CCDC69在乳腺癌中的表达及其临床意义

 目的 探讨卷曲螺旋结构域蛋白69(coiled-coil domain-containing protein 69,CCDC69)在乳腺癌组织中的表达情况及其与乳腺癌患者临床特征和预后之间的相关性,预测其影响乳腺癌进展的分子机制。方法 从癌症基因组图集(the cancer genome atlas,TCGA)数据库下载乳腺癌数据集,获得CCDC69基因表达谱和临床信息。分析CCDC69在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达情况;分析CCDC69的表达量与乳腺癌患者临床特征及预后之间的相关性。采用基因富集分析(GSEA)预测CCDC69可能参与的相关信号通路。结果 CCDC69在乳腺癌组织中表达量较正常乳腺组织低(P＜0.001);CCDC69表达量与乳腺癌患者年龄(P=0.020)和肿瘤体积(P=0.027)相关。CCDC69低表达的患者总体生存期短于CCDC69高表达的患者(P=0.004),其低表达是影响乳腺癌患者预后的独立因素(P=0.010)。CCDC69与MYC信号通路、E2F信号通路、未折叠蛋白反应、糖酵解基因集负相关。结论 CCDC69可能是乳腺癌发生发展过程中的抑癌基因,有望成为乳腺癌潜在的治疗靶点和预后指标。     

TMPO基因表达对肺癌患者临床预后的影响

 目的 探讨TMPO基因对肺癌患者预后的影响。方法 检索并下载NCBI的肿瘤公共数据集,分析肺癌基因表达谱资料及临床信息,明确TMPO基因在正常肺组织和肺癌组织中的表达差异,并利用基因集富集分析方法(GSEA)进一步探讨TMPO基因对肺癌细胞的具体作用机制。结果 TMPO基因在肺癌组织中的相对表达值为0.254 ±0.594,明显高于在正常肺组织中的相对表达值-0.332 ±0.285(P<0.0001 )。TMPO基因高表达肺癌患者的TNM分期明显高于TMPO低表达的肺癌患者(P<0.0001, P<0.0001, P=0.031), TMPO低表达组肺癌患者的无进展生存期(P<0.0001)、总生存期(P<0.0001)结果均优于TMPO高表达组的肺癌患者。TMPO高表达样本富集了与DNA修复、MYC信号通路1、有丝分裂、细胞周期G2M检查点、精子发生、E2F信号通路、MYC信号通路2、mTORC1信号通路相关的基因集。结论 TMPO基因在多种肿瘤中高表达,其通过多种途径来促使肿瘤细胞增殖,进而影响肿瘤患者的临床预后,因此TMPO基因可以作为诊疗肺癌的标志物和潜在靶点。     

乙肝相关性肝癌MLH1与p53的表达及其意义

 目的 探讨MLH1与p53在乙型肝炎病毒 (hepatitis B virus ,HBV) 感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义。方法 选取原位肝移植手术术后HBV相关性HCC伴肝硬化患者238例,应用免疫组化的方法检测肝癌组织和癌旁组织中MLH1与p53的表达情况,并以25例正常肝组织和良性肝病组作为对照。结果 MLH1在肝癌组织的阳性表达率为31.09％(74/238),在癌旁组织的表达阳性率为26.05％(62/238),良性肝病对照组阳性表达率为48.00％(12/25),各组表达的差异无统计学意义(P=0.053)。相关性分析显示,MLH1基因的表达与患者肝移植术前AFP含量(r=0.221,P=0.001)及术后的复发(r=-0.159,P=0.014)有相关性,与HCC组织病理学Edmondson分级(P=0.060)及TNM分期(P=0.065)有相关趋势。p53在肝癌组织的表达阳性率为47.06％(112/238),在癌旁组织的表达阳性率为0.84％(2/238),良性肝病对照组均为阴性,p53蛋白的表达在癌组织中明显高于其在癌旁及良性肝病中的表达(P=0.000);p53表达情况与患者肝移植术前AFP含量有相关性(r=0.172,P=0.008),与血管侵犯(P=0.053)及肿瘤数量(P=0.051)有相关趋势。结论 MLH1蛋白表达下调可能与HBV相关性肝癌的发生及术后的复发有关,且MLH1与p53蛋白在肝癌中的表达有一定的关联性。     

S100钙结合蛋白A6在胃癌组织中表达的意义

目的探讨S100钙结合蛋白A6(S100A6)在胃癌旁正常组织、慢性胃炎、肠上皮化生和胃癌的组织标本中的表达,以及其与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法收集中国医科大学附属盛京医院2005年6月至2015年6月胃组织标本,其中胃黏膜肠上皮化生组织(24例)、胃癌(42例)及癌旁正常组织标本(42例)。qRT-PCR法检测S100A6 mRNA在不同组织中表达;Western blot法检测S100A6蛋白的表达;采用Kaplan-Meier生存曲线用于区分和比较生存率;Cox比例风险模型用于多因素分析。结果 S100A6蛋白的表达按以下顺序逐渐增加:癌旁正常组织<慢性胃炎<肠上皮化生<胃癌。S100A6蛋白的表达与胃癌肿瘤大小、浸润深度、淋巴管和静脉侵犯、淋巴结转移、肿瘤TNM分期呈正相关。Kaplan-Meier生存曲线提示,高中度S100A6基因表达的患者累积生存率明显低于不表达的患者。Cox比例风险模型提示肿瘤的浸润深度、淋巴管及静脉浸润、淋巴结转移、TNM分期以及S100A6高表达均为胃癌患者预后的独立因素。结论在胃炎、肠上皮化生、胃癌中S100A6蛋白的表达逐渐升高;S100A6高阳性表达是胃癌预后的独立影响因素。     

层粘连蛋白在乙肝相关性肝癌中的表达、分布及意义

 目的 探讨层粘连蛋白(laminin,LN)在乙型肝炎病毒 (hepatitis Bvirus,HBV) 感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达分布及意义。方法 选取2003-01至2013-05在武警总医院施行了原位肝移植手术的215例HBV相关性HCC伴肝硬化患者的组织标本,应用免疫组化的方法检测LN在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况,并以30例正常肝组织和良性肝病组作为对照。结果 LN主要定位于HBV相关性肝癌组织肝窦窦壁,其次为癌旁间质血管与新生血管及细胞膜/浆。LN在肝癌组织中肝窦窦壁和新生血管的阳性表达率为70.23％(151/215),在癌旁组织和良性肝病中肝窦窦壁和新生血管的阳性表达率分别为57.20％(123/215)和13.33％(3/30),LN在癌组织中的表达显著高于其在癌旁及良性肝病中的表达(P=0.000),LN在癌组织中的阳性表达与微卫星灶(P=0.026)、肿瘤数量(P=0.053)、血管侵犯(P=0.005)、TNM分期(P=0.029)显著相关。结论 LN的过表达可能与肝癌的发生发展及侵袭转移相关。
     

EGCG对A549细胞炎性反应模型UBC9表达的影响

 目的 观察泛素连接酶9(ubiquitin conjugating enzyme 9,UBC9)在表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)作用的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导A549细胞中的表达,探讨UBC9与EGCG抗炎性反应机制的相关性。方法 根据筛选结果随机分为对照组、EGCG组、LPS组、EGCG＋LPS组4个组,MTT检测不同浓度的EGCG(50～400 μg/ml)和LPS(10～50 μg/ml)对A549细胞增殖活性的影响,筛选最佳作用浓度,进一步通过免疫组化染色法、蛋白质印迹法和Realtime-PCR检测分析各处理组UBC9蛋白及其mRNA的相对表达量。结果 MTT显示,200 μg/ml的EGCG细胞增殖抑制作用最强(F=1618.18,P＜0.001),LPS 25μg/ml细胞增殖活性最明显(F=237.38,P＜0.001)。免疫组化与蛋白质印迹检测均显示,与对照组比较,EGCG下调A549细胞UBC9蛋白表达(P＜0.001),LPS则上调UBC9表达量(P＜0.001),与LPS组比较,EGCG＋LPS组UBC9蛋白表达明显降低(P＜0.001)。同样,Realtime-PCR显示,与对照组比较,EGCG组UBC9 mRNA表达下调(F=89.34,P＜0.001),LPS组UBC9 mRNA表达上调(F=225.00,P＜0.001),与LPS组比较,EGCG＋LPS组UBC9 mRNA的表达受到抑制,显著降低(F=625.00,P＜0.001)。结论 EGCG下调LPS刺激的炎性反应模型的UBC9的表达,其抗炎机制可能与抑制UBC9蛋白与mRNA表达有关。     

甲烷生理盐水对肝缺血再灌注小鼠肝线粒体的影响

 目的 在肝缺血再灌注小鼠模型中研究甲烷对肝线粒体的影响。方法 将C57小鼠18只随机分为空白对照组(SHAM组)、缺血再灌注组(IR组)和甲烷盐水治疗组(IR+CH4组),每组6只,采用70%肝缺血再灌注模型,IR+CH4组再灌注开始前予甲烷生理盐水10 ml/kg腹腔内注射,留取标本检测氧化、抗氧化、线粒体相关指标。结果 与IR组相比,IR+CH4降低了ROS水平(t=3.154,P=0.0083)及MDA(t=3.738, P=0.028)水平,提高了GSH(t=2.687, P=0.0177)及SOD(t=3.480, P=0.0037)水平;采用Westen blot 检测蛋白的表达,与对照组相比,IR组线粒体融合蛋白Mfn1(q=7.57,P＜0.05)和OPA1(q=6.41,P＜0.05)表达减少,分裂蛋白DLP1(q=3.718,P＜0.05)表达增加;与IR组相比,IR+CH4组融合蛋白Mfn1(q=5.277, P＜0.05)增加,分裂蛋白DLP1(q=6.700,P＜0.05)表达下降;IR组PINK1(q=4.606, P＜0.05)表达上调,IR+CH4组PINK1(q=3.922, P＜0.05)表达下降。结论 甲烷生理盐水可降低氧化应激,提高机体抗氧化能力,促进线粒体融合,减少分裂,促进线粒体功能的恢复。     

人胃癌细胞系MKN-45中二甲双胍对顺铂的拮抗作用

 目的 初步研究二甲双胍(metformin,Met)和Met联合顺铂(cisplatin, Cisp)对人胃癌MKN-45细胞系的抗癌作用。方法 应用不同浓度Met和Cisp单独或联合处理人胃癌MKN-45细胞系,MTT法分析细胞存活率,RT-PCR检测生存素、mTOR和Akt的mRNA表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 单独使用Met可抑制增殖并诱导凋亡;Met联合Cisp时,可降低Cisp的抗增殖作用,且生存素、Akt和mTOR的mRNA表达明显增加(P＜0.05)。Met对Cisp的拮抗作用可能是通过生存素、Akt和mTOR信号通路调节。结论 Met能抑制人胃癌MKN-45细胞系对Cisp化疗的敏感性,在患有2型糖尿病的胃癌患者中,应该慎重将Met与Cisp联合使用。     

CRABP-Ⅰ在成人烟雾病血清中的表达及其与术后血流动力学变化的关系

 目的 探讨细胞视黄酸结合蛋白-Ⅰ(CRABP-Ⅰ)在成人烟雾病血清中的表达及其与术后血流动力学变化的关系。方法 选择烟雾病患者52例和健康体检者20例,采用酶联免疫吸附法分别检测烟雾病患者术前、术后6个月和健康体检者CRABP-Ⅰ的血清浓度,并与患者手术前后脑血流灌注状态进行相关性分析。结果 与对照组[(19.70±5.10) mg/L]相比,烟雾病患者CRABP-Ⅰ术前[(35.38±6.05) mg/L]及术后[(28.38±4.46) mg/L]均显著升高(P＜0.01)。术后CRABP-Ⅰ的水平较术前显著降低(P＜0.01)。铃木分期1~2期及3~4期患者术后6个月CRABP-Ⅰ水平均较术前显著降低[(28.17±4.88)mg/L vs (37.75±5.66)mg/L,P＜0.01],其中铃木分期3～4期术前CRABP-Ⅰ的血清表达显著高于铃木分期1～2期(P＜0.01)。烟雾病术后患者rTTP较术前显著降低(P=0.001)。手术前后血清CRABP-Ⅰ浓度与rTTP值均呈显著正相关(P＜0.01)。结论 CRABP-Ⅰ可能参与了烟雾病的发生发展过程,可作为烟雾病的血清学标志及血流动力学改善的指标。     

康艾注射液联合紫杉醇、替吉奥、奥沙利铂化疗对进展期胃癌预后的影响

 目的 观察康艾注射液联合化疗对诱导型血红素氧合酶-1(Hemeoxygenase-1, HO-1)阳性进展期胃癌患者预后的影响。方法 将60例血红素氧合酶阳性进展期胃癌患者随机分为实验组和对照组,每组 30 例,实验组予以康艾注射液联合紫杉醇、替吉奥、奥沙利铂方案治疗,对照组应用紫杉醇、替吉奥、奥沙利铂方案化疗。4个周期化疗后进行疗效评价及HO-1检测。结果 实验组1年、2年生存率(75.2%、22.3%)均高于对照组(59.3%、15.4%),差异有统计学意义(P＜0.05)。KPS评分提高10分比例,实验组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 康艾注射液对HO-1阳性进展期胃癌有治疗作用,能抑制胃癌组织中HO-1的表达,减轻患者不良反应。     

miR-7-5p/FGFR4轴与胆囊癌患者预后的关系

目的 探究miR-7-5p/FGFR4轴与胆囊癌(gall bladder cancer,GBC)患者预后的关系.方法 选取武警特色医学中心2016-06至2018-06住院手术的GBC患者47例,收集胆囊癌组织(GBC组)及癌旁组织(PCLT组),选择同期良性胆囊疾病患者43例,收集良性胆囊组织(NC组),用RT-q...     

METTL3在早期鳞状细胞宫颈癌中的表达及其与临床特征和预后的关系

 目的 探讨甲基化转移酶3(METTL3)在早期鳞状细胞宫颈癌中的表达及其与临床特征和预后的关系。方法 纳入2008年1－12月行广泛性子宫切除术治疗的110例早期宫颈癌石蜡组织标本。采用免疫组织化学检测肿瘤标本和癌旁非肿瘤宫颈组织中METTL3的表达,将患者分为METTL3高表达及低表达组,使用Kaplan-Meier生存分析法明确METTL3表达水平与预后的关系,使用Cox比例风险回归分析早期宫颈癌患者预后不良的影响因素。结果 宫颈癌肿瘤组织METTL3表达水平(2.705±0.273)明显低于正常宫颈标本(8.574±0.421),差异有统计学意义(P<0.01)。METTL3低表达与较高的FIGO分期(P=0.041)、盆腔淋巴结转移(P=0.001)相关。Kaplan-Meier生存分析表明METTL3低表达有低的总生存率(HR=3.576,95% CI:1.474~8.677,P=0.0048)。Cox多因素分析表明,FIGO分期(HR=5.109, 95% CI: 1.891~11.135, P<0.01)、盆腔淋巴结转移(HR=2.395, 95% CI:1.156~4.879, P=0.017)及METTL3低表达(HR=6.187, 95% CI:2.314~21.292, P=0.004)是早期宫颈癌患者的独立预后因素。结论 METTL3 表达水平在宫颈癌组织中明显下降,FIGO分期、盆腔淋巴结转移及METTL3 表达水平是早期鳞状细胞宫颈癌患者预后不良的影响因素。     

过表达miR-26b-5p抑制HMGA1参与卵巢癌细胞上皮间质转化的机制

 目的 探究microRNA-26b-5p(miR-26b-5p)介导高迁移率族蛋白组A1(high-mobility group A1,HMGA1)基因参与卵巢癌上皮间质转化的机制。方法 对miR-26b-5p靶基因进行预测。qRT-PCR检测组织中miR-26b-5p和HMGA1的表达量。卵巢癌细胞分组转染后,qRT-PCR和Western Blot检测细胞中相关因子的mRNA和蛋白的表达量;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测迁移能力。结果 卵巢癌组织中miR-26b-5p表达降低,HMGA1的表达升高(均P＜0.05)。miR-26b-5p mimic及sh-HMGA1组HMGA1和Vimentin表达降低而E-cadherin表达上调,且细胞侵袭和迁移降低(均P＜0.05);共转染miR-26b-5p inhibitor和sh-HMGA1,sh-HMGA1处理对上皮间质转化及细胞侵袭和迁移的抑制作用被逆转(均P＜0.05)。结论 过表达miR-26b-5p可抑制卵巢癌细胞中HMGA1和Vimentin表达并促进E-cadherin表达,降低细胞侵袭和迁移能力,从而抑制卵巢癌细胞上皮间质转化。     

miR-320a调控非小细胞肺癌细胞的上皮细胞间质化过程研究

 目的 探讨miR-320a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞上皮细胞间质化过程的调控作用及其可能的作用机制。方法 选取2017-07至2018-12于菏泽市立医院住院并进行手术治疗的NSCLC患者60例,术中取切除的癌组织和癌旁组织,RT-PCR和Western Blot检测癌组织和癌旁组织miR-320a和FoxM1表达;miR-320a mimics、miR-320a NC和miR-320a inhibitor转染A549细胞,24 h后划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,双荧光素酶报告基因系统预测miR-320a与FoxM1的靶向关系,Western Blot检测FoxM1、E-Cadherin和Vimentin蛋白表达。结果 癌旁组织内miR-320a的表达高于癌组织(P<0.001),FoxM1的阳性细胞率低于癌组织(P<0.001);miR-320a NC组细胞迁移和侵袭能力低于miR-320a mimics组(P<0.001),而高于miR-320a inhibitor组(P<0.001);miR-320a可靶向下调FoxM1的表达水平;FoxM1-WT A549细胞中,miR-320a mimics组细胞E-cadherin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001);miR-320a inhibitor组细胞E-cadherin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001)。结论 miR-320a在NSCLC中可能作为抑癌基因发挥作用,这种作用可能是通过靶向抑制FoxM1的表达,从而抑制NSCLC细胞的上皮细胞间质化过程而实现的。     

可手术的非小细胞肺癌患者TUBB3基因mRNA表达与预后相关性

 目的 探讨可手术的非小细胞肺癌人群中TUBB3基因mRNA表达水平和预后的相关性。方法 通过分支-DNA液相芯片技术定量检测92例非小细胞肺癌患者TUBB3基因mRNA表达,持续随访60个月,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,进行多因素分析。结果 在92例肺癌患者中,与不吸烟者相比,吸烟者的TUBB3基因mRNA表达水平明显更高(P=0.017)。随访结果显示:TUBB3 mRNA低表达的患者中位总生存期为48.7个月,长于高表达患者的生存期(35.8个月),差异有统计学意义(P=0.011,HR=1.56,95% CL:1.45~2.56)。TUBB3 mRNA低表达患者中位PFS为35.7个月,长于高表达患者中位PFS(23.5个月),差异有统计学意义(P=0.001,HR=1.33,95% CL:1.06~2.32)。结论 TUBB3 mRNA表达是可手术的非小细胞肺癌的预后因子。     

锌指蛋白A20在胃癌组织中的表达及其与胃癌病理分期和转移的相关性研究

目的探讨锌指蛋白A20在胃癌组织中的表达及其与临床病理分期和远处转移的关系。方法收集2009年1—10月在我院手术切除的42例胃癌及癌旁组织标本,用RT-PCR和Western blotting法分别检测标本中锌指蛋白A20的表达情况。结果胃癌组织中锌指蛋白A20的表达低于癌旁正常组织,Ⅲ期+Ⅳ期胃癌组织锌指蛋白A20的表达显著低于Ⅰ期+Ⅱ期胃癌组织(P<0.05)。肿瘤细胞的分化程度与锌指蛋白A20的表达水平呈负相关,有远处转移的胃癌组织中锌指蛋白A20的表达显著低于无远处转移的组织(P<0.05),有淋巴转移的胃癌组织中锌指蛋白A20的表达显著低于无转移的组织(P<0.05)。但是锌指蛋白A20的表达水平与患者的年龄、性别没有相关性。结论锌指蛋白A20在胃癌组织中表达降低,A20的表达水平与胃癌细胞的恶性程度、分期、远处转移、淋巴转移有关。     

鞘内注射胶质细胞源性神经营养因子对大鼠糖尿病神经病理性疼痛的影响

 目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(glail cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠行为学的影响及机制。方法 将雄性SD大鼠50只随机分为对照组(N组,10只)、模型组(40只),造模后的模型组再随机分成DNP组(DC组,10只,仅给予10 μl PBS缓冲液)、GDNF治疗组(DG组,10只,注射2 μg GDNF+10 μl PBS缓冲液)。各组大鼠均测造模前,造模后第3、21天,首次给药或PBS缓冲液后第1、3、7、14天的压尾机械阈值(TFT)与热痛缩爪潜伏期(PWL);处死大鼠后,取L_4-6脊髓组织,采用Western blot法测定脊髓背角磷酸化PI3K、p-AKT、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)以及磷酸化核糖体S6蛋白激酶(p-S6K)蛋白表达水平。结果 造模后第21 天,与N组比较,模型组的血糖明显升高(P<0.01),且TFT与PWL也均明显缩短(P<0.01);给药后第14 天,与DC组相比较,DG组TFT和PWL均明显升高(P<0.01),且磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达均明显降低(P<0.01);给药后第14天,与N组相比较,DC组TFT和PWL均明显降低(P<0.01),且磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达均明显升高(P<0.01);给药后第14 天,DG组与N组相比较,在TFT、PWL以及磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达等方面的差异均无统计学意义。结论 鞘内注射GDNF能够减轻大鼠DNP,其机制可能与GDNF通过调控PI3K-AKT信号通路,降低p-AKT表达水平,从而抑制p-mTOR和p-S6K的表达有关。