核因子-κB对哮喘炎性因子的调控

核因子κＢ（ＮＦκＢ）是近年来发现的重要基因转录因子,参与许多炎性因子的调控。哮喘气道炎症由多种细胞因子、粘附分子和炎性介质参与形成,因此对哮喘患者ＮＦκＢ的研究具有重要意义。一、ＮＦκＢ／ＮＦκＢ抑制因子（ＩκＢ）的种类和基本结构ＮＦκ...     

血管紧张素Ⅱ对单核细胞中转录因子的作用

目的：研究血管紧张素Ⅱ与单核细胞活化的相互关系。方法：采用脱氧核糖核酸蛋白质凝胶漂移泳动检测技术分析血管紧张素Ⅱ对单核细胞Ｕ９３７中的激活蛋白１（Ａｐ１）、激活蛋白２（Ａｐ２）、糖皮质激素应答元件结合蛋白（ＧＲＥ）、环磷酸腺苷应答元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）、ＧＣ框特异结合蛋白（Ｓｐ１）、核因子１（ＣＴＦ／ＮＦ１）、核因子κＢ（ＮＦκＢ）等转录因子结合活性的影响。结果：血管紧张素Ⅱ使单核细胞中的Ａｐ１、ＣＲＥＢ和ＮＦκＢ转录因子结合活性明显增强，未标记一致寡核苷酸和单克隆抗体竞争实验证明转录因子结合反应具有特异性。结论：血管紧张素Ⅱ对单核细胞Ｕ９３７的Ａｐ１、ＣＲＥＢ和ＮＦκＢ转录因子具有激活作用，该作用可能使单核细胞活化而粘附血管内皮。     

脂多糖和抗炎药物对肺血管内巨噬细胞核因子κB的影响

目的观察脂多糖（ＬＰＳ）致肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ）核因子κＢ（ＮＦκＢ）的活化及抗炎药物地塞米松（ＤＥＸ）和阿斯匹林（ＡＳＡ）对ＮＦκＢ的影响。方法用改良法分离、培养猪ＰＩＭ,设正常对照、ＬＰＳ刺激、ＤＥＸ和ＡＳＡ干预组,共４组。用凝胶电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）法和放射免疫分析（ＲＩＡ）法,分别检测ＰＩＭ核提取物ＮＦκＢ的活性和细胞培养上清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的含量。结果ＬＰＳ刺激组ＮＦκＢ活性于刺激后０５～４小时、ＴＮＦα含量于刺激后１～２小时高于刺激前和正常对照组（Ｐ＜０．０１）;二者在刺激后１小时呈显著正相关（ｒ＝０．９９１,Ｐ＜０．０１）。ＤＥＸ组和ＡＳＡ组ＮＦκＢ活性、ＴＮＦα含量虽较刺激前和正常对照组有所升高,但均显著低于ＬＰＳ组（Ｐ＜０．０１）。结论ＬＰＳ可诱导ＰＩＭＮＦκＢ激活,并进而导致ＴＮＦα的基因转录和表达增加;ＤＥＸ和ＡＳＡ可通过抑制ＮＦκＢ的活化而减少ＴＮＦα的释放。     

乙醇诱导HepG2细胞凋亡模型的建立及BCl-2对抗作用

目的研究 Ｂｃｌ－２家族蛋白在乙醇引发肝细胞凋亡时的作用。方法以 ＴＵＮＥＬ法、 ＤＮＡ梯度检测乙醇诱导ＨｅｐＧ_２肝细胞凋亡,以免疫组织化学法检测细胞中Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｂａｋ等蛋白表达情况,并以Ｂｃｌ－２腺病毒感染细胞观察其抗凋亡作用。结果体积分数 ０．２％、 １．０％乙醇处理 ２４ ｈ对 ＨｅＰＧ_２细胞无明显细胞毒性作用;３．０％组则有明显的细胞毒性作用,伴有典型的凋亡特征。免疫组织化学发现Ｂａｘ、Ｂａｋ蛋白在３．０％组显著增加;Ｂｃｌ－２腺病毒载体可部分抑制凋亡。结论 Ｂａｘ、Ｂａｋ蛋白加强表达在乙醇诱导ＨｅｏＧ_２细胞凋亡中起一定作用; Ｂｃｌ－２腺病毒载体可有效抑制乙醇诱导的凋亡。     

肝细胞癌P53，Bcl-2蛋白的表达和细胞凋亡

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）中细胞凋亡情况及其与Ｐ５３和Ｂｃｌ２蛋白表达的关系．方法细胞凋亡采用原位细胞凋亡检测法Ｐ５３和Ｂｃｌ２蛋白表达采用免疫组化方法．细胞凋亡与Ｐ５３，Ｂｃｌ２蛋白表达的关系采用双标记法进行检测．结果ＨＣＣ７０例，癌组织和癌周组织中细胞凋亡指数（１０００个细胞中）分别为３６±２０和１０６±３６．Ｂｃｌ２和突变型Ｐ５３蛋白检出率分别为２２９％和４２９％．Ｂｃｌ２主要表达在癌周组织中，抑制肝细胞凋亡；而Ｐ５３则仅表达在癌组织，抑制癌细胞凋亡．双染色显示细胞凋亡与Ｐ５３或Ｂｃｌ２不同时在一个细胞中表达．结论ＨＣＣ癌细胞凋亡减弱．突变型Ｐ５３蛋白是癌细胞凋亡减弱的主要原因，而Ｂｃｌ２则可能在维持ＨＣＣ的肝脏功能方面具有重要作用．     

白细胞介素12与慢性乙型肝炎

白细胞介素12(Ｉｎｔｅｒｌｕｋｉｎ－１２，ＩＬ－１２)是一种由单核吞噬细胞产生的细胞因子。它主要作用于细胞毒性T细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)，是迄今为止所发现的最有效的CTL和NK细胞活性刺激因子。目前研究认为，IL－１２能增强Ｔｈ１应答和抑制Ｔｈ2应答，在调控Ｔｈ细胞的分化上起重要作用。随着病毒性肝炎发病机理研究的不断深入，人们认为在乙肝病毒清除机制中，针对ＨＢV核衣壳抗原的T细胞反应起重要作用，ＨＢｃＡｇ/ＨＢｅＡｇ特异的Ｔｈ１和Ｔｈ2细胞亚群之间的平衡关系可能影响慢性化的产生和持续。ＨＢｃＡｇ和ＨＢ…     

雷公藤内酯醇对Bcl—2基因转染细胞凋亡作用的研究

目的：通过比较转染Ｂｃｌ－２（＋／＋）及未转染ｂｃｌ－２（－／－）原癌基因的２Ｂ４细胞，在雷公藤内酯醇作用下细胞凋亡和细胞增殖的差别，探讨了该化合物诱导淋巴细胞凋亡的机制。方法：以ｂｃｌ－２（＋／＋）２Ｂ４细胞及ｂｃｌ－２（－／－）２Ｂ４细胞为研究对象，结合流式细胞仪，ＤＮＡ凝胶电泳，及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入等方法，评价雷公藤内酯醇对此两种细胞的作用，结果：（１）雷公藤内酯醇只能促使ｂｃｌ－２（－／－     

核因子-κB与阿尔茨海默病

早在 2 0世纪 80年代中期Ｓｅｎ和Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ〔1〕 即在Ｂ淋巴细胞中发现一种特异结合于免疫球蛋白κ轻链基因增强子上的核转录因子蛋白 ,因而命名为核因子 κＢ (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢ ,ＮＦ κＢ)。ＮＦ κＢ是机体细胞快速反应系统中关键的因子 ,随其功能变化可快速调节细胞的转录程序 ,使其能适应外界应激情况〔2〕 。ＮＦ κＢ本身和调节分子的复杂性使得ＮＦ κＢ可在不同的细胞中发挥不同的生理作用。　　一、ＮＦ κＢ的功能与活化　　 1.ＮＦ κＢ的结构与活化 :现已证实多种细胞中均有ＮＦ κＢ ,其蛋白亚基主…     

肿瘤坏死因子-α诱导肝细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用

目的 研究肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）诱导肝细胞凋亡细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用机制。方法 分别注射脂多糖（ｌｉｐｏｐ ｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）和ＴＮＦ－α于Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ,ＧａｌＮ）致敏的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠造成暴发性肝衰竭模型,用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口原位末端标记（ｉｎ ｓｉｔｅ ｅｎｄ ｌａｂｅ     

乙醇诱导HepG2细胞调亡模型的建立及Bcl—2对抗作用

目的 研究Ｂｃｌ－２家族蛋白在乙醇引发肝细胞调亡时的作用。方法 以ＴＵＮＥＬ法,ＤＮＡ梯度检测乙醇诱导ＨｅｐＧ２肝细胞凋亡,以免疫组织化学法检测细胞中Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｂａｋ等蛋白表达情况,并以Ｂｃｌ－２腺病毒感染细胞观察其抗调亡作用。结果 体积分数０．２％、１．０％乙醇处理２４ｈ对ＨｅｐＧ２细胞无明显细胞毒性作用;３．０％组则有明显的细胞毒性作用,伴有典型的凋亡特征。免疫组织化学发现Ｂａｘ、Ｂ     

C-myc,Bcl-2与胃癌生物学行为和细胞凋亡

目的探讨癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ的表达变化与胃癌生物学行为和细胞凋亡的关系．方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法，检测６０例原发性胃癌组织（男３８例，女２２例，年龄３７岁～７５岁）癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ蛋白的表达变化；在普通光学显微镜下对受检组织的ＨＥ片进行形态学测量和凋亡细胞计数．结果受检组织６０例中，Ｃｍｙｃ阳性表达３７例（６２％），其表达与分化程度和临床分期呈显著性相关，且Ｃｍｙｃ阳性组织细胞凋亡指数（０７±０３）明显高于阴性组织（０３±０２）；所检标本中，Ｂｃｌ２阳性表达率为６８％（４１／６０），其中高分化胃癌的阳性表达率明显高于低分化胃癌（３２％ｖｓ９％）（Ｐ＜００５），阳性Ｂｃｌ２组织与阴性Ｂｃｌ２组织比较，前者凋亡指数明显低于后者（０４±０３ｖｓ０９±０５）（Ｐ＜００５）．结论Ｃｍｙｃ与Ｂｃｌ２基因的异常表达是胃癌生物学行为的重要影响因素，二者在胃癌形成过程中均起着一定的作用，并对细胞增生与凋亡有重要调节作用．     

羟基喜树碱诱导SMMC-7721细胞凋亡时线粒体凋亡诱导因子的转位研究

目的研究羟基喜树碱诱导肝癌细胞株SMMC-7721凋亡时线粒体凋亡相关蛋白凋亡诱导因子表达及从线粒体发生核转位的变化.方法用80 μg/ml羟基喜树碱作用于肝癌细胞株SMMC-7721后,用吖啶橙/溴化乙啶染色法观察细胞凋亡现象;用电子显微镜观察线粒体超微结构;分别用逆转录聚合酶链反应、Western blot检测凋亡诱导因子在mRNA与蛋白质水平表达的变化;用激光共聚焦显微镜观察凋亡诱导因子在细胞凋亡时从线粒体到核的迁移变化.结果 80μg/ml羟基喜树碱作用SMMC-7721细胞后,吖啶橙/溴化乙啶荧光双重染色可见细胞体积缩小、细胞皱缩、核碎裂等典型细胞凋亡形态学改变;超微结构观察发现线粒体肿胀;细胞凋亡时凋亡诱导因子在mRNA与蛋白质水平上的表达与对照组细胞相比没有明显变化,但凋亡诱导因子发生了从线粒体到核的迁移. 结论羟基喜树碱可以通过线粒体途径诱导人肝癌细胞发生凋亡;在线粒体凋亡途径中,线粒体凋亡相关蛋白凋亡诱导因子从线粒体释放并发生核转位可能与羟基喜树碱诱导细胞凋亡密切相关.     

抗Fas单克隆抗体诱导人胃癌细胞系SGC-7901细胞

目的探讨抗Ｆａｓ单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡的规律及在胃癌治疗中的意义．方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗Ｆａｓ单克隆抗体对胃癌细胞ＳＧＣ７９０１增殖周期的影响以及对细胞杀伤作用的方式,并检测了ＳＧＣ７９０１细胞表面Ｂｃｌ２的表达情况．．结果抗Ｆａｓ单克隆抗体有阻滞细胞周期、通过诱发凋亡而抑制肿瘤细胞生长的作用．经抗Ｆａｓ单克隆抗体处理后,ＳＧＣ７９０１细胞表面Ｂｃｌ２蛋白表达无明显变化．．结论抗Ｆａｓ单克隆抗体可以诱导胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１细胞凋亡．抗Ｆａｓ单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡与Ｂｃｌ２表达无关     

核因子-κB与治疗类风湿关节炎的药物

转录因子核因子 κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ κＢ ,ＮＦ κＢ)是可与多种基因启动子或增强子上的κＢ位点发生特异性结合并能促使基因的转录的蛋白质总称。ＮＦ κＢ为ＮＦ κＢ Ｒｅｌ家族的一员。在哺乳动物细胞中 ,已区分出如下几种核因子 κＢ的蛋白质 :ｐ6 5 ,ｃ Ｒｅｌ,ＲｅｌＢ ,ｖ Ｒｅｌ,ｐ5 0 ｐ10 5与 ｐ5 2 ｐ10 0 ,其中ｐ5 0与ＲｅｌＡ (ｐ6 5 )两亚基形成的异二聚体为最常见的形式[1 ,2 ] 。当细胞处于静息状态时 ,ＮＦ κＢ同源或异源二聚体与抑制性蛋白κＢ (ＩκＢｓ)以非活性的形式结合成三聚体存在于细胞质中。…     

胆囊肿瘤组织中细胞凋亡及bcl-2基因的研究

目的探讨细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ２在胆囊癌发生发展中的作用．方法用原位末端标记法（ＩＳＥＬ）和免疫组化ＡＢＣ法对２４例胆囊癌和１６例胆囊腺瘤中的凋亡细胞及其调控基因ｂｃｌ２的表达产物进行了检测．同时观察胆囊癌中的调亡细胞与胆囊癌病理类型、分化程度和浸润转移的关系，分析ｂｃｌ２基因对细胞凋亡的调控作用．结果胆囊癌、胆囊腺瘤中的细胞凋亡发生率分别为１００％和５６％；胆囊癌中的凋亡细胞数明显高于胆囊腺瘤（χ２＝３６１１１，Ｐ＜００１）；低分化腺癌及Ｎｅｖｉｎ分期Ｓ１～Ｓ３胆囊癌中的凋亡细胞数明显高于高分化及Ｎｅｖｉｎ分期Ｓ４，Ｓ５者（χ２＝１９０５１，Ｐ＜００１）．高分化腺癌中的凋亡细胞多呈点状分布，低分化腺癌及转移性胆囊癌中的凋亡细胞呈片状或块状分布．ｂｃｌ２基因在胆囊癌和胆囊腺瘤中的表达无显著差异（χ２＝１１１１，Ｐ＞００５）．在胆囊癌中，ｂｃｌ２产物阳性表达与细胞凋亡密切相关（χ２＝１１８２，Ｐ＜００１）．结论细胞凋亡ｂｃｌ２基因在胆囊癌发生发展中起重要作用     

核因子-kB在心力衰竭治疗中的研究进展

核因子-kB是一种重要的核转录因子，与免疫、细胞凋亡等重要生物学事件有着密切联系。近来大量研究表明其在心力衰竭发病机制中有着重要的作用，能特异性的调控心力衰竭时期核因子-kB活性必将为心力衰竭的治疗提供一个新的方向。     

红霉素对肺纤维化大鼠核因子κB活性及细胞因子mRNA表达的影响

目的　探讨红霉素治疗肺纤维化的机制和疗效。方法　实验用Ｗｉｓｔａｒ 大鼠８１ 只，分成三组：正常对照组、博莱霉素模型组和红霉素治疗组， 每组２７ 只。气管内注入单剂量博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型，于博莱霉素气管内注入后每日给予口服红霉素（１００ ｍｇ／ｋｇ）治疗，各组动物分别于气管内用药后第４、７ 和２８ 天处死动物。用凝胶电泳迁移实验测定肺泡巨噬细胞（ＡＭ） 的核因子（ＮＦ）κＢ活性；用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交测定肺组织的白细胞介素１（ＩＬ１）β和转化生长因子（ＴＧＦ）βｍＲＮＡ表达。结果红霉素治疗组第４ 和第７ 天时，ＡＭ 的ＮＦκＢ活性与博莱霉素模型组比较，差异有显著性（Ｐ＜０－０５） ，第７ 天时肺组织的ＩＬ１β和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达与博莱霉素模型组比较，差异有显著性（ Ｐ＜０－０５）。在病理上，红霉素减轻了肺泡炎及后续的肺纤维化。结论　在肺纤维化中，红霉素可能通过抑制ＮＦκＢ活性、ＩＬ１β和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达起抗炎和抗纤维化作用。     

肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达及意义

Ｂｃ１－２基因家族对细胞凋亡具有广泛的调控作用。其中，ｂｃｌ－２和ｂａｘ分别是最主要的抑制凋亡和促凋亡基因。多数肿瘤的ｂｃｌ－２蛋白表达升高，ｂａｘ蛋白表达下降。我们检测ｂｃｌ－２和ｂａｘ蛋白在肝癌组织及其细胞系的表达，并以正常肝组织及其细胞系作对照，探讨它们在肝癌细胞凋亡调控中的作用。 １．标本和细胞来源：第四军医大学西京医院手术切除的６６例人肝癌组织，其中肿瘤细胞分化程度高的Ⅰ级１９例、肿瘤细胞分化程度中等的Ⅱ级３０例、肿瘤细胞分化程度低的Ⅲ级３０例。２４例人正常肝组织取自尸检。人肝癌细胞系…     

网上快讯

美国糖尿病协会 (ＡＤＡ) 2 0 0 2年第 6 2届年会消息β细胞凋亡机制1.白细胞介素 1β介导 β细胞中ＣＲＥＢ诱导的ｂｃｌ 2表达下调 (2 1 ＯＲ)研究人员发现 ,当ＭＩＮ 6细胞暴露于白细胞介素 1(ＩＬ 1) β时 ,培养液中Ｂｃｌ 2蛋白含量显著下降 ,进一步研究显示ＩＬ 1β使Ｂｃｌ 2启动子活性下降。另外 ,以ＩＬ 1β长期处理ＭＩＮ 6可使转录因子ＣＲＥＢ磷酸化下降 (45 % )且ＣＲＥＢ蛋白含量显著降低。如将ＣＲＥＢ基因腺病毒转染ＭＩＮ 6细胞可防止细胞因子诱导的细胞凋亡。因此研究人员认为通过下调ＣＲＥＢ的功能以降低ｂｃｌ 2表达…     

细胞凋亡与肥胖相关的非酒精性脂肪性肝病

近年来，肥胖相关的非酒精性脂肪性肝病的发病率呈上升趋势，并严重影响着人们的健康。其中细胞凋亡及其相关因素肿瘤坏死因子-α，Fas系统，核因子-κB及组织蛋白酶B在肥胖相关的非酒精性脂肪性肝病的发病机制中起了重要的作用。本文概括综述细胞凋亡与其相关因素在肥胖相关的非酒精性脂肪性肝病中的作用。