米诺环素对局灶性脑缺血大鼠脑可塑性的影响

目的 观察米诺环素对大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤后皮质神经元结构及突触素（synaptophysin, SYN）蛋白表达的影响。 方法 将36只大鼠随机分为假手术组（Sham组）、I/R模型组（I/R组）及米诺环素组（Min组）,每组12只。Sham组不进行I/R处理,不给药。I/R组及Min组均采用线栓法阻塞大脑中动脉制作大鼠MCAO模型,再尾静脉注射PBS或米诺环素（3 mg/kg,2次/d）14 d后,采用Montoya楼梯实验评估3组大鼠前肢运动功能,HE染色观察皮质神经元的形态结构,免疫荧光法观察缺血灶周围神经突的生长,Western blot法检测缺血脑组织内SYN蛋白的表达。结果 假手术组大鼠无明显神经功能缺损,皮层神经元细胞形态正常,微管相关蛋白-2（microtubule-associated protein-2, MAP-2）阳性神经元排列整齐,神经突较长;同模型组相比,米诺环素组大鼠的前肢运动功能改善,MAP-2及SYN蛋白表达增加,两组差异有统计学意义（P<0.05）。结论 米诺环素能促进大鼠缺血皮层神经元神经突的生长、突触素的表达及神经功能的恢复,发挥对脑组织可塑性的调节作用。     

电针对局灶性脑缺血大鼠脑水含量的影响

目的：探讨电针对局灶性脑缺血大鼠脑水含量的影响。方法：线栓法阻塞大鼠大脑中动脉，在24小时内进行3次电针刺激，依照Bederson分级法观察大鼠脑缺血后运动功能的差异，应用干湿法测定脑水含量的改变。结果；发现电针后大鼠运动功能有明显改善，脑水含量明显减轻。结论：电针对脑缺血的治疗意义。     

通络注射液对局灶性脑缺血及局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的 观察通络注射液对局灶性脑缺血再灌注及局灶性脑缺血大鼠的保护作用。方法 用栓线法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型；用大脑中动脉电凝方法制备大鼠局灶性脑缺血模型。结果 局灶性脑缺血再灌注及局灶性脑缺血手术后，通络注射液高、中剂量组动物的行为学得分均显著低于模型组；通络注射液高剂量和中剂量均可显著降低手术大鼠的脑含水量，减轻脑水肿；并可显著降低实验大鼠的脑梗死率。结论 通络注射液对局灶性脑缺血再灌注及局灶性脑缺血大鼠具有明显的保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的改进

参照有关方法，成功地制作经颈外脉至颈内动脉尼龙线栓大鼠大脑中动脉缺血模型，适当做了改进，并初步进行了病理学研究，该模型无需开颅即能观察再灌注损伤，较好地模拟大脑中动脉区缺血的病理状态。     

实验性局灶性脑缺血再灌注Fos蛋白的表达

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注Ｆｏｓ蛋白表达的意义及其机制。方法 采用免疫组化法观察Ｆｏｓ蛋白在大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮层和基底节区的动态变化。结果 Ｆｏｓ蛋白在大脑中动脉阻断１ｈ后,随再灌注时间延长其分布不同,基底节区持续时间长,阳性细胞多,而皮层持续时间短,阳性细胞少,其中再灌注９０ｍｉｎ,Ｆｏｓ蛋白表达最显著,大脑中动脉供血中心区皮层几无表达。结论 Ｆｏｓ蛋白的表达与神经细胞存活密切相关     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织CD31表达的影响

目的探讨电针对大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型脑内血管新生是否有促进作用。方法采用改良Longa动脉线栓法制作脑缺血/再灌注大鼠模型,选用雌性SD大鼠120只,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,后两组分为缺血1 h后再灌注12 h 1、d、2 d、4 d、7 d五个亚组。免疫组化SABC方法观察CD31在脑缺血/再灌注后不同时间的动态变化。结果 CD31微血管阳性表达:电针组缺血1 h再灌注后12 h、1 d 2、d、4 d7、d表达明显高于模型组,高峰7 d,且各时间段的表达均高于模型组相应时间段,P<0.05。结论电针对大鼠局灶性脑缺血后缺血组织微血管的形成有促进作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后β-淀粉样蛋白的表达

①目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后 β 淀粉样蛋白 (β AP)在梗死区的表达。 ②方法　应用免疫组织化学方法观察大鼠大脑中动脉缺血再灌注后存活 6h、1d、2d、3d、7d、14d不同时间 β AP的表达。 ③结果　缺血再灌注后 1d ,β AP在梗死区及其周围表达开始增强 ,7d时达高峰 (F =92 .6 3,q =5 .2 1～ 2 5 .87,P <0 .0 1)。④结论　β AP在脑缺血再灌注损伤区表达增多 ,提示β AP在脑缺血损伤的病理改变中具有重要作用     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑缺血半影区的界定

①目的 界定大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑缺血半影区的范围。②方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型，氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、甲苯胺蓝染色、焦油紫染色和苏木精-伊红染色界定脑缺血半影区和中心区。③结果 脑缺血再灌注2h，缺血病灶位于纹状体外侧区和额顶叶皮质下部，随着缺血再灌注时间的延长病灶范围逐渐扩大；再灌注1～2d最大，波及纹状体内侧区和额顶叶皮质上部以及梨状区皮质，之后逐渐缩小；再灌注7～14d恢复到再灌流2h的水平。缺血病灶与周围正常脑组织之间有一形态和结构过渡区，该区的着色和细胞形态结构界于病灶和正常脑组织之间，即缺血半影区。缺血中心区神经细胞明显减少，呈现坏死特征；缺血半影区细胞主要呈现核固缩、染色质凝聚等凋亡特征。④结论 脑缺血再灌注缺血中心区位于纹状体外侧区和额顶叶皮质下部，缺血半影区位于纹状体内侧区和额顶叶皮质上部以及梨状区皮质。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的动态变化

目的：观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化。方法：采用健康雄性大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型，阻断大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注，在0．5h，6h，12h，24h和48h不同时间点断头取脑，连续取脑进行TUNEL染色。结果：①假手术组、缺血再灌注组非缺血侧大脑半球未见阳性的凋亡细胞。②脑缺血再灌注早期部分神经细胞发生了凋亡。随着再灌注时间的延长，凋亡细胞数目逐渐增多，12h～24h达到高峰。③凋亡细胞主要分布在梗死灶的边缘区，梗塞灶中心区和正常区无凋亡细胞。结论：神经细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤时起着重要作用。     

局灶性脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的研究

目的 探讨局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和不同时间点脑组织病理学改变及相应时间点大鼠神经功能评分的关系。方法 将成年Wistar大鼠55只，随机分为脑缺血组、假手术对照组、糖缺血再灌注组，应用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型，并采用HE染色TUNEL法检测再灌注损伤后细胞凋亡情况。电镜观察脑缺血再灌注后细胞凋亡形态的改变。结果 脑缺血再灌注0～6h神经功能缺损程度最重，随再灌注时间延长逐渐改善，24h症状又有加重，提示再灌注引起继发性脑损害。神经细胞出现坏死或凋亡与缺血程度和持续时间有关。TUNEL标记缺血1h后再灌注48h之内，皮层区细胞凋亡指数（AI）随再灌注时间的延长不断增加。结论 线栓法成功制备的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，可用于缺血再灌注神经细胞损害及脑保护的研究。缺血性神经原死亡经历凋亡和坏死两种途径，中度、重度缺血以坏死为主，轻度缺血以凋亡为主。     

针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:揭示针刺对脑缺血再灌注大鼠模型细胞凋亡的影响.方法:本实验以线栓法阻断一侧大脑中动脉造成局灶性脑缺血再灌注的动物模型,从缺血区脑细胞凋亡的变化以及针刺的干预作用等方面进行系列动态研究.结果:与假手术组、针刺治疗组相比,对照组大鼠脑梗死体积、神经元缺失明显(P＜0.01).对照组、针刺治疗组大鼠大脑皮层均存在神经元凋亡,但针刺治疗组与对照组相比,脑梗死体积明显缩小(P＜0.01),阳性神经元数目明显减少(P＜0.01).结论:针刺"百会"、"风府"及"曲池"、"足三里"可以促进受伤神经元的恢复,有较好的抗脑缺血再灌注后神经元凋亡的作用.     

电针内关对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的　观察电针内关对心肌缺血再灌注损伤心肌肌酸激酶 (creatinekinase ,CK)和内源性保护物质腺苷的影响 ,探讨电针内关对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法　Wistar雄性大鼠 5 0只 ,随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、电针内关组、电针列缺组和电针合谷组 ,结扎大鼠冠脉左前降支造成心肌缺血模型 ,检测心肌CK和腺苷 (adenosine ,Ado)含量。结果　内关穴组心肌CK含量低于模型组 (P <0 .0 5 ) ,内关组血清中Ado含量高于模型组 (P <0 .0 1 )。结论　电针内关穴减少心肌缺血再灌注损伤CK的释放 ,从而减轻心肌缺血再灌注损伤 ;促进内源性保护物质Ado的释放 ,从而在一定程度上对心肌缺血再灌注损伤心肌起到保护作用。     

实验性局灶性脑缺血再灌注Fos蛋白的表达

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注Fos蛋白表达的意义及其机制。方法　采用免疫组化法观察Fos蛋白在大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮层和基底节区的动态变化。结果　Fos蛋白在大脑中动脉阻断 1h后 ,随再灌注时间延长其分布不同。基底节区持续时间长 ,阳性细胞多 ,而皮层持续时间短 ,阳性细胞少。其中再灌注 90min ,Fos蛋白表达最显著。大脑中动脉供血中心区皮层几无表达。结论　Fos蛋白的表达与神经细胞存活密切相关 ,出现Fos蛋白表达的区域神经元易于耐受缺血性损害而存活 ,可能是神经细胞自我保护机制之一 ,Fos蛋白的表达存在扩散抑制     

Effects of Electroacupuncture of Different Intensities on Energy Metabolism of Mitochondria of Brain Cells in Rats with Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury

Objective: To observe the effects of electroacupuncture (EA) of different intensities on lactate dehydrogernase (LDH), succinate dehydrogenase (SDH) and ATPase in brain tissue of rats with cerebral ischemia-reperfusion injury (CI/R). Methods: Forty male SD rats were uniformly randomized into sham operation group (group A), CI/R group (group B), CI/R+5 mA EA (group C), CI/R+3 mA EA (group D) and CI/R+1 mA EA (group E) groups with eight rats in each group. Transient general brain ischemia was induced by four-vessel occlusion and reperfusion. The rats in group C, group D and group E were punctured and stimulated at Baihui (GV20), Mingmen (GV4) and Zusanli (ST36) with the same intermittent and rarefaction-dense wave (30 to 50 Hz) and different electric current intensities: 5 mA , 3 mA and 1 mA for 20 min after CI/R. Then the activities of Na+-K+-ATPase, SDH and LDH in mitochondria of brain tissue were measured by spectrophotometry. The ischemic cerebral cortex tissue was taken for observing the ultrastructure changes of impaired nerve cells. Results: Compared with group A, the activities of LDH, SDH and Na+-K+-ATPase were lowerer in the group B (P<0.05 or P<0.01). However, the activities of LDH, SDH and Na+-K+-ATPase were higher in the group D than those in the group B (P<0.05 or P<0.01). In group A, the anatomical structure of the cerebral cortex cells was basically normal; in group B, the neuronal cellular structures were severely damaged, the neuronal mitochondria got swelling, the mitochondrial cristae were broken, the medullated nerve fibers were not integrated. In group C, group D and group E, the ultrastructure of impaired neuron were improved. Group D was the best among three groups above. Conclusion: EA of 3 mA intensity could strengthen aerobic metabolism by elevating the activities of SDH and LDH, meanwhile maintaining the ionic equilibrium in the exterior and interior brain cell and relieving the cellular edema by reinforcing the activities of Na+-K+-ATPase.     

血栓通针对急性脑梗塞大鼠S-100b及神经功能的影响

[目的]探讨血栓通针对脑缺血损伤的保护作用。[方法]大鼠54只,随机分为假手术组、对照组、药物组,每组再分为脑缺血1d、3d、7d组,每组6只。应用线栓法建立大脑中动脉阻塞（MCAO）模型,药物组于术前3d开始注射血栓通针进行干预治疗,对照组给予等量生理盐水。采用Bederson6级5分法进行神经功能评分,免疫组化检测S-100b的表达。[结果]①神经功能评分：药物组在1d,3d,7d均低于对照组,其中7d有统计学意义（P〈0.05）。②脑组织S-100b阳性表达：药物组与对照组在各时间点阳性细胞数增多,表达强度增加,与假手术组比较有显著差异（P〈0.01）。与对照组比较,药物组阳性细胞表达强度在3d,7d较低,有统计学差异（P〈0.05）。③血清S-100b变化：对照组和药物组血清S100水平在1d、3d、7d均明显升高,与假手术组比有显著差异（P〈0.01）;药物组在各时点比对照组低（P〈0.05）。[结论]血栓通针对急性局灶性脑缺血引起的脑损伤具有一定的保护作用,其保护机制可能与抑制S-100b蛋白、抑制其神经毒性作用有关。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注过程中缺血中心区和半暗区NOS变化

目的 :了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶 (NOS)活性变化与脑缺血损伤的关系 ,探索脑缺血的治疗时间窗。方法 :用线栓法建立局灶性脑缺血模型 ,大脑中动脉阻塞 (MCAO)的时间分别为 15、30、6 0、90、12 0min ,再灌注 2 4h。用NADPH d组织化学法 ,检测局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗区和中心区NOS活性变化。结果 :半暗区NOS阳性神经元数量于 6 0min达峰值 ;中心区NOS阳性神经元数量于 30min达峰值 ,90～ 12 0min急剧减少。结论 :局灶性脑缺血再灌注过程中NOS参与脑缺血损伤 ,在中心区与半暗区NOS活性变化不一致 ,半暗区NOS达峰值时间较中心区延长。推测中心区运用NOS抑制剂最佳时机在 30min内 ,半暗区最佳时机在 6 0min内     

线栓法制备SD大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的改良研究

目的本研究的目的旨在对传统线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型方法进行改良以提高实验成功率。方法选择SD大鼠50只,对传统制备方法进行改良。改良方法包括:1)激光多普勒流量仪监测脑血流;2)将脑血流严格降低到正常15%以下;3)对侧颈总动脉夹闭;4)选择头端5 mm包被硅橡胶直径0.35 mm的尼龙线作为栓线。结果脑血流监测可准确判断插线是否成功,当栓线插到合适位置时,脑血流迅速下降至30%以下,但很少降到15%以下;对侧颈总动脉夹闭,一般可将脑血流降至正常15%以下。造模成功率88%。结论改良后方法优于传统方法,制备模型过程中,严密监测脑血流、夹闭左颈总动脉以严格控制脑血流量至正常15%以下,是提高造模成功率的关键。应用头端包被硅橡胶的丝线对血管损伤小。