赤芍不同提取物抑制ras突变的肿瘤活性谱效关系研究

目的： 建立赤芍不同提取部位高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,探讨其抑制ras突变肿瘤活性的谱效关系,为明确其抗肿瘤作用及物质基础提供参考。方法： 分别用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇对赤芍水煎液进行萃取,并采用HPLC法对提取物进行分析,建立色谱图;采用秀丽隐杆线虫检测各有效部位的急性毒性及抗肿瘤活性;采用偏最小二乘（PLS）回归分析研究其谱效关系。结果： 赤芍醋酸乙酯部位的急性毒性高于正丁醇部位和石油醚部位;赤芍3个部位均不同程度地提高了线虫的野生型比例,且正丁醇部位效果最好;谱效关系研究表明,色谱峰7、5（芍药苷）、1所对应化合物对抑制ras突变的肿瘤活性有重要作用。结论： 赤芍抑制ras突变的抗肿瘤活性是多种化学成分共同作用的结果,为赤芍作为抗肿瘤药物的开发研究提供了一定思路。     

黄芩抑菌谱-效相关质量评价系统的研究

目的:建立黄芩抑菌谱-效相关质量评价系统。方法:对收集到的20批不同产地的黄芩药材,采用HPLC法进行液相检测,选择合适的内标物质和共有峰,计算共有峰相对内标峰的相对峰面积值。试管法进行体外抑菌实验,测定抑菌率。运用最小二乘支持向量机(LS-SVM)法建立黄芩药材抑菌谱-效相关质量评价模型。结果:建立以丹皮酚为内标物质的黄芩指纹图谱检测方法,指定10个色谱峰为共有峰;检测了20批黄芩药材对金黄色葡萄糖球菌的抑菌率,抑菌率为71.177 0%~95.243 0%。建立的数学模型,拟合值与实验数据的吻合度非常高,平均相对偏差不到10-14%,盲法验证试验,模型预测值与实验值的相对偏差及平均相对误差均在6%以下。结论:通过黄芩指纹图谱的检测,运用所建立的数学模型,可以达到从药效上对黄芩质量进行评价的目的。     

基于HPLC指纹图谱结合多种化学模式识别评价生脉饮(党参方)质量

目的：建立多批次生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱并采用多种化学计量学分析评价多厂家多批次生脉饮（党参方）的整体质量。方法：采用Ultimate XB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.15%甲酸水溶液,检测波长为260 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温20℃,对多批不同厂家和来源的生脉饮（党参方）制剂进行分析,建立中药色谱指纹图谱,并结合聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法判别分析对生脉饮（党参方）质量进行评价。结果：建立了生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱,确定了23个共有峰,并指认了其中7个色谱峰;多批次生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱的相似度为0.061~0.798;聚类分析与主成分分析结果一致,结合正交偏最小二乘法判别分析发现3类主成分中包含的7个成分峰是造成不同批次生脉饮（党参方）质量差异的主要标志物。在多指标成分定量分析方法学考察结果中,7种指标性成分的加样回收率在97.32%~101.26%,RSD为1.89%~3.56%。结论：不同批次的生脉饮（党参方）之间虽有一定的相关性,但存在质量差异。生脉饮（党参方）检测方法的建立可以为其质量控制及评价提供参考依据,且具有一定的药用开发价值,为其进一步药效及制剂研究奠定基础。     

雷公藤不同乙醇提取物指纹图谱及与大鼠肾小球系膜细胞的谱效关系研究

摘 要 目的：探讨雷公藤不同乙醇提取物中对大鼠肾小球系膜细胞（GMC）有增殖影响的活性成分。方法: 采用HPLC法建立5个不同乙醇浓度雷公藤提取物的指纹图谱,选择大鼠肾小球系膜细胞模型进行药效学研究,考察不同乙醇浓度雷公藤提取物对大鼠肾小球系膜细胞的增殖影响。采用偏最小二乘回归分析法分析谱效关系。结果: 建立了5个不同乙醇浓度雷公藤提取物的HPLC指纹图谱,并从HPLC指纹图谱中提取出32个能够表征含量差异的特征峰。药效研究结果表明,60 %、70 %、95 %乙醇提取物和雷公藤多苷片组均呈现一定的量效关系,随着给药量增加,细胞增殖的抑制作用越大。中、高剂量的60%提取物组的吸光度值均低于同剂量其他各提取物。采用偏最小二乘回归分析法以大鼠肾小球系膜细胞增殖抑制率为“药效”指标时,高剂量（40 μg·L^-1）下有20个峰为药效峰;中剂量（20 μg·L^-1）下有17个峰为药效峰;低剂量（10 μg·L^-1）下有15个峰为药效峰。结论:部分药效峰随着给药剂量的变化,呈现一定规律的量效关系。     

高效液相色谱法同时测定清肺抑火丸中13种成分的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定清肺抑火丸中芒果苷、栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、汉黄芩素、大黄酸、大黄素、白花前胡甲素、大黄酚和大黄素甲醚13种成分含量。方法:采用Dikma Platisil ODS (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,检测波长分别为238 nm (栀子苷、盐酸小檗碱),254 nm (芒果苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚),280 nm (黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素),321 nm (白花前胡甲素);柱温:35℃;流速:0.8 mL·min^-1。结果:芒果苷、栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、汉黄芩素、大黄酸、大黄素、白花前胡甲素、大黄酚和大黄素甲醚线性范围分别为0.231 3~23.13,1.786 8~178.68,0.900 2~90.02,4.913 5~491.35,0.899 0~89.90,0.626 9~62.69,0.213 3~21.33,0.198 8~19.88,0.157 7~15.77,0.210 7~21.07,0.326 1~32.61,0.557 8~55.78,0.235 0~23.50 μg·mL^-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD小于2%;平均回收率(n=6)均大于90%。结论:该方法精确可靠、操作简便快捷,可用于清肺抑火丸中各成分的同时测定。     

四消丸HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:建立四消丸HPLC指纹图谱方法,为评价其质量提供参考。方法:采用Waters Symmetry Shield TM RP₁₈色谱柱;乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0mL·min^-1;柱温30℃;检测波长254nm;进样量10μL。通过相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析对6家生产企业不同批次的四消丸样品进行质量评价和分析。结果:6家生产企业17批样品共标定24个共有峰,相似度为0.747~0.972,并对24个色谱峰进行了药味归属,同时指认了12个色谱峰;通过聚类分析及主成分分析将所有样品分为2类;偏最小二乘判别分析筛选出包括大黄素甲醚、大黄素葡萄糖苷、大黄素等在内的8种质量差异标志物。结论:该方法操作简便、准确,可用于四消丸的质量控制和评价研究。     

基于灰色关联分析的藤茶提取物体外抗炎作用的谱-效关系研究

目的： 研究藤茶不同极性部位高效液相色谱（HPLC）图谱与其体外抗炎作用的谱效关系。方法： 建立藤茶不同极性部位的HPLC图谱;采用脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,检测藤茶不同提取部位对一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）释放的影响,考察其抗炎活性;采用灰色关联度法分析不同极性部位HPLC特征峰与其抗炎药效之间的谱效关系。结果： 藤茶不同极性部位HPLC图谱有明显差异,共确定了5个共有峰。谱-效分析结果显示,5个共有峰对药效贡献均较大。结论： 建立了藤茶不同极性部位的HPLC图谱及其体外抗炎活性的谱-效关系,为该药材的抗炎药效物质基础研究提供参考。     

基于HPLC指纹图谱及定量测定的益气逐瘀利水方质量评价研究

目的：建立益气逐瘀利水方的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含量,为益气逐瘀利水方产业化开发的质量控制提供参考。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长245 nm,建立10批益气逐瘀利水方指纹图谱。采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）进行相似度评价,结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）模式识别技术进行质量评价,同时进行含量测定。结果：10批益气逐瘀利水方标准汤剂指纹图谱相似度均大于0.995,标定出共有峰24个,指认其中的4个共有峰（14号峰毛蕊异黄酮葡萄糖苷、15号峰阿魏酸、17号峰汉防己乙素、19号峰粉防己碱）,CA、PCA及OPLS-DA将10批样品分成2类。定量分析方法学考察结果良好,10批样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、汉防己乙素、粉防己碱的定量结果分别为43.98~64.18、107.32~167.95、122.63~175.21、391.62~582.02 μg·g^-1。结论：所建立的益气逐瘀利水方指纹图谱及定量测定方法稳定性好、重复性高,可更加全面系统地评价益气逐瘀利水方的质量。     

虎杖的功效成分组研究Ⅳ-纤维蛋白原谱效分析的研究

目的在HPLC指纹图谱和降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效的基础上进行谱效分析,以此确定虎杖降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效的"药效成分组"。方法采用偏最小二乘回归法(partial least squares regression,PLSR),对虎杖HPLC指纹图谱数据和降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效数据之间的内在联系进行谱效分析。结果指纹图谱上的X1、X2(白藜芦醇苷)、X4、X5、X7、X12、X14、X15这8个成分组成的"药效成分组"对虎杖降低纤维蛋白原药效的贡献最大。结论中医用药基于正确的辩证沦治,是根据中药的功效对患者进行治疗,因此,反映中药功效的"功效成分组"是评价中药质量的关键,"功效成分组"需最终得到药效验证才具有代表性。     

苗药地瓜藤UPLC指纹图谱及抗氧化活性谱效关系研究

目的 建立苗药地瓜藤的UPLC指纹图谱,研究其与抗氧化活性的谱效关系,筛选抗氧化活性成分群。方法 采用UPLC建立地瓜藤指纹图谱,运用《中药指纹图谱相似度评价系统》（2012版）进行相似度评价并指认共有峰,运用SPSS 16.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析( Hierarchical cluster analysis,HCA) 和主成分分析( Principal component analysis,PCA);采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除法、2,2’-联氮-二（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除法和总抗氧化能力测定法（FRAP）评价16批地瓜藤抗氧化活性;运用灰色关联度分析( Grey relational analysis,GRA）、双变量相关分析、偏最小二乘回归分析（Partial least squares regression,PLSR）3种分析方法研究谱效关系。结果 建立了16批地瓜藤的UPLC指纹图谱并标定13个共有峰,相似度为0.613~0.996,同时指认出峰9为芦丁、峰10为异槲皮素、峰12为水仙苷,HCA结果显示样品共聚为两类,与PCA结果一致;16批地瓜藤均有不同程度抗氧化活性。GRA结果显示13个共有峰与抗氧化活性之间的关联度>0.8,均具有高关联性,双变量相关性分析及PLSR分析结果表明峰5、峰9（芦丁）、峰10（异槲皮素）、峰11、峰12（水仙苷）的相关系数及回归系数与抗氧化活性呈正相关,且贡献度较大(VIP>1),为抗氧化活性的主要有效成分。结论 16批地瓜藤均具有较好的抗氧化活性,其发挥抗氧化作用是内部抗氧化成分群协同作用的结果,而共有峰5、9、10、11、12所对应的成分与其抗氧化活性密切相关,揭示了地瓜藤抗氧化活性的药效物质基础。     

基于正交投影偏最小二乘法对复方首乌藤合剂抗失眠作用的谱效关系研究

目的 探讨复方首乌藤合剂抗失眠作用与HPLC指纹图谱间的相关性。方法 采用HPLC分析得到不同提取工艺条件下的复方首乌藤合剂指纹图谱;腹腔注射DL-4-氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型,用ELISA法测定大鼠海马体5-HT的含量,采用正交投影偏最小二乘法分析谱效关系。结果 从指纹图谱中共确定21个共有峰,12个峰的变量投影重要性（VIP）均>1.0,复方首乌藤合剂指纹图谱中3个色谱峰对抗失眠发挥重要作用。结论 复方首乌藤合剂抗失眠作用的物质基础与其所含多种成分共同作用的结果有关,通过谱效关系分析得到复方首乌藤合剂的抗失眠物质基础,可为制剂的质量控制提供实验依据。     

剔除相关性的最小二乘理论研究

提出了一种新的回归模型,剔除相关性的最小二乘,并给出建模步骤。该模型能有效的克服变量间的相关性,兼顾到变量的筛选并克服回归系数反常的现象。     

数据分析技术在中药抗氧化谱效关系研究中的应用进展

目的 介绍近年来数据分析技术在中药抗氧化谱效关系研究中的进展情况,为抗氧化中药的药效物质基础及质量评价研究提供思路和借鉴。方法 综述了近年来应用于中药抗氧化谱效关系研究的数据分析技术,包括相关分析（双变量相关、多元相关、典型相关）、灰关联度分析、回归分析（多元线性回归、偏最小二乘回归）、主成分分析、人工神经网络等,并对其进行了分析比较。结果 数据分析技术应用于中药抗氧化谱效关系的研究已取得一定成效,但由于各种数据分析技术各有优缺点,采用哪种方法更合适,或者采用哪些方法组合更有效,有待进一步研究和探讨。结论 将数据分析技术科学、合理地应用于中药抗氧化谱效关系的研究有相当广阔的发展前景,将有力推动抗氧化中药现代化研究的进程。     

白术挥发油GC-MS指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系研究

目的 研究白术挥发油指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系,筛选主要抗氧化活性成分。方法 采用GC-MS测定不同产地的15批白术饮片挥发油指纹图谱,通过清除1,1-二苯基-2-苦腈基（DPPH）和Fe³⁺还原/抗氧化能力法测定白术挥发油的抗氧化能力,运用偏最小二乘回归法进行数据分析,研究白术挥发油指纹图谱和抗氧化活性的相关性,并筛选活性色谱峰。结果 28个匹配指纹峰中,对挥发油清除DPPH自由基活性贡献度最大的前5个峰依次为：峰11 > 峰25 > 峰2 > 峰4 > 峰24;对挥发油还原Fe³⁺能力贡献度最大的前5个峰依次为：峰11 > 峰8 > 峰14 > 峰19 > 峰26。其中峰11的峰面积与挥发油清除DPPH自由基能力和还原Fe³⁺能力均呈正相关。通过与对照品比对确定峰11为苍术酮,并具有显著的抗氧化活性。结论 苍术酮不仅是白术挥发油的主要成分,还是主要的抗氧化活性物质。     

基于谱效关系的核桃楸皮治疗肝癌药效物质基础研究

目的 基于核桃楸皮不同极性部位HPLC指纹图谱与抗肝癌作用的谱效关系，筛选出核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示其治疗肝癌的药效物质基础。方法 采用HPLC法建立核桃楸皮不同极性部位的指纹图谱；采用CCK-8法开展核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌的体外药效学研究；采用灰色关联度分析法及偏最小二乘回归分析法，将指纹图谱共有峰峰面积与药效学数据相关联，建立核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌体外谱效关系，筛选出其治疗肝癌的药效物质，并进行体外药效验证。结果 不同极性部位指纹图谱中共24个共有峰，其中有8个峰与药效呈正相关且VIP值大于1，确认这8种成分为核桃楸皮治疗肝癌的药效物质。经对照品比对，指认出4号峰为丁香酸、9号峰为鞣花酸、10号峰为槲皮苷、16号峰为山柰酚。结论 本研究通过建立谱效关系筛选出了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质基础。     

Extended least squares nonlinear regression: A possible solution to the “choice of weights” problem in analysis of individual pharmacokinetic data

It is often difficult to specify weights for weighted least squares nonlinear regression analysis of pharmacokinetic data. Improper choice of weights may lead to inaccurate and/or imprecise estimates of pharmacokinetic parameters. Extended least squares nonlinear regression provides a possible solution to this problem by allowing the incorporation of a general parametric variance model. Weighted least squares and extended least squares analyses of data from a simulated pharmacokinetic experiment were compared. Weighted least squares analysis of the simulated data, using commonly used weighting schemes, yielded estimates of pharmacokinetic parameters that were significantly biased, whereas extended least squares estimates were unbiased. Extended least squares estimates were often significantly more precise than were weighted least squares estimates. It is suggested that extended least squares regression should be further investigated for individual pharmacokinetic data analysis.This work was supported in part by USUHS Grant RO-7516 and NIH Grants GM26676 and GM26691.