低氧诱导因子-1ɑ、血管内皮生长因子及其受体在胰腺癌中的表达和预后

目的探讨胰腺癌组织中低氧诱导因子-1ɑ(HIF-1ɑ)、血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体1(VEGFR1)、受体2(VEGFR2)对胰腺癌微血管密度(MVD)的影响,以及这些蛋白的表达与胰腺癌根治性手术后患者生存期的关系。方法收集2008年1月—2012年5月在上海交通大学医学院附属仁济医院普外科行胰十二指肠切除术的50例胰腺癌患者的胰腺癌组织病理标本,并随机取其中15例患者的胰腺阴性切缘组织作为对照。采用免疫组织化学法检测胰腺癌组织、阴性切缘组织中HIF-1ɑ、VEGF、VEGFR1、VEGFR2的表达水平。以CD34单克隆抗体显示肿瘤微血管内皮细胞,计算肿瘤内MVD。结果共随访45例,随访率为90%。胰腺癌组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR1、VEGFR2阳性率分别为82.0%、84.0%、80.0%和84.0%,均显著高于阴性切缘组织的46.7%、26.7%、0、13.3%(P值均<0.05)。胰腺癌组织中,HIF-1α与VEGF(r=0.564)、VEGFR1(r=0.301)、VEGFR2(r=0.310)、MVD(r=0.443)呈正相关(P值均<0.05),VEGF与VEGFR1(r=0.383)、VEGFR2(r=0.342)呈正相关(P值均<0.05),VEGFR1与VEGFR2呈正相关(r=0.851,P<0.05)。胰腺癌组织中,VEGF(r=0.836)、VEGFR1(r=0.339)、VEGFR2(r=0.284)与肿瘤MVD均呈正相关(P值均<0.05)。结论胰腺癌组织中HIF-1α影响肿瘤分化,能促进VEGF、VEGFR1、VEGFR2表达,诱导肿瘤新生血管形成,增加MVD,促进肿瘤生长,影响患者术后的生存期。     

肾积水后缺氧诱导因子-1、血管内皮生长因子、微小RNA-210的动态表达

目的：观察小鼠肾积水后缺氧诱导因子‐1（HIF‐1）、血管内皮生长因子（VEGF）、微小RNA（miRNA）‐210在不同时间点的表达变化并探讨其调控机制。方法采用丝线结扎单侧输尿管的方法制备急性完全性单侧肾积水模型（UUO模型），分为假手术对照组和单侧肾积水组，于单侧肾积水后2、5、9、14 d分别颈椎脱臼处死。采用实时荧光定量 PCR检测肾积水后患肾各时间点HIF‐1 mRNA 、VEGF mRNA及miRNA‐210的表达变化，采用Western blot方法检测肾积水后各时间点HIF‐1蛋白的表达变化。结果 HIF‐1 mRNA表达水平在肾积水后表达量逐渐上调（P＜0．05）。VEGF mRNA及miRNA‐210表达水平在肾积水后2 d升高并达到高峰，于UUO后5、9、14 d表达量逐渐下调（P＜0．05）。HIF‐1蛋白表达量逐渐上调。结论肾积水后HIF‐1 mRNA及蛋白表达逐步上调，VEGF mRNA及miRNA‐210表达一过性上调，可能与肾积水后肾皮质被压迫机体对缺氧、缺血产生适应性反应有关。     

溺水脑损伤大鼠脑组织低氧诱导因子及血管内皮生长因子表达的变化

目的:观察淡水淹溺大鼠脑组织形态及病理学改变,检测脑内低氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨淹溺治疗的新途径.方法:制备淡水淹溺大鼠模型,随机分为淹溺致死组、淹溺2 min后存活3、6、12、24、40 h组,分别于溺水2 min后相应时间点处死大鼠,另设正常对照组(n=10).测定各组大鼠脑指数;观察脑组织病理改变;免疫组化法检测脑组织HIF-1α、VEGF的表达,并分析二者相关性.观察淹溺2 min后存活大鼠不同时间点(10、30 min,1、3、6、12、24、40 h)血氧饱和度的动态变化.结果:淹溺致死组、溺水后存活24、40 h组脑指数明显高于正常对照组;溺水后存活3、12 h组明显低于淹溺致死组,但高于正常对照组(P＜0.05).淹溺后即刻血氧饱和度为(59±5)%,以后逐渐上升,到12 h已基本恢复正常.脑水肿于淹溺后3 h出现,12～24 h逐渐加重,24 h最重,40 h水肿较前略有减轻.正常对照组脑组织无HIF-1α表达,淹溺致死组表达较低,随淹溺时间的延长HIF-1α表达逐渐上升,至淹溺后12 h达高峰(P＜0.05);VEGF表达结果类似.HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.629,P＜0.05).结论:淡水淹溺易导致严重脑损伤,机体可能通过促进HIF-1α合成进而上调VEGF表达来发挥脑保护作用.     

血管内皮生长因子、低氧诱导因子1α和生长抑制因子4在胃癌组织中的表达

目的探讨胃癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)和生长抑制因子4(ING4)的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测62例胃癌组织和28例正常胃组织中VEGF、HIF-1α和ING4的表达及微血管密度(MVD),分析VEGF、HIF-1α和ING4的表达与胃癌临床特征的关系。结果 62例胃癌组织中VEGF、HIF-1α和ING4的阳性表达率分别为59.7%(37/62)、72.6%(45/62)和51.5%(34/62),28例正常胃组织中VEGF、HIF-1α和ING4的阳性表达率分别为14.3%(4/28)、7.1%(2/28)和89.3%(25/28),胃癌组织中VEGF和HIF-1α的阳性表达率显著高于正常胃组织(P<0.01),而ING4的阳性表达率显著低于正常胃组织(P<0.01)。胃癌和正常胃组织中MVD分别为31.3±7.4和6.2±1.8,胃癌组织中MVD显著高于正常胃组织(P<0.01)。VEGF、HIF-1α的表达与胃癌的临床分期、淋巴结转移及浸润深度显著相关(P<0.05),ING4的表达与胃癌的临床分期、浸润深度及患者性别显著相关(P<0.05)。结论 ING4可能在胃癌的发生、发展过程发挥一定的抑制作用,HIF-1α和VEGF在胃癌发展过程中可能起促进作用。     

纳米微载体介导的低氧诱导因子-1圈套寡核苷酸对小鼠HepG2细胞血管内皮生长因子的作用

目的：以低氧诱导因子（HIF）-1为靶点,观察HIF-1转录因子圈套寡核苷酸（HIF-1decoy ODN））对小鼠HepG2细胞内血管内皮生长因子（VEGF）的作用,在分子水平为肝细胞癌干预靶点提供实验依据。方法：用ELISA法测定小鼠HepG2细胞内VEGF浓度。用逆转录-聚合酶链式反应测定小鼠HepCa细胞内VEGFmRNA。结果：HIF-1decoy ODN在体外能有效抑制HIF-1活性。Decoy ODN治疗后小鼠HepC2细胞内VEGF表达明显下降,而变异的decoy ODN无效果。结论：纳米微载体介导的HIF-1decoyODN能下调nepC2细胞的VEGF水平。     

低氧诱导因子-1α参与肿瘤血管形成的生物学机制研究进展

肿瘤血管的形成对肿瘤的生长、转移起到至关重要的作用。低氧诱导因子-1α作为重要的转录因子,在肿瘤的发生发展中始终扮演着举足轻重的角色,其能调控肿瘤血管的形成,并与其他因子共同促进肿瘤的发生与发展。本文将对低氧诱导因子-1α参与肿瘤血管形成的可能生物学机制进行综述,以期为理清其发生发展过程提供理论支撑、为其预防和治疗提供参考。     

缺氧诱导因子-1和血管内皮生长因子在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肝癌组织中HIF-1α和VEGF表达的相互关系及临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测36例肝癌及15例癌旁组织中HIF-1α、VEGF的表达，分析比较其与肝癌组织病理学的关系。结果肝癌组中的HIF一1α及VEGF的表达较癌旁组增强（P〈0．01），且肝癌组中无包膜及已转移者H1F-1α、VEGF的表达水平相应较有包膜及未发生转移者高（P〈0．05）；同时肝癌组织中HIF-α、VEGF两者的表达呈正相关（r=0．62，P〈0．05）。结论肝癌组织中HIF-1α和VEGF表达可反映肝癌的生物学行为，可作为预测肝癌浸润转移的一项重要指标。     

低氧诱导因子-2α和血管内皮生长因子在肾细胞癌中的表达及意义

目的 探讨低氧诱导因子-2α（HIF-2α）和血管内皮生长因子（VEGF）在肾细胞癌（RCC）中的表达及意义.方法 免疫组织化学方法检测76例RCC组织和12例癌旁正常组织中HIF-2α和VEGF的表达水平,分析与肾细胞癌的相关性.结果 HIF-2α、VEGF在正常肾组织中不表达,而在肾细胞癌组织中表达较强.HIF-2α与肿瘤组织的病理类型、病理分级及临床分期有显著相关性,VEGF与肿瘤组织病理分级及临床分期有显著相关性.结论 HIF-2α和VEGF与肾细胞癌的生长密切相关,HIF-2α和VEGF的研究可能成为治疗肾细胞癌患者潜在的生物靶位.     

血管内皮生长因子和低氧诱导因子1α在颈动脉粥样硬化性狭窄患者血清中的表达及临床意义

目的探讨颈动脉粥样硬化性狭窄患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)的变化及临床意义。方法采用酶连免疫吸附反应(ELISA)方法检测92例颈动脉粥样硬化性狭窄(CAS)患者和30例健康查体者血清中VEGF、HIF-1α水平。将92例患者根据颈动脉粥样硬化性狭窄程度分为轻度狭窄、中度狭窄、重度狭窄、极重度狭窄,记录患者一般临床资料,并分析CAS发生的危险因素。结果 CAS组高血压、糖尿病发生率显著高于对照组(P0.05),随颈动脉狭窄程度的加重SBP和FPG水平逐渐升高。CAS组VEGF、HIF-1α均显著高于对照组,相比较有显著性差异(t=6.807、7.500,P0.01)。CAS患者按照颈动脉粥样硬化性狭窄标准进行分级后发现血清VEGF、HIF-1α水平随着颈动脉狭窄程度的加重而逐渐上升,CAS患者的VEGF与HIF-1α水平呈正相关性。结论VEGF和HIF-1α在颈动脉粥样硬化性狭窄患者血清中呈高表达,其表达水平随着颈动脉狭窄程度的加重而升高,并且血清VEGF水平随着HIF-1α的变化而改变。血清VEGF和HIF-1α高水平可能成为CAS发生和发展的危险因素。     

核转录因子-κB信号途径对鼻息肉细胞中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)信号途径对低氧培养条件下鼻息肉细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨NF-κB信号途径与鼻息肉发生、发展的关系。方法收集2012年1月至2014年12月佳木斯大学附属第一医院耳鼻喉手术切除的鼻息肉及下鼻甲组织标本,取鼻息肉和下鼻甲组织,获得鼻息肉细胞和下鼻甲细胞,进行细胞原代培养,待细胞生长至90%时进行低氧培养;另取体外培养生长至90%的细胞,加入NF-κB抑制剂BAY11-7082(抑制剂处理组),不加抑制剂的细胞作为对照(未加抑制剂组),然后进行低氧培养;分别收取培养0、3、6、9 h的细胞,采用Western blot法检测细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白的表达。结果与0 h时比较,低氧培养3、6、9 h时鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白表达均显著增加(P<0.05),但下鼻甲细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。低氧培养6 h时鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白表达显著高于低氧培养3、9 h时(P<0.05),但低氧培养3 h与9 h时鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与0 h时比较,低氧培养3、6、9 h时未加抑制剂组鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达均显著增加(P<0.05);低氧培养6 h时未加抑制剂组鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达显著高于低氧培养3、9 h时(P<0.05),但低氧培养3 h与9 h时未加抑制剂组鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。低氧培养0、3、6、9 h时抑制剂处理组鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。低氧培养0 h时,未加抑制剂组与抑制剂处理组鼻息肉细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。低氧培养3、6、9 h时,抑制剂处理组鼻息肉细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达均显著低于未加抑制剂组(P<0.05)。结论在低氧条件下,鼻息肉细胞中HIF-1α、VEGF、NF-κB p65蛋白表达增加;NF-κB信号通路可能介导了低氧诱导HIF-1α和VEGF蛋白表达的过程,进而参与鼻息肉的发生和发展。     

诱导型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子在舌癌细胞株中的表达

 【目的】探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血管内皮生长因子（VEGF）在舌鳞癌细胞株Tca8113中的表达,为进一步研究iNOS和VEGF在舌鳞癌肿瘤血管生成中的作用提供实验基础。【方法】采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和SP免疫组化方法,对舌鳞癌细胞株Tca8113中iNOS和VEGF mRNA和蛋白表达情况进行检测。【结果】RT-PCR检测到舌鳞癌Tca8113细胞株中iNOS／VEGF mRNA条带明显,SP免疫组化检测到iNOS／VEGF蛋白在舌癌细胞胞浆中呈强阳性表达。【结论】iNOS／VEGF mRNA和蛋白在舌鳞癌Tca8113细胞株中呈高水平表达。     

诱导型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子在舌癌细胞株中的表达

【目的】探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血管内皮生长因子（VEGF）在舌鳞癌细胞株Tca8113中的表达,为进一步研究iNOS和VEGF在舌鳞癌肿瘤血管生成中的作用提供实验基础。【方法】采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和SP免疫组化方法,对舌鳞癌细胞株Tca8113中iNOS和VEGF mRNA和蛋白表达情况进行检测。【结果】RT-PCR检测到舌鳞癌Tca8113细胞株中iNOS／VEGF mRNA条带明显,SP免疫组化检测到iNOS／VEGF蛋白在舌癌细胞胞浆中呈强阳性表达。【结论】iNOS／VEGF mRNA和蛋白在舌鳞癌Tca8113细胞株中呈高水平表达。     

缺氧预适应小鼠脑组织中缺氧诱导因子-1的表达

为探讨缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )在缺氧预适应小鼠脑组织中的表达 ,用Western印迹法检测慢性缺氧 (H)和不缺氧 (C)HeLa细胞、急性重复性缺氧 0次 (H0 )、1次 (H1)、4次 (H4 )小鼠脑组织中的HIF 1α。结果 :慢性缺氧HeLa细胞中可检测到较多的HIF 1α,H0 组脑组织中检测不到HIF 1α ,H1组检测到微量HIF 1α,H4 组检测到较多HIF 1α。结果显示 :脑组织中HIF 1α的含量随缺氧预适应的产生而逐步增加 ,提示HIF 1可能参与缺氧预适应的形成。     

神经生长因子在病毒性心肌炎心肌中的表达及法医学意义

目的检测病毒性心肌炎(VM)患者心肌组织中神经生长因子(NGF)的表达,探讨其在病毒性心肌炎发病过程中的作用及其在法医学中的意义。方法取10例病毒性心肌炎死者心肌组织为实验组,10例颅脑损伤死者心肌组织为对照组,HE染色并采用免疫组化法(SABC法)检测NGF表达,对其表达水平与心肌病变积分进行相关性分析。结果病毒性心肌炎死者心肌组织与对照组心肌组织中NGF表达有显著性差异(P<0.05),NGF免疫组化阳性颗粒指数与心肌病变积分呈显著正相关(r=0.91,P<0.05)。结论NGF过度表达可能在病毒性心肌炎的发病机制中起重要作用,NGF对病毒性心肌炎猝死有辅助诊断价值。     

ECGF生物活性与肝素的相关性研究

观察肝素与内皮细胞生长因子（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ。ＥＣＧＦ）的分离、生物活性及促创伤愈合作用的相关性。结果表明：用肝素亲和层析分离ＥＣＧＦ纯度高、产量多；肝素可使ＥＣＧＦ生物活性增加；另外，在动物实验中，肝素与ＥＣＧＦ合用可使创伤提前愈合。     

内皮细胞生长因子的分离和纯化

参照 Lobb 和 Fett 方法,用肝素亲和层析法从牛脑组织中提取出纯度较高的内皮细胞生长因子,后者能明显促进体外人脐静脉内皮细胞增殖。     

血管内皮细胞生长因子及其受体在大鼠肺气肿模型中的表达

目的　探讨血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体 2 (VEGFR 2 )在大鼠肺气肿模型中的表达及意义。方法　经气管内注入脂多糖及熏香烟法建立大鼠肺气肿模型。免疫组化法检测VEGF在肺组织的表达部位 ,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中VEGF的含量 ,Westernblot检测VEGFR 2蛋白的表达。结果　VEGF在肺泡上皮细胞、支气管粘膜上皮细胞及血管内皮细胞表达 ,模型组BALF的VEGF含量 (110 2± 4 6 0 .1)pg/mL较对照组 (2 0 17± 84 0 .6 ) pg/mL明显降低 (P <0 .0 5 ) ;模型组VEGFR 2蛋白的表达低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　VEGF及VEGFR 2的减少可能参与了肺气肿的发生     

VEGF及PD-ECGF在膀胱癌的表达及与肿瘤血管生成的关系

目的：研究膀胱移行细胞癌中血管内皮生长因子（VEGF），血小板源性内皮细胞生长因子（PD－ECGF）的表达及肿瘤血管形成的情况及意义。方法：采用免疫组化SP法分析68例原发性膀胱移行细胞部的VEGF，PDECGF的表达情况，检测CD34以计算微血管密度（MVD）。结果：膀胱癌中VEGF表达率为61．76％（42／68）；PDECGF表达率为54．41％（37／68）；二者共同阳性表达率为38．24％（26／68）。VEGF，PD－ECGF与膀胱癌的分级，分期和预后相关，并与MVD呈正相关（P＜0．05）。此外二者之间也有相关性（P＜0．05）。结论：VEGF，PD－ECGF能共同调节膀胱癌的血管形成，可用于判断膀胱癌的生物学行为。     

血管内皮生长因子促进慢性心肌梗死血管生成

目的 探索血管内皮生长因子对猪慢性心肌梗死的治疗作用。方法 通过开胸直视下结扎前降支建立猪的心肌梗死模型,1个月后将建模成功的猪分为血管内皮细胞生长因子（VEGF）组和对照组,分别直视下心肌内注射VEGF和磷酸缓冲盐溶液（PBS）,2个月后行MR检查比较两组心功能参数,梗死心肌组织分别做HE染色和免疫组化染色,分析梗死区域微血管生成和细胞增殖情况。结果 因子注射2个月后,两组干预前后的心功能指标差值比较分别为左心室射血分数（LVEF）（4.0%±10.4% vs 1.8%±1.6%,P>0.05）、心排出量（CO）（2.1±1.6L/min vs 1.4±0.8L/min,P>0.05）、左心室后壁舒张期厚度（LVPWTd）（2.8±0.5mm vs 2.0±0.8mm,P>0.05）、左心室舒张末期容积（EDV）（24.0±5.0ml vs 39.6±16.2ml,P>0.05）。通过免疫组化染色分析,VEGF组的微动脉密度比对照组高（87.0±9.1 vs 50.8±7.2,P<0.05）,毛细血管密度比对照组高（367.5±50.8 vs 188.5±14.3,P<0.05）,增殖细胞核数目较对照组多（432.5±37.7 vs 132.0±29.0,P<0.05）。结论 VEGF能够促进梗死心肌的血管新生,促进梗死区域侧支循环建立。