人参皂苷Rg3对肺癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨人参皂苷Rg3对肺癌诱导血管内皮细胞(VEC)增殖的抑制作用.方法用MTT法检测不同浓度Rg3对VEC、肺腺癌SPC-A-1细胞增殖及SPC-A-1细胞诱导VEC增殖的影响.结果Rg3浓度为0.0313～0.5 mmol@L-1时,对VEC及SPC-A-1细胞增殖没有直接影响(P＞0.05);经0.0313～0.5 mmol@L-1Rg3作用后,SPC-A-1细胞条件培养液对VEC的增殖作用也不受影响(P＞0.05);Rg3浓度为0.125～0.5 mmol@L1时,其对SPC-A-1细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用(P＜0.01),抑制率为16.44%～57.53%.结论人参皂苷Rg3对肺癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖具有抑制作用.     

人参皂苷CK对人肝癌细胞HepG2迁移及侵袭的影响

目的探讨人参皂苷CK对人肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能机制。方法取对数生长期的Hep G2细胞,用不同浓度人参皂苷CK(0、10、20、40、80μmol·L^-1)处理,MTT法检测人参皂苷CK对细胞增殖的影响;细胞划痕实验、Transwell实验检测人参皂苷CK对肝癌细胞迁移、侵袭的影响;Western blot检测人参皂苷CK对Hep G2细胞中E-cadherin、N-cadherin及信号分子p-ERK、ERK、p-Akt、Akt水平的影响。结果 MTT检测结果显示,人参皂苷CK对肝癌Hep G2细胞生长有抑制作用;划痕和Transwell实验结果显示,人参皂苷CK可抑制Hep G2细胞的迁移和侵袭;Western blot结果显示人参皂苷CK可降低N-cadherin表达,明显升高E-cadherin表达水平,同时抑制ERK和Akt信号的磷酸化。结论人参皂苷CK可抑制肝癌细胞的迁移和侵袭过程,可能与抑制ERK和Akt信号有关。     

人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响

目的 探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法 MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^-1)对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell实验测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞迁移及侵袭的影响;Western blot测定不同浓度人参皂苷Rg3对E2F1、MMP-2、MMP-9、BCL-2、Bax表达的影响。结果 80、160、320μmol·L^-1人参皂苷Rg3组细胞存活率与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^-1人参皂苷Rg3组细胞凋亡率与空白对照组比较明显增加,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^-1人参皂苷Rg3组细胞迁移数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^-1人参皂苷Rg3组细胞侵袭数目...     

人参皂苷Rg3通过抑制mTOR通路介导的磷酸戊糖途径对肺癌细胞的放射增敏作用

目的 探讨人参皂苷Rg3通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路介导的磷酸戊糖途径（PPP）,对肺癌细胞放射敏感性的影响。方法 以0、10、20、40、60、80 mg/L的人参皂苷Rg3处理肺癌细胞A549;MTT法检测细胞增殖情况;将细胞分为对照组（正常培养,不照射）、放射组（X射线照射处理）、人参皂苷Rg3组（60 mg/L人参皂苷Rg3,不照射）、联合组（X射线照射+60 mg/L人参皂苷Rg3）、激活剂组（X射线照射+60 mg/L人参皂苷Rg3+100 nmol/L mTOR通路激活剂MHY1485）;均为加入相对应药物培养48 h后放射组、联合组和激活剂组采用8 Gy X射线照射。平板克隆实验检测各组细胞克隆形成率;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）水平;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧（ROS）水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;γ-H2AX免疫荧光染色分析DNA损伤修复情况;Western blot检测细胞中mTOR、p-mTOR、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2相关...     

山楂酸对肺癌95D细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨山楂酸对肺癌细胞95D增殖及凋亡产生的影响。方法将山楂酸作用于人的肺癌细胞系95D,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测山楂酸对细胞增殖的影响;通过流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;通过荧光显微镜检测细胞核的形态变化;采用Western blot方法检测凋亡相关蛋白的影响。结果随着山楂酸浓度增大,95D细胞的增殖率明显降低,早期及晚期凋亡率逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义;荧光电子显微镜观察山楂酸作用后的细胞,可见染色体边集、核碎裂等典型的凋亡改变,而对照组没有相应的变化;Western blot显示,随着山楂酸浓度的增加,Bcl-2蛋白表达逐渐降低,Bax蛋白表达逐渐升高。结论山楂酸可以抑制肺癌95D细胞增殖,且具有浓度依赖性,山楂酸抑制肺癌95D细胞增殖是通过诱导细胞凋亡实现的。     

人参皂苷Ro对胃癌细胞MFC增殖和凋亡的影响

目的 探讨人参皂苷Ro对胃癌细胞MFC增殖和凋亡的影响.方法 采用MTT染色法检测MFC细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测MFC细胞周期和凋亡情况;MFC移植瘤小鼠,经受试药物处理后,剥取瘤组织称量并计算抑瘤率.结果 与对照组比较,人参皂苷Ro在6～96 μg· mL-1范围内对MFC细胞增殖的抑制率随浓度的增加而显著升高.与对照组比较,人参皂苷Ro高剂量组对MFC细胞G0/G1期和凋亡率明显升高,G2/M期,S期明显降低;人参皂苷Ro各剂量组均能显著抑制肿瘤生长,与模型组比较,各给药组肿瘤的质量明显降低,其中,高剂量组的抑瘤率为62.7％.结论 人参皂苷Ro对MFC移植瘤具有抑制生长的作用,这可能与诱导MFC细胞凋亡和抑制增殖有关.     

人参皂苷Rb1与红景天苷对抗皮肤光老化作用

目的:分析红景天苷与人参皂苷Rb1对抗皮肤光老化的作用.方法:设定4组,空白对照组1(未经UVB照射)、空白对照组2(经UVB照射)、人参皂苷Rb1组与红景天苷组,以MTT法对细胞增殖活性予以检测,再检测细胞中SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、CAT(氧化氢酶)及GSH(谷胱甘肽)含量.结果:红景天苷与人参皂苷Rb1可提升细胞内CAT、SOD及GSH活性,减少MDA生成量,与0μg·mL-1对比P<0.05.结论:人参皂苷Rb1与红景天苷可有效对抗皮肤光老化.     

CIK细胞对Lewis肺癌细胞凋亡影响的实验研究

目的 观察CIK细胞对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,探讨其抑瘤机制.方法 常规方法培养CIK细胞,以CIK细胞为效应细胞,Lewis肺癌细胞为靶细胞,以不同效靶比共同培养,MTT法检测细胞增殖情况,同时电镜观察Lewis肺癌细胞形态特征改变;流式细胞仪检测Lewis肺癌细胞的凋亡;免疫细胞化学法检测并比较FasL在单个核细胞和CIK细胞表面的表达;用MTF法检测抗FasL单克隆抗体对CIK细胞杀伤Lewis肺癌细胞的影响.结果 电镜观察:CIK细胞能促进Lewis肺癌细胞凋亡超微结构的改变;流式细胞仪检测:CIK细胞组凋亡率明显高于对照组;FasL在CIK细胞表达增加;抗Fas单抗可抑制CIK杀伤Lewis肺癌细胞的活性.结论 CIK细胞可在体内及体外抑制Lewis肺癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,Fas/FasL途径在其中发挥一定作用.     

mTORC1抑制剂增强KRAS突变型肺癌细胞对化疗药物敏感性药效及机制研究

摘要：目的:探讨Kirsten大鼠肉瘤病毒基因同源物(KRAS)突变型肺癌细胞对化疗药物敏感性降低的机制及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1(m TORC1)抑制剂增强KRAS突变型肺癌细胞对化疗药物敏感性药效及机制。方法:选取在本院就诊并确诊为KRAS突变型非小细胞肺癌的患者53例,通过Q-PCR及Western blot检测患者肿瘤病变部位m RNA及蛋白水平m TORC1相关因子的表达,对比产生耐药及未产生耐药患者体内以上因子的差异。构建KRAS突变型肺癌细胞,采用MTT及Western blot检测不同浓度m TORC1抑制剂或m TORC1抑制剂与顺铂联合使用对KRAS突变型肺癌细胞的抑制增殖、m TORC1活性底物S6K和4EBP1的磷酸化(p)水平的作用。结果:与未耐药KRAS突变型肺癌患者相比,耐药患者体内m RNA及蛋白水平m TORC1相关因子的表达均显著上升(P<0. 05);低浓度m TORC1抑制剂即可对KRAS突变型肺癌细胞有明显抑制增殖作用(P<0. 05),呈剂量依赖性;且同浓度m TORC1抑制剂与顺铂联合使用时抑制细胞增殖作用显著增加(P<0. 05)。KRAS突变型肺癌细胞给予顺铂刺激时,P-4EBP及P-S6K水平显著提高(P<0. 05),m TORC1被显著激活,这一升高可被m TORC1抑制剂降低(P<0. 05)。结论:KRAS突变型肺癌患者对化疗药物敏感性的产生可能与m TORC1的激活有关,m TORC1抑制剂可以通过抑制m TORC1的激活增强KRAS突变型肺癌患者对化疗药物敏感性;且顺铂与m TORC1抑制剂联合使用具有更好的抑制KRAS突变型肺癌细胞增殖的作用。     

人参皂苷Rg3对人胃癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响

目的研究人参皂苷Rg3对人胃癌细胞株MKN28中Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad（Ser112）,pBad（Ser136）表达的影响。方法用浓度为0,10,20,40和80μmol/L的人参皂苷Rg3处理MKN28细胞24h后。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测人参皂苷Rg3对MKN28细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对MKN28细胞凋亡的诱导作用,Westernblot方法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后MKN28细胞中Pim-3,pBad（Ser112）和pBad（Ser136）的表达情况。结果10,20,40和80μmo1/L的人参皂苷Rg3对MKN28细胞增殖的抑制率分别为18.70,34.06,54.49,69.28%。10～80μmol/L的人参皂苷Rg3处理细胞呈现明显的凋亡形态学改变,80μmol/L人参皂苷Rg3处理MKN28细胞24h后,凋亡细胞占（12.23±2.1）%,处理组比正常对照组（3.28±1.7）%凋亡明显增加,差异有统计意义（P〈0.01）。Bad总蛋白表达没有明显影响。pim-3和pBad（Ser112）的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱。pBad（Ser136）不表达。结论人参皂苷Rg3的抗癌活性与其调节Pim-3以及磷酸化Bad蛋白表达有关;Pim-3可磷酸化Bad抑制胃癌细胞的凋亡。     

皂角刺皂苷对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究皂角刺皂苷(Saponins of spina gleditsiae,SSG)对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验分成不同浓度的给药处理组(SSG)、未加药的阴性对照组(NP)、以培养液为参照的空白对照组(CP)。对数生长期PC-3细胞用EDTA-胰蛋白酶消化后,接种于96孔培养板。贴壁后分别加入不同浓度的SSG溶液,每孔100μL,每组设6复孔。体外培养前列腺癌PC-3细胞给药处理48h后,MTT比色法检测前列腺癌PC-3细胞抑制率,流式细胞仪检测SSG对PC-3细胞凋亡率的影响。结果:与NP相比,SSG可显著抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖(P<0.05);SSG50mg/L组、100mg/L组、200mg/L组的细胞凋亡率分别为6.91%,10.52%和16.50%,3组的细胞凋亡率均高于0mg/L组(P<0.05)。结论:SSG对前列腺癌PC-3细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。     

Antitumor and anti-angiogenic activity of Ganoderma lucidum polysaccharides peptide

AIM: To investigate the antitumor and anti-angiogenic activity of Ganoderma lucidum polysaccharides peptide (GLPP). METHODS: Antitumor effect of GLPP was observed in tumor-bearing mice in vivo. At the same time,the effects of GLPP on proliferation of tumor cells and human umbilical cord vascular endothelial cell (HUVEC) were detected by MTr assay in vitro. Subsequently, spleen lymphocytes proliferation of nude mice was stimulated by LPS or ConA. To investigate the anti-angiogenic effect of GLPP, GLPP 80 μg per disc and GLPP-treated serum 10μL per disc were added to the chick chorioallantoic membrane (CAM) respectively in vivo. RESULTS: GLPP 50, 100, and 200 mg/kg inhibited growth of Sarcoma 180 in BALB/c mice markedly by 35.2 %, 45.2 %, and 61.9 %,respectively. GLPP which was directly added to the cultured medium did not inhibit PG cell proliferation in vitro;but GLPP-treated serum 50, 100, 200 mg/kg potently inhibited PG cell proliferation by 22.5 %, 26.8 %, and 30.3 %,respectively; and reduced the xenograft (human lung carcinoma cell PG) in BALB/c nude mice greatly in vivo by 55.5 %, 46.0 %, and 46.8 %, respectively. Lymphocytes proliferation of nude mice could be stimulated by LPS 5 mg/L but not by ConA 2.5 mg/L, indicating that GLPP could not promote the T lymphocyte proliferation and neutral red phagocytosis of peritoneal macrophages of nude mice. The CAM assay showed that GLPP and GLPP-treated serum had anti-angiogenic effect. GLPP (1, 10, and 100 mg/L) inhibited HUVEC proliferation in vitro with the inhibitory rate of 9.4 %, 15.6 %, and 40.4 %, respectively. CONCLUSION: GLPP has antitumor and antiangiogenic activity. The anti-angiogenesis of GLPP may be a new mechanism underlying its anti-tumor effects.     

Application of high-content cell imaging system in cell proliferation detection北大核心CSCD

Aim To compare high-content cell imaging system and other methods in detecting cell proliferation, including the traditional thymidine (3H-TdR) incorporation method, methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) method and cell counting kit-8 (CCK-8) method. Methods The fibroblast-like synovial cells (FLS) were used as the study object to observe the sensitivity and stability of FLS proliferation in different methods by using the usual proliferative stimulant tumor necrosis factor-a (TNF-a) and the known proliferation inhibitor methotrexate at different concentrations. Results The 3H-TdR method and high-content cell imaging could detect a significant inhibitory effect of 1 nmol L"1 MTX on FLS cell proliferation, MTT assay and CCK-8 method could detect the significant inhibitory effect of 10 nmol L"1 MTX on FLS cell proliferation. 3H-TdR method was found to have a large degree of discretization in the data set, with a standard deviation of 32. 61%-61. 36%, and the MTT method was 11.9%-17.8%, the CCK-8 method was 17.15%-32. 88%, and the high-content cell imaging system method was 12.66%-26.54%. Conclusion The method of high-content cell imaging system is more accurate and stable for detecting cell proliferation. © 2018 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

舒尼替尼用于对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌的作用研究

目的:探讨舒尼替尼用于对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌的效果及其作用机制.方法:选取2017年1月至2019年1月内蒙古自治区人民医院收治的非小细胞肺癌患者75例,对其肿瘤组织进行切除,提取肿瘤细胞后进行原代培养,提取细胞总RNA并测定其纯度以及浓度.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测舒尼替尼对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌细...     

粗毛豚草素对人肺癌细胞A-549的抑制作用研究

【摘要】 目的 探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制。方法 粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期蛋白cyclin D1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21和p27的表达;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达。结果 A-549细胞经不同浓度(15、30、60、120μmol/L)粗毛豚草素作用72h后,细胞存活率分别为(57.30±3.92)%、(43.91±4.32)%、(17.82±2.73)%和(13.20±2.46)%,均低于对照组(96.30±2.08)%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。粗毛豚草素(15、30μmol/L)作用A-549细胞24h,可使细胞发生G1/S期阻滞。3种浓度(15、30、60μmol/L)的粗毛豚草素作用24h,可抑制A-549细胞周期蛋白cyclinD1、CDK4的表达,使p21蛋白表达增高,但对p27蛋白表达无明显影响。粗毛豚草素(15、30、60μmol/L)可显著抑制PCNA表达,其表达强度分别为(35.7±2.3)%、(26.6±2.1)%和(14.1±2.2)%,均低于对照组(45.2±3.3)%(P﹤0.01)。结论 粗毛豚草素可抑制肺癌细胞A-549增殖,其机制可能与改变细胞周期分布,下调cyclinD1、CDK4表达,上调p21的表达等有关。      

参麦注射液对培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响和机理研究

目的 研究参麦注射液对血管平滑肌细胞增殖的影响和机理。方法 以培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞为模型，通过细胞计数及测量3H-胸腺嘧啶核苷掺入量观察细胞增殖情况，同时测定培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂质过氧化物、前列环素(PGI2)的含量，比较分析加入不同剂量参麦注射液后上述指标的变化和相互关系。结果 不同剂量参麦注射液组的平滑肌细胞增殖及3H—胸腺嘧啶核苷掺入量均显著低于对照组，SOD活性及PGI2含量显著高于对照组，脂质过氧化程度显著降低。结论 参麦注射液对血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用，并呈剂量依赖关系，其作用可能与增加SOD活性、降低脂质过氧化物水平，升高PGI2／TXA2有关。     

洛伐他汀对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨洛伐他汀对醛固酮诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用胰酶消化法分离培养SpragueDawley大鼠心肌成纤维细胞,以3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)掺入法、四氮唑蓝比色法和流式细胞仪观察洛伐他汀对醛固酮诱导心肌成纤维细胞增殖的DNA合成、细胞数目和细胞周期的影响。结果:(1)0.1,1,10μmol·L-1浓度的洛伐他汀抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞3HTdR掺入率和A490值,其中1,10μmol·L-1组的3HTdR掺入率[(1292±s152),(1030±163)counts·min-1]和A490值[(0.287±0.008),(0.231±0.007)]显著低于对照组、0.1和0.01μmol·L-1组(P<0.01);(2)洛伐他汀可增加G0/G1期细胞百分率,降低S期细胞百分率、增殖指数和DNA含量;(3)甲羟戊酸可逆转洛伐他汀的上述作用。结论:洛伐他汀可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及DNA合成,阻止其由G1期进入S期,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关。     

雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响

目的 探讨雷公藤多苷（TG）对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组（含5.5 mmol/L葡萄糖培养基）、高糖组（含25 mmol/L葡萄糖培养基）和12.5、25、50 mg/L TG组（分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基）。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧（ROS）水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶（SOD）水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Casp...     

硒化壳聚糖促进体外培养皮肤成纤维细胞增殖

目的研究硒化壳聚糖对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法用不同剂量（25、50、100、200、400mg/L）硒化壳聚糖作用于成纤维细胞,光镜下观察药物对细胞形态的影响;MTT法、3H-TdR掺入法、细胞生长动力学研究用于检测药物对细胞增殖影响,LDH漏出率检测药物对细胞增殖及损伤的影响,并以等体积细胞培养液处理为对照组。结果各药物浓度组处理细胞后,细胞形态未见明显改变,均可使细胞吸光度值增加,细胞倍增时间缩短,促进表皮细胞对3H-TdR的掺入（P〈0.05）,降低LDH漏出率（P〈0.05）。结论硒化壳聚糖对体外培养皮肤成纤维细胞增殖具有促进作用。     

白黎芦醇体外抗肝纤维化实验研究

目的:探讨白黎芦醇体外抗肝纤维化的作用机制。方法:原位灌流分离大鼠肝细胞,以维生素E作阳性对照,检测不同浓度白黎芦醇对四氯化碳(CCl4)损伤后肝细胞中丙二醛(MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性和肝细胞存活率的影响;并用肝星状细胞(HSC)与次氮基三醋酸铁共同培养产生氧应激后,检测不同浓度白黎芦醇对HSC增殖和Ⅰ型胶原生成的影响,并测定细胞培养液中MDA、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:白黎芦醇明显改善CCl4损伤后肝细胞存活率,抑制CCl4引起的ALT、MDA活性升高,并能明显抑制HSC氧应激后MDA活性升高和SOD活性的降低,抑制HSC增殖和Ⅰ型胶原的生成。结论:白黎芦醇抗肝纤维化作用可能与其抗脂质过氧化有关。