广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者的基因型研究

目的扩增HBV DNA S基因,建立HBV DNA的分型方法,研究广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者(AsC)的基因型. 方法利用PCR-RFLP基因分型方法,扩增HBV DNA S基因,以限制性内切酶AvaII、MboI酶切分型. 结果 60份AsC血清样本,B型37份(62.7%),C型20份(33.3%),B、C混合型2份(3.3%),未分型1份(1.7%),经序列分析证明为C型,C型共35%. 结论 PCR-RELP分型方法经济实用,分型率达98.3%,广州地区小儿乙肝病毒的基因型以B型和C型为主,其中携带者中B型占优势.     

广州地区小儿乙肝无症状携带者及其父母的HBV DNA基因型研究

目的扩增HBV DNA S基因,建立 HBV DNA的分型方法,研究家庭中小儿乙肝无症状携带者与其父母的基因型.方法利用PCR-RFLP基因分型方法,扩增HBV DNA S基因,以限制性内切酶AvaⅡ,MboⅠ酶切分型;结果 12个家庭共27例乙肝无症状携带者血清,其中两个家庭儿童与父母的基因型相同,均为B型;9个家庭儿童与母亲的基因型相同(7个B型,2个C型),父亲HBV DNA阴性;1个家庭儿童与母亲为B型,父亲为C型,结论本文利用的分型方法经济实用,分型率高,广州地区的基因型以B型,HBV DNA的传播具有家庭聚集性特点及母婴传播的特点.     

采用PCR微板核酸杂交-ELISA技术进行HBV DNA基因分型的研究

目的 采用PCR微板核酸杂交－ELISA技术对HBV DNA进行基因分型研究。方法 采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术,首先将HBV DNA进行PCR扩增,并将扩增产物加入预先包被HBV通用探针的微孔板,再加入HBV各基因型显色探针,同时进行微板核酸夹心杂交－ELISA显色,对152例临床诊断为不同程度乙型肝炎患者血清中HBV DNA进行基因分型。结果 152例不同临床表面的肝炎患得血清中的HBV DNA的基因型大多集中在B、C和D这3种基因型,其所占比例分别为：B型28．29％（43／152）,C型（37．50％（57／152）、D硎型18．42％（28／152）;A型、E型、F占比例很少,各占有3．29％（5／152）。还存在一定比例的混合基因型,B、C、D三型不同组合的混合型共占10．53％（16／152）。结论 PCR微板核酸杂交－ELISA方法可以准确、快速、简便进行HBV基因分型,在探讨HBV的流行病学及观察各基因型毒力强弱及致病性大小方面有重要意义。     

增城与广州地区乙型肝炎病毒基因分型比较研究

目的 增城地区与广州地区的乙型肝炎病毒基因型的差异性比较．方法 利用荧光PCR法对HBV携带者进行基因分型。结果 增城地区B型占87．0％，C型占11．6％，BC混合型占1．4％，没有发现D型；广州地区B型占48．9％，C型占43．7％，BC混合型占6．5％，D型占0．9％。结论 增城与广州HBV DNA基因分型存在一定差异。     

特异性引物聚合酶链反应乙型肝炎病毒基因分型法的建立及应用

目的应用型特异性引物聚合酶链反应法（PCR）进行乙型肝炎病毒基因分型并分析该法的可靠性。方法应用型特异性引物PCR和INNO-LiPA分别对深圳、长春、北京152份HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者的血清标本进行了基因型分型，对该两种分型法不一致的血清标本再进行S区基因测序分型，以确定该两法的可靠性。结果型特异性引物PCR和INNO-LiPA的总符合率为86．8％（132／152），不一致率为13．2％（20／152）。型特异性引物PCR检测到81份（53．3％）B型；58份（38．2％）C型；13份（8．5％）B＋C型混合感染，未检出其他基因型或混合感染的基因型。INNO-LiPA检测到74份（48．7％）B型；61份（40．1％）C型；5份（3．3％）B＋C型混合感染；另检出3份（2．0％）A＋B型混合感染；1份（0．7％）B＋E型混合感染；1份（0．7％）C型与D型，1份（0．7％）D型感染，3份（2．0％）B／C／D型及3份未能分型。20份两法分型不一致的标本中，6份无剩余血清，对其余14份进行了S区基因测序分型，结果型特异性引物PCR与S区基因测序分型法的符合率为71．4％（10／14），而INNO-LiPA与S区测序法的符合率仅为7．1％（1／14），前者明显高于后者（P〈0．05）。结论型特异性引物PCR和INNO-LiPA均可鉴定HBV基因型，但前者较为简便和可靠，且费用较低，可用于临床标本的检测和流行病学调查。     

成都地区HBV基因型分布研究

目的 调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情况。方法 以长片段高保真聚合酶链反应（LA—PCR）扩增乙肝病毒S基因区，结合双脱氧链末端终止法（Sanger）测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型；同时与常用的基因型特异引物扩增分型法获得的分型结果进行比较，做重复试验以证实所用方法的可靠性和准确性。结果 S基因直接测序法检测成都地区人群HBV基因分型结果为B基因型57例（63．3％）、C型30例（33．3％），D型3例（3．3％），无其他基因型和混合型；基因型特异引物分型法除检出23例（25．5％）混合基因型外，其他各例结果均与S基因测序法吻合。结论 成都地区HBV优势基因犁以B型为主，C型次之，偶见D型。S基因直接测序法能准确鉴定HBV基因型，并较好地反映HBV基因组变化的准种特征，总体上优于型特异引物分型法，此结论具有统计学意义（P〈0．001）。     

北京地区HBV基因型的分布及其与临床表现关系的初步研究

目的 了解北京地区乙肝患者HBV基因型的分布及其与临床表现的关系.方法 从1148份血清中筛选出HBsAg阳性血清200份.利用巢式PCR法扩增血清中HBV DNA S基因进行测序并分型;统计分析基因型分布及与临床表现的关系.结果 北京HBV有B、C、D三个基因型,其中B基因型17例(12.5％),c基因型116例(85.2％),D基因型3例(0.02％);在携带者,慢乙肝患者,肝硬化,肝癌中,B型呈逐步下降C型呈逐步上升的趋势.结论 C型与严重肝脏疾病的发生有关,感染B型HBV的患者比感染C型HBV的患者的临床预后要好,对抗病毒治疗的应答较好.     

乙型肝炎病毒基因分型方法的建立及应用

目的　扩增病毒S基因区,建立基因分型方法。方法　利用基因库软件及PCR和限制性片段长度多态性分析技术RFLP,用慢性无症状携带者的血清,扩增病毒S基因,建立新的分型方法。用此方法对我国部分地区慢性无症状携带者(AsC)及慢性乙型肝炎、肝硬化的HBVDNA进行了调查。对广州、重庆、北京、沈阳等地区慢性无症状携带者的HBVDNA进行分型。结果　广州,B型328%、C型427%、BC混合型230%、其他16%;重庆,B型350%、C型400%、BC混合型250%;北京,B型250%、C型500%、BC混合型250%;沈阳,B型111%、C型889%。结论　新的基因分型方法,简化了传统的基因序列分型法,结果可靠,操作相对简便。我国HBVDNA的基因型以C型和B型为主。广州地区慢性乙型肝炎和肝硬化患者的HBV基因型,肝硬化患者以C和B混合型为主,占500%,HBVDNA毒株的混合感染,有可能加重肝组织的损伤。     

沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分子流行病学研究

目的 研究沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分布和特点。方法 应用半巢式聚合酶链反应（PCR）扩增乙型肝炎病毒P基因，将PCR产物应用ABI377自动测序仪直接做核苷酸序列分析，并用DNA STAR软件进行种系发生分析及基因型鉴定。结果 HBV DNA标准株P基因片段可进行基因分型。在沈阳地区慢性HBV感染者中可检出基因型B、C和D，检出率分别为22％、50％和28％，基因型C分布与基因型B、D的差异有统计学意义，在慢性乙型肝炎患者和慢性HBV携带者间各基因型间分布比较中差异无统计学意义。结论 通过测定HBV DNAP基因序列片段可进行HBV DNA基因分型。沈阳地区乙型肝炎病毒基因型有基因型B、C和D型，其中基因型C为优势基因型。     

慢性乙型肝炎患者病毒基因型分布及与临床关系

目的了解邯郸市乙肝病毒基因型分布情况，并探讨其与临床的关系。方法采用PCR—RFLP方法对邯郸108份HBV感染者的血清进行基因型分型，并结合转氨酶和HBV—DNA结果，分析乙肝病毒基因型的临床意义。结果邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主，占93．5％，B基因型占6、5％。不同性别感染基因型差异无统计学意义。肝生化指标ALT、AST、TB比较提示c基因型患者的肝脏炎症似乎比B型患者重，但差异无统计学意义。C基因型的患者血清HBeAg阳性率高于B基因型。C基因型的患者血清HBV—DNA略高于B基因型，但无统计学差异。结论邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主。C基因型患者血清HBeAg阳性率高于B基因型，C基因型患者与B基因型相比肝脏炎症较重，HBV—DNA略高，但差异无统计学意义。     

反向点杂交法检测湘潭地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究

目的了解湘潭地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价。方法用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析。结果HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100％,湘潭地区HBV各种基因型分布比例：B型占74．74％。C型占11．58％,B、C型混合感染占13．68％。无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBVB型和C型感染率存在显著性差异。其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组。结论HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值。湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点。     

应用扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测HBV基因型

目的建立扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型方法,并对慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV基因型进行分析。方法通过对HBV全基因组序列比对分析,设计ARMS特异性引物和探针体系,建立检测HBVB和C基因型方法,对50例临床标本进行检测。结果50例临床样本中,B型的检出率为26％（13例）,C型为74％（37例）,其实验结果与测序结果完全一致。常州及周边地区乙型肝炎病毒C基因型HBV为优势株。C基因型患者A1762T／G1764A突变率为62％,明显高于B型。结论ARMS检测HBV基因型,快速、准确;常州及周边地区HBV基因型主要为B、C型,且C型携带A1762T／G1764A双突变率较高,与较为严重的肝病相关。     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义.结果 2922例HBV感染者中,B、C、B/C、D基因型分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%,未发现其他基因型.北方地区C基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主.B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P<0.001);C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高(P=0.023);B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较C基因型高(P=0.038);C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义(P值分别为0.016).结论 中国HBV基因型以B、C基因型为主,仅少量的B/C和D基因型.北方地区以C基因型为主,南方地区C基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主.C基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBV DNA载量低,病情较重.     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义.结果 2922例HBV感染者中,B、C、B/C、D基因型分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%,未发现其他基因型.北方地区C基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主.B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P<0.001);C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高(P=0.023);B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较C基因型高(P=0.038);C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义(P值分别为0.016).结论 中国HBV基因型以B、C基因型为主,仅少量的B/C和D基因型.北方地区以C基因型为主,南方地区C基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主.C基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBV DNA载量低,病情较重.     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义。方法应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义。结果2922例HBV感染者中,B、C、B／C、D基因型分别占15．9％、83．5％、0．41％、0．21％,未发现其他基因型。北方地区c基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以c基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。B基因型较c基因型HBV感染者平均年龄小（P〈0．001）;C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高（P=0．023）;B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较c基因型高（P=0．038）;C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义（P值分别为0．016）。结论中国HBV基因型以B、c基因型为主,仅少量的B／C和D基因型。北方地区以c基因型为主,南方地区c基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主。c基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBVDNA载量低,病情较重。     

High prevalence of mixed genotype infections in hepatitis B virus infected intravenous drug users

The clinical relevance of hepatitis B virus (HBV) genotypes has been documented; however, the prevalence of mixed HBV genotype infections in at-risk groups remains controversial. The HBV genotypes were determined in 325 HBV-infected intravenous drug users (IVDU) who were at a greater risk of multiple exposures to different HBV genotypes by using a newly developed line probe assay. The distribution of HBV genotype was as follows: genotype A alone in 2 (0.6%); genotype B alone in 256 (78.8%); genotype C alone in 10 (3.1%); mixed genotype A and B in 18 (5.5%); genotype B and C in 30 (9.2%); genotype B and D in 1 (0.3%); genotype A and C in 1 (0.3%); and mixed infections of genotype A, B, and C in 3 (0.9%). Clonal analysis confirmed further the existence of mixed genotype infection and recombination between different genotypes. Compared with our previous data, the line probe assay seemed more sensitive than polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism (RFLP) assay in identifying HBV genotype (98.8% vs. 65.0%) and detecting mixed genotype infections (16.3% vs. 0%). In conclusion, the prevalence of mixed HBV infections is substantially higher in IVDU in endemic areas, and the line probe assay is a useful method for rapid genotyping of HBV, with particular reference to the detection of mixed genotype infections.     

HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨

目的探讨HBV基因型与HBV-DNA水平及血清标志物的相关性。方法选择125例乙肝患者血清HBV-DNA复制阳性的标本分别检测HBV病毒基因分型、HBV-DNA、乙肝血清标志物、谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TBL）。结果 125例HBV-DNA复制阳性标本中HBV基因分型以B型为主占71.2%（89/125）,C型占24.0%（30/125）,BC混合型占2.4%（3/125）,非B非C型占2.4%（3/125）;B基因型患者血清ALT（297.3±193.6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L,P〈0.01;B基因型患者血清抗-HBe阳性率91.0%（81/89）显著高于C基因型的23.3%（7/30）,P〈0.01;B型HBV-DNA水平（5.87±1.72）log10copies/mL与C型（6.01±1.91）log10copies/mL无差异（P〉0.05）。结论本地区HBV病毒基因型以B型为主,C型次之,B基因型对肝脏损害较C基因型重,并与HBV载量及HBeAg系统具有相关性,B基因型易发生YMDD突变。     

HBV基因型与HBV感染慢性化、重症化的关系

目的 探讨HBV基因型与HBV感染后慢性化、重症化的关系.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国2922例HBV感染者进行HBV基因型检测,比较各临床类型HBV感染者基因型分布差异及各基因型HBV感染者肝功能和病毒学差异.结果 2922例HBV感染者中,基因型B、C、B/C、D分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%.与慢性肝炎比较急性肝炎B基因型所占比例较高（P=0.003）,肝硬化和肝细胞性肝癌C基因型所占比例较高（P值均为0.000）,慢加急性肝衰竭与慢性肝炎比较基因型分布差异无统计学意义.急性肝炎和慢性肝炎B、C基因型患者HBeAg 阳性率、HBV DNA病毒载量、肝功能生化指标差异无统计学意义.慢加急性肝衰竭、肝硬化、肝细胞性肝癌组C基因型较B基因型患者HBeAg阳性率更高（P值分别为0.000、0.024、0.003）,肝细胞性肝癌C基因型患者HBV DNA病毒载量高于B基因型患者（P=0.025）,慢加急性肝衰竭和肝细胞性肝癌组C基因型较B基因型患者胆碱酯酶更低（P值为0.0004、0.02）.结论 中国HBV感染者的HBV基因型以B、C基因型为主,少量的B/C、D基因型;C基因型较B基因型HBV感染者更易发生慢性化和进展为肝硬化和肝细胞性肝癌,但未观察到基因型对慢加急性肝衰竭发生的差异.急性和轻症HBV感染者B、C基因型未显示对病情的明显影响,但重症和终末期HBV感染者C基因型较B基因型患者HBeAg阳性率、HBV DNA病毒载量更高,肝功能损害更严重.