HPLC-MS/MS法测定超声提取刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量

目的:建立一个高效液相-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶含量的方法。方法:建立HPLC-MS/MS方法,进行色谱和质谱方法的考察,得到最优的分析条件,即流动相为乙腈-0.05%的甲酸溶液(20∶80,V/V),流速为0.5 ml/min。采用电喷雾离子源(ESI)进行电离,多离子反应监测(MRM)模式进行信号采集,采用外标法进行定量;采用HPLC-MS/MS方法同时测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量。结果:刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.7~30 000 ng/ml、0.4~10 000 ng/ml和0.3~16 000 ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r0.999 7),检出限(LOD)分别为0.17 ng/ml、0.12 ng/ml和0.09 ng/ml,定量限(LOQ)分别为0.7 ng/ml、0.4 ng/ml和0.3 ng/ml,不同浓度下的平均加标回收率为98.10%、98.19%和98.21%;在最优提取条件下刺五加果实中刺五加苷B的含量为(1.935 0±0.001 5)mg/g,刺五加苷E的含量为(0.273 0±0.003 5)mg/g,异嗪皮啶的含量为(0.013 0±0.001 2)mg/g。结论:HPLC-MS/MS法灵敏度高、选择性好、分析时间短,可对刺五加果实中刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶进行准确的定量分析。     

刺五加颗粒质量标准研究

目的：建立刺五加颗粒的质量标准。方法：采用TLC法对刺五加进行定性鉴别;采用HPLC法测定样品中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的含量。色谱柱为Welchrom C18（4.6 mm×200 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长为220 nm。结果：薄层定性鉴别斑点清晰,分离效果良好,具有较好的专属性。紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.08~3.20、0.08~3.20、0.019~0.76μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998,0.9999,0.9999）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均〈3%;平均加样回收率分别为99.13%、98.77%和98.92%,RSD分别为2.46%、2.52%和2.67%（n=6）。结论：本方法所用定性与定量方法简便,专属性强,结果准确可靠,可作为刺五加颗粒的质量控制标准。     

刺五加提取物中五加苷B、E含量的RP-HPLC测定方法的改进

刺五加提取物是从五加科植物刺五加 Acan-thopanax senticosus( Rupr.et Maxim.) Harms的干燥根及根茎中提取的有效成分经喷雾干燥而得 ,其中主要含有各种苷类如五加苷 B,E(又分别称为丁香苷和紫丁香树脂苷 )及多种木脂素类、异秦皮啶和黄酮类成分 [1] 。关于五加苷 B的测定已有文献报道 [1～ 3 ] ,笔者也曾采用 RP- HPLC法对五加苷 B,E的含量进行了测定 ,但有些样品中五加苷 B存在分离不完全的情况 [4]。为了准确地测定刺五加提取物中五加苷 B、E的含量 ,我们对该方法进行了改进和研究 ,采用梯度方法对五加苷 B、E的含量进行了测定…     

刺五加颗粒质量标准研究

目的:建立刺五加颗粒的质量标准。方法:采用TLC法对刺五加进行定性鉴别;采用HPLC法测定样品中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的含量。色谱柱为Welchrom C18(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长为220 nm。结果:薄层定性鉴别斑点清晰,分离效果良好,具有较好的专属性。紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.08~3.20、0.08~3.20、0.019~0.76μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998,0.9999,0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均3%;平均加样回收率分别为99.13%、98.77%和98.92%,RSD分别为2.46%、2.52%和2.67%(n=6)。结论:本方法所用定性与定量方法简便,专属性强,结果准确可靠,可作为刺五加颗粒的质量控制标准。     

RP-HPLC法测定糙叶五加不同部位中刺五加苷B和E

目的 建立同时测定糙叶五加不同部位中的刺五加苷B和刺五加苷E的方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Lichrom C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）柱,柱温35 ℃,0.1%磷酸水溶液-乙睛梯度洗脱（0→15 min,90∶10;15→30 min,90∶10→84∶16）,检测波长为220 nm,体积流量1.0 mL/min。结果 刺五加苷B的线性范围为14.4～72.0 μg/mL（r＝0.999 9）,平均回收率为98.97%;刺五加苷E的线性范围37.4～187.0 μg/mL（r＝0.999 7）,平均回收率为99.13%。糙叶五加根、茎、叶中刺五加苷B的质量分数分别为：0.463 4、2.452 4、0.016 5 mg/g（n＝3）;刺五加苷E的质量分数分别为0.143 9、1.375 4、0.187 7 mg/g（n＝3）。结论 该方法简便快速,结果准确可靠。     

高效液相色谱测定不同产地刺五加中刺五加苷B含量

目的测定并比较不同产地的刺五加中刺五加苷B含量。方法回流提取刺五加苷B;色谱柱:Kromasil ODS柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.1%磷酸水溶液-乙睛(0→25min,90:10→80:20);流速为0.8mL/min;检测波长:220nm。结果刺五加苷B的线性范围为2.76～43.92μg/mL(r=0.9998);平均回收率为97.85%,RSD为1.91%。结论本方法操作简便,结果可靠,重复性好,可作为刺五加及其制剂的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定肿节风野生与栽培品中异嗪皮啶的含量

目的:建立野生与栽培肿节风不同部位异嗪皮啶含量的测定方法,分析比较肿节风不同部位中异嗪皮啶含量的差异.方法:采用HPLC法,phenomenexC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,4 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(25∶75);流速:1.0 mL/min,柱温:30 ℃,检测波长为344 nm,进样量10 μL.结果:野生肿节风根、茎、叶中异嗪皮啶的平均含量分别为0.059%,0.042%,0.137%,栽培肿节风根、茎、叶中异嗪皮啶的平均含量分别为0.054%,0.041%,0.066%.结论:肿节风叶中异嗪皮啶含量最高,根中次之,茎中最少,栽培品根、茎、叶3个部位中异嗪皮啶含量均高于中国药典标准.     

HPLC法测定万通炎康片中异嗪皮啶的含量

目的建立高效液相色谱法测定万通炎康片中异嗪皮啶含量的方法。方法色谱柱Hypersil C18柱（5μm,250 mm×4.0 mm）,以乙腈-0.1%磷酸（20∶80）为流动相,检测波长为342 nm。结果异嗪皮啶在0.062～0.558μg范围内具有良好的线性关系,回归方程为：Y=2774.2X-15.91（r=0.99992）,平均回收率为97.35%（RSD=1.42%）。结论本法操作简单、快速,且准确、重现性好,可用于万通炎康片中异嗪皮啶的含量测定。     

HPLC法测定红毛五加中刺五加苷E

目的 建立红毛五加药材中刺五加苷E的测定方法。方法 采用Hypersil ODS2色谱柱;流动相：乙腈-0.3%磷酸二氢钠水溶液梯度洗脱系统(磷酸调节pH值为3.5);体积流量：1.0 mL/min;柱温：35 ℃;检测波长为207 nm。结果 刺五加苷E的线性范围为0.142～1.133 μg,平均回收率为101.73%,RSD小于2%。结论 该方法简便、准确、重现性好,可为红毛五加的质量控制提供参考。     

高效液相色谱法测定五加通络胶囊中异嗪皮啶的含量

目的建立高效液相色谱法测定五加通络胶囊中异嗪皮啶含量的方法。方法采用Diamonsil C18(5μm,250mm×4.6mm),以乙腈-0.1%磷酸(20∶80)为流动相,检测波长343nm,流速1.0mL/min。结果:异嗪皮啶在0.0206-0.1648μg(r=0.9999,n=5)范围内线性关系良好。平均加样回收率为99.89%(RSD=1.99%)。结论本方法操作简便、可靠,结果准确、灵敏度高,重复性好,适合于五加通络胶囊中异嗪皮啶含量控制。     

反相高效液相色谱法测定刺五加药材中异嗪皮啶含量

目的:测定刺五加药材中异嗪皮啶的含量.方法:应用RT-HPLC法,检测波长为343nm,流动相为乙腈一磷酸水(35:65)系统.结果:异嗪皮啶含量在0.40～2.00 μg范国内,峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.9999),RSD为2.3%(n=5).结论:该法可以反映刺五加药材中异嗪皮啶的质量,重现性好,具有实用性.     

刺五加总苷自微乳制备工艺的研究

目的研究刺五加总苷自微乳的制备工艺和检测方法。方法考察了刺五加总苷在不同油、乳化剂、助乳化剂中的平衡溶解度,通过伪三元相图的绘制、含药自微乳释药系统自微乳化效率和稳定性考察,确定最佳处方;以刺五加中异嗪皮啶为指标,采用HPLC法测定其在微乳中的量。结果自微乳最佳处方:C af-丙二醇-亚油酸乙酯的比例为16∶4∶5;微乳的平均粒径为40 nm,异嗪皮啶的平均质量浓度为92.6μg/mL。结论刺五加微乳粒径小,稳定性好。以异嗪皮啶为质量控制指标,方法准确可行。     

不同炮制方法对熟地黄中7种化学成分含量的影响

目的通过建立熟地黄中梓醇、益母草苷、地黄苷A、地黄苷D、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和5-羟甲基糠醛（5-HMF）7种化学成分同时分析的方法,测定清蒸熟地黄、酒炖熟地黄、九蒸九晒熟地黄3种不同炮制品中7种化学成分的含量,探讨不同炮制方法对熟地黄中化学成分的影响。方法采用超声提取法处理熟地黄3种不同炮制品,赛默飞C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相:0.1%磷酸（A）-乙腈（B）,梯度洗脱,程序为:0~8 min,1% B;8~9 min,1%~4% B;9~25 min,4% B;25~35 min,4%~20% B;35~50 min,20% B;50~50.01 min,20%~1% B;50.01~55 min,1% B。柱温:30℃,检测波长:203 nm、332 nm,测定3种样品中7种化学成分的含量。结果生地黄中未检出5-HMF。清蒸熟地黄和酒炖熟地黄中,环烯醚萜单糖苷梓醇和益母草苷几乎全部降解;环烯醚萜双糖苷地黄苷A、地黄苷D和苯丙素苷毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量较生地黄中含量降低;可以检测到5-HMF。九蒸九晒熟地黄中环烯醚萜单糖苷梓醇和益母草苷、环烯醚萜双糖苷地黄苷A、地黄苷D和苯丙素苷毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷几乎全部降解;可以检测到5-HMF。结论不同炮制方法对熟地黄成分的影响较大,该方法可用于熟地黄不同炮制品的质量控制。     

大孔吸附树脂富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷的研究

目的富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷。方法以紫丁香苷和刺五加总苷为指标,考察D-101大孔吸附树脂分离纯化紫丁香苷和刺五加总苷的最佳吸附及洗脱条件。结果富集紫丁香苷和刺五加总苷的工艺为样品溶液(0.2g药材/mL,)以1mL/min的上柱速度上柱,最大上样量为1g药材/g树脂,弃去水洗脱液,收集5BV75%乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得。经D-101大孔吸附树脂处理后紫丁香苷和刺五加总苷提取率可达89%以上,终产品中刺五加总苷质量分数可达14%以上。结论本方法适合于刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷的富集。     

HPLC法测定周氏方黄酮部位异槲皮苷和黄芩苷的含量

目的定量分析周氏克金岩方（周氏方）中黄酮部位异槲皮苷和黄芩苷的含量,为制订周氏方质量标准提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为PlatisilODS色谱柱（250minx4．6mm,5μm）,柱温30℃,流速1．0mL／min。流动相为乙腈-0．1％醋酸水溶液,梯度洗脱,检测波长为270nm。结果异槲皮苷和黄芩苷线性范围分别为0．536～4．020μg（r=0．9990）、0．285～2．850μg（r=0．9999）;平均加样回收率分别为100．92％和101．97％（n=6）。周氏方黄酮部位中异槲皮苷和黄芩苷的平均含量分别是1．13％和0．25％。结论本方法简便易行,结果准确可靠,适用于周氏方有效部位异槲皮苷和黄芩苷的含量测定及质量控制。     

刺五加提取物中紫丁香苷、紫丁香树脂苷的HPLC测定法

以Ｃ１８柱,甲醇－水（２８：７２）为流动相,在２７０ｎｍ检测波长下,建立了刺五加提取物中紫丁香苷（简称苷Ｂ）、紫丁香树脂苷（简称苷Ｅ）的反相高效液相色谱同时测定方法。访方法快速、准确、灵敏。方法回收率苷Ｂ为９７．３％、ＲＳＤ１．９５％;苷Ｅ为９６．８％,ＲＳＤ１．５０％。     

正交试验优选刺五加有效成分微波提取工艺

目的以紫丁香苷质量分数为指标,研究刺五加有效成分的微波提取工艺。方法采用高效液相色谱法测定刺五加中紫丁香苷的含量,采用正交试验法考察乙醇体积分数、微波功率、提取时间及料液比对提取工艺的影响,并优选提取工艺条件。结果提取工艺为乙醇体积分数75%,微波功率500 W,提取时间20 min,料液比为1∶15(g∶mL)。结论刺五加微波提取工艺周期短,以紫丁香苷为代表的有效成分提取效率高,对于刺五加中重要活性成分紫丁香苷的研究与开发具有一定的实用价值。     

杏花药材质量控制

目的 建立杏花药材的质量控制方法。方法 以绿原酸、芦丁为对照品,建立薄层色谱以鉴别药材。采用紫外波长转换检测的高效液相色谱法同时测定药材中阿魏酸、芦丁及异槲皮苷的含量,色谱柱为YMC-Pack ODS-A C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（125∶105∶770）;阿魏酸的检测波长为322 nm（0～25 min）,芦丁与异槲皮苷的检测波长为255 nm（25～70 min）;流速：1.0 mL/min;柱温：30 ℃。结果 薄层色谱中斑点清晰;阿魏酸、芦丁及异槲皮苷分别在1.452 2～14.521 7 μg/mL（r=0.998 9）、27.366 7～273.666 8 μg/mL（r=0.997 2）、1.649 9～16.499 0 μg/mL（r=0.999 6）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.86%、99.70%、100.03%;RSD分别为0.9%、0.8%、1.2%。结论 所用方法准确、稳定、可行,可用于杏花药材的质量控制。     

RP-HPLC法测定新疆不同产地药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量

目的 考察新疆不同产地、不同采摘时间药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量变化.方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),以大连依利特 Hypersil ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,进样量20 μl,流动相为乙腈(A)-水(B)-0.2%磷酸溶液(pH=4.8)(C),梯度洗脱[0 min,A-C(18:82);4 min,A-C(21:79);10 min,A-C(8:92)],流速1.0 ml/min,检测波长为358 nm,柱温为25℃.结果 不同产地、不同采摘时间的药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量均有一定的差异,喀什地区、5～6月份二者含量较高.结论 药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量与产地和采摘季节等有关,尤其以季节的影响大.     

梯度洗脱反相HPLC法测定刺薏胶囊中紫丁香苷含量

目的：建立测定刺薏胶囊中紫丁香苷含量的高效液相色谱法,并进行方法学考察。方法：采用梯度洗脱法,用ZORBAXSB-C18（5μm,4.6mm×150mm）色谱柱,以甲醇为流动相A,水为流动相B,以1.0ml/min的流速进行梯度洗脱（0～20min,A为18%;20～30min,A为18%～70%;30～35min,A从70%～18%）;检测波长265nm。结果：紫丁香苷进样量在0.0808～0.404μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为98.2%,RSD为1.75%。结论：梯度洗脱反相HPLC法测定刺薏胶囊中紫丁香苷含量的方法专属性强、准确稳定、重复性好,可用于刺薏胶囊的质量监控。