因子对脑梗死大鼠脑组织中生长分化因子15 表达水平的影响

目的：探讨神经生长因子（NGF）对脑梗死大鼠脑组织中生长分化因子15（GDF-15）表达水平的影响,阐明NGF对脑梗死大鼠的作用机制。方法：采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型。将54只大鼠随机分为假手术组、模型组和NGF组,每组18只。NGF组大鼠腹腔注射50 μg·kg^-1 NGF,假手术组（仅分离动脉,不结扎栓线）和模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。于造模后1、3和7 d进行神经功能评分,HE染色法观察各组大鼠脑组织神经元病理形态表现,免疫组织化学染色检测各组大鼠脑组织中GDF-15阳性细胞数,ELISA法检测各组大鼠脑组织中GDF-15表达水平。结果：HE染色,造模后7 d NGF组大鼠神经细胞坏死程度较低,细胞间质水肿、胶质细胞增生程度均较轻。与假手术组比较,模型组和NGF组大鼠造模后1、3和7 d的神经功能评分明显升高（P<0.05）,GDF-15阳性细胞数明显升高（P<0.05）,脑组织中GDF-15表达水平均明显升高（P<0.05）。与模型组比较,造模后3和7 d时NGF组大鼠神经功能评分降低（P<0.05）,各时间点GDF-15阳性细胞数均明显升高（P<0.05）,各时间点脑组织中GDF-15表达水平明显升高（P<0.05）。结论：NGF可上调大鼠脑组织中GDF-15表达水平,改善神经功能,达到保护脑神经的作用。     

复方鳖甲软肝片对阿霉素肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子mRNA及蛋白表达的影响

目的:分析阿霉素肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGE)mRNA及蛋白的变化,研究复方鳖甲软肝片的干预怍用及其机制。方法:采用单侧肾切除阿霉素肾病模型。将45只大鼠随机分为5组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝片组。用药10周后处死大鼠,观察肾组织病理改变,应用原位杂交和免疫组织化学方法检测肾组织CTGF mRNA及蛋白的表达。结果:正常组及假手术组肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞以及肾间质细胞胞浆内有少量CTGF mRNA及蛋白的黄色颗粒状阳性反应物;模型组上述部位的CTGF mRNA及蛋白的黄色颗粒状反应物呈强阳性表达;复方鳖甲软肝片组CTGF mRNA及蛋白表达较模型组显著减少,与苯那普利组比较,差异无统计学意义。结论:复方鳖甲软肝片可能通过抑制CTGF mRNA及蛋白的过度表达而减缓肾纤维化病程进展。     

雌激素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响

目的:探讨雌激素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响。方法:选取雌性大鼠36只,随机分为假手术组、卵巢切除(OVX)组、OVX+苯甲酸雌二醇(EB)组,每组12只。首先采用海马注射Aβ1-42建立AD模型,然后通过Morris水迷宫观察大鼠的学习记忆能力,同时通过ELISA检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(Ch AT)的活性。结果:与OVX组比较,OVX+EB组逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05),原平台象限活动时间明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),穿越原平台次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。且提高大鼠脑组织SOD、Ch AT活性,降低MDA活性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雌激素可改善AD大鼠的学习记忆能力。