TLR4在脓毒症大鼠急性肺损伤中作用

目的:研究Toll样受体(Toll like receptors,TLR)4在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺内的动态表达情况.方法:32只Wistar大鼠随机分成对照组12只与ALI组20只.实验6,12,18,24 h后分别处死大鼠.采用Real-time PCR测定肺组织TLR4 mRNA表达,免疫组织化学观察肺组织TLR4蛋白的表达情况.结果:ALI组与对照组比较,肺组织TLR4蛋白和TLR4 mRNA表达增加(P<0.01).ALI组TLR4蛋白和TLR4 mRNA在盲肠结扎穿孔术术后逐渐增加至18 h达高峰,后逐渐下降.结论:TLR4升高与脓毒症ALI的发生、发展密切相关.     

连续性肾脏替代治疗对重症肺炎所致急性肾损伤患者TLR2和TLR4的影响

目的探讨连续性肾脏替代(CRRT)治疗对重症肺炎(SP)所致急性肾损伤(AKI)患者Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的影响。方法采用前瞻性研究方法,选取2018年1月至2019年11月新疆维吾尔自治区人民医院收治的98例SP所致AKI患者,采用随机数字表法将其分为两组:对照组和观察组,每组各49例。对照组患者采用间歇性血液透析治疗,观察组患者采用CRRT治疗。比较两组患者的急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(A-PACHEⅡ)、序贯性脏器衰竭评分(SOFA)、肾功能指标[血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血乳酸(Lac)、血尿酸(UA)、尿量(UO)]、T细胞亚群(CD4~+、CD4~+/CD8~+)变化、炎症指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL-6)、TLR2、TLR4)]水平,并采用Kaplan-Meier生存曲线(K-M)分析两组患者1个月的生存情况。结果治疗后,观察组患者的APACHEⅡ(6.72±1.59分)、SOFA评分(2.02±0.58分)均低于对照组(10.11±2.48分,3.67±0.67分),差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,观察组患者的SCr(184.47±50.01μmol/L)、BUN(12.39±1.58 mmol/L)、Lac(2.15±0.66 mmol/L)、UA(184.29±68.52μmol/L)均低于对照组(256.29±86.73μmol/L,15.34±1.27 mmol/L,2.73±0.81 mmol/L,247.15±70.69μmol/L),UO[0.57±0.12 ml/(kg·h)]高于对照组[0.48±0.11 ml/(kg·h)],差异均具有统计学意义(P0.05);治疗后,观察组患者的CD4~+(35.83±3.77%)、CD4~+/CD8~+(1.20±0.11)高于对照组(32.49±3.51%,1.01±0.10),差异均具有统计学意义(P0.05);观察组治疗后CRP(80.82±16.47 mg/L)、IL-6(96.44±20.39 ng/L)、TLR2(2.58±1.09 ng/ml)、TLR4(1.89±0.26 ng/ml)低于对照组(107.52±25.19 mg/L,118.45±35.07 ng/L,4.29±1.12 ng/ml,2.24±0.35 ng/ml)(P0.05);两组K-M曲线比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 CRRT治疗SP所致AKI,可减轻肾脏负担,促进肾功能恢复,增强机体免疫功能,降低炎症因子表达,减少炎症因子对肾脏的损害,改善患者病情。     

人TLR4胞外段真核表达质粒的构建及其在HEK293 细胞中的表达

目的 构建人Toll—like receptor 4（TLR4）胞外段真核表达质粒并观察其表达。方法 通过PCR扩增人TLR4胞外段基因，将其克隆入真核表达质粒pcDNA3．1（＋），重组质粒peDNA3．1（＋）-eTLR4转染入人胚肾293细胞（HEK293 细胞）中，RT-PCR检测TLR4胞外段的表达。结果 测序结果表明，成功构建人TLR4胞外段真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-eTLR4，并在HEK293细胞中获得表达。结论 TLR4胞外段能在HEK293细胞中获得正确表达，为TLR4信号通路的进一步研究打下了基础。     

抑制枯否细胞对脓毒症大鼠肝脏微循环的影响

目的 探讨抑制枯否细胞(Kupffer cells,KCs)对脓毒症大鼠肝脏微循环的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备大鼠脓毒症急性肝损伤模型.造模前1 d和2 d经尾静脉注射三氯化钆(GdC13)去除KCs.将60只健康SD大鼠随机分为四组,即对照组、假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)和GdC13组(CLP+GdC13组).各组动物于术后24 h处死.检测血中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、内毒素(ET)、内皮素-1(ET-1)及一氧化氮(NO)的水平.提取肝组织RNA,采用RT-PCR方法检测ET-1、eNOS、iNOS及HO-1 mRNA的表达.结果 与对照组比较,脓毒症大鼠血中ALT、AST、ET、ET-1及NO水平显著升高(P<0.05);去除KCs后,脓毒症大鼠血中ALT、AST、ET、ET-1及NO水平显著降低(P<0.05).脓毒症大鼠肝组织ET-1、eNOS、iNOS及HO-1 mRNA 表达水平较对照组显著升高(P<0.05);去除KCs后,肝组织中iNOS及HO-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05).结论 KCs在脓毒症时肝脏的微循环障碍中起重要作用.     

慢阻肺急性加重患者外周血单核细胞CD64，TLR2及TLR4水平表达与预后的关系研究

目的　研究慢阻肺急性加重（AECOPD）患者外周血单核细胞CD64和Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)与预后的关系。方法　将南京医科大学附属江苏盛泽医院2017.06~2020.06间收治的96例慢阻肺急性加重（AECOPD）患者纳为研究对象,同时将30例稳定期COPD患者纳为稳定组,30例健康志愿者纳为对照组。采集三组外周静脉血,检测单核细胞亚群CD64,TLR2和TLR4的表达水平,分析其与炎症标志物降钙素原（PCT）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞计数（WBC）及肺功能间的相关性,随访6个月,统计AECOPD组中再次急性复发的患者,绘制受试者特征工作曲线（ROC）,分析外周血单核细胞亚群CD64表达,TLR2和TLR4在AECOPD急性复发中的预测价值。结果　COPD组以及AECOPD组外周血CD64水平（32.69±6.43,39.69±7.79 vs 26.74±5.14）,TLR2水平（169.79±29.07,181.15±22.44 vs 140.03±28.74）以及TLR4水平（186.25±34.15,200.58±33.47 vs 153.65±35.14）均高于对照组,差异均有统计学意义（F=51.774,26.957,2.488,均P<0.05）,AECOPD组外周血CD64,TLR2以及TLR4水平均高于COPD组,差异具有统计学意义（t=4.466,2.249,2.037,均P<0.05）;随访6个月,96例AECOPD患者中共20例患者因再次急性复发入院,再次复发者首次入院时外周血TLR2（249.66±40.52 vs 163.21±35.64）、TLR4（253.66±36.85 vs 186.69±45.21）及CD64（53.69±13.58 vs 35.41±14.47）水平均高于无复发者,差异均有统计学意义（t=9.379,6.105,5.089,均P=0.000）。相关性分析提示,AECOPD患者外周血CD64与其吸烟史,IL-6,PCT水平呈正相关（r=0.36,0.33,0.31,均P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.45, P<0.05）。TLR2与其PCT水平呈正相关（r=0.34, P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.35, P<0.05）,TLR4与其他临床指标无相关性（r=0.07,0.11,0.13,0.13,-0.17,-0.23,-0.26,0.29, 均P >0.05）。绘制ROC曲线发现,血清CD64,TLR2及TLR4在预测AECOPD患者再次急性复发中均具有良好的应用效能,各指标单独应用时以TLR2应用效能最高,其AUC=0.805,95%CI(0.679~0.931),三指标联合应用的预测效能最高,AUC=0.833,95%CI(0.703~0.964)。结论　AECOPD患者外周血CD64,TLR2及TLR4水平均较COPD者明显升高,且其在预测患者半年内再次急性复发中具有良好的效能。     

TLR4在博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型肺组织中的表达

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在博来霉素诱导的肺纤维化小鼠模型肺组织中的表达。方法将60只小鼠随机分为两组:对照组(气管内注入生理盐水)和纤维化组(气管内注入博来霉素5 mg/kg)。处理后用实时定量PCR和免疫蛋白印迹法分别在7、14、21 d观察肺组织中TLR4m RNA和蛋白质的表达。此外,通过HE染色判断肺纤维化的程度。所有数据均用均数±标准差(sx±)表示,两组之间比较采用t检验,多组之间比较采用方差分析。结果 14、21 d纤维化组TLR4 m RNA表达明显高于对照组(P<0.05),且在第21天达到高峰。与对照组相比,纤维化组TLR4蛋白表达增加,21 d达高峰。结论在博来霉素诱导的肺纤维化小鼠模型中,TLR4的表达与炎症和肺纤维化均密切相关。     

细胞色素C在急性肝衰竭大鼠中的蛋白表达变化及其意义

目的:探讨细胞色素C(cytochrome c,Cyt-c)在急性肝衰竭(acute liver failure)大鼠中的变化及其对肝再生的作用.方法:SD大鼠分两组,正常组6只,模型组30只.D-氨基半乳糖(D-Ga1)诱发大鼠急性肝衰竭模型,造模后分别在12、24、48、72、120 h 5个时间点取大鼠血及肝脏标本,动态观察肝功能的变化,并采用Westernblotting法检测肝组织中Cyt-c蛋白表达的变化,采用TUNEL法检测原位肝细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).结果:造模后24 h的大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)等指标显著升高,以48～72 h为著,与正常组比较差异具有显著性(P＜0.05).造模后12 h的Cyt-c表达显著高于正常组(P＜0.01),48 h达最高峰,72 h则明显下降.随着时间的推移,模型组肝细胞凋亡指数逐渐升高,48 h达高峰,48～72 h开始下降.Cyt-c表达与AI具有明显的正相关关系(P＜0.05).结论:Cyt-c在急性肝衰竭大鼠中的表达与肝细胞受损程度密切相关,可能具有促进肝细胞凋亡的作用.     

急性淋巴细胞白血病患儿共刺激分子表达及其临床意义

目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿共刺激分子(CD28+、CD80+、CD86+)的表达状况及临床意义.方法:用流式细胞仪检测30例ALL患儿及28例健康对照组儿童共刺激分子(CD28+、CD80+、CD86+)的表达.结果:ALL患儿共刺激分子(CD28+、CD80+、CD86+)表达低于对照组,但CD86+与对照组差异无显著性.结论:CD28+、CD80+在ALL患儿中低表达,这可能是ALL的发病机制之一.     

骨髓干细胞体外培养诱导为心肌样细胞的研究

目的:探讨应用5-氮胞苷(5-aza)诱导体外培养人骨髓干细胞向心肌细胞分化的作用.方法:采用正常志愿者髂后上棘为穿刺点获得骨髓干细胞,体外培养传3代后应用5×10-6 mmol/L 5-aza(Sigma公司)诱导20 h后继续原条件培养,相差显微镜下观察细胞形态并照相记录.诱导后细胞行a-action Trophonin T免疫组化染色.行透射电镜观察,进一步行RT-PCR分析诱导后细胞表达a-cardiac action,Cardiac tropponin T等mRNA.结果:诱导组人a-action Trophonin T免疫组化染色阳性,电镜下观察到细胞与细胞间见类心肌闰盘样结构,见线粒体空泡及微丝样结构,PCR结果发现有a-cardiac action、Cardiac tropponin T mRNA的高表达.结论:初步证实人骨髓干细胞在体外被5-aza诱导时,能够向心肌细胞分化.     

血糖对急性冠脉综合征预后的影响

目的:初步探讨急性冠脉综合征患者短暂急性的血糖升高与心血管事件发生的相关性.方法:选择2003年2月至2005年8月以急性冠脉综合征收入我院心内科的患者.入选患者206例,其中男164例,女42例,平均年龄(65.97±10.40)岁.平均发病到手术时间(9.09±7.33)h.以血糖7.8 mmol/L为切点分组,将血糖≤7.8 mmol/L患者分为A组,血糖＞7.8 mmol/L分为B组.对比分析两组的临床资料及30 d内心血管事件的发生率.结果:B组心血管事件发生率均较A组高,差异有统计学意义.结论:入院血糖异常增高和急性冠脉综合征患者30 d预后较差有相关.     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗大鼠急性肝衰竭(ALF)的机制,并示踪MSCs在ALF大鼠体内的分布、迁移。方法 ①以流式细胞仪检测hrGFP慢病毒感染的UE7T-13细胞株(hrGFP-MSCs)和氯甲基苯甲酰氨(CM-DiI)标记MSCs(MSCs-DiI)的绿色荧光蛋白阳性表达率或红色荧光染料标记阳性率。②CCK-8体外检测MSCs、hrGFP-MSCs和MSCs-DiI的细胞增殖情况。③取SD大鼠38只,建立急性肝损伤模型,30只造模成功,随机分为3组:CCL4组(A组)、CCL4/hrGFP-MSCs组(B组)和CCL4/MSCs-DiI组(C组)。B组和C组造模12 h肝内注射MSCs悬液。④分别于造模24 h、72 h、7天取肝组织以及肺组织观察移植hrGFP-MSCs、MSCs-DiI分布、迁移情况。造模后72 h,检测血清IL-10,TNF-α炎症因子水平,另取肝组织行PCNA免疫组化染色。结果 ①hrGFP-MSCs的hrGFP表达阳性率达99.21％,MSCs-DiI的CM-DiI标记率为99.98%。②CCK8检测示MSC-DiI、hrGFP慢病毒标记MSCs均不影响其增殖能力。③冰冻切片示CM-DiI标记MSCs可更好地示踪移植细胞,造模24 h、72 h及7天非注射部位肝组织和肺组织MSCs-DiI均可见散在的移植细胞团,而hrGFP-MSCs未见明确荧光阳性细胞。④MSCs治疗ALF大鼠模型下调了系统性炎症应答,造模72 h A组的TNF-α、IL-10水平大于B组及C组;PCNA示MSCs治疗促进了宿主肝细胞增殖。结论 CM-DiI标记MSCs能更好地示踪少量散在的移植细胞。异种移植MSCs可通过下调系统性炎症应答,促进肝细胞增殖,修复ALF大鼠肝组织。     

急性性功能衰竭大鼠内毒素血症的防治研究

目的 观察胃肠粘膜保护剂思密达对肝衰竭大鼠内毒素血症的预防作用。方法 SD大鼠65只 ,随机分成3组 ,对照组15只 ,衰竭组25只 ,治疗组25只。衰竭组 :用硫代乙酰胺复制出急性肝衰竭大鼠模型。治疗组 :在肝功能衰竭造模同时应用思密达灌胃 (思密达3g加生理盐水50ml配制 ),每次灌胃2ml,每天2次。对照组 :用生理盐水作对照。3组同时实验 ,第3天剖腹作门静脉内毒素测定及胃肠冲洗液细菌培养 ,并观察胃肠道病理改变。结果 3组大鼠门静脉内毒素水平分别为 :对照组29.33±18.50ng/l;衰竭组105.81±18.82ng/l (较对照组明显升高P<0.01) ;治疗组74.20±21.38ng/l(较衰竭组有明显下降P<0.01)。三组大鼠胃小肠细菌培养结果 :衰竭组较对照组细菌明显增多 (P<0.05) ,治疗组有所下降 ,但无比较意义 (P>0.05) ,胃肠病理改变 :肝功能衰竭组大鼠胃肠扩张明显 ,腔内见大量液体或气体 ,粘膜固有层变薄 ,部分胃粘膜糜烂 ,肝功能衰竭治疗组病变较轻。 结论 由硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝功能衰竭模型门静脉内毒素水平明显增高 ,胃肠道细菌培养提示细菌上移 ,菌落总数明显增多 ,胃肠道存在一定的病变 ,经思密达治疗后 ,门静脉内毒素水平有明显下降 ,细菌总数略有下降 ,胃肠粘膜病变改善     

动态监测TOLL样受体4在多器官功能障碍综合征大鼠肝组织中的表达

目的 动态监测多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肝组织中Toll样受体4(TLR4)蛋白的表达变化,探讨TLR4在MODS早期肝损伤中的作用.方法 实验在三峡大学医学院实验中心完成.将40只成年雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为健康对照组(8只)、MODS模型组(32只),模型组又分为造模后6 h,12 h,24 h,48 h不同时相,每组8只.采用"二次打击"即眼球失血加腹腔注射脂多糖(LPS)制备MODS模型:大鼠左眼球取血2 mL/100 g,在放血4 h后予无菌腹腔注射LPS 5 mg/kg.对照组予以腹腔注射等量的生理盐水,造模完成后在不同的时间点搜集标本.肉眼、光镜观察肝组织的形态结构变化;采用流式细胞技术(FCM)测定肝组织和外周血白细胞表面TLR4蛋白表达.所有数据以均数±标准差((x-)±s)表示,组间比较采用单因素方差分析(SNK法).结果 (1)健康对照组肝组织结构无改变;NODS组肝组织损伤较重.(2)流式细胞技术结果显示,与对照组比较,造模后6h肝组织TLR4的表达开始增高,12 h达到高峰(P<0.01),24 h开始下降(P<0.01),48 h与对照组比较,差异无统计学意义.与对照组比较,造模后外周血白细胞表面TLR4的表达6～48 h组均有明显增加(P<0.01).结论 在MODS的早期,大鼠肝组织TLR4表达迅速上调,高表达的TLR4可能参与了MODS肝损伤的病理生理过程,TLR4有可能成为防治MODS新的靶点.     

吡格列酮抑制肺组织TLR2、TLR4的mRNA表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制探索

目的:探讨吡格列酮减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机（随机数字法）分为假手术组、模型组、吡格列酮组,每组10只。假手术组大鼠麻醉后,胰胆管逆行注射生理盐水。模型组麻醉后,胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠构建重症急性胰腺炎肺损伤模型。吡格列酮组腹腔注射吡格列酮后再构建模型。每组随机选择6只大鼠于手术后12 h剖杀,留取肺组织及静脉血。检测并比较三组大鼠血清淀粉酶水平及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平;采用RT-PCR检测并比较三组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达情况;比较三组间肺组织病理损伤评分和肺渗漏指数。分析TLR2和TLR4的mRNA表达情况与肺病理损伤评分、肺渗漏指数的相关性。结果:模型组血清淀粉酶及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标水平均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。模型组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平以及肺组织病理损伤评分、肺渗漏指数均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。由Spearman相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺组织病理损伤评分呈显著正相关关系（rs=0.959, P<0.001;rs=0.924, P<0.001）;由Pearson相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺渗漏指数均呈显著正相关关系（r=0.957, P<0.001;r=0.958, P<0.001）。 结论:吡格列酮可能通过抑制肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

吡格列酮抑制肺组织TLR2、TLR4的mRNA表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制探索

目的:探讨吡格列酮减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机（随机数字法）分为假手术组、模型组、吡格列酮组,每组10只。假手术组大鼠麻醉后,胰胆管逆行注射生理盐水。模型组麻醉后,胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠构建重症急性胰腺炎肺损伤模型。吡格列酮组腹腔注射吡格列酮后再构建模型。每组随机选择6只大鼠于手术后12 h剖杀,留取肺组织及静脉血。检测并比较三组大鼠血清淀粉酶水平及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平;采用RT-PCR检测并比较三组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达情况;比较三组间肺组织病理损伤评分和肺渗漏指数。分析TLR2和TLR4的mRNA表达情况与肺病理损伤评分、肺渗漏指数的相关性。结果:模型组血清淀粉酶及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标水平均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。模型组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平以及肺组织病理损伤评分、肺渗漏指数均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。由Spearman相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺组织病理损伤评分呈显著正相关关系（rs=0.959, P<0.001;rs=0.924, P<0.001）;由Pearson相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺渗漏指数均呈显著正相关关系（r=0.957, P<0.001;r=0.958, P<0.001）。 结论:吡格列酮可能通过抑制肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

高糖上调肾小管上皮细胞Toll样受体2的表达

目的探讨葡萄糖对大鼠肾小管上皮细胞Toll样受体2(TLR2)表达的影响。方法大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养液传代培养。根据培养液葡萄糖浓度分组。培养24小时后用Western blot及RT-PCR方法检测各组肾小管上皮细胞TLR2蛋白及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表达。结果肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)表达TLR2,高浓度葡萄糖可增加肾小管上皮细胞TLR2的表达。高浓度葡萄糖刺激肾小管上皮细胞表达MCP-1 mRNA显著上调。结论高浓度葡萄糖上调肾小管上皮细胞TLR2的表达,诱导炎症趋化因子增加。     

TLR2、TLR4、TLR5和TLR9在小鼠Hp感染模型中的表达

目的:研究BALB/c小鼠在幽门螺杆菌(Hp)感染前后和用抗生素治疗后胃黏膜组织中Toll样受体(TLR)2、TLR4、TLR5、TLR9、IL-1β的表达,探讨Toll样受体家族在Hp感染机制中的作用。方法:60只BALB/c小鼠随机分为3组,第1组不予处理(正常组),第2组予感染Hp(Hp感染组),第3组感染Hp后予抗生素治疗(抗生素治疗组)。RT-PCR和Western blotting法半定量检测小鼠胃内TLR2、TLR4、TLR5、TLR9、IL-1β的表达,Giemsa染色切片计数Hp定植数量,HE染色切片判断黏膜炎症水平。结果:(1)TLR5、TLR9在各组小鼠胃黏膜组织中均无表达。(2)TLR2在Hp感染组胃黏膜组织中表达(PCR:0.13±0.025;Western:1.32±0.27)高于抗生素治疗组(PCR:0.04±0.011;Western:0.43±0.08),正常组无表达。(3)TLR4在Hp感染组胃黏膜组织中表达(PCR:0.22±0.051;Western:0.72±0.17)高于抗生素治疗组(PCR:0.06±0.009;Western:0.21±0.04),正常组无表达。(4)IL-1β在Hp感染组胃黏膜组织中有表达(PCR:0.27±0.038;Western:0.58±0.14),抗生素治疗组和正常组无表达。结论:TLR2、TLR4可能参与了Hp的致病机制,TLR5、TLR9可能未参与Hp的致病机制。     

TLR2和TLR4激动剂对人脐血CD34+细胞迁移能力的影响

本研究旨在探讨Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)和TLR4激动剂对人脐血CD34+细胞迁移功能的影响及其机制.采用流式细胞术检测脐血CD34+细胞表面TLR2和TLR4的表达情况;用趋化实验和黏附实验观察PAM3CSK4(TLR2激动剂)和LPS(TLR4激动剂)对人脐血CD34+细胞的迁移活性和黏附活性的影响.结果表明:人脐血CD34+细胞表面表达TLR2(14.2±3.8)%和TLR4(19.6±4.1)%.与对照组相比,LPS可明显抑制SDF-1诱导的CD34+细胞的趋化作用(p<0.01),但LPS对CD34+细胞的黏附能力,以及PAM3CSK4对CD34+细胞的趋化和黏附能力均无明显影响.进一步研究显示,LPS对CD34+细胞表面CXCR4的表达无明显影响,但可明显抑制CD34+细胞的自发迁移作用(p<0.05).结论:TLR4的活化可显著降低SDF-1诱导CD34+细胞的趋化功能,这可能与其抑制CD34+细胞的自发迁移作用具有一定的关系.     

ROC曲线评价AFP在急性肝衰竭预后中的应用

目的 研究AFP定量对急性肝衰竭预后的判断价值.方法 2009年1月至2012年1月连续收集在解放军第302医院住院的71例急性肝衰竭患者.所有患者均行AFP定量检测,并随访3个月.根据实际预后将患者分为生存组（n＝21）及死亡组（n＝50）.采用独立变量的非参数检验比较生存组和死亡组AFP水平;利用ROC曲线分析AFP水平在评价急性肝衰竭患者预后中的作用,并结合临界值进行四格表分析.结果 生存组患者AFP水平（186 μg/L）明显高于死亡组（36.5 μg/L,P＝0.004）.通过ROC分析显示,以121 μg/L作为急性肝衰竭预后好转判断的临界值时,其曲线下面积（AUC）达到0.719,灵敏度和特异度分别为0.714和0.700,对预后判断的准确率为0.714,阳性预测值为50%,阴性预测值为85.4%.结论 AFP水平121 μg/L是急性肝衰竭患者预后判断的临界值,其灵敏度和特异度、准确率较好,阴性预测值较高.     

重症脓毒症患者外周血单核细胞人类白细胞抗原和TLR4的表达与预后关系

目的 观察重症脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)人类白细胞抗原(HLA-DR)、天然免疫的模式识别受体TIR4(toll like receptor 4)在不同预后的表达变化.方法 选取35例符合重症脓毒症患者为重症脓毒症组和15名健康志愿者作为对照组.35例重症脓毒症患者按预后又分为好转组(25例)与死亡组(10例),用流式细胞仪检测PBMC表面HLA-DR、TLR4表达.结果 治疗前重症脓毒症组外周血单核细胞数量[(0.39±0.30)×109/L]及其表面HLA-DR(10.25±5.35)FMI、TLR4(10.93±5.66)FMI表达均低于正常对照[(0.62±0.41)×106/L、(59.28±14.76)FMI、(39.86±8.55)FMI](t=2.423、12.52、14.12,P<0.01或P<0.05).重症脓毒症组经ICU综合治疗后,好转组,随着各项指标好转,单核细胞的数量及其表面HLA-DR、TLR4表达各观察点逐渐呈升高趋势,单核细胞数量[(1.03±0.78)×106/L]、HLA-DR[(25.12±9.29)FMI]及TLR4(36.68±16.61)FMI于第5天恢复正常人水平,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01,<0.05).死亡组单核细胞的数量及其表面HLA-DR、TLR4表达各观察点持续在较低水平,各时点比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 重症脓毒症患者外周血单核细胞数量及其表面HLA-DR、TLR4表达可能与患者的免疫状态、预后情况密切相关.