线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道在未成熟心肌缺血预处理中的作用

目的探讨线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）在未成熟心肌预处理保护中的作用,为未成熟心肌的保护提供依据。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,将24只新生（出生14～21d）日本长耳大白兔按随机数字表法分为4组：缺血／再灌注组（I／R组）,心脏缺血预处理组（E1组）,mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate（5-HD）＋心脏缺血预处理（E2组）,mitoKATP通道开放剂Diazoxide（Diaz）预处理组（E3组）;检测心脏功能恢复率、心肌含水量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷（ATP）含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性（Ca^2＋-ATPase）、心肌线粒体合成ATP的能力;电子显微镜观察心肌超微结构。结果E1组、E3组心功能恢复优于I／R组和E2组,心肌含水量低于I／R组和E2组（P〈0．05）;E1组、E3组三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca^2＋-ATPase活性、心肌线粒体合成ATP的能力均优于I／R组和E2组（P〈0．05）,丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量低于I／R组、E2组（P〈0．05）;E1组、E3组心肌超微结构损伤较I／R组和E2组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过mitoKATP通道的开放起作用。     

肾缺血预处理对未成熟心肌的保护作用

目的探讨肾缺血预处理对未成熟心肌保护的影响，为未成熟心肌的保护提供新的方法。方法建立兔Langendorff灌注模型，将18只幼兔随机分为3组，缺血／再灌注组（I／R组）：灌注15min转为工作心15min，停灌45min，恢复灌注15min改为工作心30min；心脏缺血预处理组（CIP组）：灌注15min转为工作心15min，反复2次缺血5min再灌注5min，重复I／R组的方法；肾缺血预处理组（RIP组）：反复3次阻断左肾动脉血流5min再灌注5min，取离体心脏，灌注15min转为工作心15min，重复I／R组的方法。观察血流动力学、生化等指标。结果CIP组和RIP组的冠状动脉流量（CF）、心排血量（CO）、左心室收缩压（LVSP）恢复百分率均较I／R组升高，左心室舒张期末压（LVEDP）恢复率则较I／R组降低，差异有统计学意义（P〈0.01）；三组间比较，HR、AF恢复率差异无统计学意义（P〉0.05）；RIP组与CIP组比较各指标恢复率差异无统计学意义（P〉0．05）。RIP组与I／R组比较：心肌含水量（MWC）、血清肌酸激酶（cK）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、ATP含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-ATPase活性、心肌线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体合成ATP能力差异有统计学意义（P〈0.01），RIP组和CIP组比较各项指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肾缺血预处理对未成熟心肌具有心肌保护作用。     

缺血预处理对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响

目的研究缺血预处理（IPC）对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响。方法SD大鼠72只，随机分为4组（n=18）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）和5-羟葵酸（5-HD）拮抗IPC组（5-HD＋IPC组）。采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，IPC组在全心停灌前，给予2次缺血预处理，每次缺血5min，间隔5min；5-HD＋IPC组预处理前灌注5-HD 10min。各组于平衡末、缺血前、再灌注30min各取6个心脏，分离心肌线粒体并测定线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（ADP／O2）、NADH氧化酶（NADH-OX）、琥珀酸氧化酶（SUC-OX）、细胞色素C氧化酶（CYTC-OX）的活性。结果与CON组比较，IR组、IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min RCR、ADP／O2、NADH-OX、SUC-OX和CYTC＋OX的活性降低（P〈0．05）；与IR组比较，IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标升高（P〈0．05）；与IPC组比较，5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标降低（P〈0．05）。结论缺血预处理可改善大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的功能，其机制与mitoKATP的激活有关。     

异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法75只雄性沙士鼠，随机分5组，每组15只。假手术组（SHAM组）；I／R组：夹闭双侧颈总动脉5min后开放造成缺血再灌注；异氟醚预处理组（ISO组）：缺血前60min吸入1．2％．1．5％异氟醚30min；5．羟葵酸盐组（5-HD组）：缺血前30min腹腔内注射线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂5-HD 10mg／kg；5．HD＋ISO组：腹腔内注射5-HD10mg／kg，30min后同ISO组。再灌注24h，取鼠前脑，透射电镜下观察线粒体超微结构，用荧光分光光度计测定线粒体游离Ca^2＋浓度，用紫外分光光度计测定线粒体通透转运通道（MPTP）开放程度。结果I／R组、5-HD和5-HD＋ISO组线粒体肿胀，嵴断裂、溶解，内呈空泡状，ISO和SHAM组线粒体结构较完整，嵴及内膜间隙仍清晰可见。I／R、5．HD、5．HD＋ISO组线粒体游离Ca^2＋浓度及MFrP开放程度均高于SHAM组，ISO组线粒体游离Ca^2＋浓度及MPTP开放程度低于I/R组（P〈0．05）。结论异氟醚预处理对沙士鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用，可能是通过激活线粒体ATP敏感性钾通道，减轻Ca^2＋超载，从而抑制MPTP开放而产生的。     

PI3K/AKT信号通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K／AKT信号传导通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 成年SD大鼠32只，随机分为4组：缺血再灌注组（I／R组）、异丙酚组（P组）、渥曼青霉素组（W组）和异丙酚＋渥曼青霉素组（PW组），每组8只。建立Langendorff离体心脏灌注模型，灌注压10kPa,灌注速率7．10ml／min，I／R组用K-H液灌注，P组用含50μmol／L异丙酚的K-H液灌注，W组用含100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注；PW组用含50μmol／L异丙酚＋100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注，灌注15min，全心缺血30min，再灌注60min。测定再灌注10、40min时冠脉流出液中心肌肌钙蛋白（cTnI）浓度，再灌注60min时测定心肌组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，电镜下观察心肌细胞超微结构。结果 与I／R组比较，P组再灌注期间cTnI浓度明显降低，心肌组织SOD活性升高，MDA含量降低（P〈0．05），其余2组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与缺血前比较，P组再灌注40min时cTnI浓度升高，其余各组再灌注期间cTnI浓度均升高（P〈0．05或0．01）。P组电镜下心肌超微结构改变减轻。结论 异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤可能通过PI3K／AKT信号传导通路介导。     

非创伤性双下肢缺血预处理对兔肺缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨非创伤性双下肢缺血预处理（N-WIP）对兔肺缺血／再灌注（I／R）损伤的保护作用。方法采用N—WIP及经典缺血预处理（C-IP）的动物模型，比较两种预处理方法对肺I／R损伤的保护效应。将40只兔随机分4组：对照组（C）、I／R组、C—IP组和N-WIP组，每组10只。对比观察各组血氧分压、肺湿／干重比、血清及肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性，丙二醛（MDA）含量。结果再灌注后I／R组血氧分压呈进行性下降，尤以再灌注30min内明显；N—WIP组和CIP组血氧分压、SOD活性均优于I／R组（P〈0．01），肺湿／干重比和MDA含量均低于I／R组（P〈0．05,P〈0．01），MPO活性较I／R组明显降低（P〈0、05）；N—WIP组和C-IP组与C组之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论N-WIP与C-IP可通过减轻肺毛细血管的通透性，抑制缺血再灌注时中性粒细胞的浸润、激活，提高机体抗氧自由基的能力，同等强度的减轻I／R损伤，起到保护肺脏的作用。     

蛋白激酶C和线粒体ATP敏感性钾通道在未成熟心肌预处理中的作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)和线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道(mitoKATP)在未成熟心肌预处理保护中的作用。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,30只新生日本长耳大白兔分为5组:缺血/再灌注组(I/R组),心脏缺血预处理组(E1组),蛋白激酶C(PKC)阻滞剂chelerythrine(CLT) 心脏缺血预处理(E2组),mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate(5-HD) 心脏缺血预处理(E3组),mitoKATP通道开放剂Diazoxide(Diaz)预处理组(E4组)。以血流动力学、生化指标、心肌超微结构等作为观察指标。结果E1和E4组心功能恢复、心肌含水量优于I/R、E2和E4组(P<0.05),三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、心肌线粒体合成三磷酸腺苷(ATP)的能力优于I/R、E2和E4组(P<0.01),丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量低于I/R、E2和E4组(P< 0.01),心肌超微结构损伤较I/R、E2和E4组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过PKC的激活和mitoKATP通道的开放起作用。     

内源性一氧化氮在非创伤性缺血预处理中对兔肺的保护作用

目的探讨内源性一氧化氮（NO）在非创伤性缺血预处理（N—WIP）中对兔肺缺血／再灌注（I／R）损伤的保护作用及可能机制。方法采用N-WIP及经典缺血预处理（C-IP）的动物模型，比较两种缺血预处理方法中内源性NO对兔肺在缺血／再灌注损伤中的保护效应。将40只大白兔随机平均分为4组：对照组、I／R组、C—IP组和NWIP组。对比观察各组血清及肺组织中NO2^-／NO3^-、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性以及肺湿／干重比。结果N—WIP组和C-IP组的兔肺再灌注后NO2^-／NO3^-含量均高于I／R组（P〈0．01），甚至高于对照组（P〈0．05）。两种缺血预处理组SOD活性均高于I／R组（P〈0．01），肺湿／干重比和MDA含量均低于I／R组（P〈0．05，P〈0．01）。结论N-WIP与C-IP对移植肺在缺血／再灌注损伤中具有同等强度的保护作用。其机制可能是通过诱发内源性一氧化氮（NO）舒张血管，从而起到保护血管内皮的效应。     

热休克蛋白70表达对未成熟心肌保护作用的实验研究

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在未成熟心肌中的表达规律和对未成熟心肌的影响。方法健康新生长耳大白兔30只随机分为5组。对照组：腹腔注射生理盐水0．4ml 24h后取离体心脏，建立Langendorff离体心脏灌注模型；E4h、E12h、E24h、E48h组，腹腔注射去甲肾上腺素，4、12，24、48h后分别取离体心脏，方法同对照组。测定心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、生化指标，并观察心肌超微结构。结果HSP70含量如。组明显高于其他各组，血流动力学、生化指标均优于其他各组（P〈0．01），心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻。结论腹腔注射去甲肾上腺素24h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达，一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌缺血再灌注损伤。     

一氧化氮在大鼠肝缺血预处理中的作用

目的：探讨一氧化氮（NO）在大鼠肝脏缺血预处理（IP）中的作用。方法：131大鼠随机分为缺血再灌注（I／R）组、IP组及假手术（S）组，观察术后2h，24h及1周后血浆NO，AST及ALT以及大鼠死亡率及肝脏组织病理改变。结果：（1）血浆NO IP组在术后即升高，3个时段均明显高于S组（P＜0．05，P＜0．01，P＜0．05）；I／R组在2h后低于S组（P＜0．05），24h与S组无显著差异（P＞0．05），1周时高于S组（P＜0．05）；IP组于2h（P＜0．01）及24h(P＜0．01）时均高于I／R组。（2）ALT IP组及I／R组在2h（P＜0．05）及24h（P＜0．01）时均高于S组；IP组显著低于I／R组（P＜0．05）；1周时IP组与S组间差异无显著性，I／R组显著高于IP组（P＜0．05）及S组（P＜0．01）。（3）IP组及I／R组血浆NO与ALT呈负相关（P＜0．01，P＜0．05）。（4）肝脏病理改变IP组较I／R组为烃。（5）术后2h及累计动物死亡率I／R组显著高于S组及IP组（P＜0．05），而IP组与S组无统计学差异。结论：IP对肝脏I／R具有保护作用，该作用可能与血浆NO升高有关，NO升高的峰值提前在经典IP中具有重要的作用。