复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱研究

目的 建立复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱,分辨该制剂给药后血中产生的共性的药源性成分,并对这些成分的来源作初步分析,为该制剂血清药化学研究奠定基础.方法 大鼠分组灌胃给药制备10批含药血清,高效液相色谱法建立其指纹图谱,并与相同条件下测定的体外制剂和对照品的图谱比对,对其共有峰归属进行分析.结果 标出10批含药血清色谱图除血清固有成分外的共有峰13个,其中8个为制剂原形成分,5个为代谢产物,鉴定出3个成分.结论 本研究建立的方法准确、可靠,可用于复方五仁醇胶囊血清药化学研究.     

大黄及其含药血清指纹图谱比较分析

目的:探求并优化大黄及其含药血清的指纹图谱,为在细胞体系中运用含药血清提供依据。方法 :制备大黄含药血清,进行血清蛋白沉淀,高效液相色谱法(HPLC)通过梯度洗脱获得大黄及其含药血清的指纹图谱,并对大黄及含药血清指纹图谱出峰时间的分布进行非参数检验和聚类分析。结果:甲醇作为蛋白沉淀剂处理含药血清得到的结果最好。指纹图谱出峰时间统计分析显示,出峰时间总体分布无显著性差异。结论:本实验所提供的含药血清优化处理方法及色谱条件可以作为大黄含药血清指纹图谱检测的常规方法,大黄含药血清含有大黄的主要成分,可以应用含药血清代替水煎液用于细胞体系研究。     

半夏白术天麻汤提取液的血清指纹图谱研究

目的 比较半夏白术天麻汤4种方法提取液的血清指纹图谱。方法 取大白兔，ig半仿生-生物酶提取(SBEE)液，采集不同时刻的血样，分离含药血清，用HPLC法和UV法测定，将HPLC色谱峰数目、峰总面积以及紫外吸光度平均值标准化处理，加权求和后得综合评判Y值，以Y值大者为较佳采血时刻；然后对4种方法提取液此时刻的含药血清进行指纹图谱比较。结果 给药后2 h的含药血清综合评判Y值最大；4种方法提取液2 h含药血清以SBEE液综合评判Y值最大。结论 SBEE液含药血清较水提法、醇提法、SBE法提取液含药血清中成分量高。     

基于衰老大鼠模型的银杏叶提取物血清指纹图谱研究

目的 研究银杏叶提取物用于衰老大鼠模型的血清指纹图谱,探讨其体内药效成分。方法 建立D-半乳糖致衰老大鼠模型,同时ig给予银杏叶提取物,制备衰老大鼠的含药血清,采用HPLC-UV和HPLC-ESI-MS法,分别针对黄酮类成分和内酯类成分建立指纹图谱,分析入血成分。结果 HPLC-UV指纹图谱显示了10个入血成分,大多为代谢成分;HPLC-MS指纹图谱标定了9个共有峰,其中7个为原型成分。结论 首次进行了银杏叶提取物的血清药物成分图谱研究,可反映银杏叶提取物口服给药吸收入血药物成分的变化,为其体内药效物质研究奠定基础。     

生、炒酸枣仁水提液指纹图谱对比研究

目的 分别建立生、炒酸枣仁水提液的指纹图谱,拟从整体水平表征酸枣仁炒制前后化学成分发生的变化,同时以此指导酸枣仁的炒制工艺优化。方法 采用Hypersil GOLD C₁₈色谱柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长280 nm,分别测定不同产地不同批次生、炒酸枣仁水提液的指纹图谱,利用中药指纹图谱相似度评价系统（2012A版）进行相似度比较,同时使用主成分分析方法对2种酸枣仁样品分别进行模式识别。结果 同时建立了生、炒酸枣仁的水提液指纹图谱共有模式,确定了生酸枣仁水提液样品中的10个共有峰和炒酸枣仁水提液样品中的12个共有峰,并利用模式识别方法对生、炒酸枣仁加以区分。对比标准图谱,确定在130~150 ℃的炒制温度范围内,酸枣仁炒制最佳时间为7 min。结论 采用指纹图谱结合模式识别的方式能够有效区分生、炒酸枣仁水提液样品,同时为酸枣仁的质量评价与炮制工艺优化提供参考。      

河北道地药材酸枣仁HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的建立河北道地药材酸枣仁的HPLC-ELSD指纹图谱,为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法收集不同产地酸枣仁药材21批,采用HPLC-ELSD法测定其指纹图谱。色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD检测器,体积流量1.0mL/min,柱温35℃。结果建立了道地酸枣仁药材HPLC-ELSD指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。结论方法简便、可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。     

茵陈蒿汤血清药化学研究?

目的采用血清药化学方法对茵陈蒿汤(YCHD)的入血成分进行分析。方法以SD大鼠为供体,灌胃给药制备YCHD及各缺味方、单味药含药血清,建立含药血清HPLC指纹图谱。与空白血清指纹图谱比对,指认含药血清中的药源性成分;与各缺味方、单味药含药血清比对,分析各药源性成分来源;与体外指纹图谱、对照品指纹图谱色谱峰保留时间及紫外吸收光谱图指纹图谱比对,对各药源性成分进行鉴别。结果 YCHD含药血清中检测到23个药源性成分,其中6个为体外原形成分,17个为体内代谢产物。6个原形成分分别为来源于栀子的京尼平苷酸、栀子苷、西红花酸类成分,来源于大黄的大黄酸及蒽醌类成分。17个代谢产物中的1个为环烯醚萜类成分代谢产物,7个为蒽醌类成分代谢产物,9个为西红花酸类成分代谢产物。结论 YCHD含药血清中的药源性成分主要为来源于大黄的蒽醌类成分、来源于栀子的环烯醚萜类成分和西红花酸类成分及以上成分的代谢产物,这些药源性成分可能构成了该方保肝作用的药效物质基础。     

大黄附子汤血清药物化学初步研究

目的 对大黄附子汤进行血清药物化学初步研究,通过分析入血成分探讨该复方发挥药效的物质基础。方法 采用血清药物化学的研究方法,同时建立大黄附子汤及大鼠ig给予大黄附子汤后血清HPLC指纹图谱,通过分析比较分别给予大黄附子汤、单味生药所得血清样品,初步鉴定大黄附子汤在大鼠血清中的移行成分。结果 大鼠ig给予大黄附子汤后,血清中发现18个入血成分,其中14个为代谢产物;4个为原型成分。结论 大黄附子汤入血成分主要来自大黄和附子,复方血清药物化学研究为深入阐述大黄附子汤药效物质基础提供依据。     

复方五仁醇胶囊含药血清药源性成分分析

目的:分析大鼠服复方五仁醇胶囊后血清中的药源性成分。方法:以已经建立的高效液相色谱指纹图谱分析方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清色谱图和空白血清色谱图,分辨该制剂给药后血清中产生的药源性成分,并通过对照品比对部分成分进行鉴定。结果:灌胃给药后血清中产生药源性成分13个,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素,其余5个为代谢产物。结论:复方五仁醇胶囊体内直接作用物质很可能出自血清中的13个药源性成分,结合血清药理学对其作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。     

小柴胡汤含药血清诱导SSMC-7721人肝癌细胞株分化研究

目的：观察小柴胡汤含药血清对SMMC-7721人肝癌细胞是否具有分化诱导作用,并探讨其分化诱导的作用机制。方法：经药物作用后,观察细胞形态、MTT抑制率、乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、细胞周期的情况。结果：小柴胡汤含药血清使SSMC-7721细胞株有向成熟细胞形态分化的趋势;MTT抑制作用增强;细胞内LDH活性降低、SDH活性上升;流式测定S期细胞数减少,细胞周期阻滞于G0/G1期。其中以低剂量组效果最为显著（P〈0.05）。结论：小柴胡汤含药血清可诱导SSMC-7721细胞株向成熟细胞分化,其作用机制可能与降低细胞内LDH活性、升高SDH活性,并且将细胞阻滞于G0/G1期有关。     

理中丸含药血清对Cajal间质细胞的影响

[目的]探讨理中丸对Cajal间质细胞的作用。[方法]通过体外培养及血清药理学的方法,观察理中丸含药血清对Cajal间质细胞(ICC)Ca2+-ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响。[结果]理中丸含药血清能明显提高ICC细胞Ca2+-ATP酶活力(P0.01),使ICC细胞外Ca2+浓度提高(P0.01);并在明显提高ICC细胞内SDH活力的同时(P0.01),降低ICC细胞内LDH活力(P0.01)。[结论]理中丸含药血清能提高ICC细胞Ca2+-ATP酶活力,同时还能增强ICC细胞内的有氧代谢,抑制细胞内的无氧代谢。     

清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒抑制作用的实验研究

目的研究清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞的抑制作用。方法用不同剂量的清肺口服液制成含药血清处理呼吸道合胞病毒感染后的Hep-2细胞,用组织细胞培养法,采用细胞病变(CPE)观察和四氮唑盐还原法(MTT法)检测清肺口服液含药血清对RSV感染细胞的增殖抑制作用。结果在Hep-2细胞上,清肺口服液的最大无毒浓度为1∶9。100TCID50RSV攻击后Hep-2细胞的OD值明显降低,加入中高剂量含药血清后OD值升高。结论清肺口服液含药血清对RSV有抑制作用。      

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

目的：观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法：经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药含药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果：MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异（P〈0．01）,而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤含药血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF—β3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论：龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48h、72h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。     

六神曲质量标准研究

目的：建立六神曲的质量标准。方法：通过全国六神曲处方组成、药物剂量配比、发酵工艺和成品质量研究进行分析。结果：各地标准六神曲药物组成、剂量配比出入较大,发酵工艺不尽相同,成品的质量控制仅凭感官判断,质量较难控制。结论：制定统一的国家标准,确保六神曲临床疗效。     

酸枣仁汤处方的配比研究

目的：对酸枣仁汤的拆方进行研究。方法：采用均匀设计的方法,以旷野法的自发活动次数为指标对酸枣仁汤的拆方进行研究。结果：方中除酸枣仁外,四味药对自发活动次数影响贡献大小依次为：茯苓,川芎,知母,甘草。选择了酸枣仁汤的最优化配方比为酸枣仁：甘草：知母：茯苓：川芎（12：1：2：10：2）。实验值与理论预测值相近。结论：此配比与传统中药方解较为一致,配比可行。为本方的药理研究和临床应用提供剂量依据。     

痰瘀证的血清蛋白质指纹图谱的临床研究

[目的]分析痰瘀证患者血清蛋白质指纹图谱,探讨痰瘀证患者血清多肽蛋白表达的差异性。[方法]应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)及弱阳离子交换蛋白质芯片(weak cationic exchanger protein chip)技术检测14例痰瘀证患者和16例性别、年龄匹配的正常对照组血清,获得血清蛋白质指纹图谱。[结果]痰瘀证组与正常对照组之间检测到18种差异蛋白(P0.05)。[结论]痰瘀证患者血清中存在一些差异表达蛋白质。     

甘草药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立甘草药材HPLC指纹图谱,并尝试将其应用到质量评价中。方法:采用RP-HPLC(DAD)法,用Agilent Extend-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)和Extend-C18保护柱(20 mm×4.6 mm,5μm)。以乙腈(A)-0.026%磷酸水溶液(B)为流动相。采用梯度洗脱:0~20 min,A为20%~25%;20~30 min,A为25%~33%;30~55 min,A为33%~50%;55~65 min,A为50%~60%;65~80 min,A为60%。检测波长为280 nm。结果:对29批甘草药材进行测定,标定了29个共有峰,且样品基本上被分成了三类。结论:建立了高效液相指纹图谱(RP-HPLC),能有效地体现出中药成分的复杂性;对29批甘草药材进行的相似度评价,反应出一定的差异性,推测这三类甘草的差异可能为种的不同所致。     

补中益气汤含药血清干扰A549/DDP生长作用的实验研究

目的从细胞水平探讨补中益气汤含药血清改善A549/DDP耐药作用并选择最佳含药血清的浓度。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备高、中、低剂量补中益气汤的含药血清,分别以5%和10%的浓度作用于人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP 48 h,观察补中益气汤含药血清对A549/DDP生长的影响并通过MTT法检测各组细胞的抑制率,以此筛选出最佳含药血清浓度,计算出最佳浓度含药血清对A59/DDP的耐药逆转倍数。结果补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞有明显抑制作用,且呈浓度依赖关系。5%高剂量组对A549/DDP的抑制率高于5%中剂量组和5%低剂量组,并与5%空白血清组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。10%各剂量组对A549/DDP的抑制率与10%空白血清组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。经筛选,10%中剂量含药血清作用48 h为最佳干扰浓度,在此浓度下,A549/DDP对顺铂的IC50明显下降（P〈0.05）,对A549/DDP细胞的逆转倍数为2.46。结论 10%中剂量含药血清干扰48 h可作为后期药物实验的含药血清加药浓度及观察时间筛选的实验依据,补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP的耐顺铂作用。     

鱼腥草药材挥发油的指纹对照法研究

目的：建立鱼腥草药材中挥发油成分的指纹图谱,对各产地药材实现定性定量地评价,并对挥发油中主要成分进行鉴别。方法：采用气相色谱-氢离子火焰检测（GC-FID）技术测定不同产地的13批鱼腥草药材挥发油成分GC指纹图谱。以甲基正壬酮为对照品,以内标法估算各产地药材中各成分的相对含量,以夹角余弦和相对欧氏距离为参考指标进行评价;利用气相色谱-质谱-计算机检索技术（GC-MS-DS）对各色谱峰进行鉴别。结果：建立的鱼腥草药材挥发油成分指纹图谱确立23个共有峰,方法学考查显示各特征指纹峰保留相对稳定,经考察甲基正壬酮在6．6-660μg／ml内线性关系良好,经空白回收率校正后加样回收率为93．46％（n=6）。经鉴定识别其中24种主要成分。结论：建立的鱼腥草药材挥发油成分指纹图谱重复性好,综合了指纹对照法、定性和定量相似度,能更好地评价鱼腥草药材的质量。