聚氨酯组织工程支架的研究进展

聚氨酯(Polyurethane,PU)材料以其原料来源丰富、加工方式多样、性能优异且覆盖范围宽,而应用于生产、生活的多个领域。商业用途的PU早在20世纪30年代即投入应用,而医疗用途的PU在20世纪60年代初才开始应用。由于聚合     

性激素对系膜细胞增殖的影响

由肾小球肾炎和高血压性肾小球硬化所致的终末期肾功能衰竭中男性发病率高于女性。多种肾脏病发展男性快于女性［１］。肾小球硬化包括细胞增殖和细胞外基质合成，我们实验观察性激素对体外培养大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖和基质合成的直接影响。一、材料和方法１．ＭＣ的培养与鉴定：雄性ＳＤ大白鼠４只，６～８周龄，１５０～２００ｇ，由河南医科大学动物实验中心提供。ＭＣ的培养与鉴定按谌贻璞等建立的方法进行［２］。２．性激素对ＭＣ增殖的影响：（１）对活细胞计数的影响：将亚培养第五代ＭＣ种于２４孔（１００００个／孔）培…     

神经递质对肝细胞增殖的影响

目的：探讨自主神经控制对人肝细胞增殖的影响及其机理，并对增殖相关受体定位。方法：用去甲肾上腺素（NE）及其拮抗剂及激动剂和乙酰胆碱（Ach）及其阻滞剂作用于人传代正常肝L02细胞及肝癌Bel-7402细胞，分别于4h、24h、48h及72h用改良MTT法检测上述药物对细胞增殖的影响；免疫组织化学染色法对肝L02细胞的肾上腺素受体（α1B-AR及β2－AR）和表皮生长因子受体（EGFR）定位。结果：NE对人正常肝细胞及肝癌细胞具有促增殖作用，且随浓度增加其促增殖作用也增加，4h的增殖率较其它时间点显著增高（P＜0．05）；NE＋心得安组的作用与NE组间差异无显著性意义；二羟苯基异丙氨基乙醇的作用不明显；Ach对人正常肝细胞的增殖具有抑制作用，且随浓度增加其抑制作用也增加，加用阿托品在24h及48h与Ach比抑制率显著降低（P＜0．05）；玻珀胆碱组在24h、48h及72h对细胞的增殖也具有抑制作用（P＜0．05，P＜0．01）。所有人肝L02细胞都呈α1B-AR、β2-AR及EGFR免疫反应阳性，主要定位于胞膜及胞浆。结论：血清存在下，交感神经递质NE早期对人正常肝细胞L02及人肝癌细胞Bel-7402具有促增殖作用，其作用是通过激动α-AR实现的，β－AR对人肝细胞增殖无影响。副交感神经递质Ach对人正常肝细胞L02的增殖具有抑制作用，其作用是通过激动M及N型胆碱受体实现的。     

补骨脂素对良性增生前列腺细胞增殖的影响

目的:观察补骨脂素对良性前列腺增生的抑制效果,探讨其作用机制.方法:将20只SD大鼠随机均分为两组,去势7 d后皮下注射丙酸睾酮5 mg/kg,同时实验组灌胃给予补骨脂素40 mg/kg,对照组给予等量蒸馏水,30 d后处死,称取前列腺湿重、计算前列腺指数,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)指数,光镜观察前列腺组织病理学改变.结果:实验组大鼠前列腺湿重、前列腺指数和PCNA指数均显著低于对照组(P<0.05).结论:补骨脂素能显著抑制模型大鼠的良性前列腺增生,其机制可能是通过降低前列腺细胞增殖而实现的.     

氧自由基对体内生长胆管癌细胞增殖的影响

为探讨胆管癌细胞内氧自由基浓度与体内培养胆管癌细胞增殖的关系,我们利用体外培养的胆管癌细胞QB ,建立裸鼠动物模型,检测不同浓度的氧自由基对动物体内生长胆管癌细胞增殖的影响。一、材料与方法1.主要材料:丙二醛(MDA )试剂盒购自南京生物工程研究所;Dulbecco改良培养基(DMEM )及新生牛血清购自Ser va公司;SOD及H2 O2 均为Sigma公司产品;紫外分光光度仪(瑞典LKB公司) ;流式细胞仪(美国杜邦公司) ;2 4孔细胞培养板(美国Costar公司产品)等。2 .细胞培养:体外培养胆管癌细胞QB由西南医院肝胆医院建株。材料取自低分化肝门部胆管…     

血竭提取物对角质形成细胞增殖的影响

目的:观察血竭提取物对体外培养角质形成细胞增殖的影响,探讨血竭促进创面愈合的机制。方法:将血竭经过氯仿、乙酸乙酯、乙醇回流提取得到三种提取液,进行角质形成细胞的培养,噻唑蓝(MTT)法检测不同血竭提取物在不同浓度以及不同时间点对体外培养角质形成细胞增殖的影响,并绘制最适浓度下细胞生长曲线。利用流式细胞仪分析最适浓度培养条件下角质形成细胞的细胞周期变化。结果:血竭乙酸乙酯提取物在0.0625～0.5mg/ml浓度范围内,促进角质形成细胞增殖,且呈剂量依赖性,在0.5mg/ml浓度值时促进作用最显著,此条件下细胞DNA合成S期较对照组增加25.7%(P<0.01)。结论:血竭乙酸乙酯提取物具有显著促进角质形成细胞增殖作用,提示血竭可能具有促进创面愈合中再上皮化的作用。     

神经生长因子对人胆管癌细胞增殖作用的影响

目的探讨神经生长因子（NGF）对人胆管癌细胞株QBC939增殖能力的影响。方法构建β-NGF的真核表达载体pcDNA3．0-NGF，经酶切鉴定后，采用脂质体lipofectamine转染人胆管埔细胞株QBC939。Western Blot检测蛋白的表达情况。MTT法检测转染前后细胞的增殖情况。结果成功构建β—NGF的真核表达载体pcDNA3．0-NGF：转染QBC939细胞后，能稳定表达β-NGF蛋白，且表达强度随转染质粒浓度的增加而增强，与对照组相比，差异有显著性（P〈0.0001）。MTT检测转染后的细胞增殖能力增强，与空白对照组和转染空质粒组相比，差异有显著性（P〈0．01）．且表现出量效依赖关系。结论NGF具有促进胆管癌细胞株QBC939增殖的作用。     

表皮生长因子受体阻断对前列腺癌细胞增殖的影响

目的：探讨阻断表皮生长因子受体（EGFR）对前列腺癌（PCa）细胞增殖的影响。方法：人PCa细胞株DU－145，分别加或不加抗EGFR单抗C225（20nmol/L)阻断EGFR体外细胞培养7d，收集细胞、计数以观察对PCa雄激素非依赖增殖的影响，并采用免疫沉淀和Western blot方法，探讨阻断EGFR后不同时相点磷酸化有丝分裂原激活下蛋白激酶MAPK，及p27^kipl的表达变化。结果：阻断EGFR与对照相比较可使DU－145细胞增殖被抑制达35％，8h后磷酸化MAPK的表达水平开始降低，p27^kip1表达开始升高，至24h最明显。结论：阻断EGFR可抑制PCa细胞增殖，可能的机制是MAPK的活性降低，使p27^kip1的表达升高而细胞周期被阻。     

TRPM7在膀胱癌细胞增殖与凋亡中的调控作用

目的 探讨薄荷醇受体7（transient receptorpotential melastatin 7,TRPM7）在膀胱癌细胞株T24细胞增殖与凋亡中的调控作用及分子机制.方法 采用RT-PCR及Western blot检测T24细胞株中TRPM7 mRNA及蛋白的表达;分别采用通道阻滞剂及基因沉默的方法阻断TRPM7离子通道的功能,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率,Western blot检测Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达.结果 RT-PCR及Western blot证实T24细胞株中存在TRPM7 mRNA及蛋白的表达;采用基因沉默及通道阻滞剂阻断TRPM7的功能后,T24细胞存活率分别下降了56.48％和54.87％,处于G0/G1期的细胞随阻滞剂浓度增加而显著增加,细胞凋亡率亦随之增加并呈浓度依赖性,与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.Western blot显示阻断TRPM7后,T24细胞Cdk4、Cdk6的表达减少,而Cyto C的表达增加.结论 TRPM7可促进T24细胞增殖,抑制细胞凋亡.这一过程可能通过调节Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达来实现.阻断TRPM7的功能,能够抑制T24细胞增殖,促进细胞凋亡,可能为临床治疗膀胱癌提供新的靶点.     

尿路上皮细胞分化的研究进展

尿路上皮是分布于肾盂、输尿管、膀胱及尿道近膀胱部的一类移行上皮。在尿路上皮发育或损伤修复的过程中,基底层干细胞中一系列转录因子的分级调控发挥了重要作用,最终形成分化成熟的移行上皮细胞并表达尿路上皮特异性标志蛋白。正确理解正常尿路上皮分化的过程,不仅有利于了解尿路上皮癌的发生和分期规律,寻找相应的治疗靶点并提供可能的治疗...     

不同浓度罗哌卡因对乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的作用研究

目的观察不同浓度罗哌卡因对乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的影响并探讨其机制。方法人乳腺癌细胞MCF-7接种于培养板培养24h,随机分为四组:对照组(C组)、罗哌卡因100μg/ml组(R1组)、罗哌卡因200μg/ml组(R2组)和罗哌卡因400μg/ml组(R3组)处理乳腺癌MCF-7细胞48h后,检测其细胞增殖能力(细胞活力)和细胞周期。检测R3组作用于MCF-7细胞48h后TCF-4、beta-catenin的蛋白表达水平。结果 R2、R3组MCF-7细胞活力明显低于C组(P0.05);R1、R2、R3组MCF-7细胞G0/G1期细胞明显少于C组,S期和G2/M期细胞明显多于C组(P0.05);R3组TCF-4和beta-catenin蛋白表达水平明显低于C组(P0.05)。结论罗哌卡因可能通过下调TCF-4和beta-catenin蛋白表达水平抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖。     

MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测63例膀胱癌组织和癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU-87、J82、T24、5637)和正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中的MTUS2-AS2表达。以MTUS2-...     

转染CXCR7重组质粒对膀胱癌5637细胞株增殖和侵袭的影响

目的 探讨转染趋化因子受体CXCR7对膀胱癌细胞株5637增殖和凋亡的影响.方法 构建CXCR7表达质粒转染膀胱癌5637细胞,并通过四甲基偶氮唑蓝盐比色法(MTT)实验和Transwell小室实验与未转染组进行比较.结果 成功构建了CXCR7慢病毒表达载体.与空质粒组相比,转染CXCR7重组质粒能促进膀胱癌5637细胞中CXCR7的表达,通过MTT表明转染重组质粒组加强细胞的增殖能力和Transwell法检测表明穿过的细胞数显著增加,高表达CXCR7能够促进5637细胞的迁移能力.结论 CXCR7的高表达能提高膀胱癌细胞的增殖和侵袭能力,提示CXCR7与膀胱癌的发生、发展有关.     

雷帕霉素纳米粒对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:观察雷帕霉素( RAPA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米微粒(RAPA-PLGA-NPs)对血管平滑肌细胞( VSMCs)增殖的抑制作用.方法:原代培养大鼠VSMCs,并采用α-肌动蛋白免疫组化染色进行鉴定;透射电镜观察VSMCs对RAPA-PLGA-NPs的摄取;分别用MTT法和Western blot法检测RAPA-PLGA-NPs对VSMCs增殖的抑制作用以及RAPA靶蛋白(mTOR)下游蛋白表达的影响,并同时以游离RAPA作为对照.结果:成功培养VSMCs并鉴定;透射电镜显示RAPA-PLGA-NPs可被VSMCs大量摄取于细胞质中;MTT结果显示,RAPA-PLGA-NPs(1,10,100 ng/mL)能浓度依赖性地抑制VSMCs增殖(均P＜0.05),且1 ng/mL的RAPA-PLGA-NPs与10 ng/mL游离RAPA的抑制作用相似(p＞0.05);Western blot结果显示,2个浓度(1,10 ng/mL)的RAPA-PLGA-NPs均能降低VSMCs中S6K1和4E-BP1磷酸化水平,且作用均较游离RAPA( 10 ng/mL)明显.结论:RAPA-PLGA-NPs穿透力强,能迅速被细胞摄取,生物学效应明显强于其游离药物.     

逆行上尿路腔内碎石术后并发急性尿源性感染的相关危险因素分析

目的探讨上尿路腔内碎石术后并发急性尿源性感染的危险因素。方法选取2013年2月至2014年11月在本院进行逆行上尿路腔内碎石术患者843例,按照术后是否发生急性尿源性感染进行分组,不发生感染的为A组(747例),发生感染的为B组(96例),收集并整理两组患者临床资料,采用单因素分析和logistic回归分析法分析逆行腔内碎石术后并发急性尿源性感染的危险因素。结果单因素结果显示年龄、性别、结石直径、手术时间、糖尿病、手术方式选择、术前是否应用抗生素为术后发生急性尿源性感染影响因素。Logistic回归分析结果显示女性、结石直径>2 cm、手术时间>90 min、糖尿病、尿白细胞>10个/HP、尿培养阳性为术后发生急性尿源性感染独立危险因素(P<0.05)。结论女性患者、结石直径>2 cm、手术时间>90 min、糖尿病、尿白细胞>10个/HP、尿培养阳性为患者术后并发急性尿源性感染的危险因素,此类患者术后应警惕急性尿源性感染的发生。     

细胞增殖对DNA损伤敏感度的影响

目的 观察细胞增殖状态对DNA损伤敏感度的影响.方法 相同时间和强度的紫外线(uV)作用于过以及未经过植物m凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞(PBLs),荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DSBs)处的,y-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤,用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.结果 经PHA刺激PBLs细胞进人增殖状态,UV可引起DNA双链断裂,增殖期的PBLs细胞DNA损伤程度明显大于静止期PBLs细胞.结论 受到相同打击后,处于增殖期的淋巴细胞DNA损伤较静止期更为明显.     

PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞株增殖及迁移的影响

目的 探讨PBK/TOPK在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞株增殖及迁移的影响。方法 采用QRT-PCR及Western blot检测3例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达。随后,对膀胱癌BIU-87细胞株中PBK/TOPK的表达分别干扰及过表达,通过CCK-8实验检测细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力下降(P<0.05) ;而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力增强(P<0.05) 。结论 PBK/TOPK高表达于膀胱癌,有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移。     

5-Aza-dc对膀胱癌ScaBer细胞CDH13基因甲基化状态和蛋白表达以及细胞增殖迁移侵袭的影响

目的 探讨去甲基化药物5-Aza-dc对膀胱癌ScaBer细胞CDH13基因甲基化状态和蛋白表达以及细胞增殖迁移侵袭的影响.方法 以膀胱癌ScaBer细胞为研究对象,分为5-Aza-dc处理组和对照组.应用5-Aza-dc与ScaBer细胞共同孵育后,用MSP检测CDH13基因甲基化状态、western blot检测CDH13的表达水平、MTT法检测细胞增殖、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell法检测细胞侵袭能力.结果 5-Aza-dc与ScaBer细胞共同孵育后CDH13基因甲基化状态得到逆转,与对照组相比CDH13蛋白表达明显增加(P＜ 0.05);实验组细胞增殖能力下降,迁移和侵袭能力减弱,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 5-Aza-dc可逆转CDH13基因的甲基化状态并使其蛋白表达增加,CDH13表达增加后细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱,CDH13有可能成为膀胱癌治疗的新的靶点.